抗-HCV免疫测定室内质控图连续性的应用

目的探讨不同ELISA检测试剂室内质控图连续性使用的方法。方法不同批试剂同时测定系列质控血清，得系列质控血清的S／CO值，根据系列质控血清的浓度及其S／CO值之间的关系，分别得不同批号试剂的直线回归方程（y=a＋bX），从而得不同批号试剂之间的换算关系，即可将新批号试剂测定同一批号、同一浓度质控血清的S／CO值换算回原批号试刺所测的S／CO值，可在原质控图上连续描点。结果针对同一质控血清不同批号试剂的检测结果，应用统计学的直线回归与相关分析，可使室内质控图连续性使用。结论室内质控图的连续性使用，可解决由于试剂的更换而更换质控图的问题，避免“即刻法”质控本身固有的缺陷，为室内质控工作带来方便。     

即刻法室内质控在ELISA实验中的应用

室内质控是保证血液质量的重要措施之一 ,EL ISA实验的质控一般采用临床化学实验质控的方法。由于 ELISA试剂盒效期短、批号更换频繁 ,试剂昂贵。加上其灵敏度高、特异性强 ,批内测定不能代表批间测定 [1] ,故实际操作较难。笔者在EL ISA实验中采用即刻法室内质控 ,并绘制了即刻法室内质控表。取得了良好的效果。现以 EL ISA法检测抗 - HIV为例报告如下。材料与方法1　质控血清　由卫生部临检中心提供 ,抗 - HIV4NCU/ml,批号 0 0 0 2。2　试验　抗 - HIV ELISA试剂盒 ,由北京金豪公司提供 ,批号 2 0 0 0 0 5 2 3。3　仪器　 …     

HBsAg定性测定室内质控物浓度的选择

目的探讨定性ELISA测定的室内质控血清浓度的选择方法。方法根据系列HBsAg质控血清的浓度与其测定S／CO值的关系,得到线性回归直线方程Y=a＋bX及其相关系数r。选择计算得到的S／CO值减去3倍批间CV与该S／CO值的乘积仍大于1的质控物作为判断实验室测定重复性室内质控用。结果质控血清0～2ng／ml与其检测的S／CO值之间呈高度相关。1ng／ml质控血清可作为测定重复性使用,0．5ng／ml质控血清作为监测试剂下限使用。结论定性ELISA试剂本身的阴性、阳性对照只能检测其实验的有效性,无法监测灵敏性及测定下限的变化,必须使用弱阳性质控血清进行室内质控,并依据统计学直线回归与相关分析,科学地选用质控物浓度,保证实验的准确性。     

应用即刻性进行抗-HCV检测的室内质控

目前国内检测抗 -HCV的 ELISA法大多参照生化的质控方法 ,即选择弱阳性标本为质控物 ,以 x质控图法控制日常工作的精密度 ,判断实验的有效性。但由于 ELISA检测试剂有效期短 (一般为 6个月 ) ,用同一批号试剂盒连续常规检测 2 0次难度大 ,有一定的局限性。笔者结合 x质控图和“即刻性”质控的优点 ,建立了抗 -HCV的即刻性 x质控图方法 ,现介绍如下。材料与方法1　试剂与质控物　试剂为厦门新创公司生产 ,批号 2 0 0 2 0 45 80 5。 2 Ncu/ml低值质控物购自上海市血液中心 ,批号2 0 0 1 0 81 5。阴性质控物则取 A值在 0 .0 2～ …     

抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度的选择和批间连续质控延续方法的建立

目的建立抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度的选择方法和批间连续质控的延续方法。方法选择系列质控血清中S/CO值减去精密度测定中得到的3倍批间CV与该S/CO值的乘积仍大于1.0者用来监测试验重复性,选择S/CO处于1.5左右的质控血清以判断试剂盒测定下限的有效性。使用新旧两个批号试剂盒同时检测系列质控血清得到线性回归的直线方程,计算得到换算因子,用以将新批号试剂测定值换算至原批号试剂测定值,继续使用原质控图。结果通过实验能够选择合适浓度的质控物用以判断检测重复性和试剂盒测定下限的有效性。能够得到不同批号间质控测定的换算因子用以有效延续质控图。结论通过上述方法能够有效选择抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度,并建立批间连续质控的延续方法。     

“即刻法”室内质控存在的问题探讨

由于酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒有效期较短,同一批号试剂若按常规方法开展室内质控难度较大,故秦晓光[1 ] 提出采用“即刻法”做ELISA法的室内质量控制。“即刻法”实际上是数据统计处理方法中应用Grubbs[2 ] 剔除异常值的方法在免疫质控中的应用,就是用检验一个室内质控结果是否为异常值的方法来判断其是否失控。该法只需要连续测定3次,即可对3次结果中异常值进行检验,比较简单,因此在临床中得到一定应用。但我们在实际应用中,发现“即刻法”还存在下列问题。一、从理论上讲“即刻法”不适用于ELISA法的室内质量控制所谓“即刻…     

以临界值进行即刻法室内质控的探讨

ELISA竞争一步法检测抗-HBc的室内质控通常是用室内质控品来进行的.由于室内质控品的浓度较高,使得检测的吸光度A值较低,求得的吸光度值/临界值(S/CO)难以绘制Levey-Jennings质控图,对临界值样本不能起有效的质控作用.此外在基层医院由于标本量较少,检测的频次较低,加之使用室内质控品也存在着一定的困难,因而许多单位事实上不能按照要求进行室内质控.使用"即刻法"进行ELISA检测的室内质控虽有较多报道,然而以何种数据进行尚不一致.本文以抗-HBc检测为例探讨了直接以临界值(cut-off,CO)进行 "即刻法" 室内质控的方法,现报道如下.     

无偿献血300ml与200ml献血反应的比较分析

ELISA检测室内质控与临床化学测定的质控方法相比有其特殊性 ,由于 ELISA试剂盒的有效期短 ,批号更换频繁 ,短时间内难以积累最佳条件下 2 0次质控物的检测结果。而采用“即刻法”质控统计方法 ,只需连续测 3次 ,即可对第 3次检验结果进行质控。笔者在免疫实验室 ELISA检测室内质控中采用了即刻法取得了良好的效果 ,现以检测HBs Ag室内质控为例 ,简述如下。材料与方法1　材料　 1 ng HBs Ag质控血清 (由卫生部临床检验中心提供 ) ;酶标仪 (美国伯乐 5 5 0 ) ;洗板机 (美国伯乐 1 5 75 ) ;40～ 2 0 0 μl加样枪 (芬兰产 ) ;检测HBs…     

酶联免疫吸附法检测艾滋病抗体室内质控血清的制备和应用

EL ISA法检测抗 - HIV的诊断试剂虽然经过中国药品生物制品检定所批批检的检测 ,但由于很多因素都会影响到 EL ISA法检测结果的准确性 ,所以每次检测都应进行室内质控 [1 ] 。因此我们试制了抗 - HIV室内质控血清 ,考核了其在不同温度存放时的稳定性和精密性 ,并与卫生部临床检测中心所购抗 - HIV室内质控血清进行了对照。结果显示该方法制备的室内质控血清具有较好的稳定性和精密性 ,比较适合在抗 - HIV初筛试验室中推广应用 ,现介绍如下。1　材料和方法1.1　试剂　 EL ISA检测抗 - HIV试剂盒 :上海科华 ,批号为2 0 0 10 915 ,…     

CD3500R血液分析仪做白细胞质控的探讨

CD35 0 0R血液分析仪参加全国室间质评的白细胞(WBC)结果通常严重偏离靶值,但我们发现可用机内同时测定的WIC作为质控结果。我们研究了质评物用WIC测定的方法。一、材料和方法1.材料　(1)仪器:ABBOTTCD35 0 0R血液分析仪,CoulterJT IR血液分析仪;(2 )试剂:进口原装配套试剂;(3)室内质控物:ABBOTT质控物,批号2 0 0 2 11。2 .方法　(1)每天用ABBOTT质控物做室内质控监测仪器性能;(2 )用正常人新鲜抗凝血作WBC测定的WIC与WOC相符性试验;(3)用WBC质评物在CD35 0 0R血液分析仪上测定WIC和WOC ,并与CoulterJT IR结果作…     

"即刻法"室内质控存在的问题探讨

由于酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒有效期较短，同一批号试剂若按常规方法开展室内质控难度较大，故秦晓光提出采用“即刻法”做ELISA法的室内质量控制。“即刻法”实际上是数据统计处理方法中应用Grubbs剔除异常值的方法在免疫质控中的应用，就是用检验一个室内质控结果是否为异常值的方法来判断其是否失控。该法只需要连续测定3次，即可对3次结果中异常值进行检验，比较简单，因此在临床中得到一定应用。但我们在实际应用中，发现“即刻法”还存在下列问题。     

ELISA定性检测HBsAg的室内质控探讨

目前国内检测HBsAg的ELISA大多参照生化的质控方法,即选弱阳性标本为质控物,以X图法控制日常工作的精密度,判断实验的有效性。我们改用临界值法进行室内质控,简便易行,现特予介绍。一、室内质控物　高值质控物为10μg/ml,低值质控物为1ng/ml,阴性质控物则取A值在0.04～0.08间的样本20份以上混匀后分装。二、室内质控方法　实验除用试剂盒内的质控品外,同时也检测高值、低值和阴性三种质控物,并将质控结果算出S/CO值点入质控图中(S/CO值:S为样本A值,CO为临界(CutOff)值,即阴性对照A值×2.1。如阴性对照小于0.05时,以0.05计)。参…     

第二代与第三代抗-HIV检测试剂的比较

第二代抗 -HIV检测试剂采用 ELISA间接法 ,而第三代抗 -HIV检测试剂采用 ELISA双抗原夹心法。本站从 2 0 0 1年 1 0月起 ,停用第二代试剂 ,全部采用第三代试剂。通过 2 0 0 1年全年的标本检测、室内质控及室间质评工作 ,认为第三代试剂与第二代试剂相比 ,在灵敏度、特异性上都有很大提高。现将抗 -HIV试剂的使用情况报告如下。材料与方法1　试剂来源　抗 -HIV第二代、第三代试剂均购自厦门新创科技有限公司和北京万泰生物药业有限公司。试剂均经中国药品生物制品检定所批批检定合格 ,并在有效期内使用。2　标本及质控血清来源　标…     

核酸转录介导的扩增中室内质控方法的探讨

目的 比较箱体图法和Levey-Jennings质控图法在转录介导的扩增中对室内质控的监测情况.方法 每天使用同一台机器检测同一批号的HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA室内质控品的待测物信号/临界值(S/CO值).使用SPSS17.0软件绘制箱体图并判断离群值,并用K-S检验判断室内质控品S/CO值是否服从正态分布;使用Excel软件连续测定前20次室内质控品的S/CO值为参数绘制Levey-Jennings质控图.结果 共收集86组HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA室内质控品S/CO值,箱体图法分别出现2次、0次、1次离群值;Levey-Jennings质控图法分别出现4次、4次、6次失控值;室内质控品S/CO值经过K-S检验服从正态分布(P>0.05),适用于Levey-Jennings质控图的绘制.结论 应用外部质控品S/CO值绘制的Levey-Jen-nings质控图法相对于箱体图法,更有助于检验核酸检测体系的稳定性.     

自制人类免疫缺陷病毒抗体等质控血清及室内质控方法建立研究

目的用人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体阴性血清梯度稀释HIV抗体酶联免疫试剂盒中阳性对照,制备室内质控血清。建立艾滋病酶联免疫检测的室内质控方法。进行方法可靠性和质控血清稳定性的评价,同时比较两个厂家生产的HIV抗体试剂盒进行自制质控血清室内质控结果以及自制丙型肝炎抗体、乙型肝炎表面抗原血清的室内质控结果的评价。方法将自制的HIV质控品与卫生部HIV质控品按照HIV抗体检测的SOP文件用HIV抗体试剂随患者进行检测,每天测定吸光度,计算S/CO値。连续检测20次计算S/CO值和s,以x±2s为控制限,以x±3s为失控限绘制质量控制框架图。每天随患者标本各加入1份自制质控品和1份卫生部购质控品进行质控将其各自的S/CO描在质控图上,应用多规则质量控制原则分析以发现当天测定批的误差以及误差原因。控制每批次检测的重复性,观察试剂盒间的差异进行两种质控血清质控结果的比对研究。结果自制HIV抗体质控血清方法科学可靠,减少了基质效应,能确保结果的准确性和可靠性。结论稀释阳性对照制备质控品,建立酶联免疫室内质控方法也适用于乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体等其他免疫项目的酶联免疫室内质控。不同厂家试剂用自制质控品进行质控结果无差异。     

乙肝表面抗原室内弱阳性质控物的制备及其应用评价

目的制备长期使用且稳定性好的HBsAg室内弱阳性质控血清。方法以小牛血清磷酸盐缓冲液按不同稀释倍数1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32等比例梯度稀释HBsAg阳性血清;以2种厂家提供不同批号的检测试剂,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法对HBsAg阳性质控血清进行连续6个月检测,以此对HBsAg阳性质控血清稳定性进行评价。结果以吸光度值/临界值(S/CO)1.0~3.0为参考标准,确定该实验室HBsAg阳性质控血清的最佳稀释度为1∶8[其S/CO值为2.42,变异系数(CV)为4.72];且该质控血清在不同试剂使用稳定性较好(其S/CO范围为2.41~2.82,CV范围为4.24%~8.68%);HBsAg阳性质控血清连续6个月检测结果CV范围为8.71%~9.86%(CV10%)。结论自制HBsAg质控血清具有很好的稳定性和精密度,可作为临床常规HBsAg检测中的室内质控血清。     

尿干化学分析室内质控的探讨

尿液室内质控属等级资料 ,不能象计量资料那样直观、及时地发现误差和反映误差的性质 ,为此 ,笔者提出了一种新的室内质控方式———偏倚累加法质控图 ,作为当前尿液质控的一种补充 ,暂称它为双偏倚质控图。1　材料与方法1 .1　试剂与仪器　拜耳尿 1 0项试纸条 ;Clinitek 5 0 0尿分析仪 ;天津市检验中心统一提供的上海伊华公司生产的尿分析质控液 ,批号 :2 0 0 2 0 30 5。1 .2　方法1 .2 .1　按照尿常规室内质控的要求进行每日质控 ,并做登记 (见表 1 )。以连续 2 0次出现频率最多的定量等级作靶值 ,每个项目以测定值符合靶值记为 0 ;以高…     

Grubbs法在酶联免疫法室内质控中探讨

Grubbs法即"即刻法"被推荐作为酶联免疫法(ELISA法)项目检验的室内质控方法,简单实用,易于掌握[1]。现将我科在实际工作中遇到的问题分析如下。1材料与方法1.1材料丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)试剂(北京万泰,批号I20081015),我科2009年1～3月常规ELISA实验检测所得的质控数据(本科配制),全自动酶     

A值及S/CO值质控图的比较

随着检验技术的不断提高 ,人们越来越认识到室内质控是保证检验质量的基础。自 1 95 0年临床化学实验室内质量控制首次推广采用质控图以来 ,质控图就一直被各实验室作为质量控制的一种手段。由于免疫质控不象生化和血液质控好控制 ,主要是由于各试剂厂家之间的试剂差异及同一厂家的批内及批间差异是不可避免的 ,且免疫学反应影响因素很多 ,所以要确保准确无误的发出每一项免疫检验报告 ,室内质控尤为重要。而每天的质控图直接反映了本室当天试验的可靠程度。通常实验室是以各质控品的 A值或 S/CO值来画质控图 ,哪一种更能反映质控监测的准…     

酶结合物效价下降引起抗-HCV检测失控原因分析

20 0 2年 6月 ,笔者检测抗 -HCV时 ,先后出现 3次失控现象 ,均为阳性对照和质控物 OD值低于要求 ,经过对仪器、人员、试剂、质控物的排查 ,发现是由于试剂盒保存不当引起酶结合物失效 ,为引起同行和试剂厂家重视 ,报告如下。材料与方法1　检测对象　绍兴市无偿献血者。2　试剂与仪器　抗 -HCV检测试剂为国内某厂家生产 ,经中国药品生物检定所批批检定 ,批号 2 0 0 2 0 0 2 2 0 ,HCV 2NCU质控物由卫生部临检中心提供 ,批号 0 2 0 2 ,以上各种试剂均在有效期内使用 ;TECANRSP-1 5 0全自动加样器(瑞士 TECAN公司 ) ,TECAN全自动洗…