黄药子醇提物抑制胃癌细胞功能的研究

目的研究黄药子醇提物对人胃癌细胞增殖、克隆形成和迁移能力的影响。方法制备黄药子醇提物,根据细胞培养液所含黄药子醇提物的不同浓度,将实验分为黄药子醇提物高浓度组(120 mg/L)、低浓度组(60 mg/L)和对照组(等量无菌水)。通过体外MTT、克隆形成实验、细胞迁移实验,分别检测黄药子醇提物对人胃癌细胞系MGC803增殖、克隆形成和迁移能力的影响。结果与对照组相比,黄药子醇提物高浓度组和低浓度组胃癌细胞体外增殖速度明显减慢(培养第2~6天时,F分别为29.130、21.864、67.826、36.015、43.656,均P<0.01)、平板克隆形成率明显减少(F=11.918,P<0.01),黄药子醇提物高浓度组的细胞迁移能力明显降低(F=4.258,P<0.05)。结论黄药子醇提物可以显著抑制胃癌细胞增殖、克隆形成和迁移能力,具有潜在的抑制胃癌细胞转移的能力。     

三脉菝葜醇提物及其不同极性萃取部位的抗肿瘤作用研究

目的:研究三脉菝葜醇提物及其不同极性萃取部位的抗肿瘤作用,为其抗肿瘤活性部位的筛选提供参考。方法:采用MTT法检测不同质量浓度的三脉菝葜醇提物及其石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水层萃取部位对人肝癌细胞株HepG2、人肺癌细胞株A549、人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231、人宫颈癌细胞株HeLa以及人卵巢癌细胞株HO-8910的增殖抑制率,并计算其半数抑制浓度(IC_(50))。将80只KM小鼠通过右前肢腋部皮下接种S180细胞悬液的方法复制荷瘤小鼠模型,并按体质量随机分为8组,即模型组(生理盐水,每天灌胃2次),环磷酰胺(阳性药物)组(0.025 g/kg,每天腹腔注射给药1次),三脉菝葜醇提物高、中、低剂量组和醇提物乙酸乙酯萃取部位高、中、低剂量组(以浸膏计给药剂量均分别为0.1、0.05、0.025 g/kg,每天灌胃2次),每组10只;各组小鼠均连续给药14 d;末次给药后禁食不禁水12 h,检测各组小鼠的抑瘤率、脾指数和胸腺指数。结果:体外试验表明,三脉菝葜及其不同极性萃取部位对6种肿瘤细胞的增殖抑制作用均呈现明显的量-效关系。其中以醇提物乙酸乙酯萃取部位的作用最强,其对各肿瘤细胞的IC_(50)在40～210μg/mL范围内,对MCF-7细胞、MDA-MB-231细胞和HeLa细胞的IC_(50)分别为70.56、83.58、44.67μg/mL。体内实验表明,各给药组小鼠的瘤质量较模型组均显著降低(P<0.05或P<0.01),并且三脉菝葜醇提物高剂量组和醇提物乙酸乙酯部位萃取部位高、中剂量组小鼠瘤质量显著低于环磷酰胺组(P<0.01);环磷酰胺组、三脉菝葜醇提物高剂量组和醇提物乙酸乙酯萃取部位高、中剂量组小鼠脾指数较模型组显著降低(P<0.01),环磷酰胺组小鼠胸腺指数较模型组和其余各给药组均显著升高(P<0.01)。结论:在4个极性部位中,三脉菝葜醇提物乙酸乙酯萃取部位的抗肿瘤效果最佳,并且免疫抑制作用较小。     

连翘醇提物对肺癌NCI-H226细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探究连翘醇提物对肺癌NCI-H226细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法 以肺癌NCI-H226细胞为研究对象,将细胞分为对照组,连翘醇提物低、中、高浓度组（5、10、20 mg/mL）,激活剂组[10 mg/mL连翘醇提物+0.5μmol/L核因子κB(NF-κB)信号通路激活剂PMA],抑制剂组（10 mg/mL连翘醇提物+10μmol/L NF-κB信号通路抑制剂BAY 11-7082）,阳性对照组（20μg/mL顺铂）,除对照组细胞不作干预外,其余各组细胞加入相应药物培养24 h。检测细胞增殖、迁移、侵袭情况,并计算增殖率、迁移率、侵袭细胞数;检测细胞中NF-κB p65、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、磷酸化IκBα(p-IκBα)蛋白表达水平。结果 与对照组比较,连翘醇提物各浓度组和阳性对照组细胞的增殖率、迁移率、侵袭细胞数以及细胞中p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）;与连翘醇提物中浓度组比较,抑制剂组细胞增殖率、迁移率、侵袭细胞数及细胞中上述蛋白表达水平均显著降低（P&l...     

桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,探讨其抗癌作用的机制。方法:应用MTT法检测桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,倒置显徽镜、HE染色及电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期及凋亡率,免疫细胞化学法(ICC)检测细胞增殖、凋亡相关调控蛋白的表达。结果:桃儿七根醇提物可明显抑制MCF-7细胞的增殖,1,2,3 mg．L~(-1)桃儿七根醇提物作用72h后,细胞生长抑制率分别为43．0%,54．9%,78．5%,抑制作用呈时间及浓度依赖性。形态学观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征,伴有多核细胞形成。FCM分析发现桃儿七根醇提物阻断MCF-7细胞生长于细胞周期的G_2/M期,凋亡诱导作用呈时间及浓度依赖性。免疫细胞化学结果显示,2mg·L~(-1)桃儿七根醇提物作用48h后,PCNA,Bcl-2蛋白表达较对照组显著下降;而p21~(WAFI-CIP1)和c-Myc蛋白显著增加(P＜0．01)。结论:桃儿七根醇提物可能通过增加p21~(WAFI-CIP1)蛋白表达及降低PCNA蛋白表达而抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并可能下调Bcl-2蛋白表达和上调c-Myc蛋白表达来促进MCF-7细胞凋亡。     

麦角甾醇与吉非替尼联合用药协同抑制非小细胞肺癌A549和PC-9细胞增殖

目的研究麦角甾醇(ERG)与吉非替尼(GEF)联合用药协同对非小细胞肺癌A549(GEF耐药细胞)和PC-9(GEF敏感细胞)细胞的抑制作用。方法将人肺癌细胞A549和PC-9细胞分别分为对照组、ERG 5～160μmol·L~(-1)单药组、GEF 5～160μmol·L~(-1)(A549)或0.625～20μmol·L~(-1)(PC-9)单药组及不同浓度ERG+GEF联合用药组,MTT法测定细胞增殖;Hoechst 33258观察细胞核形态变化;流式细胞术测定细胞凋亡率及细胞周期;Western印迹法检测蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt),磷酸化AKT(p-Akt),表皮生长因子受体(EGFR),磷酸化EGFR(p-EGFR)蛋白的表达。结果在不同作用时间点,与ERG和GEF单药组相比,相应浓度两药联用组对A549和PC-9细胞的增殖抑制率提高(P<0.01),表现出明显的协同效应(q>1.15);Hoechst 33258凋亡染色结果显示,与单药组相比,联用组A549细胞和PC-9细胞各给药组细胞出现明显核分叶、碎裂、凋亡样小体和核大小不一等典型凋亡样特征。与相应浓度GEF和ERG单药组相比,ERG+GEF联用(10+10)μmol·L~(-1)和(40+40)μmol·L~(-1)组A549细胞凋亡率升高(P<0.01),ERG+GEF(40+5)μmol·L~(-1)和(80+10)μmol·L~(-1)组PC-9细胞凋亡率显著升高(P<0.01);两药联用组(20+20)μmol·L~(-1)A549细胞的p-EGFR/EGFR蛋白比值显著降低(P<0.01),两药联用组(40+5)μmol·L~(-1)PC-9细胞的p-Akt/Akt和p-EGFR/EGFR蛋白比值显著下调(P<0.05,P<0.01);细胞周期结果显示,对于A549细胞,两药联用改变了G_0/G_1,G_2/M和S期细胞比例,主要将细胞阻滞在G_0/G_1期。对于PC-9细胞,两药联用未改变G_0/G_1,G_2/M和S期细胞比例。结论 ERG与GEF联用具有协同抑制A549和PC-9细胞增殖的作用,诱导细胞凋亡,其作用机制可能是抑制EGFR信号通路相关蛋白。     

巴戟天醇提物对衰老大鼠心肌组织的抗氧化作用

目的 探讨巴戟天醇提物对衰老大鼠心肌组织的抗氧化作用.方法 将健康6月龄Wistar雄性大鼠50只随机分为正常组、衰老组、阳性对照组、巴戟天醇提物3g/kg和1g/kg剂量组,各10只.分别给予相应的处理后,测定各组大鼠心肌组织中的超氧化物支化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)水平.结果 衰老组较正常组大鼠心肌组织中SOD、GSH-Px水平降低,MDA水平升高,差异均有统计学意义(P<0.01);3个用药组较衰老组大鼠心肌组织中SOD、GSH-Px水平升高,MDA水平降低,差异均有统计学意义(P<0.01);巴戟天醇提物3g/kg组上述3个指标与阳性对照组的三者比较差异无统计学意义(P>0.05),巴戟天醇提物1g/kg组上述3个指标与其他2个用药组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 巴戟天醇提物能够对抗衰老大鼠心肌组织氧化.     

余甘子醇提物抑制人胃癌株AGS细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用

目的 考察余甘子醇提物体外对人胃癌AGS细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用。方法 采用MTT法、细胞集落实验、Hoechst染色分析、Annexin-V-FITC/PI等方法对经过余甘子醇提物体外作用的AGS细胞进行观察和检测。结果 AGS细胞经0.05,0.1,0.15 mg·mL^-1余甘子醇提物作用后,各组细胞形态均发生不同程度的变化,并呈现浓度-时间依赖性;细胞集落实验表明余甘子醇提物抑制肿瘤细胞的集落形成率;Hoechst染色分析、Annexin V/PI实验表明余甘子醇提物能够促进肿瘤细胞的凋亡。结论 余甘子醇提物在体外对人胃癌AGS细胞具有良好的抑制生长和诱导凋亡的作用。     

雷公藤醇提物对人L02肝细胞增殖和凋亡的作用

目的 研究雷公藤醇提物对人L02肝细胞增殖和凋亡的作用.方法 以0、4、8、16 mg/L的雷公藤醇提物(分别为对照组、4 mg/L组、8 mg/L组、16 mg/L组)干预体外培养的人L02肝细胞48 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组肝细胞的生长抑制率,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化吡啶双染流式细胞术检测人L02肝细胞的凋亡率.结果 与对照组比较,4mg/L组的吸光度值降低[(0.90±0.04)比(0.94±0.06),P＜0.05];当雷公藤醇提物浓度为8 mg/L和16 mg/L时,细胞液吸光度值降低均更加明显[(0.76±0.05)、(0.53 ±0.04)比(0.94±0.06),均P＜0.01].与对照组比较,4 mg/L组的细胞凋亡率升高,差异有统计学意义[(9.68±0.45)％比(5.42±0.27)％,P＜0.05];当雷公藤醇提物浓度为8mg/L和16 mg/L时,人L02肝细胞凋亡率升高均更加明显[(30.19±0.31)％、(57.26±0.54)％比(5.42±0.27.)％,均P＜0.01].结论 雷公藤醇提物对人L02肝细胞的增殖有抑制作用,并可诱导其凋亡.     

鲜壁虎醇提物与水提物体内、外对肿瘤活性的影响

目的:研究鲜壁虎水提物与醇提物体内、外的抗肿瘤活性。方法:体外采取MTT法测定鲜壁虎水提物、醇提物对BEL-7402细胞和HepG2细胞生长的抑制作用。体内复制移植瘤小鼠H22模型,给药后计算抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数。结果:0.0625mg·mL-1壁虎水提物对HepG2细胞生长有显著抑制作用(P<0.05),1.0000、0.2500、0.0625mg·mL-1壁虎水提物对BEL-7402细胞的生长均有显著抑制作用(P<0.05)。1.0000、0.2500、0.0625mg·mL-1壁虎醇提物对2种细胞有促进增殖的趋势。1.0000、0.2500、0.0625mg·mL-1壁虎水提物与1.0000、0.0625mg·mL-1壁虎醇提物均可显著抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长活性(P<0.05)。结论:鲜壁虎水提物体外有抑制肿瘤细胞生长的作用,醇提物有促进细胞增殖的趋势。鲜壁虎水提物、醇提物体内均有抗肿瘤活性,水提物抑瘤率高于醇提物。     

山银花水提物体外抗甲型H1N1流感病毒的作用研究

目的:考察山银花水提物(SYHW)体外抗甲型H1N1流感病毒(H1N1病毒)的作用。方法:以H1N1病毒感染体外培养的犬肾小管上皮细胞(MDCK细胞),计算病毒的半数组织培养感染剂量(TCID_(50));以不同质量浓度SYHW作用MDCK细胞24 h,考察其最大无毒浓度。然后将试验分为正常细胞组、病毒对照组和SYHW预防给药组、治疗给药组和直接杀灭给药组(均给予最大无毒浓度的SYHW,并以100 TCID_(50)H1N1病毒感染细胞),测定SYHW的抗病毒有效率(ER);将试验分为正常细胞组、病毒对照组和SYHW治疗给药组、直接杀灭给药组(给药及病毒感染方法同上),分别测定细胞增殖指数(PI)和细胞凋亡率的变化。结果:H1N1病毒的100 TCID_(50)为1.26×10~(-7),SYHW对MDCK细胞的最大无毒浓度为50μg/m L(细胞存活率为91.3%)。SYHW预防给药组、SYHW治疗给药组和SYHW直接杀灭给药组的ER分别为0、80.3%、52.7%。与正常细胞组比较,病毒对照组细胞的PI值显著降低(P<0.05),早期、晚期凋亡率显著升高(P<0.05);与病毒对照组比较,SYHW直接杀灭给药组细胞的PI值显著升高、早期凋亡率显著降低(P<0.05),SYHW治疗给药组细胞的早期凋亡率显著降低(P<0.05)。结论:SYHW具有体外抗H1N1病毒的作用,且以治疗给药和直接杀灭给药抗病毒作用较好。     

壳聚糖及ZTC1+1-Ⅱ澄清剂对大青叶提取液的澄清工艺研究

目的:研究壳聚糖及ZTC1+1-Ⅱ天然澄清剂处理大青叶提取液的最佳工艺。方法:以多糖保留率、靛玉红保留率、药液澄清情况等为考察指标,采用单因素考察法,优选最佳除杂工艺条件。结果:优选出的最佳工艺条件为:壳聚糖取浓缩至1:10的提取液,加热至50℃,按8%澄清剂用量加入;ZTC1+1-Ⅱ取浓缩至1:10的提取液,加热至70℃,按5%澄清剂用量,先B后A的次序加入。结论:壳聚糖及ZTC1+1-Ⅱ天然澄清剂均可用于大青叶提取液的除杂,效果良好。     

牡丹皮水提取物及乙醇提取物的抗菌作用研究

目的研究牡丹皮水提取物及不同浓度乙醇提取物的体外抑菌和杀菌作用。方法用试管内药液稀释法测定牡丹皮水提取物及不同浓度乙醇提取物的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果牡丹皮水提取物和乙醇提取物对金黄色葡萄糖球菌、大肠杆菌及绿脓杆菌均有较强的抑制作用和一定的杀灭作用,且水提取物的作用强于乙醇提物。结论牡丹皮具有抗菌作用。     

金银花水提物及醇提物体外抗菌实验

目的：研究金银花水提物及不同浓度醇提物的体外抑菌和杀菌作用。方法：测定金银花水提物及25%、50%、75%、90%醇提物的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果：金银花水提物及醇提物均对金黄色葡萄球菌有较明显抑菌及杀菌作用,对痢疾杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌的抑菌和杀菌效果一般,高浓度醇提物对铜绿假单胞菌和大肠埃希菌的抗菌作用不明显。结论：金银花不同溶剂提取物对供试菌均有一定的抑菌作用,是有研究、开发价值的天然抗菌中草药。     

Activation of the Chemosensory Ion Channels TRPA1 and TRPV1 by Hydroalcohol Extract of Kalopanax pictus Leaves

TRPA1 and TRPV1 are members of the TRP superfamily of structurally related, nonselective cation channels. TRPA1 and TRPV1 are often co-expressed in sensory neurons and play an important role in somatosense such as cold, pain, and irritants. The first leaves of Kalopanax pictus Nakai (Araliaceae) have long been used as a culinary ingredient in Korea because of their unique chemesthetic flavor. In this study, we observed the intracellular Ca²⁺ response to cultured cells expressing human TRPA1 (hTRPA1) and human TRPV1 (hTRPV1) by Ca²⁺ imaging analysis to investigate the ability of the first leaves of K. pictus to activate the hTRPA1 and hTRPV1. An 80% ethanol extract of K. pictus (KPEx) increased intracellular Ca²⁺ influx in a response time- and concentration-dependent manner via either hTRPA1 or hTRPV1. KPEx-induced response to hTRPA1 was markedly attenuated by ruthenium red, a general blocker of TRP channels, and HC-030031, a specific antagonist of TRPA1. In addition, the intracellular Ca²⁺ influx attained with KPEx to hTRPV1 was mostly blocked by ruthenium red, and capsazepine, a specific antagonist of TRPV1. These results indicate that KPEx selectively activates both hTRPA1 and hTRPV1, which may provide evidence that the first leaves of K. pictus primarily activate TRPA1 and TRPV1 to induce their unique chemesthetic sense.     

Chitin from the Extract of Cuttlebone Induces Acute Inflammation and Enhances MMP1 Expression

We previously reported that the extract from cuttlebone (CB) has wound healing effect in burned lesion of rat. In present study, the main component of CB extract was analyzed and its wound healing activity was evaluated by using in vitro acute inflammation model. The extract of CB stimulated macrophages to increase the production of TNF-α. The extract also enhanced the production of TGF-β and VEGF, which were involved in angiogenesis and fibroblast activation. The treatment with CB extract enhanced proliferation of murine fibroblast. CB extract also induced the activation of fibroblast to increase the secretion of matrix metalloproteases 1 (MMP1). The constituent of CB extract which has wound healing activity was identified as chitin by HPLC analysis. The mechanism that the CB extract helps to promote healing of burned lesion is associated with that chitin in CB extracts stimulated wound skins to induce acute inflammation and to promoted cell proliferation and MMP expression in fibroblast. Our results suggest that CB or chitin can be a new candidate material for the treatment of skin wound such as ulcer and burn.     

蛇葡萄根提取物在细胞内抗单纯疱疹病毒的作用部位

蛇葡萄(Ampelopsis sinica)根通过提取得到不同提取物,用之进行细胞内抗单纯疱疹病毒的实验,发现其中除去鞣质后的水溶性部分具有抑制单纯疱疹病毒的活性作用。     

罗汉果果实、茎叶总黄酮的含量测定

目的:建立罗汉果果实、茎叶提取物中总黄酮的含量测定方法.方法:利用分光光度法,以山奈苷为对照,氯化铝为显色剂,在检测波长为393 nm下测定其总黄酮含量.结果:回归方程为Y=0.389 6X +0.009 7(r =0.999 8),山奈苷在0.1～0.4 mg-ml-1范围内线性关系良好,其平均回收率为97.27％,RSD=2.33％(n=6).结论:此方法简便、灵敏、准确、可靠性强,可用于测定罗汉果果实、茎叶提取物中总黄酮的含量,为其质量控制提供了检测方法.     

银杏叶提取物对树突状细胞和Th1/Th2细胞因子的影响

目的研究银杏叶提取物对不稳定型心绞痛患者(UAP)树突状细胞(DC)功能和Th1/Th2细胞因子的影响。方法将54例UAP分为常规治疗组(对照组,27例)和常规加银杏叶提取物组(银杏叶组,27例),分别于治疗前及治疗后4周取血,分离外周血单个核细胞,在含粒细胞、巨噬细胞、集落刺激因子和白介素4的培养条件下制备DC。用流式细胞仪检测DC表面CD86(B7-2)的表达;混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC对同种异体T淋巴细胞的刺激能力;ELISA法测定血液中的细胞因子IFN-γ和IL-4;比浊法测定血C反应蛋白(CRP)。体外实验观察银杏内酯B对DC CD86表达的直接影响。结果与对照组比较,银杏叶提取物可进一步抑制DC功能(P<0.01),同时显著降低血CRP水平(P<0.05)和血IFN-γ浓度(P<0.01);银杏内酯B对DC CD86表达有直接的抑制作用(P<0.01)。结论银杏叶提取物对DC的抑制和由此对患者炎性反应的抑制可能是其治疗心绞痛的机制之一。     

Biological Activity of Crude Extract and Saponin Pseudoginsenoside-RT1 Derived from the Fruit of Randia siamensis

Ursolic acid (1), pseudoginsenoside-RP 1 (2), and pseudoginsenoside-RT 1 (3) were isolated from the fruit of Randia siamensis. 13 C NMR spectroscopy was particularly useful in confirming the structures of these components. Studies with rats showed that saponin 3 caused a decrease in blood pressure, an increase in heart rate and an increase in spontaneous contractility of the uterus. Also, a crude ethanol extract of the fruit of R. siamensis exhibited acute ichthyotoxic activity.