試用组織培养分離肝炎病毒的初步報告

用组织培养法作传染性肝炎病原学的研究。直到目前尚未有肯定一致的结果。1956年Rightsel氏Morzycki氏等报告,用肝炎患者血清感染人胚睾丸细胞,肝细胞Detroit6细胞,Hala细胞、可以发生可见的细胞病变。最近捷克学者Kubelka氏等曾用猴贤细胞分离出一株肝炎病毒,据云能传到十四代,氏等用人与猴的上皮性细胞进行培养却没有看到病变。58年我们和协和医院病毒室及长春生物制品所协作之     

简易尿6-羟甲基蝶呤荧光强度测定对恶性疾病诊断价值的探讨

Halprn 等认为6—羟甲基蝶呤(下简称蝶呤)是各种癌细胞在组织培养中特有的叶酸降解产物,Rao 等(1981)介绍用活性炭吸收尿中蝶呤,发现癌患者尿蝶呤含量是正常人和非癌患者的3～20倍。我们对 Rao 氏法作了某些改进,以上海产930荧光光度计检测正常人、非癌患者、各种恶性疾病称癌患者术后患蝶呤荧光强     

造血微环境体外研究——骨髓基质细胞的起源生理功能及其在血液病诊治中的意义(摘要)

研究造血微环境(HME)的生理功能及其在各种血液病中的病理改变,对认识血液病的发病机理,提高临床诊治水平有着重要的意义。本研究利用骨髓基质细胞(F—CFU)体外培养、造血干细胞培养、细胞染色体分析、电镜观察和羟基脲自杀试验等方法,结合临床对HME的某些生理功能及其在一些血液病发病机理中的作用作了广泛的探讨。1、首先在国内建立了人骨髓F—CFU培养的方法,探索了细胞浓度和小牛血清等条件对F—CFU生长的影响。证明用低浓度细胞小平皿短期液体培养法是定理骨髓的F—CFU的方便、稳定、可靠且经济的方法,较适于再障等骨髓增生低下病人的测定;长期液体培养是做F—CFU细胞染色体分析的可靠     

慢病毒转染人骨髓间质干细胞研究

目的:分离培养人骨髓来源间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行慢病毒载体介导的基因转染研究。方法:采取全骨髓贴壁培养法分离培养人骨髓MSCs。利用脂质体法进行慢病毒感染人骨髓MSCs。结果:分离培养出人骨髓来源的MSCs,并用携带绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的慢病毒成功感染人骨髓MSCs。结论:获得人骨髓MSCs并进行慢病毒载体介导的基因修饰,为间质干细胞基因工程和组织工程研究奠定了基础。     

胎儿不同组织的CSF对骨髓CFU—C生长刺激作用的探讨

用胎儿大脑、脑干、小脑、胸腺、肾脏、肾上腺、心脏、胃及腮腺九种器官组织培养上清液作集落刺激因子(CSF),对30例4～6个月龄胎儿的骨髓造血祖细胞(CFU-C)进行培养和观察。结果:腮腺CSF的刺激活力最强,胃CSF次之,肾上腺及心脏CSF刺激活力较弱,肾组织CSF无刺激作用或作用极弱。其他组织CSF对CFU-C生长有一定刺激作用。作者且对嗜酸性粒细胞集落和细胞簇进行了观察。     

小儿睾丸卵黄囊瘤组织原代培养的不同方法评价

目的 采用组织培养技术在体外培养取自人体的睾丸卵黄囊瘤组织,比较并建立人睾丸卵黄囊瘤细胞原代培养的理想方法.方法 分别采用机械分散法、酶消化法和植块培养法进行人睾丸卵黄囊瘤细胞的体外原代培养,倒置显微镜及台盼蓝染色观察并比较三者的培养成功率、细胞活力、细胞形态和数量等,免疫组化法鉴定其细胞来源.结果 原代培养的成功率、...     

动物模型中的乙型肝炎

甲型和乙型肝炎病毒在组织培养中传代繁殖仍然是困难的。HBsAg 偶尔可以在接种了的人肝器官培养中产生,但连续传代还未获成功,看来 HBV 的复制是不成熟的。在鸡胚绒毛尿膜中培养人胚肝碎片的研究亦获得同样结果。在用从持续性乙型肝炎抗原血症的婴儿所获得的肝脏活组织标本的培养物中,可以看到肝细胞核内有病毒样颗粒。因为难以找到适于 HBV 复制的组织培养,所以对 HBV 的研究主要依靠动物模型。目前黑猩猩是在活体内研究 HBV 唯一可靠的模型。已证明恒河猴不适于作这种研究用,长臂猿来源又太少,不足以供广泛研究。     

应用造血干细胞培养对血液病的研究

自1970年Pike和Robinson应用体外软琼脂培养技术,成功地培养了人骨髓粒系祖细胞(CFU—C)以来,造血干细胞培养技术被广泛用于造血理论和临床实践的研究,特别是对白血病、再生障碍性贫血(再障)的发病机理、诊断、治疗及予后等方面的研究提供了有价值的资料,本文采用人骨髓细胞体外培养皿琼脂培养方法,对白血病、再障及其他血液病作了初步观察,现将结果报导如下.     

KB 细胞株有丝分裂在藜芦硷作用下的变化

近几年以来,本教研室的研究工作已经证明藜蘆硷(Veratrine)可导致小白鼠慢性中毒,引起小白鼠机体内许多脏器形态结构及机能上的变化。本文的目的在于观察藜蘆硷对组织培养细胞的影响,现将藜蘆硷对组织培养细胞(KB细胞株)有丝分裂的影响作一初步报导。材料和方法一、细胞的培养以长期适应本室培养的KB细胞作为研究材料。利用单层细胞培养法,在装有盖片     

肝脏脾脏在白血球神經体液調节上的意义

Beer、Muto、Bock、Heilmeyer等学者在动物实驗中証明,肝脏可能分泌出一种促进骨髓粒性細胞成长的物質,脾脏也能分泌出一种体液,这种体液能抑制骨髓細胞的发育。但这些現象只是在动物实验时所观察到的,在人体上研究肝、脾在白血球神經体液調节上的意义,还没有人研究过。作者根据Moeschlin与Hoff氏的骨髓功能試驗法,对正常健康人(8名),肝脏疾病(24例) 及脾脏疾病(16例)患者进行了研究,方法用Pyrifer注射产生人工高热,以后每4小时檢查白血球計数,一共六次,观察白血球数的变化,結果如下:     

Ⅱ型登革病毒对人骨髓造血细胞抑制机制的初步探讨

用Ⅱ型登革病毒(D_2 V)与人骨髓细胞混合培养48小时后,测定上清液中干扰素的浓度,发现D_2 V感染组的干扰素浓度明显高于空白对照组(P<0.001)。在骨髓CFU-GM培养中,加入D_2 V及抗γ-干扰素后,CFU-GM集落产率明显高于只加D_2 V而不加抗γ-干扰素组(P0.05)。实验研究结果提示D_2 V对人骨髓的抑制与免疫及体液因素有关。     

儿童骨髓基质细胞体外培养

目的 探讨儿童骨髓基质细胞体外培养条件,为儿童骨组织工程研究选择种子细胞。方法 将儿童髂骨内骨髓分别采用密度梯度离心法和全骨髓法培养,待细胞长满培养瓶后传代,选取正常生长骨髓基质细胞第3代绘制生长曲线并测定细胞内骨钙素(OCN)及培养液中碱性磷酸酶(ALP)含量。培养期间用倒置相差显微镜观察细胞形态。结果 原代儿童骨髓基质细胞呈长梭形、三角形或多角形,存在有集落样生长特性,传代后细胞形态无明显变化,且生长、增殖稳定,细胞内OCN及培养液中ALP含量在1周左右达到高峰。结论 采用密度梯度离心法和全骨髓法获得儿童骨髓基质细胞,经培养、传代后,可以得到大量稳定增殖的骨组织工程种子细胞。     

骨髓基质细胞体外扩增能力及支持造血的研究

目的 :观察成纤维细胞集落形成单位 (CFU- F)贴壁层的形成、体外传代培养、扩增的情况 ,研究各阶段 (CFU- F)对粒 -单核细胞集落形成单位 (CFU- GM)和红细胞集落形成单位 (CFU- E)生长及细胞因子对造血的支持作用 ,并测定骨髓有核细胞对基质细胞的粘附能力。方法 :利用改进的液体培养法 ,培养骨髓基质细胞并传代 ,利用甲基纤维素半固体培养法 ,培养人骨髓细胞 ,观察 CFU- GM、CFU- E集落数。结果 :人骨髓基质细胞在体外可以传代培养 4代并能扩增 2 8倍 ,其中 F3代对 CFU- GM和 CFU-E的促进增殖作用最强 ,且对骨髓有核细胞的粘附能力最强。结论 :人骨髓基质细胞可体外传代扩增并支持造血细胞生长     

长期培养起始细胞在不同的基质细胞层上的培养

长期培养起始细胞在不同的基质细胞层上的培养梁辉，等。中华血液学杂志１９９５；１６（５）：２４１长期培养起始细胞（ＬＴＣ－ＩＣ）是一群迄今为止经体外培养所获得的最幼稚的造血祖细胞。作者用正常人类骨髓基质细胞以及５株人或鼠的骨髓为外纤维细胞作基底层，移种...     

全骨髓培养法对大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定

目的探讨一种易操作、高效的分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法。方法采取全骨髓培养法分离和纯化大鼠MSCs,用显微镜观察细胞形态,用流式细胞仪检测mMSCs纯度和形态特征,观察MSCs在不同诱导条件下向成骨细胞及脂肪细胞分化的能力。结果全骨髓培养法培养的MSCs具有良好的贴壁性,形态均一,流式细胞仪检测:CD45、CD90分别为1.3%、98.6%。第3代MSCs经适当诱导后可向成骨细胞和脂肪细胞分化。结论全骨髓培养法从大鼠骨髓中分离培养出的MSCs纯度较高,稳定性好,且操作相对简便。     

人胚胎骨髓间充质干细胞的体外培养

目的 摸索体外培养人胚胎骨髓间充质干细胞的方法.方法 采用含5%胎牛血清的MEM(modified Eagle's medium)培养基培养人胚胎骨髓间充质干细胞,用流式细胞仪检测培养获得的细胞中人胚胎骨髓间充质干细胞含量.结果 培养获得的细胞中人胚胎骨髓间充质干细胞含量达93%.结论 本研究方法培养获得的人胚胎骨髓间充质干细胞纯度高,细胞活性好.     

Fain和Wolfe氏法显示线粒体的经验介绍

线粒体在教学上和细胞学研究上都是人们经常观察的对象。我们在60年代研究小白鼠肝脏的发育分化时,曾引用过Fain和Wolfe氏法显示线粒体,得到了满意的结果。后来我们又用该法(略加改进)显示小白鼠和豚鼠的肾、小肠、胰腺、心肌、和人的大脑、小脑、脊髓等细胞的线粒体,并与Bensley,Regaud,Altman-Meres等法作了比较。结果表明,本法显示的线粒体     

人脐血粒单系及成纤维系祖细胞的体外培养

采用体外单层半固体琼脂培养法及液体培养法检测了脐血中CFU—GM和CFU－F，并与成人骨髓和外周血对照。结果显示：脐血培养7dCFU－GM产率约相当于成人外周血的5～6倍，但低于骨髓；培养14d的产率略高于骨髓，与骨髓培养7d结果相比无统计学差异；脐血中CFU－GM的集落大小、细胞构成明显不同于成人外周血及骨髓；脐血中可培养出CFU—F，但产率仅为骨髓的1／5，而外周血中则无CFU－F形成。提示人脐血富含造血祖细胞，且有不同于骨髓及外周血的性质。     

巨噬细胞在实验性新月体性肾小球肾炎发展中的作用——组织培养和电子显微镜研究

传统的认识是,新月体是由肾小球的上皮细胞增生所形成,这可能是对包曼氏囊内纤维蛋白沉积的反应。但本文作者在以往的研究中便发现,取自急进性新月体性肾小球肾炎病人或取自建立了实验性新月体性肾小球肾炎动物的肾小球作组织培养时,除了正常肾小球作培养时就可在细胞长出物(Outgrowth)中见到的Ⅰ型(上皮性)细胞和Ⅱ型     

体外微量琼脂法培养人类紅細胞系統先驅細胞

利用体外骨髓干细胞克隆生长技术,可以研究人类造血的早期状况。以往常用2种方法研究体外红细胞系发生,组织凝浆法和甲基纤维素法。近来,有人利用微量琼脂法培养人类T细胞克隆。作者则用此法培养人类骨髓红细胞系先駆细胞。先分离骨髓中单个核细胞,取30×10~4细胞混入1ml含20％胎牛血清,0.3％琼脂的