TNP-470对人结肠癌Lovo细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响

目的　探讨TNP 4 70对体外培养的人结肠癌Lovo细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法　采用MTT法检测TNP 4 70对体外培养的Lovo细胞的生长抑制作用 ,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡百分率。结果　TNP 4 70对Lovo细胞生长具有抑制作用 ,并存在量效和时间依赖性。流式细胞仪分析表明 :G0 /G1期细胞百分率上升 ,S期细胞百分率下降 ,增值指数 (PI)下降 ,凋亡率上升 ,电镜下可见典型的细胞凋亡形态改变。结论　TNP 4 70对Lovo细胞的增殖具有抑制作用 ,其机制与细胞周期阻滞和凋亡有关     

大蒜提取物Z-ajoene对U937细胞增殖抑制作用机制的研究

目的　研究大蒜含硫化合物Z ajoene抗肿瘤作用的分子机制。方法　应用MTT法测定Z ajoene对不同白血病细胞株的生长抑制作用。采用流式细胞技术 (FACS)分析Z ajoene对U937细胞周期的影响以及对该细胞的诱导凋亡作用。用Western blot的方法检测Z ajoene对凋亡相关蛋白以及微管蛋白表达的影响。结果　Z ajoene对两种白血病细胞系HL6 0和U937有着相近的生长抑制作用 ,IC50 值均约为10 μmol·L-1。细胞周期分析发现 ,在给药初期和药物浓度较低时G2 /M期细胞数量明显升高 ;2 0 μmol·L-1Z ajoene作用 2 4h时 ,G2 /M期细胞比对照组升高约15 2 5 %。Z ajoene可以诱导U937细胞凋亡 ,并呈浓度和时间依赖性。实验结果表明 ,细胞凋亡过程中的关键蛋白酶caspase 3的激活及其底物PARP蛋白的裂解随着给药浓度和时间的增加而增加。此外 ,Z ajoene也产生以出现 2 3ku裂解带为特征的Bcl 2裂解。另外 ,实验浓度的Z ajoene对β 微管蛋白的表达有抑制作用 ,而对α 微管蛋白表达无明显改变。结论　Z ajoene能明显抑制U937细胞株的生长并可阻断U937细胞周期于G2 /M期 ,且这种阻断早于细胞凋亡。Z ajoene抗肿瘤机制与诱导细胞凋亡和干扰微管蛋白聚合相关。     

芹黄素联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖、迁移及凋亡的影响

目的 探讨芹黄素联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖、迁移及凋亡的影响.方法 采用MTT法测定人乳腺癌MCF-7细胞的增殖活性;用Transwell法测试细胞的迁移情况;用流式细胞仪检测细胞的凋亡.结果 芹黄素与紫杉醇单独用药对细胞的抑制作用随药物浓度的提高而增强,呈浓度依赖性,联合用药有协同作用;两药联用后,抑制细胞的迁移能力和诱导细胞的凋亡作用增强.结论 芹黄素与紫杉醇联用可协同抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖和迁移,并诱导细胞的凋亡.     

三氧化二砷对人肝癌细胞凋亡及Bcl-2、caspase-3蛋白表达的影响

目的研究三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）诱导HepG2细胞凋亡及其机制。方法采用MTT法、形态学观察及流式细胞术方法检测As2O3对HepG2细胞的生长抑制、凋亡作用的影响,用Western blot检测As2O3处理后HepG2细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3的表达。结果As2O3对HepG2细胞有明显的抑制增殖作用,且呈浓度和时间依赖性,细胞呈典型的凋亡形态学改变,As2O3呈时间依赖性诱导HepG2细胞凋亡。As2O3处理不同时间后,Bcl-2蛋白表达水平下调,caspase-3蛋白表达水平升高。结论As2O3具有诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的作用,其机制可能与其下调Bcl-2蛋白的表达,促进caspase-3活化有关。     

苦参素对人前列腺癌PC-3细胞体外作用研究

目的探讨苦参素对人前列腺癌PC 3细胞的生长抑制作用及可能的作用机制。方法采用MTT法检测PC 3细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测PC 3细胞周期改变,免疫组化法检测PC 3细胞中Bcl 2和Bax的表达。结果随着苦参素浓度的增加和作用时间的延长,PC 3细胞生长抑制率呈明显上升趋势(P＜0.05)。随着苦参素浓度的增加,G0/G1期和S期PC 3细胞所占比例逐渐上升,而G2/M期所占比例逐渐下降,同时Bcl 2表达下调,而Bax表达上调。结论苦参素能通过诱导人前列腺癌PC 3细胞周期阻滞于G0/G1和S期,下调Bcl 2表达和上调Bax的表达抑制癌细胞的生长增殖。     

金雀异黄素对胃癌细胞SGC-7901凋亡的诱导及相关基因表达的调控

目的：研究金雀异黄素（Genistein,Gen）对胃癌细胞SGC-790t凋亡的影响及凋亡相关基因表达的调控。方法：应用MTT比色法检测Gen对胃癌细胞SGC-7901生长活力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;RT—PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Fas表达水平的改变。结果：Gen对SGC-7901细胞有生长抑制作用,且呈时间／浓度依赖性;10．0mg·L^-1,20．0mg·L^-1Gen能诱导SGC-7901细胞凋亡,凋亡率与剂量正相关（r=0．9830）;Gen使SGC-7901细胞Bcl-2 mRNA表达下调,Fas mRNA表达上调。结论：Gen可能通过调控Bcl-2、Fas的基因水平而诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡。     

金雀异黄素对人胃癌细胞恶性增殖的抑制作用

大豆异黄酮 (ｓｏｙｂｅａｎｉｓｏｆｌａｖｏｎｅｓ)是大豆中的一类重要的非营养素成分 ,它主要包括以糖苷结合形式存在的金雀异黄素苷 (ｇｅｎｉｓｔｉｎ)和黄豆苷 (ｄａｉｄｚｉｎ)。大豆经加工、微生物发酵或体外酸水解作用 ,金雀异黄素苷和黄豆苷的糖苷部分脱离 ,释放出游离形式的三羟异黄酮 (金雀异黄素 ,ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ ,Ｇｅｎ)和二羟异黄酮 (黄豆苷元 ,ｄａｉｄｅｉｎ) ,这两种形式的异黄酮可被机体肠道有效吸收。研究发现大豆异黄酮具有抗癌作用 ,对人乳腺癌细胞株、前列腺癌细胞株等具有体外抗增殖作用。有研究报道其抗癌作…     

消瘤平体外诱导人白血病HL-60细胞凋亡及机制研究

目的研究消瘤平对人白血病细胞增殖的抑制及诱导凋亡的作用,揭示其抗白血病的部分作用机制。方法体外常规培养HL-60细胞,以不同浓度的消瘤平作用于细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞术检测凋亡率和细胞周期;ELISA法检测培养上清液中Caspase-3、Fas和Bcl-2的含量。结果与空白对照组相比,作用24 h后,消瘤平显著抑制HL-60细胞的增殖,且呈时间和剂量依赖性;提高HL-60细胞的凋亡率,并诱导出现G2-M细胞周期阻滞;消瘤平作用48 h后,Caspase-9和Fas蛋白表达量增加,Bcl-2表达减少。结论消瘤平抑制人白血病HL-60细胞的作用机制与阻滞细胞周期于G2-M期和诱导细胞凋亡有关,其诱导凋亡作用可能通过上调Caspase-9、Fas和下调Bcl-2而实现。     

儿茶素对人肝癌细胞HepG2的影响

目的研究儿茶素[(+)-catechin,Cat]不同时间、不同浓度对人肝癌细胞(HepG2)的增殖、迁移能力的抑制及诱导凋亡作用。方法 HepG2细胞分别与不同浓度Cat作用,MTT法检测细胞增殖率的变化,显微镜观察细胞形态学变化,划痕法检测细胞的迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组织化学染色法检测HepG2的Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达。结果 Cat(4~100mg·mL-1)能明显抑制人肝癌细胞HepG2的增殖和迁移能力,并呈浓度依赖性。流式细胞术检测结果显示Cat(4mg.L-1)作用于HepG2细胞24h即可诱导细胞凋亡。免疫组织化学结果显示Cat(4~20mg·mL-1)的Bax和Caspase-3的表达呈浓度依赖性升高,而Bcl-2的表达呈浓度依赖性降低。结论 Cat可以一定程度的抑制HepG2细胞的增殖和迁移能力并诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与其下调HepG2细胞内Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达,从而促进Caspase-3活化有关。     

苦参碱对人原代白血病细胞的体外作用研究

目的研究苦参碱对原代人白血病细胞的体外作用及可能的分子机制。方法取临床初诊的髓系白血病患者外周血,分离得到原代白血病细胞体外培养。不同浓度苦参碱作用后,观察细胞的形态学改变、CCK8法检测细胞增殖、Annexin V-FITC/PI分析细胞凋亡及流式检测细胞周期。结果苦参碱作用24 h,细胞增殖明显受抑,0.5、0.8 mg/m L组的生长抑制率分别为54.98%和72.96%,与对照组相比差异显著(P<0.01),抑制效应有明显剂量相关性。苦参碱作用24 h的IC50为0.5 mg/m L。苦参碱作用24 h,0.2、0.5、0.8 mg/m L组细胞早期凋亡率分别为11.8%、37.6%、54.7%,明显高于对照组自发凋亡率(7.50%)(P<0.05)。苦参碱作用48 h后,细胞周期阻滞于G0/G1→S期。结论苦参碱可显著抑制体外培养的人原代白血病细胞增殖,其机制与诱导细胞早期凋亡,促进细胞周期G1→S期阻滞有关。     

芹菜素对子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

目的　研究芹菜素对子宫内膜癌细胞HEC-1-B增殖、侵袭、迁移、凋亡的影响及其作用机制。方法　取对数生长期的HEC-1-B细胞,加入0、20、40和80 μmol/L的芹菜素,采用CCK-8法检测培养24、48和72 h后细胞的光密度,计算增殖抑制率。流式细胞术检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力变化。Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2以及磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）和磷酸化AKT（p-AKT）的表达水平。结果　20~80 μmol/L范围内,随着芹菜素干预浓度的升高,HEC-1-B细胞的增殖明显受到抑制,细胞凋亡率升高,同时促凋亡蛋白Bax表达增高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下降。0、5、10和20 μmol/L范围内,随着芹菜素干预浓度的升高,HEC-1-B细胞侵袭和迁移能力下降。Western blot结果显示,40 μmol/L芹菜素能够下调PI3K/AKT通路蛋白p-PI3K和p-AKT的表达。结论　芹菜素能够抑制HEC-1-B细胞增殖、侵袭、迁移并促进其凋亡,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。     

灵芝孢子粉抑制人卵巢癌细胞增殖及诱导凋亡的体外研究

目的研究灵芝孢子粉对人卵巢癌OV2008细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法采用WST-1比色法及显微镜观察法研究灵芝孢子粉对OV2008细胞生长抑制作用及细胞形态的改变;流式细胞仪检测细胞周期分布情况;Hoechst-33258染色方法评估细胞凋亡并采用western blot方法测定凋亡相关蛋白的表达。结果 WST结果表明灵芝孢子粉可以抑制OV2008细胞的生长,并呈剂量和时间依赖性;流式细胞术结果提示灵芝孢子粉可使卵巢癌细胞生长阻滞于G1期。Hoechst-33258染色结果显示灵芝孢子处理细胞后可以检测出凋亡细胞。Western blot方法检测到凋亡抑制蛋白bcl-2、bcl-xl随灵芝孢子浓度增加而下降,而促凋亡蛋白bax及P27、casep具有抑制卵巢癌细胞生长及诱导凋亡的作用,其机制是作用于细胞周期的ase-3逐渐升高。结论灵芝孢子粉可以抑制卵巢细胞生长,使细胞生长阻滞于G1期,并可以通过上调bax、P27,下调bcl-2并活化casepase-3而发挥其作用。     

补肾养骨汤诱导多发性骨髓瘤细胞株 KM3 的 凋亡及机制探讨

目的 探讨补肾养骨汤对人多发性骨髓瘤细胞株 KM3 细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 取对数生 长期 KM3 细胞,分别加入 5%、10%、20% 的补肾养骨汤含药血清培养,培养 12、24、48 和 72 h 后,采用 Cell Counting Kit-8（CCK-8）法检测补肾养骨汤对 KM3 细胞增殖的影响;KM3 细胞经过不同浓度含药血清培养 72 h 后,采用流式 细胞术检测补肾养骨汤对 KM3 细胞周期和凋亡作用;RT-qPCR 和 Western blot 检测 B 淋巴细胞瘤-2 基因（Bcl-2）、 Bcl-2 相关蛋白（Bax）和核转录因子（NF）-κB 的表达水平。结果 补肾养骨汤抑制 KM3 细胞株的增殖,诱导 KM3 细胞株呈剂量依赖性凋亡,使 KM3 细胞周期停滞在 G0/G1 期,导致 KM3 细胞株 Bcl-2、NF-κB 表达下调,Bax 表达 上调。结论 补肾养骨汤抑制 KM3 细胞的增殖,影响细胞周期,诱导其凋亡,此作用机制可能与 Bcl-2、Bax 和 NF- κB 表达异常有关。     

霞草苷对人结肠癌HT－29细胞生长和凋亡的影响

目的：观察霞草苷对人结肠癌HT－29细胞凋亡的影响及其可能机制。方法用MTT法和流式细胞技术检测浓度为5,10,20,40μmol· L－1霞草苷对HT－29细胞生长、凋亡的影响;用实时荧光定量RT－PCR检测细胞Caspase－3、Bax的mRNA水平。结果霞草苷对HT－29细胞的生长有明显的增殖抑制作用,呈浓度和时间依赖性,细胞凋亡率明显增高。 Caspase－3和Bax的mRNA表达量逐渐增加,呈明显的浓度依赖性。结论霞草苷能诱导体外培养的人结肠癌HT－29细胞凋亡,上调Bax表达,活化Caspase－3可能是霞草苷诱导HT－29细胞凋亡的机制之一。     

莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 探讨莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的影响。方法 水蒸气蒸馏法提取黔产莪术挥发油,配制成40、80、120、160、200、240、280 mg/L浓度梯度,干预SW1463细胞24、48、72 h,MTT法检测莪术油对SW1463细胞的增殖抑制率;Giemsa染色法观察莪术油对SW1463细胞凋亡形态的影响;蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测Capase-3、Bax与Bcl-2蛋白表达。结果 莪术油对SW1463细胞的增殖有明显抑制作用,并呈现时间-剂量相关性,24、48、72 h的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为144.33、134.11、120.04 mg/L;Giemsa染色可见细胞明显的凋亡形态学特征;莪术油干预SW1463细胞24 h后,与对照组比较,Caspase-3、Bax蛋白表达显著上调、Bcl-2蛋白表达显著下调（P<0.05）。结论 莪术油能明显抑制SW1463细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调Caspase-3和Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达相关。     

华蟾素诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡及其作用机制

为了观察华蟾素体外抑制肝癌细胞株HepG₂增殖、诱导细胞凋亡作用及其机制, 将不同浓度华蟾素作用于HepG₂细胞。采用MTT法观察华蟾素对HepG₂细胞的增殖抑制作用; 用Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态学改变; 以流式细胞术观察细胞的凋亡率和细胞周期的变化; 以实时荧光定量PCR技术 (real time-PCR) 和蛋白免疫印迹 (Western blotting) 法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax及p53 mRNA水平和蛋白水平的表达情况。结果表明, 华蟾素对体外培养的肝癌HepG₂细胞有抑制增殖作用, 且具有剂量、时间相关性; 华蟾素可致HepG₂细胞阻滞于G₂/M期, 细胞凋亡率随药物浓度增加亦呈增长趋势; 细胞凋亡相关因子Bax及p53 mRNA和蛋白表达上调, Bcl-2的mRNA和蛋白表达下调。因此, 华蟾素可抑制肝癌细胞株HepG₂的增殖, 诱导肝癌HepG₂细胞凋亡, 其机制可能与调节凋亡相关因子Bcl-2、Bax及p53的表达有关。     

黄芪多糖对人肺癌A549 细胞增殖的作用及其机制的实验研究

目的探讨黄芪多糖（astragalus polysaccharide,APS）对人肺癌A549细胞增殖的作用及其机制。方法用不同浓度的APS（25μg.mL-1、50μg.mL-1、10μg.mL-1、200μg.mL-1、400μg.mL-1）作用于人肺癌A549细胞,用MTT法检测细胞增殖的抑制率,免疫细胞化学法检测bcl-2和bax的表达。结果 APS的浓度在25μg.mL-1～400μg.mL-1范围内均可抑制人肺癌A549细胞的增殖,100μg.mL-1的APS对A549细胞增殖的抑制率达最高,100μg.mL-1的APS作用于人肺癌A549细胞48和72小时后,均可下调bcl-2和上调bax的表达。结论 APS能够可抑制人肺癌A549细胞的增殖,可能与其下调bcl-2和上调bax的表达有关。     

舒尼替尼对EGFR TKI抵抗的A549细胞株增殖抑制作用及机制研究

目的探讨舒尼替尼(sunitinib)体外对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR TKI)耐药的非小细胞肺癌A549细胞的生长抑制作用及其机制。方法 MTT法检测sunitinib对A549细胞的生长抑制作用;荧光显微镜观察sunitinib诱导的细胞凋亡;流式细胞术检测sunitinib作用后细胞周期变化;Western blot检测sunitinib作用后Bcl-2蛋白水平的变化。结果在0.4～12.8μmol.L-1浓度范围内,sunitinib抑制A549细胞增殖,且具有浓度和时间依赖性,24、48、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为(7.34±0.76)、(5.54±0.62)、(3.68±0.53)μmol.L-1。荧光显微镜观察发现sunitinib能够诱导细胞出现核固缩、体积缩小等凋亡形态学改变。细胞周期显示sunitinib将A549细胞阻滞于G0/G1期。Western blot显示sunitinib能够降低Bcl-2蛋白的表达水平,且随着sunitinib浓度的升高,Bcl-2蛋白的表达水平逐渐降低。结论 sunitinib能够抑制EGFR TKI抵抗的A549细胞生长,并具有浓度和时间依赖性,其抗肿瘤的机制可能与诱导细胞周期阻滞和下调Bcl-2的表达有关。     

蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞的作用及其相关机制研究

目的观察蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用,探讨其诱导凋亡的机制。方法采用体外细胞培养方法,以不同浓度蓝萼甲素作用于HeLa细胞,用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞的存活率;透射电镜观察细胞的形态学变化;流式细胞仪(AnnexinV-FITC)检测细胞凋亡率的变化;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达情况。结果与对照组相比,蓝萼甲素对HeLa细胞有增殖抑制作用,呈剂量、时间依赖趋势;Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达上调,Caspase-3、Caspase-9蛋白表达上调。结论蓝萼甲素对宫颈癌HeLa细胞有增殖抑制及诱导凋亡的作用,其分子机制可能与线粒体信号通路有关。