蛛网膜下腔出血后鼠脑底动脉内皮素-1能神经纤维的表达变化

本文旨在探讨大鼠蛛网下腔出血(SAH)诱发脑血管痉挛时脑底动脉内皮素-1(endothelin-1,ET-1)能神经纤维的表达变化及其诱发脑血管痉挛的作用。大鼠随机分为正常组、SAH组(3d、14d)。SAH组大鼠取股动脉自体血注入蛛网膜下腔,应用免疫组织化学ABC法,观察正常组、SAH组大鼠脑底动脉ET-1能神经纤维的表达。结果显示正常组大鼠脑底动脉可见棕褐色,细线状ET-1能免疫反应阳性纤维。SAH后3d组大鼠脑底动脉与正常组大鼠脑底动脉比较ET-1能神经纤维密度明显增多,统计学检验(P<0.05);而SAH14d组大鼠脑底动脉ET-1能阳性神经纤维密度与正常组比较无明显变化。以上结果提示脑底动脉ET-1能神经纤维在蛛网膜下腔出血诱发脑血管痉挛的病理生理过程中可能发挥重要的作用。     

内皮素受体与蛛网膜下腔出血

蛛网膜下腔出血的主要并发症是脑血管痉挛,脑血管痉挛可引起颅内压升高、脑血流降低和脑灌注 压降低,甚至死亡。其发生机制可能与内皮素、内皮衍生收缩因子、内皮衍生舒张因子和一氧化氮等因子有关。本 文讨论了实验性蛛网膜下腔出血动物模型的制作方法,内皮素受体在蛛网膜下腔出血诱发脑血管痉挛中的作用。     

内皮素在蛛网膜下腔出血诱发脑血管痉挛中的作用

目的：探讨实验动物蛛网膜下腔出血诱发脑血管痉挛时内皮素-1(Endothelin—1，ET—1)基因在大鼠脑底动脉的表达变化及其诱发脑血管痉挛中的作用。方法：56只Wistar大鼠随机分为正常组、蛛网膜下腔出血组(2、3、7、14d)、生理盐水组和假手术组，应用逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)，以B—actin为内参照基因，分别检测各组实验动物脑基底动脉ET—1 mRNA的表达变化。结果：蛛网膜下腔出血组，在出血2d、3d组实验动物脑基底动脉ET—1 mRNA表达较正常组明显增高，出血后7d组仍增高，14d组趋于正常。结论：ET-1参与了蛛网膜下腔出血诱发脑血管痉挛的病理生理过程，提示ET-1在蛛网膜下腔出血诱发脑血管痉挛中起着重要的作用。     

丁香酚减轻蛛网膜下腔出血大鼠脑血管痉挛

目的观察丁香酚对蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)大鼠脑血管痉挛(cerebral vasospasm,CVS)的治疗作用。方法血管内插线法建立大鼠SAH模型后,立即吸入丁香酚,每天3次,共7天。测量各组基底动脉(basilar artery,BA)的直径和管壁厚度,ELISA方法测量各组BA内MPO和MDA含量,免疫印迹法检测BA的p-p53、caspase-3、NF-κB和TNF-α的表达。结果丁香酚可增加蛛网膜下腔出血大鼠BA直径并减小管壁厚度,显著减少BA内MPO和MDA含量,下调p-p53、caspase-3、NF-κB和TNF-α表达水平。结论丁香酚减轻脑血管痉挛可能与抑制BA内的细胞凋亡和炎症反应相关。     

Mitofusin-2在大鼠蛛网膜下腔出血后大脑动脉内表达的变化

目的 研究Mitofusin-2(Mfn2)在大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）后大脑动脉中表达的变化,寻找Mfn2基因与脑血管痉挛(CVS)之间的关系。 方法 蛛网膜下腔出血模型由刺破颈内动脉的颅内动脉分叉处诱导。146只SD大鼠被随机分为6组：假手术组（sham组）,SAH后24h、48h、72h、7d 和14d各组。计算动物死亡率,测定神经功能学评分及脑水含量。组织学检测观察形态学变化,采用Western blotting及RT-PCR 分别检测SAH后不同时间点的大鼠主要大脑动脉Mfn2蛋白及mRNA 水平的表达变化。 结果 围绕在基底动脉周围的血块随着时间逐渐消失,形态学观察显示SAH 24h组基底动脉出现严重的痉挛。SAH7d组的基底动脉中层无阳性的免疫组织化学阳性染色。Western blotting结果显示,Mfn2蛋白表达 sham组与SAH48h组和SAH72h组相比,均显著增加(P<0.05),SAH 7d出现显著性降低(P<0.05),SAH14d 恢复至 sham 和SAH24h 组水平。而mRNA 水平变化与蛋白水平变化相类似。Mfn2基因参与到SAH后血管的自我调节过程中,表达随着时间增加而增加,并在72h到达高峰,7d时显著下降,14d左右恢复至sham组水平。 结论 Mfn2在SAH后的早期以及迟发型脑血管痉挛中起重要作用,为揭示SAH后脑血管痉挛的机理提供实验依据。     

蛛网膜下腔出血后基底动脉细胞间粘附分子-1的表达

目的：探讨蛛网膜下腔出血（SAH）后迟发性脑血管痉挛的病理过程中细胞间粘附分子－1（ICAM－1）与其发生时相间的关系。方法：采用49只雄性SD大鼠，随机分为实验组和对照组，实验组按存活时间分为6组，采用经额钻孔、注血的方法制作SAH动物模型。切取基底动脉，分别行HE染色和ICAM－1免疫组化染色，进行体视学图像分析。结果：病理切片经图像分析，在SAH后1h和48h管腔面积显缩小（P＜0．001），48h后基底动脉壁发生明显病理形态学变化。SAH后3h血管内皮细胞ICAM－1表达逐渐增强，48h后达到高峰。结论：SAH后可引发急性脑血管痉挛和迟发性脑血管痉挛。ICAM－1参与的炎症反应在SAH后迟发性脑血管痉挛的形成和发展过程中发挥关键性作用。     

一氧化氮和内皮素在蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛发生机制中的作用

采用不开颅法造成实验性大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）模型，检测脑血流中一氧化氮（NO）和内皮素（ET－1）含量。结果发现，SAH后1h脑血流ET－1浓度升高（P＜0．001），NO浓度降低。并且在SAH后即刻开始，脑血流NO／ET－1比值下降（P＜0．001）L-精氨酸可增加脑血流NO含量，减少ET－1含量，使NO／ET－1比值降低幅度减小。结果表明，脑血流内皮舒张因子和内皮收缩因子之间的平衡紊乱是SAH后脑血管痉挛发生的机制之一。     

蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛平滑肌超微结构研究

采用盐酸和胶原酶消化动脉外膜的技术，对正常的脑动脉、蛛网膜下腔出血后痉挛的脑动脉及经前列腺素F2α(prostaglandin F2α，PGFZa)处理的脑动脉平滑肌细胞构筑进行研究。结果显示正常平滑肌细胞是梭形的，沿着血管长轴环行分布，细胞间通过突起相连，肌细胞外膜面通常是光滑的；痉挛的脑动脉和经PGF2α处理的脑动脉平滑肌外膜面均出现非常相似的膜皱折和卷曲，肌间隙增宽。透射电镜显示急性痉挛管壁病理变化轻微；迟发性痉挛出现明显病理性超微结构改变。实验结果提示急性脑血管痉挛是由平滑肌收缩引起，病理变化轻微；迟发性脑血管痉挛是血管持久收缩伴病理性超微结构改变。     

大鼠蛛网膜下腔出血脑微区血流量与血清一氧化氮变化

目的探讨蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后继发性脑缺血损害及其一氧化氮（ＮＯ）的作用。方法应用非开颅性方法建立大鼠ＳＡＨ模型,检测２４ｈ内脑微区血流量和颅内血清ＮＯ的动态改变,并测量基底动脉（ＢＡ）管径。结果ＳＡＨ后脑微区血流量迅速降低,１ｈ达最低值,２４ｈ内无明显恢复趋势（Ｐ＜ ０．０１）。ＳＡＨ后１ｈ血清ＮＯ开始减低,井持续２４ｈ（Ｐ＜０．０１）。ＢＡ管径于ＳＡＨ后明显缩小（Ｐ＜０．０１）。结论ＳＡＨ时脑灌注压降低、脑血管痉挛及微循环异常均可能与脑血流量降低有关。ＮＯ减少是脑血管 痉挛和微循环异常发生的重要因素之一。     

自发性蛛网膜下腔出血后症状性脑血管痉挛22例

症状性脑血管痉挛是蛛网膜下腔出血(SAH)病人致残致死的主要原因。其原因复杂，疗效一直不尽人意。为探索更佳的治疗方法，现对我院1999年5月至2003年5月收治的22例蛛网膜下腔出血引起的症状性脑血管痉挛病人治疗体会报告如下。     

癫痫大鼠海马和大脑皮质糖皮质激素受体变化的观察

为了探讨糖皮质激素受体（ＧＲ）与癫痫发病机制间的关系，本研究应用免疫细胞化学ＰＡＰ法显示马桑内酯致痫大鼠海马和大脑皮质内ＧＲ的变化，并用显微图像分析仪进行检测分析。结果显示：ＧＲ主要表达在海马回的锥体细胞层、齿状回颗粒细胞层及大脑皮质各层，特别是Ⅳ、Ⅴ层。ＧＲ免疫反应主要定位于细胞核内，胞浆内有较弱的免疫反应。图像分析及统计学处理表明：癫痫大鼠海马回、齿状回、大脑皮质含ＧＲ免疫反应阳性细胞数目、平均总面积、平均光密度均明显低于对照鼠，有极显著性差异。结果提示：ＧＲ的减少可能与癫痫的发病机制有密切关系     

氯胺酮对新生大鼠海马NMDA受体亚型mRNA表达的影响

本研究利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)观察了将氯胺酮给予生后早期大鼠后,海马组织中NMDA受体亚型mR-NA的表达变化。实验用生后7d的SD大鼠40只,随机分为2大组:给药后即刻组(PND7组)和给药后3周组(PND28组)。PND7组为腹腔注射不同剂量氯胺酮后24h内处死,PND28组用相同给药方法给药并在相同环境中饲养3周(即至生后28d)后处死。RT-PCR结果显示在PND7组,腹腔注射氯胺酮引起海马组织内NR2A,NR2B和NR2C亚型mRNA的表达上调,NR1受体亚型mRNA的表达无明显变化。在PND28组,氯胺酮注射引起NR1和NR2A亚型mRNA的表达水平增高,而NR2B和NR2C亚型mRNA的表达没有变化。氯胺酮的给药量和给药方式对上述受体亚型的表达变化没有明显影响。各受体亚型在不同发育阶段的海马组织中的表达水平也有一定的差异。本研究的结果提示氯胺酮对发育阶段大鼠脑内NMDA受体的表达具有上调作用,从而对大鼠神经系统的发育可能产生影响。     

缺氧大鼠肺内动脉壁FN及LN的改变

目的　利用大鼠常压缺氧模型 ,采用形态计量学方法 ,系统观察缺氧大鼠肺动脉壁FN及LN的改变 ,进一步探讨缺氧性肺血管组织重建的机制。　方法　利用常压缺氧舱建立大鼠缺氧模型 ,取肺分别进行免疫组织化学染色和电镜观察。　结果　缺氧后肺动脉壁上FN及LN均增加 ,这一变化在缺氧 7d时最明显 ,且FN增加的程度及含量远远高于LN。电镜观察显示 ,肺动脉中膜平滑肌细胞有由收缩表型转化为合成表型的倾向。　结论　肺动脉壁上FN及LN增加 ,不仅可以增加血管紧张性及血管壁厚度 ,同时也为诱导中膜平滑肌细胞表型转换及增生提供了条件     

自发性脑卒中高血压大鼠大脑中动脉超微结构的病理改变

目的：观察双肾双夹型肾血管怀高血压大鼠（ＲＨＲ）大脑中动脉超微结构及平滑肌层面积与中膜总面积之比的动态变化。方法;双肾双夹法建立ＲＨＲ模型,分别于７ｄ、３０ｄ、６０ｄ处死动物、透射电镜观察,并用体视学技术进行定量分析。结果：（１）透射电镜观察,高血压组７ｄ内弹务膜略增厚,中膜平滑肌细胞略有肥大,无明显结构性破坏３０ｄ内皮细胞有伪足伸入内弹力膜,中膜平滑 支数稍增多,排列较紊乱,胞体增大,细胞间隙增     

雌性大鼠心内神经节中雌激素受体及其mRNA的表达

目的 在雌激素受体蛋白及ERmRNA水平提供雌激素对心内神经节中神经元作用的形态学依据。方法 采用免疫组织化学及原位杂交技术。结果 在心内神经节部分神经元中，雌激素受体免疫反应及其mRNA原位杂交反应阳性。雌激素受体免疫反应沉淀物呈棕黄色，定位于胞核，雌激素受体mRNA免疫反应沉淀物呈棕黄色，定位于胞浆。结论 大鼠心内神经节中，部分神经元能合成雌激素受体蛋白，说明ER阳性神经元可以为雌激素提供结合位点，因此，这些神经元可能受到雌激素的影响。     

同源盒基因Lhx3和Lhx4在成年大鼠缺血性脑损伤后的表达变化

目的 揭示发育基因Lhx3和Lhx4参与成年动物中枢神经损伤修复的过程。方法 线栓法制作局灶性脑缺血模型,阻断成年大鼠右侧大脑中动脉,缺血2h后再灌注,分别于损伤再灌注后3d、7d、14d和2ld取左右侧大脑皮层组织,采用RT-PcR结合HPLC测定方法,相对定量分析上述不同损伤时相同源盒基因Lhx3和Lhx4在损伤侧与对照侧皮层运动神经元mRNA表达量的改变。结果 正常成年大鼠大脑皮层运动神经元中,从Lhx3和Lhx4基因均维持一定的表达水平,在局灶性脑缺血再灌注3d、7d、14d后,大脑皮层运动神经元损伤侧的从Lhx3和Lhx4基因表达均有明显改变,但变化规律不同。其中Lhx3在损伤后mRNA表达量较自身对照侧明显降低,而Lhx4的mRNA表达量较自身对照侧明显升高,该结果与成年大鼠坐骨神经夹伤后,脊髓中Lhx3和Lhx4的基因表达变化规律基本一致。结论 LIM同源盒基因家族中的Lhx3和Lhx4基因不仅在神经元发育过程中起重要调控作用,而且可能参与成年动物中枢神经损伤的修复过程。     

高脂血症大鼠大脑中动脉神经肽Y能神经纤维的变化

观察高脂血症大鼠不同时期大脑中动脉神经肽Ｙ能神经纤维的变化。方法ＡＢＣ免疫组人方法；结果（１）定性观察；对照组各时期神经肽育神经纤维多呈网状攀附于血管周围，纤维较稀疏，并有明显的串珠状膨体；高脂组纤维亦呈网状分布于血管周围，较稠密，膨体清晰可见，这种变化见一实验组各时期。     

毒蕈碱M2受体在脑震荡大鼠脑内的表达变化

为了探讨脑震荡(brain concussion,BC)后认知功能障碍的大鼠中枢毒蕈碱M2受体的表达变化,本实验应用金属单摆式机械打击装置复制单纯性脑震荡大鼠模型,采用免疫组织化学结合图像分析的方法,观察BC后大脑前额叶皮质(PFC)、海马CA1-CA4区、丘脑、尾壳核(CPU)、Broca斜角带垂直支(VDB)和内侧隔核(MSN)区M2受体蛋白的表达情况。结果显示:在损伤后M2受体蛋白的表达在海马CA1-CA4区出现轻微下降(P>0.05),在PFC、VDB、CPU和MSN区即刻呈轻度上升,随后又下降,但与正常组相比无显著性差异(P>0.05);在伤后1、8、24d组大鼠丘脑M2受体的表达呈明显下降,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05)。以上结果提示M2受体的表达在丘脑出现明显下调的改变可能与BC认知功能的改变有关。     

前脑缺血再灌流后大鼠海马 NMDA受体亚单位NR1蛋白的表达变化

目的　观察大鼠前脑缺血再灌流后海马各区域NMDA受体亚单位NR1表达的变化和差异 ,探讨NR1在缺血性脑损伤中的作用。　方法　免疫组织化学和图像处理技术。　结果　 1 在前脑缺血再灌流后早期 ,海马各区域NR1的表达水平显著下降 (P <0 0 5 )。CA1区 ,下降趋势持续存在且不可逆 ,直至再灌流后第 7d ,NR1在该区域的染色强度降至对照组的 17% (P <0 0 5 )。CA3区及齿状回 ,NR1的表达下降是可逆的 ,再灌流后 72h ,齿状回的表达恢复正常 ,再灌后第 7d ,CA3区的表达也恢复到对照组的 96 % ,两组间染色强度无显著差异。 2 在迟发性神经元坏死出现前的缺血再灌流的早期 ,NR1在CA1区、CA3区及齿状回表达下降的幅度不一致 ,再灌后 6h以前 ,CA1区的下降幅度明显小于CA3区及齿状回 (P <0 0 5 ) ,再灌后 12h ,CA1区的下降幅度仍低于CA3区 (P <0 0 5 )。结论　短暂性前脑缺血后 ,NR1在海马CA1区、CA3区及齿状回表达下降的幅度和可逆性存在显著差异 ,这种差异可能是造成CA1区缺血敏感性的重要原因。