复方SZ滴眼液对晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用及其信号转导机制

目的： 探讨复方SZ滴眼液（Co-SZ）抑制H₂O₂诱导的晶状体上皮细胞（LEC）凋亡的作用及信号转导机制。为将Co-SZ作为防治白内障的有效药物提供实验依据。 方法： (1)将H₂O₂与Co-SZ和SD大鼠晶状体共同孵育后：TUNEL法检测LEC凋亡率。透射电镜观察LEC超微结构改变及凋亡形成。(2)H₂O₂与Co-SZ和体外培养的牛LEC共同孵育后,四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测不同浓度的Co-SZ抑制LEC凋亡率。流式细胞仪（FCM）检测LEC细胞核内DNA含量。荧光分光光度法检测LEC内游离Ca2+浓度。放射免疫分析法检测LEC内环化腺苷酸（cAMP）和环化鸟苷酸（cGMP）浓度。 结果： TUNEL法检测Co-SZ组LEC凋亡率显著低于H₂O₂组。Co-SZ组LEC超微结构变化也显著轻于H₂O₂组。MTT检测Co-SZ组细胞活性明显高于H₂O₂并具有剂量依赖关系。Co-SZ组LEC核内DNA含量增加。Co-SZ使LEC内游离Ca2+、cAMP降低、cGMP升高。结论：Co-SZ能有效抑制H₂O₂诱导的LEC发生的凋亡 。Co-SZ抑制LEC凋亡的机制可能是通过抑制LEC核内DNA降解，并通过抑制细胞内游离钙离子浓度升高、阻断Ca2+-钙调蛋白依赖性蛋白激酶途径和Ca2+-蛋白激酶C信号转导途径。     

半乳糖诱导大鼠晶状体上皮细胞凋亡与白内障形成的关系

目的研究半乳糖对大鼠晶状体上皮细胞凋亡的影响,并探讨细胞凋亡与白内障形成的关系。方法将半乳糖单侧眼球后注射W istar大鼠,裂隙灯下观察晶状体混浊情况,运用流式细胞仪检测各组晶状体上皮细胞C-MYC水平,用末端标记(Tunel)法检测细胞凋亡。结果半乳糖诱导第7天半数以上晶状体混浊度为Ⅱ期,至14 d时87%晶状体混浊度为Ⅳ~Ⅴ期,在第24天时100%晶状体混浊度Ⅳ~Ⅴ期;乳糖诱导第7天细胞凋亡率为5.6%~8.4%,从第7天开始凋亡细胞数逐渐增多,第14天时细胞凋亡率达30.2%~41.8%,第24天时镜下最多可观察到60%的凋亡细胞;晶状体上皮细胞C-MYC水平在半乳糖诱导第7天和14天均高于对照组(P<0.05),24 d接近正常水平。结论半乳糖诱导大鼠白内障形成过程中出现晶状体上皮细胞的凋亡,其机制可能与半乳糖诱导晶状体上皮细胞C-MYC高表达有关。     

D( + )半乳糖对小鼠卵巢功能影响的实验性研究

目的评价D（帕半乳糖代谢作用对性成熟小鼠卵巢功能的影响，并探讨利用半乳糖建立卵巢早衰动物模型的可行性。方法选择8-12w龄SPF级昆明小鼠90只，分为试验组和对照组，各45只，给予半乳糖食物丸和标准食物丸，在饲养的第30d、50d、70d，取血检测小鼠体内半乳糖、E2、FSH水平，并行促排卵检查卵巢功能，光镜观察卵巢组织形态学变化。结果在饲养第70d，与对照组相比，模型组卵巢明显缩小，重量显著降低（P〈0．001）；光镜下，对照组卵巢组织中可见各个阶段的卵泡及黄体，模型组卵巢组织可见大量初级卵泡，但成熟卵泡和黄体数量减少，卵巢血管增生，血管壁增厚，有玻璃样变；饲齐第50d和第70d，模型组血清FSH水平明显高于对照组（P值〈0．001），E：水平明显低于对照组（P值〈0．001）。促排卵后发现模型组小鼠输卵管中成熟卵母细胞数目减少，且明显低于对照组（P值〈0．001）。结论大量半乳糖代谢作用可导致性成熟小鼠卵巢功能提前衰竭，可建立卵巢早衰动物模型，为深入探讨POF患者病理生理提供研究之手段。     

水蛭对实验性脑出血后病理学改变的影响

目的：观察大鼠实验性脑出血经饲喂水蛭后的病理学改变。方法：将５６只ＳＤ大鼠分为水蛭大、中、小剂量治疗组（分别相当于生药９００、４５０、２２５ｍｇ·ｋｇ－１），实验对照７天、１４天及假手术组。利用脑立体定向仪在左尾状核处注入２５μｌ自体血制作脑出血模型。应用ＨＥ、ＶＧ、银染、胶质纤维酸性蛋白免疫组化染色及透射电镜观察脑组织的病理形态学改变并测量脑水含量。结果：药物治疗组脑水肿、脑组织坏死及神经元缺血变化减轻；新生毛细血管、格子细胞、星形细胞数目明显增加，胶质纤维生成增多。大剂量治疗组作用最明显。结论：水蛭对实验性鼠急性脑出血有明促进毛细血管和胶质细胞的增生的作用，从而可能有利于血肿的清除     

补体活化在D-氨基半乳糖/内毒素诱导的大鼠实验性肝坏死中的作用

目的：探讨补体系统活化在大鼠实验性肝坏死中的作用。方法：应用D-氨基半乳糖／内毒素（Ga1N／LPS）诱导大鼠肝坏死，用血清50％补体溶解法作为评价血清经典途径补体溶血活性而检测血清CH50、光镜下观察肝组织形态学改变和免疫组化法检测肝组织内补体C3沉积。结果：各组大鼠在用药后随着时间延长血清CH50呈不同程度下降，与对照组比较，单用Ga1N后第4小时血清CH50显著下降（71．43％，P〈0、05），2、6、8、10、12和14小时血清CH50降低更显著（P〈0．01），最低为30、5％；单用LPS后2小时的血清CH50下降至正常水平的69．31％（P〈0．01）；用药后4～6小时，血清CH50有回升趋势，但仍低于正常水平，差异显著（P〈0．05）；Ga1N／LPS组血清CH50的变化与Ga1N组相似，用药后2～14小时血清CH50下降均非常显著（P〈0.01）；应用Ga1N／LPS后2～4小时的血清CH50与LPS组比较差异不显著（P〉0．05），但在用药后6～14小时血清的CH50在两组间差异非常显著（P〈0．01）。联合注射Ga1N／LPS后可见肝组织呈亚大块坏死，并观察到C3沉积于Kupffer细胞、肝细胞膜及坏死区；单用Ga1N组可见肝组织损伤轻微，并观察到有单核细胞浸润、肝细胞气球样变及灶性坏死，但未见C3在肝内沉积；单用LPS组的肝组织形态学改变与Ga1N组类似，C3沉积在内皮细胞和Kupffer细胞。结论：血清补体活化和肝内局部补体活化在Ga1N／LPS大鼠急性肝坏死中起重要作用。外源性LPS可引起大鼠血清补体系统经典途径的活化，但其所致的肝损伤可能与肝组织中补体C3的局部沉积有关。Ga1N所致肝损伤可能与血清补体活化无明显关系。     

半乳糖对小鼠胚胎发育的影响

目的研究半乳糖对妊娠小鼠胎盘组织脂质过氧化和抗氧化酶的影响，探讨半乳糖对小鼠胚胎发育的影响及其机理。方法将75只妊娠小鼠随机分为4组，即半乳糖低、中、高浓度组（20％、35％和50％）和正常对照组，分别从妊娠第1d开始喂不同浓度半乳糖（20％、35％、50％）及正常食物，观察妊娠结局，记录总胎鼠数、活胎数、吸收胎数和死胎数。测定35％半乳糖组孕鼠胎盘组织中超氧化物歧化酶（SOD）的活性及脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量。采用放免法（RIA）测定35％半乳糖组孕鼠及对照组孕d5、d9、d13和d15血清孕酮（P）和雌二醇（E2）水平。结果（1）35％半乳糖可使妊娠小鼠血清孕酮和雌二醇水平较对照组显著下降（P〈0．05）（2）35％半乳糖使妊娠小鼠胎盘组织中SOD活性较对照组显著降低，MDA含量较对照组显著升高（P〈0．01）（3）随着半乳糖浓度增高，妊娠小鼠活胎率明显下降，吸收胎率和死胎率明显升高（P〈0.05）。结论半乳糖致妊娠小鼠胎盘组织中抗氧化能力下降，氧化水平增强，破坏胎盘的抗氧化系统的平衡状态，造成胎盘组织氧化损伤，使发育中的胚胎失去血液供应和营养，最终导致胚胎发育受阻，孕体被排出或吸收。     

内毒素对实验性急性肝功能不全的作用

本文对大肠杆菌内毒素在半乳糖胺引起急性肝功能不全中的作用进行了研究。实验结果表明,内毒素加重半乳糖胺所致的肝细胞坏死,使大鼠血浆尿素氮、胆红素水平升高,凝血酶原时间延长,嗜睡时间提前与昏迷加重。经血浆、脑匀浆游离氨基酸分析提示,内毒素可使脑组织牛磺酸水平增高。上述结果表明,内毒素血症是诱发急性肝功能不全发生发展的重要因素。     

超抗原SEB和D—氨基半乳糖对小鼠肝细胞的作用观察

用超抗原葡萄球菌Ｂ型肠毒素（ＳＥＢ）、Ｄ－氨基半乳糖（Ｄ－ＧａｌＮ）及两者合用腹腔注射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于２、６、１２、２４ｈ取肝脏和血标本，从形态学和生化指标来研究肝细胞的死亡模式；同时还检测了小鼠２４ｈ死亡率。结果发现单用ＳＥＢ可诱导肝细胞凋亡，其机制可能与ＴＮＦ、ＩＦＮ－γ等细胞因子的产生和作用有关。单用Ｄ－ＧａｌＮ可同时引起肝细胞凋亡和变性，ＳＥＢ和Ｄ－ＧａｌＮ合用２、６ｈ见肝细胞凋亡，１２ｈ后以肝细胞坏死为主，小鼠２４ｈ死亡率达５０％。因而，推测凋亡与坏死间存在一定的联系，在急性肝坏死的发病机制中大量肝细胞凋亡可能是坏死的前奏     

复方SZ滴眼液抑制晶状体上皮细胞凋亡及其信号转导机制的实验研究

目的：探讨复方SZ滴眼液（Co-SZ）抑制H202诱导的晶状体上皮细胞（LEC）凋亡的作用及信号转导机制。为将Co-SZ作为防治白内障的有效药物提供科学的实验依据。方法：1、将H202与Co-SZ和SD大鼠晶状体共同孵育后：（1）TUNEL法检测LEC凋亡率。（2）透射电镜观察LEC凋亡形成。2、H2O2与Co-SZ和体外培养的牛LEC共同孵育后：（1）四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测不同浓度的Co-SZ抑制LEC活性的作用。（2）流式细胞仪（FCM）检测LEC细胞核内DNA含量。（3）荧光分光光度法检测LEC内游离Ca^2＋浓度。（4）放射免疫分析法检测LEC内环化腺苷酸（cAMP）和环化鸟苷酸（cGMP）浓度。     

肝毒清颗粒对大鼠实验性肝纤维化的防治作用

目的 :观察肝毒清颗粒的抗纤维化作用。方法 :将Wistar雄性大鼠随机分成 6组 ,即正常对照组、模型组、肝毒清大、中、小剂量组和乙肝宁阳性组 ,采用四氯化碳诱导肝纤维化模型。于造模第 2个月始给予治疗药物。实验持续 3月后将大鼠处死取血作肝功检查及取肝组织做病理检查。结果 :肝毒清能降低AST ,升高TP、ALB ,与模型组比较 (P <0 .0 5 ) ;减轻肝脂肪变性、减少纤维组织增生、促进肝细胞再生。结论 :肝毒清对大鼠肝纤维化有明显防治作用     

D-半乳糖致原代培养神经元损伤模型的研究

目的:建立D-半乳糖致原代培养神经元损伤模型,为筛选益智药物提供药效学研究方法。方法:在原代培养神经元的第6d,加入50mmol/LD-半乳糖作用72h,倒置显微镜下观察神经元的生长发育形态,MTT法在酶联免疫检测仪上检测神经元代谢率,PI染色在流式细胞仪上检测神经元凋亡率,HE染色观察神经元形态、形态计量神经突起密度,RT-PCR检测醛糖还原酶信使RNA(AR-mRNA)含量。比较正常对照神经元和受D-gal攻击神经元之间的差别。结果:受D-半乳糖攻击神经元的生长发育显著迟缓;代谢率从0.762±0.030(n=33)降低到0.543±0.064(n=11),P<0.01;凋亡率从0.060±0.029(n=19)增高到0.356±0.215(n=19),P<0.01;出现变性坏死的形态变化,神经突起密度从0.557±0.042(n=10)降低到0.468±0.033(n=10),P<0.01;无AR-mRNA的表达。结论:用D-半乳糖建立的原代培养神经元损伤模型稳定、观察指标敏感,可用于老年性痴呆等神经系统疾病的研究。     

Antioxidant effects on the intracerebroventricular galactose damage in rats

We investigated the effects of the intracerebroventricular infusion of galactose and the influence of pretreatment with antioxidants on oxidative stress parameters and acethylcholinesterase (AChE) activity in the brain of 60-day-old Wistar rats (6 per group). The animals were divided into naïve group (did not undergo surgery); procedure group (only underwent surgery); sham group (underwent surgery and received 5?μL saline) and galactose group (received 5?μL of galactose solution (5.0?mM) by intracerebroventricular injection), and were killed by decapitation after 1?h. Other groups were pretreated daily for 1 week with saline (sham and galactose groups) or antioxidants, α-tocopherol (40?mg/kg) plus ascorbic acid (100?mg/kg, i.p.) (antioxidants and galactose?+?antioxidants groups). Twelve hours after the last antioxidants injection, animals received an intracerebroventricular infusion of 5?μL of galactose solution (galactose and galactose?+?antioxidants groups) or saline (sham and antioxidants groups) and were sacrificed 1?h later. Galactose elevated thiobarbituric acid reactive substances (TBA-RS), protein carbonyl content and glutathione peroxidase (GSH-Px) activity and decreased total sulfhydryl content and catalase (CAT) activity in the cerebral cortex. In the hippocampus, galactose enhanced TBA-RS, decreased total sulfhydryl content and increased AChE activity, while in the cerebellum it decreased total sulfhydryl content and increased CAT and superoxide dismutase (SOD) activities. Pretreatment with antioxidants prevented the majority of these alterations, indicating the participation of free radicals in these effects. Thus, intracerebroventricular galactose infusion impairs redox homeostasis in the brain; the administration of antioxidants should be considered as an adjuvant therapy to specific diets in galactosemia.     

杀菌/通透性增强蛋白对腹腔感染脓毒症大鼠的治疗作用

目的：探讨杀菌／通透性增强蛋白（ＢＰＩ）对腹腔感染脓毒症大鼠的治疗作用及其机制。方法：腹腔感染脓毒症模型采用盲肠结扎穿孔法,分别在盲肠结扎穿孔后即刻和１２ｈ腹腔内注射ＢＰＩ各２．５ｍｇ／ｋｇ或等容量生理盐水,血浆内毒素采用鲎试验显色定量测定法。结果：９１）ＢＰＩ治疗组动物存活时间明显长于生理盐水组;（２）ＢＰＩ治疗组动物平均动脉压,左室收缩压,心室等容收缩压,左室压力最大上升和下降速率等虽有一定下     

鹿茸水提物减轻顺铂所致的小鼠肾损伤

目的:探讨梅花鹿二杠茸和三岔茸水提物对顺铂(CDDP)所致小鼠肾损伤的影响。方法:采用灌胃给药方式,用顺铂(15 mg/kg)诱导小鼠肾损伤模型,测定小鼠肾脏指数(KI)、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,并对肾脏组织进行HE染色,观察肾脏病理学变化,研究梅花鹿二杠茸和三岔茸的水提物各剂量对小鼠肾损伤的影响。结果:与顺铂组相比,各剂量鹿茸水提物可显著降低CDDP诱导肾损伤小鼠SCr、BUN水平及肾脏MDA含量,提高SOD和GSH-Px的活性(P0.05);明显改善肾组织病理学形态,减轻CDDP对肾小管上皮细胞的损伤程度,且同等浓度下,与三岔茸相比,二杠茸水提物能更好地改善肾功能及减轻病理损伤。结论:鹿茸水提物减轻顺铂引起的小鼠肾损伤,其作用机制可能与鹿茸水提物增强小鼠肾脏组织的抗氧化能力有关。     

精胺对急性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的: 观察外源性精胺对急性脑缺血-再灌注损伤大鼠的作用,并初步探讨其可能机制。方法: 采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血(2 h)-再灌注(2 h)模型。SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组和低、中、高剂量精胺组。检测指标有神经病学评分、脑梗死面积、皮层脑组织HE染色、电镜超微结构观察、超氧化物歧化酶活性(SOD)及丙二醛(MDA)含量。结果: 与模型组相比,不同浓度精胺均能降低大鼠急性脑缺血-再灌注后神经功能学评分、梗死面积、缺血脑组织MDA含量,减轻脑组织形态学和超微结构损伤,增加缺血区SOD活性。结论: 外源性精胺对大鼠局灶性急性脑缺血-再灌注损伤有保护作用,其机制可能与清除氧自由基有关。     

雾化吸入米力农对烟雾吸入性损伤大鼠肺的保护作用

目的探讨米力农对大鼠烟雾吸入性损伤肺保护作用。方法雄性Sprague-Dawley大鼠32只,随机分为正常组（Ⅰ组）、生理盐水组（Ⅱ组）、低剂量米力农组（Ⅲ组）、高剂量米力农组（Ⅳ组）,每组8只。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组建立吸入性损伤模型,伤后30min开始分别给予雾化生理盐水、0.4mg/ml米力农、1mg/ml米力农,每次10min,间隔50min,共4次,Ⅰ组不予处理。最后一次雾化治疗结束后30min后,检测4组大鼠血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,以及肺组织匀浆中丙二醛（MDA）含量、髓过氧化物酶（MPO）和超氧化物歧化酶（SOD）活性,取左肺组织经做病理HE染色切片光镜观察。结果Ⅲ组以及Ⅳ组的IL-6、TNF-α、MDA、MPO均比Ⅱ组降低,IL-10、SOD活性增高;Ⅳ组相对于Ⅲ组IL-6、MDA、MPO降低,SOD活性增高（P〈0.05）。光镜下Ⅲ组和Ⅳ组较生理盐水组肺组织炎细胞浸润减少,肺水肿减轻。结论吸入性损伤后,早期雾化吸入米力农可以调节炎症/抗炎症以及氧化/抗氧化的平衡,对肺损伤早期起到肺组织保护作用。     

Making sticky cells: effect of galactose and ferrous iron on the attachment of Leptospirillum ferrooxidans to mineral surfaces

The purpose of this study was to compare the efficacy of galactose and high initial ferrous iron concentrations as inducers for extracellular polymeric substances (EPS) production in planktonic cells of Leptospirillum ferrooxidans and to study cell attachment to a mineral surface in comparison to cells not exposed to such substances. L. ferrooxidans was successfully adapted to grow in a modified 9K medium at different concentrations of galactose (0.15, 0.25, 0.35%) and also at different initial ferrous iron concentrations (18, 27, 36 g/L), which are higher than 9K medium (9 g/L). The experiments were done in shake flasks using ferrous iron as energy source. A comparison of growth kinetics showed a decreasing of maximum specific growth rate of L. ferrooxidans with increasing concentrations of galactose and initial ferrous iron. The EPS content increased and the EPS chemical composition (relative abundance of carbohydrates, proteins and ferric iron) changed with increasing concentrations of galactose and initial ferrous iron. Results revealed that the increase of the bacterial adhesion rather depended on the chemical composition, i.e. relative abundance of the constituents of the EPS, than on the total amount of EPS. The EPS induced by galactose seemed to be “stickier” than the one induced by ferrous iron. Based on the results of this study it is proposed that galactose might enhance biooxidation processes which needs to be tested in future studies.     

Direct and maternal aspects of the risk of cataract with partial disorders of galactose metabolism

Partial deficiencies of the enzymes of galactose metabolism can be associated with cataract, both directly and through maternal effects during pregnancy on enzymatically normal children. However, the associations are modest, variable and not obviously expressing cause and effect. We have recorded ophthalmological and biochemical observations including oral galactose tolerance on families with established enzyme deficiencies and/or cataracts, including possible effects during pregnancy. With the partial disorders a simple relationship between the extent of biochemical abnormality and the risk of cataract is not apparent and the association may be substantially coincidental. Cataract is common, and the attractive possibility that expression is significantly due to heterozygous or lesser deficiency of the enzymes of galactose metabolism, amenable to early dietary control of children or mothers at risk, is on present evidence not well supported.