慢性HBV感染者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性变化

探讨慢性HBV感染者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞活性变化情况。应用流式细胞法检测所有研T淋巴细胞亚群和NK细胞。慢性乙肝、肝炎肝硬化和慢性重型乙肝组患者CD3 、CD4 百分率及CD4 ／CD8 比值与正常组比较均有所下降,且慢性重型乙肝组患者CD4 百分率和CD4 ／CD8 比值与正常组比较差异有显著性。各临床类型慢性HBV感染者NK细胞百分率均降低,与正常对照组比较有统计学意义。慢性HBV感染者细胞免疫功能低下。检测T淋巴细胞亚群及NK细胞活性变化对判断病变程度、指导临床治疗具有一定参考价值。     

慢性HBV感染患者T细胞亚群变化规律及可能的意义

目的通过对不同病理阶段的224例HBV感染患者CD4 、CD8 T细胞亚群、HBV DNA等指标的检测结果进行了回顾性分析,以期明确不同病理阶段T细胞亚群变化的规律及可能的临床意义.方法外周血CD4 和CD8 T细胞亚群检测采用流式细胞仪技术;HBV DNA检测采用荧光定量PCR检测;ELISA检测用于血清HBeAg和抗HBe评价.结果肝硬化患者(499.75±304.46,t=-3.12,P=0.041)和肝癌患者(442.10±241.81,t=4.1,P=0.038)CD4 T细胞,显著低于急性肝炎患者(682.21±299.74);肝硬化患者(303.45±225.84,t=3.75,P=0.033)和肝癌患者(296.59±279.51,t=5.39,P=0.026)CD8 T细胞,显著低于急性肝炎患者(542.83±277.35);59例肝硬化患者的CD4 T细胞(477.42±206.39)低于35例HBsAg阳性患者(512.37±261.87),但统计学差异不显著(t=0.76,P=0.62).但前者CD8 T细胞亚群显著高于后者(369.35±203.14 vs 277.81±212.58;t=3.02,P=0.41);肝硬化和肝癌血清HBV DNA阳性患者,均显著低于慢性重型肝炎患者(t=4.21,P=0.038;t=3.92,P=0.041),但肝癌组与肝硬化组间无差异(t=0.49,P=0.37).结论HBV感染肝硬化和肝癌患者CD4 和CD8 T细胞亚群较急性肝炎和健康对照人群显著降低,对于CD8 T细胞亚群显著降低的HBV感染患者,应该排除原发性肝癌的存在.     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者外周血T细胞亚群、NK细胞的变化及其与预后的关系

[目的]探讨HBV相关慢加急性（亚急性）肝衰竭（HBV-ACLF）患者外周血T细胞亚群、NK细胞的变化趋势及其与预后的关系。[方法]选取HBV-ACLF患者46例,慢性乙型肝炎（CHB）患者40例,健康志愿者20例,采用流式细胞仪检测外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞及NK细胞计数,用SPSS 18.0软件对其进行统计学分析。[结果]HBV-ACLF组外周血CD3＋、CD4＋T细胞、NK细胞计数与慢性乙肝组、健康对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）;HBV-ACLF组外周血CD8＋T细胞与健康对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）。HBVACLF患者死亡组中CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞及NK细胞计数均低于存活组,2组CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞比较差异有统计学意义（P〈0.01）。[结论]HBV-ACLF患者存在T细胞亚群失衡和细胞免疫紊乱,提示细胞免疫参与了HBV-ACLF的发病和进展。     

肝病患者外周血CD28+T细胞亚群变化

T细胞的特异性激活需要特异性T细胞受体(TCR)/CD3复合物信号,同时还需要共刺激信号.现已证实,在CD40-CD40-L和B7-CD28/CTLA-4(CD152)二条共刺激途径中,CD28,CTLA-4和ICOS与其配体B7家族分子(B7.1/CD80和B7.2/CD86)结合后所产生的共刺激信号(costimulatory signal)在T细胞活化过程中起重要作用[1].迄今,国内外开展有关肝移植排异[2]、原发性胆汁性肝硬变和原发性硬化性胆管炎等自身免疫疾病[3]、血吸虫等寄生虫感染[4]、HCV病毒感染[5,6]、肿瘤[7]、重症肝炎[8 ]中肝损伤T细胞的特异性激活共刺激研究,但乙肝病毒感染所致的肝损伤T细胞的特异性激活共刺激研究不多[9].鉴此,我们采用流式细胞分析仪,检测130例肝病患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中CD4+,CD8+和CD28+T细胞变化,兹报告如下.     

慢性HCV感染患者外周血T淋巴细胞亚群的检测

目的探讨慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染患者T细胞亚群水平以及与丙型肝炎病毒复制的关系。方法以间接免疫荧光一流式细胞仪、ELISA法和RT-PCR检测了26例慢性HCV感染患者外周血T细胞亚群(其中HCV-RNA阳性17例,HCV-RNA阴性9例)。结果慢性HCV感染患者外周血CD_4~ 淋巴细胞亚群,CD_4~ /CD_8~ 比值明显低于正常对照组(P<0.01)。血清HCV-RNA阳性患者的CD_4~ /CD_8~ 比值明显低于HCV-RNA阴性患者(P<0.05)。结论提示细胞免疫功能受抑制可能是HCV持续感染的原因。     

乙型肝炎患者外周血T细胞亚群的分析及意义

目的研究乙肝患者外周血T细胞亚群的变化,进而了解其细胞免疫状态水平。方法用流式细胞仪对228例不同乙肝患者的外周血T细胞亚群CD+3、CD+4、CD+8绝对细胞计数及CD+4/CD+8比值进行检测,并将检测结果与e抗原、HBV-DNA含量、YMDD变异情况进行比较,以探讨各组之间的关系。结果与正常对照组相比,急性乙型肝炎(AHB)患者外周血T细胞亚群CD+3、CD+4、CD+8绝对细胞数升高(P<0.01);而慢性乙型肝炎(CHB)、肝硬化(LC)、原发性肝癌(PHC)患者依次降低,以LC、PHC两组降低最为显著(P<0.01);CD+4/CD+8比值AHB、CHB、LC、PHC 4组有依次升高的趋势。同时e抗原(-)、HBV-DNA(-)、YMDD变异株乙肝患者外周血T细胞亚群绝对细胞数明显低于e抗原(-)、HBV-DNA(-)、YMDD野生株乙肝患者(P<0.01或P<0.05);而CD+4/CD+8比值均高于对照组。结论不同乙肝患者体内存在T细胞亚群失衡及细胞免疫功能紊乱。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血淋巴细胞亚群的变化,以了解细胞免疫在乙型肝炎发病中的作用。方法使用流式细胞仪检测100例乙型肝炎患者和20例正常人外周血CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群百分比。结果 15例急性肝炎患者T淋巴细胞亚群与正常对照组比,差异无统计学意义(P>0.05),而43例慢性肝炎、26例乙型肝炎肝硬化和16例慢性肝衰竭患者CD3+淋巴细胞百分率分别为56.15±8.94%、48.85±9.01%和55.86±9.03%,均显著低于正常对照组的66.35±8.93%(P<0.05);慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD4+淋巴细胞百分率分别为30.46±7.51%、26.71±7.03%和29.03±7.64%,,均显著低于正常对照组的35.72±7.52%(P<0.05);慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD8+淋巴细胞百分率分别为21.93±5.06%、18.71±5.53%和21.15±5.62%,均显著低于正常对照组的24.58±4.92%(P<0.05);慢性肝炎、乙型肝炎肝硬化和慢性肝衰竭患者CD4+/CD8+比值分别为1.34±0.60、1.35±0.53和1.34±0.58,均低于正常对照组的1.58±0.47(P<0.05)。结论 HBV感染者体内存在T细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱,提示细胞免疫参与了乙型肝炎的发病和疾病进展。     

慢性乙型肝炎患者外周血中T淋巴细胞亚群和CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞的表达水平与HBV DNA定量的相关分析

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中T淋巴细胞亚群(CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+T)和CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)表达水平与HBV DNA定量的相关性。方法选取2012年7月-12月在兰州市第二人民医院就诊的175例HBV感染者作为研究对象,分为CHB组(63例)、HBV携带者(ASC组)(112例),以同期50例健康体检者作为对照组。采用流式细胞术检测3组患者血清中的CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+T/CD8+T和CD4+CD25+Treg表达水平,实时荧光定量PCR法检测HBV DNA载量。多组间均数比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验,计数资料组间比较采用χ2检验;采用Pearson进行相关性分析。结果 CHB患者外周血CD4+CD25+Treg表达水平(30.97±18.78)%显著高于对照组(27.30±17.59)%,差异具有统计学意义(P0.05);与对照组相比,CHB组、ASC组的CD3+T、CD4+T淋巴细胞百分数和CD4+与CD8+T淋巴细胞百分数比值显著降低,差异均有统计学意义(P值均0.05),CD8+T淋巴细胞百分数显著升高,差异均有统计学意义(P值均0.05);ASC组和CHB组CD4+CD25+Treg表达水平与HBV DNA呈正相关(r值分别为0.501、0.682,P值均0.01)。结论 HBV感染者存在T淋巴细胞亚群比例异常,HBV DNA可以促进CD4+CD25+Treg表达水平升高,说明CD4+CD25+Treg和CD4+与CD8+T淋巴细胞比例失衡在乙型肝炎慢性化过程中发挥重要作用。     

慢性HBV感染者病毒量与细胞因子及T细胞亚群的相关性研究

目的：了解慢性HBV感染者病毒量、细胞因子及T细胞亚群之间的关系。方法：共观察80例慢性HBV感染患者，其中HBeAg阳性ALT正常者20例，HBeAg阳性ALT异常者40例，HBeAg阴性ALT正常者20例，采用罗氏荧光定量PCR法检测FIBVDNA；ELISA技术检测外周血单个核细胞（PBMC）加入HBeAg、HBcAg与PHA（植物血凝素）培养48小时后上清液中IL-10、IFN-7，流式细胞术检测培养细胞中CD8^＋、CD28^＋T细胞的比例。结果：IFN-7在HBVDNA为10^7copy／ml及10^8copy／ml组中的含量较HBVDNA≤10^3copy／ml组显著降低。IL-10在HBVDNA为10^8copy／ml组中的含量较HBVDNA≤10^3copy／ml组明显偏高。CD8^＋、CD28^＋T细胞在HBVDNA为10^8copy／ml组中的含量较HBVDNA≤10^3copy／ml组及HBVDNA为10^4～6copy／ml组显著降低（P〈0．05，P〈0．01）。结论：PBMC体外培养后，IFN-7及CD8^＋CD28^＋T细胞与血清中HBVDNA水平呈负相关，IL-10与血清中HBVDNA水平呈正相关。     

外周血DNT细胞和T细胞亚群检测在乙型肝炎病毒感染者诊断中的意义

目的：探讨乙型肝炎病毒感染者外周血CD3＋CD4-CD8-T细胞（DNT）和T细胞亚群的变化及意义。方法使用流式细胞仪检测136例乙型肝炎病毒感染者,包括33例无症状携带者、28例急性乙型肝炎患者、28例轻度慢性乙型肝炎患者、25例中度慢性乙型肝炎患者、22例重度慢性乙型肝炎患者和39例健康人外周血DNT细胞及T细胞亚群。结果健康人群和急性乙型肝炎患者外周血DNT细胞比例分别为（4.82±3.43）%和（4.75±2.71）%,显著低于无症状携带者[（5.43±3.31）%,P〈0.05]和慢性乙型肝炎患者（P〈0.05）;轻度慢性乙型肝炎患者DNT细胞比例为（7.97±4.12）%,显著低于重度慢性乙型肝炎患者[（11.36±5.01）%,P〈0.05];中度慢性乙型肝炎患者DNT细胞比例为（8.41±4.93）%,也显著低于重度慢性乙型肝炎患者（P〈0.05）;健康人、急性乙型肝炎患者和无症状携带者之间 T 淋巴细胞亚群分布无明显差异,但随着慢性乙型肝炎患者病情加重,外周血 CD3＋、CD3＋CD4＋CD8-细胞比例降低（P〈0.05）,CD3＋CD4-CD8＋细胞比例升高（P〈0.05）。结论外周血DNT细胞比例的升高与乙型肝炎病毒感染者慢性化及慢性乙型肝炎患者的疾病进程有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群与病程相关性的研究

目的对慢性乙型肝炎轻中度、重度和肝硬化患者外周血淋巴细胞亚群的百分比和绝对细胞数进行观察,探讨慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的变化与病程的关系.方法采集88例慢性乙型肝炎患者柠檬酸钠新鲜抗凝血,经流式细胞仪进行免疫分型检测.结果慢性乙型肝炎重度患者的CD3+CD4+细胞百分比显著低于轻中度患者(P＜0.05),肝硬化患者的CD3+和CD3+CD8+细胞百分比显著低于轻中度患者(P＜0.01).肝硬化患者CD3CD19+细胞百分比显著高于重度和轻中度患者(P＜0.01).CD4/CD8比例在慢性乙型肝炎轻中度、重度和肝硬化患者间无显著差异.肝硬化和重度患者淋巴细胞、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+细胞的绝对细胞数均显著低于轻中度患者(P＜0.01),且肝硬化患者CD3-CD16+56+细胞的绝对细胞数显著低于轻中度患者(P＜0.05).肝硬化患者与轻中度患者的DNA载量分布差异有显著性(P＜0.01),其高水平病毒载量的患者比例高于轻中度患者.结论慢性乙型肝炎轻中度发展为重度和肝硬化的过程中,外周血淋巴细胞亚群绝对细胞数随病情的进展显著减少,主要表现为CD3+CD4+和CD3+CD8+的T淋巴细胞亚群的百分比进行性降低.     

严重肝病患者并发感染性休克外周血T淋巴细胞亚群的分析

目的探讨并发感染性休克的肝病患者外周血T淋巴细胞亚群的变化。方法在42例并发感染性休克的慢性乙型肝炎患者,取外周血,采用特异性荧光抗体标记、BD流式细胞仪检测其T淋巴细胞亚群。结果慢性乙型肝炎并发感染性休克患者T淋巴细胞亚群表现为CD3 、CD4 、CD8 T淋巴细胞及CD4 /CD8 T比值明显下降(P<0.01),与无并发症组比较,CD3 、CD4 T淋巴细胞均明显下降(P<0.05),但CD8 T淋巴细胞无明显变化(P>0.05),导致CD4 /CD8 比值明显降低(P<0.05)。结论慢性乙型肝炎并发感染性休克患者T淋巴细胞亚群比无并发症组更紊乱,免疫功能更低下。     

慢性乙型肝炎患者外周血中淋巴细胞亚群与肝组织炎症活动度的相关性研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者外周血中淋巴细胞亚群与肝组织炎症活动度的关系.方法 对36例慢性乙型肝炎患者行肝脏穿刺术,对炎症程度进行病理分级,同时应用流式细胞技术测定其外周血单个核细胞膜上相关CD分子的表达情况,并与22例健康对照组进行比较分析.结果 15例G0～G2期患者外周血中CD4 CD45RO CD45RA-及CD8 CD45RA CD62L 淋巴细胞与健康对照组相比具有统计学差异(P<0.05);14例G3期患者外周血中CD3 、CD3 CD8 、CD8 CD28 、CD8 HLA-DR CD19 及CD3-CD19 淋巴细胞与健康对照组相比具有统计学差异(P<0.05);7例G4期患者外周血CD4 CD45RA CD62L 及CD19 CD5 淋巴细胞与健康组相比具有统计学差异(P<0.05);三组间淋巴细胞数均无统计学差异.不同组别的部分淋巴细胞之间具有一定的相关关系.结论 慢性乙型肝炎患者外周血中淋巴细胞亚群数量的改变与病情的轻重有一定的相关性;不同活动期的慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞之间具有一定的相关关系.     

丙型肝炎病毒感染者外周血淋巴细胞亚群的变化及意义

目的调查丙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群变化及影响因素。方法利用流式细胞术检测241例丙型肝炎患者和117例健康人群外周血淋巴细胞亚群数值,通过回顾性分析,调查我国丙型肝炎人群淋巴细胞亚群变化及其相关的影响因素。结果在健康人群中,CD3＋CD4＋T细胞、CD3＋CD16＋CD56＋NKT细胞频率以及CD4/CD8比值与年龄呈显著正相关;而在慢性丙型肝炎人群中,CD3＋CD4＋T细胞与年龄呈显著正相关,CD3-CD19＋B细胞则与年龄呈显著负相关;在肝硬化人群中,只有CD3-CD16＋CD56＋NK细胞频率与年龄呈显著正相关;在15～49岁的健康人及慢性肝炎人群中,女性CD3＋CD4＋T细胞亚群频率高于男性,而在肝硬化患者中女性CD3-CD19＋B细胞频率低于男性;同时,在HCV感染的不同阶段,CD3-CD16＋CD56＋NK细胞亚群频率均较正常人显著降低,而CD3＋CD8＋T细胞频率则显著升高,在15岁以上人群,CD3-CD19＋B细胞在健康人、慢性肝炎、肝硬化人群中呈持续升高的现象。结论通过回顾性分析健康人群和HCV感染不同阶段人群淋巴细胞亚群的分布特点及其与HCV疾病进展、年龄、性别的关系,为临床科学评价丙型肝炎人群免疫状态提供重要的免疫指标。     

和解汤对慢性乙型肝炎功能性T细胞亚群的影响

[目的]探讨和解汤对慢性乙型肝炎(CHB)功能性T淋巴细胞亚群的影响.[方法]将72例CHB患者随机分为2组,治疗组(42例)采用和解汤治疗,对照组(30例)采用核苷类似物治疗,观察2组治疗后外周血功能性T淋巴细胞亚群(CD8 CD28 、CD4 CD28 )、白细胞介素2(IL-2)水平及乙肝病毒(HBV)标志物及肝功能的变化.[结果]治疗组治疗后CD8 CD28 、CD4 CD28 T细胞和IL-2水平较治疗前明显升高(P＜0.05),6例患者HBeAg阴转、HBV DNA量下降至1×105 copy/ml以下;对照组治疗前后CD8 CD28 T细胞、CD4 CD28 T细胞及IL-2水平无明显变化(P＞0.05),1例患者HBeAg阴转,22例HBV DNA量下降至1×105 copy/ml以下.CHB显效者治疗后CD8 CD28 、CD4 CD28 T细胞水平和IL-2水平明显升高(P＜0.01);非显效组治疗前后CD8 CD28 T细胞、CD4 CD28 T细胞水平无明显变化(P＞0.05).[结论]和解汤清除HBV的疗效,可能与CD8 CD28 T细胞的有效激活有关,细胞免疫在HBV感染发病机制和病毒清除过程中起重要作用.     

慢性乙型肝炎患者和无症状病毒携带者外周血B淋巴细胞亚群的变化

细胞免疫反应对乙型肝炎病毒(HBV)的清除作用已得到充分的研究和重视,宿主对HBV的免疫应答,需要T、B细胞间的密切合作,而B细胞在宿主抗HBV免疫应答中的作用研     

不同临床类型HBV感染者外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的研究HBV感染者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义.方法在33例慢性乙型肝炎轻度、50例中度、32例重度、64例肝硬化、51例慢性乙型肝炎肝衰竭和30例健康人,采用特异性荧光抗体标记法和流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群.结果慢性乙型肝炎重度、乙型肝炎肝硬化和慢性乙型肝炎肝衰竭患者与正常对照组比,CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞数和CD4^＋/CD8^＋比值显著下降（P〈0.05）,以慢性乙型肝炎肝衰竭下降最显著;HBeAg阴性患者外周血CD3^＋、CD4^＋和CD8^＋细胞数较HBeAg阳性患者显著减少（P〈0.05）;HBV DNA载量与患者外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋细胞数和CD4^＋/CD8^＋比值均无明显相关性.结论严重的HBV感染者存在不同程度的细胞免疫功能低下及免疫调节紊乱,细胞免疫功能下降程度与病毒复制水平无明显相关.