土槿甲酸对MGC80-3细胞抗肿瘤活性的研究

目的研究土槿甲酸(PAA)对人胃癌细胞生长、抑制效应,探讨其抗癌作用机制.方法用不同浓度的PAA加入体外培养的人胃癌细胞(MGC80-3)中,观察加药后细胞生长和有丝分裂指数(MI)的变化;Hoechst33342/PI荧光双染色方法检测细胞凋亡.结果PAA明显抑制MGC80-3细胞生长;MI于加药后24h较对照组明显降低;凋亡细胞比例在用药后24h达80.4%.结论PAA可有效抑制人胃癌细胞的增殖.     

鲨鱼软骨制剂对人红白血病细胞增殖抑制作用的研究

目的 :研究鲨鱼软骨制剂 ( SCP)对人红白血病 ( K562 )细胞生长、抑制效应 ,探讨其抗癌作用机制。方法 :用不同浓度的 SCP加入体外培养的 K562细胞中 ,观察加药后细胞生长和有丝分裂指数 ( MI)的变化 ;用 MTT法检测其细胞毒作用 ;Hoechst3 3 3 4 2 /PI荧光双染色方法检测细胞凋亡。结果 :SCP明显抑制 K562细胞生长 ;IC5 0 值为 0 .7mg/m L ;MI于加药后 2 4h较对照组明显降低 ;凋亡细胞比例在用药后 48h达 44.55%。结论 :SCP可有效抑制人红白血病细胞的增殖。     

鲨鱼软骨制剂抑癌作用与诱发胃癌细胞凋亡

 目的　研究鲨鱼软骨制剂 (SCP)对人胃癌细胞 (MGC80 - 3)生物学行为的影响并探讨其抗癌作用机制。方法　用不同浓度的 SCP加入体外培养的 MGC80 - 3细胞系中 ,用 MTT比色法 ,荧光显微镜 ,透射电子显微镜技术和琼脂糖凝胶电泳方法 ,观察 MGC80 - 3细胞形态学和生化方面的改变。结果　 SCP明显抑制 MGC80 - 3细胞生长 ,IC50 值为 1 mg/ ml;荧光显微镜下可见MGC80 - 3细胞在形态学上出现典型的核固缩、破裂等凋亡细胞的形态学改变 ;透射电镜下可见细胞核染色质凝集呈帽状分布于核膜下 ,凋亡细胞附近可见多个高电子密度的凋亡小体 ;琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“梯状”(DNA ladder)带。结论　SCP诱导人胃癌细胞凋亡是其抑制肿瘤作用机制的重要方面之一。     

鲨鱼软骨制剂对人骨癌细胞增殖抑制作用的研究

目的 研究ＳＣＰ对人胃癌细胞生长、抑制和损伤效应，探讨其抗癌作用机制。方法用不同浓度的ＳＣＰ加入体外培养的入胃癌细胞（ＭＧＣ８０－３）中，观察加药后细胞生长和有丝分裂指数（ＭＩ）的变化，用ＭＴＴ法检测其细胞增殖抑制作用，用吖啶橙荧光染色方法观察细胞ＤＮＡ和ＲＮＡ含量的变化，用透射电镜观察细胞的损伤效应。结果 ＳＣＰ明显抑制ＭＧＣ８０－３细胞生长，ＩＣ５０值为１ｍｇ／ｍｌ，ＭＩ于加药后１２ｈ较对照组     

姜黄素诱导人胃癌MGC80-3细胞凋亡研究

八十年代以来已陆续发现姜黄素具有抗炎、抗氧化、抗凝和降血脂作用,并发现姜黄素还具有显著的防癌和抑癌作用.近年有实验证据表明姜黄素能诱导多种癌细胞凋亡.但姜黄素作为一种可食用的食品添加剂,对胃癌细胞是否有诱导凋亡作用尚无报道.我们的前期工作曾发现姜黄素可显著抑制人胃腺癌细胞MGC 80-3生长,本文以该细胞株为对象,研究和探讨姜黄素诱导胃癌细胞凋亡的效应及可能机制.以苔酚蓝拒染计数法、Giemsa染色法和Hoechst 33258染色法分别观察姜黄素对MGC80-3细胞存活及细胞形态的影响;DNA琼脂糖电泳法观察姜黄素诱导癌细胞DNA片断化作用;并以DNA-Hoechst 33258染色荧光测定法定量检测断裂及未断裂DNA含量;流式细胞仪检测术检测经姜黄素处理后的细胞周期变化.结果显示经5,10及20μmol/L终浓     

吡格列酮对胃癌细胞生长的影响及其机制

 目的研究过氧化物酶体激活物活化受体γ(PPARγ)在人胃癌MGC803中的表达及其配体吡格列酮(PGZ)对胃癌细胞生长的影响。方法用不同浓度的吡格列酮处理人胃癌MGC803细胞,采用RT-PCR法检测MGC803中PPARγ的表达变化;MTT法观察细胞增殖抑制作用;Hoechst33342/PI双荧光活细胞染色法和DNA凝胶电泳技术分析细胞凋亡。结果MGC803中存在PPARγ表达;PGZ能显著抑制MGC803生长(P<0.05),IC50值为9.01×10-6μmol/L,且作用呈剂量依赖性;高浓度PGZ能明显诱导凋亡产生;PGZ作用MGC803细胞后PPARγ表达呈剂量依赖性上调趋势(P<0.05)。结论吡格列酮依赖激活PPARγ能在体外抑制肿瘤细胞生长并诱导其凋亡,提示PPARγ可能是胃癌治疗的一个新的分子靶点。     

Adinbitor对人胃癌MGC803细胞增殖及凋亡的作用

目的探讨Adinbitor对人胃癌MGC803细胞生长及凋亡的作用。方法应用Adinbitor作用于体外培养的人胃癌MGC803细胞,采用MTT比色法分析其对MGC803细胞生长的影响;采用相差显微镜、苏木精-伊红（HE）和Hoechst染色观察不同浓度的Adinbitor诱导MGC803细胞凋亡的形态变化。结果Adinbitor可呈剂量依赖性方式抑制MGC803细胞的增殖,其抑制MGC803细胞增殖的ID50为3.52μmol/L。Adinbito诱导的MGC803细胞凋亡实验,显示出细胞凋亡的典型的形态学特征,如胞间连丝消失,细胞皱缩成团,胞内出现空泡等现象,而且随Adinbitor浓度的增加,凋亡现象越明显。结论Adinbitor对人胃癌MGC803细胞生长具有抑制作用,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

逆转录制备cDNA探针对人胃癌MGC80—3细胞系多种癌基因转录的同步检测

本文报道利用人胃癌MGC80-3细胞系总polyA ~+RNA,逆转录制备cDNA探针,并与多种克隆癌基因的质粒DNA斑点杂交,同步检测倍增生长的人胃癌MGC 80-3细胞系不同原癌基因转录本的丰度。结果发现,V-sis、c-erbB-2、V-abl、H-ras、K-ras和c-myc质粒DNA的斑点出现阳性杂交信号,其中V-sis、c-erbB-2的斑点信号最强。说明人胃癌MGC80-3细胞系中,多种原癌基因协同地进行表达。     

维甲酸对胃癌细胞生长抑制及凋亡的诱导作用

目的:研究9-顺-维甲酸(9-cis-RA)对人胃低分化黏液腺癌细胞(MGC80-3)的作用。方法:MTT比色法观察9-cis-RA对MGC80-3细胞株的生长抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态变化,Hoechst33342/PI双荧光染色和DNA凝胶电泳技术分析细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果:9-cis-RA可抑制MGC80-3细胞生长,半数抑制浓度(IC50)为8·07×10-6mol/L;显微镜观察可见细胞凋亡特征性改变;10-5mol/L浓度的9-cis-RA药物作用后96h可明显诱导MGC80-3细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测到DNA梯带;流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型亚二倍体凋亡小峰,G0/G1期细胞百分率明显升高,由对照组的(61·5±2·2)%增加到(74·3±4·7)%,F=149·795,P=0·000;同时处于S期的细胞数减少,由对照组的(26·3±1·3)%减少到(17·2±1·4)%,F=143·936,P=0·000。细胞周期出现G1期阻滞。结论:9-cis-RA对MGC80-3细胞有明显的生长抑制和诱导凋亡作用。     

光敏化姜黄素诱导人胃癌MGC80-3细胞调亡研究

姜黄素(curcumin)是从中药姜黄中提取的酚性化合物,广泛用于食品添加剂.近年来已发现姜黄素具有多种医疗作用以及显著的防癌和抑癌作用,并发现可诱导多种癌细胞凋亡.我们在研究姜黄素诱导人胃腺癌MGC 80-3细胞凋亡时,偶然发现姜黄索在光照下(光敏化姜黄素)也可诱导细胞凋亡.本文以MGC 80-3细胞为对象,研究光敏化姜黄素诱导细胞调亡的效应,以探讨姜黄素光敏化反应在光动力学治疗肿瘤上的应用前景.以台盼蓝拒染计数法、Giemsa染色法和Hoechst 33258染色法分别观察姜黄素 光照对MGC 80-3细胞存活及细胞形态的影响;DNA琼脂糖电泳法观察姜黄素 光照诱导癌细胞DNA片断化作用;并以DNA Hoechst33258染色荧光测定法定量检测断裂及未断裂DNA含量;流式细胞仪检测术检测经姜黄素 光照处理后的细胞周期变     

核黄素光化学反应诱导人胃癌细胞凋亡

背景与目的：核黄素在光照下具有抑癌活性。并且被认为与核黄素光化学反应产生的活性氧自由基有关。本研究探讨核黄素在光照处理下,体外诱导人胃癌MGC80-3细胞凋亡效应。方法：以台盼蓝拒染法计数细胞存活率,Giemas染色观察形态改变,DNA琼脂糖电泳分析DNA片段化,测定断裂及未断裂DNA含量定量凋亡效率。流式细胞术及Western blot分别检测细胞周期及凋亡相关基因表达变化。结果：细胞存活率依浓度及处理时间而下降;光照核黄素处理24h,细胞呈典型的凋亡形态;以10,10,30和40μmol/L的核黄素光照处理MGC80-3细胞,DNA电泳显示20μmol/L以上处理组均出现典型的凋亡DNA梯形带;且相应凋亡效率分别为35.4%,54.1%,70.6%和86.8%。与核黄素的浓度呈正相关;经10及20μmol/L核黄素光照处理后细胞周期主要阻滞于G2/M期,Western blot结果显示凋亡相关基因p53,c-myc及Bax表达上调,而Bcl-2表达下调。结论：核黄素光化学反应抑制胃癌MGC80-3细胞生长的作用是以诱导细胞凋亡为主要途径。并与诱导细胞阻滞于G2/M期有关。     

罗格列酮对MGC803细胞小鼠肾囊膜下移植瘤生长的影响

目的 探讨过氧化酶体增生物激活受体γ(PPARγ)配体罗格列酮对小鼠体内人类胃癌MGC803细胞移植瘤生长的影响.方法 建立人类胃癌MGC803细胞小鼠肾囊膜下移植瘤模型,通过解剖显微镜和HE染色观察50 mg/kg的罗格列酮连续灌胃5 d作用于荷瘤小鼠后对移植瘤生长的抑制作用.结果 50 mg/kg的罗格列酮能明显抑N4,鼠肾囊膜下移植瘤MGC803细胞增生、诱导肿瘤细胞凋亡而抑制移植瘤的生长,抑瘤率达62.9%.结论 PPARγ配体罗格列酮能抑制小鼠体内肾囊膜下MGC803细胞移植瘤生长.     

活性氧在EGCG诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用

背景与目的:表没食子儿茶素没食子酸(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)抗肿瘤作用的机制目前尚不十分清楚,本研究旨在探讨活性氧(reactive oxygen species,ROS)在EGCG诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用.方法:采用噻唑蓝比色法(MTT)检测MGC803细胞的存活率;采用荧光显微镜观察MGC803细胞的凋亡率;流式细胞术检测MGC803细胞凋亡率及细胞内活性氧水平.结果:EGCG可诱导MGC803细胞凋亡,细胞内活性氧水平升高.抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cystein,NAC)干预后,EGCG抑制MGC803细胞生长的作用明显减弱,细胞凋亡率下降,NAC抑制了细胞内活性氧水平的升高.结论:EGCG可诱导MGC803细胞凋亡,该作用可被NAC显著抑制,提示EGCG诱导MGC803细胞凋亡与细胞内活性氧产生增加有关.     

p38MAPK在EGCG诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用

目的：探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen—activaced protein kinase，v38MAPK）在表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）诱导人胃癌MGC803细胞凋亡中的作用。方法：采用MTT法检测MGC803细胞的存活率，荧光显微镜观察和碘化丙啶染色FCM检测MGC803细胞凋亡率，Western印迹法检测MGC803细胞中p38MAPK蛋白及磷酸化p38MAPK蛋白的表达。结果：EGCG可诱导MGC803细胞凋亡，且p38MAPK被激活。用p38MAPK特异性抑制剂SB203580干预后，EGCG抑制MGC803细胞生长的作用明显减弱，细胞凋亡率下降，p38MAPK活性显著下降。结论：EGCG可诱导MGC803细胞凋亡，该作用可被SB203580显著抑制，提示EGCG可能通过激活D38MAPK使部分MGCR03细胞凋亡。     

大葱油对体内外人胃癌细胞生长的抑制作用

目的观察大葱葱白提取物大葱油对人胃癌MGC803细胞的体内外生长抑制作用。方法用MTT,裸鼠移植肿瘤重量测定,DNA指数和平均DNA质量及TUNEL法,观察大葱油对离体培养的MGC803胃癌细胞系和裸鼠皮下移植瘤生长的影响。结果大葱油24h、48h、72h的IC50分别为52μg/ml,38μg/ml,20μg/ml。肿瘤生长抑制率为36.07%。实验组肿瘤DNA指数和平均DNA质量下降。TUNEL测定显示,实验组细胞凋亡率为(15.23±1.82)%,对照组为(2.77±0.62)%,差异有显著性。结论大葱油对体内外人胃癌细胞的生长具有抑制作用,其机制可能与其抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡有关。     

大蒜素诱导人胃癌细胞M期阻滞的研究

目的探讨大蒜素对人胃癌细胞系MGC803和SGC7901细胞周期的影响及其作用机制。方法以台盼蓝拒染法检测人胃癌细胞系MGC803和SGC7901细胞的增殖抑制率;以透射电镜观察两种胃癌细胞的直接损伤改变;以流式细胞仪及瑞士姬姆萨染色光镜观察两种胃癌细胞周期的改变;以SP免疫组化及RTPCR方法检测两种胃癌细胞的p21WAF1和p16INK4基因及蛋白表达的变化。结果大蒜素可抑制MGC803细胞生长,24h药物半数抑制浓度(IC50)为6.4μg/ml;也可抑制SGC7901细胞的生长,24hIC50为7.3μg/ml。12μg/ml的大蒜素作用两种胃癌细胞24h后,细胞出现急性直接损伤,膜系统改变明显。以3μg/ml、6μg/ml、9μg/ml终浓度大蒜素分别作用于两种胃癌细胞系24h后,与对照组比较,G0和G1期细胞周期百分比(%)明显减少,而G2和M期明显增加(P<0.01);6μg/ml大蒜素作用培养两种胃癌细胞24h后,与对照组比较,细胞分裂指数明显增加,提示两种细胞系经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于M期。经大蒜素处理后,MGC803细胞的p21WAF1和p16INK4基因及蛋白表达均明显增加;SGC7901细胞的p21WAF1基因及蛋白表达明显增加。结论大蒜素可使MGC803及SGC7901两种细胞周期阻滞于M期;大蒜素的M期阻滞作用可能与其上调细胞的p21WAF1和p16INK4基因表达有关。     

ATM在人胃癌细胞系的表达及其在细胞DNA损伤中的作用

目的:研究DNA损伤剂对ATM基因缺陷和正常的胃癌细胞系的作用机制.方法:Western-blot方法检测6株胃癌细胞系ATM蛋白的表达情况,并用DNA损伤剂顺铂作用于ATM基因缺陷的MKN28细胞系和ATM基因正常的BGC823细胞系,采用Western-blot、DNAladder、Hoechest 33258 /PI双荧光染色等方法观察凋亡相关激酶的表达和细胞的应答反应.结果:Western-blot显示,ATM蛋白在胃癌细胞系MGC803、MKN28、MKN45、SGC7901的表达水平显著低于BGC823和AGS细胞系,BGC823细胞在CDDP作用后,ATM蛋白表达水平升高,磷酸化chk1和chk2活性24小时后增强,而Cdc25C表达减少;MKN28细胞中G2期检测点蛋白ATM、p-chk1、p-chk2表达较低,Cdc25C表达较高,但在CDDP作用前后无明显变化.MKN28细胞在DNA损伤剂作用后出现显著凋亡,而BGC823细胞在DNA损伤剂作用48小时后未见显著凋亡.结论:ATM在细胞周期的多个环节均有调控作用,特别是在细胞周期检测点和DNA损伤的修复中有重要的监视和启动作用.     

γ-生育三烯酚对人胃癌 SGC-7901细胞的抑制作用及机制

目的 探讨γ -生育三烯酚(γ -tocotrienol)对人胃癌细胞SGC-7901抑制作用.方法 采用离体细胞培养技术,利用细胞生长曲线,单细胞凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、透射电镜技术等方法,观察 γ-生育三烯酚对SGC-7901细胞生长抑制及其肿瘤细胞的损伤作用.结果 γ -生育三烯酚可明显抑制SGC-7901细胞增殖,抑制作用随作用浓度增加、作用时间延长而增强;并能引起人胃癌细胞株SGC-7901细胞DNA 分子的损伤以及细胞超微结构变化,如线粒体损伤和形成凋亡小体,且与γ-生育三烯酚作用的浓度存在一定的相关性.结论 γ -生育三烯酚对SGC-7901细胞生长有明显抑制作用,其抑制机制与参与DNA损伤、诱导细胞凋亡有关.     

9-顺式维甲酸诱导胃癌MGC803细胞周期阻滞和凋亡的作用机制

背景与目的:9-顺式维甲酸(9-cisretinoicacid,9-cisRA)对胃癌的抗癌活性及机制尚不清楚,本研究以MGC803为靶细胞观察9-cisRA对胃癌的作用。方法:采用RT-PCR法检测维甲类X受体α(recinoidXreceptor!,RXRα)、细胞周期蛋白CyclinD1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4mRNA表达,流式细胞术检测细胞周期,MTT实验检测9-cisRA作用MGC803细胞后生长抑制情况,Hoechst33342/PI双荧光染色和琼脂糖凝胶电泳检测凋亡,免疫细胞化学检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达。结果:0.1～10μmol/L9-cisRA作用MGC803细胞96h,能显著抑制细胞增殖。10μmol/L9-cisRA分别作用48、72和96h,G1期细胞随着作用时间的延长而增加,呈明显的G1期阻滞。作用72h后,细胞出现核染色质凝集、DNA片段化等凋亡特征;从作用48h开始,Bcl-2表达即显著下降。在MGC803细胞中RXRα表达较弱,经10μmol/L9-cisRA作用48h其表达水平显著增加(P<0.01);作用96h,细胞中CyclinD1和CDK4表达显著降低(P<0.01)。结论:9-cisRA能明显诱导MGC803细胞周期G1期阻滞和凋亡,该作用可能与其下调细胞周期因子CyclinD1和CDK4表达有关。     

莪术醇诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡与细胞内活性氧增加的实验研究

目的:研究莪术醇抑制BGC-823人胃癌细胞增殖、影响细胞凋亡以及细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平变化等生物效应.方法:用MTT法、AO/EB双荧光染色及荧光显微镜、FITC-Annexin V与PI双染法、流式细胞术检测观察各种生物及形态指标.结果:不同浓度莪术醇在不同时间作用BGC-823,可抑制细胞增殖,并呈浓度、时间依赖性;荧光显微镜观察,经莪术醇作用后,实验组细胞核呈固缩状或圆珠状,可见凋亡小体;人胃癌BGC-823细胞经过不同浓度的莪术醇作用后,凋亡细胞比例明显升高,与对照组比较,差异有显著性(P<0.05):不同浓度莪术醇作用人胃癌BGC-823细胞后,细胞内活性氧水平与莪术醇呈浓度依赖性升高,莪术醇作用24、48h后与对照组比较,有显著性差异(P<0.05).结论:莪术醇可抑制人胃癌BGC-823细胞增殖及诱导细胞凋亡.莪术醇诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡与ROS产生增加相关.