OCIL shRNA表达载体的构建及其对成骨细胞RANKL/OPG基因表达的调节

目的:探讨成骨细胞中破骨细胞分化抑制因子(OCIL)基因敲减后护骨素(OPG)和核因子κB受体活化因子配基(RANKL)mRNA的表达水平及其对破骨细胞分化的影响。方法:构建OCIL特异性shRNA表达载体并转染至细胞,分为pRNAT-N1组、pRNAT-N2组、pRNAT-N3组和阴性对照转染组。考察与阴性对照转染组比较,各组对OCIL mRNA水平的抑制率。将对OCIL mRNA干扰效果最佳的shRNA表达载体(pRNAT-N1组)和对照载体pRNAT-U6.1/Neo/CTL(control组)分别瞬时转染UMR106细胞,考察2组RANKL和OPG表达水平。各转染组条件培养基干预骨髓细胞后,观察PBS+control shRNA(vehicle组)、PTH+control shRNA(PTH组)及PTH+OCIL shRNA(shRNA组)破骨细胞样细胞(OLC)数量。结果:(1)与阴性对照转染组比较,pRNAT-N1、pRNAT-N2、pRNAT-N3对OCIL mRNA水平抑制率分别为64%、28%和59%。(2)pRNAT-N1转染UMR106成骨细胞后,RANKLmRNA表达水平明显升高,而OPG mRNA表达水平明显降低,转染后24hRANKL∶OPG比值较control组升高5.1倍。(3)vehicle组、PTH组及shRNA组OLC数分别为(1.83±0.75)个/孔、(49.67±6.77)个/孔及(65.50±7.34)个/孔,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RANKL/OPG系统参与了OCIL对破骨细胞分化的调节作用。     

槲皮素对去卵巢大鼠股骨OPG与RANKL表达的影响

目的观察槲皮素对去卵巢大鼠股骨骨保护素（osteoprotegerin, OPG）及核因子κB受体活化子配体（ligand of receptor activator of NF κB,RANKL）表达的影响。方法健康雌性SD大鼠48只,按体质量随机分为6组：假手术组（SHAM组）、单纯去卵巢组（OVX组）、17β-雌二醇组（ERT组,0.1 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）、高剂量槲皮素组（QH组,300 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）、中剂量槲皮素组（QM组,150 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）、低剂量槲皮素组（QL组,75 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）。除假手术组外其余各组均切除双侧卵巢,术后1周开始给药,给药 16周后处死所有大鼠,测定腰椎及股骨骨生物力学性能：弹性模量（ELASTIC） 、刚度（STIFFNESS）、最大应力（M STRESS）及最大承载力（M LORD）,用免疫组织化学染色方法观察股骨OPG、RANKL表达情况。结果 槲皮素高、中剂量均能上调股骨OPG、下调RANKL表达,部分改善股骨、腰椎生物力学性能。结论 槲皮素可通过调节骨组织中OPG、RANKL的相对含量而抑制骨吸收,防止骨质疏松。     

三七总皂甙对大鼠骨髓基质细胞OPG/RANKL表达比的影响

目的观察三七总皂甙（PNS）对大鼠骨髓基质细胞中骨保护素（OPG）/核因子Kappa B受体活化因子配体（RANKL）表达的影响,探讨三七总皂甙防治骨质疏松的作用机制。方法分离、培养大鼠骨髓基质细胞（BMSCs）,取P3代细胞,分成4组,各PNS组终浓度分别为50、100、200 mg/L;对照组不进行特殊处理。培养7 d后,采用RT-PCR和Western Blotting检测OPG、RANKLmRNA和蛋白的表达并计算OPG/RANKL比值。结果 RT-PCR显示：PNS组（50、100、200 mg/L）和对照组OPG/RANKLmRNA表达比分别为（0.40±0.07）、（0.41±0.08）、（0.78±0.11）和（0.23±0.05）;蛋白印迹实验显示PNS组（50、100、200 mg/L）和对照组OPG/RANKL蛋白表达比分别为（0.25±0.06）、（0.64±0.13）、（0.28±0.09）和（0.13±0.03）。在mRNA和蛋白水平,PNS组OPG/RANKL比值均明显高于对照组,100 mg/L PNS组最高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论三七总皂甙可增加骨髓基质细胞中OPG的表达,减少RANKL的表达。     

帕米磷酸钠对大鼠成骨细胞RANKL/OPGmRNA表达的影响

目的观察帕米膦酸钠对新生大鼠成骨细胞核因子κβ受体活化受体配体（RANKL）／护骨素（OPG）mRNA表达的影响。方法 体外分离培养新生大鼠成骨细胞,分别观察不同浓度帕米膦酸钠或用帕米膦酸钠处理不同时间对成骨细胞RANKL／OPG mRNA表达的影响。采用半定量RT-PCR方法检测RANKL／OPG mRNA表达。结果帕米膦酸钠呈浓度依赖性降低RANKL mRNA的表达,干预24h,10^-5M抑制作用最大,约为对照组表达量的40％（P〈0．01）。同时帕米膦酸钠呈浓度依赖性增加OPG mRNA表达,10^-6M时增加最明显,约为对照组表达量的2．2倍（P〈0．01）,而在10^-5M时又明显降低。10^-6M帕米膦酸钠呈时间依赖性抑制RANKL mRNA和促进OPG mRNA表达,分别于24h抑制RANKL mRNA表达、48h促进OPG mRNA表达且达最大效应（P〈0．01）。结论帕米膦酸钠可能通过调节成骨细胞RANKL／OPG的基因表达,而抑制破骨细胞介导的骨吸收。     

RANK/RANKL/OPG系统及其相关疾病和抗RANKL疗法的研究进展

骨骼是一个动态组织,在生物的整个生命周期中不断地进行构建、吸收、重建,核因子(nuclear factor,NF)κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)/NF-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)/护骨素(osteoprotegerin,OPG)系统是调控这一过程的关键系统.RANK/RANKL/OPG属于肿瘤坏死因子及其受体超家族,三者通过调控破骨细胞的分化和活化来影响骨吸收和重建的过程.另外,免疫细胞也参与和调节RANK/RANKL的表达和分泌,而免疫细胞本身亦受到该系统的影响,因此,RANK/RANKL/OPG系统成为骨和免疫之间的重要关联.RANK/RANKL/OPG系统的失衡与多种骨代谢性疾病及免疫系统疾病引发的继发性骨病密切相关,该系统的发现为研究相关疾病的病理机制和治疗方法提供了基础.由此建立的抗RANKL疗法已经开始应用于临床试验和研究.此文对RANK/RANKL/OPG系统、系统相关疾病以及抗RANKL治疗的进展做一综述.     

RANKL/RANK/OPG系统及其在类风湿关节炎骨质破坏中的作用

<正>类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种高度致残性自身免疫性疾病,其基本特征是炎症性滑膜炎伴关节软骨和骨的破坏,破骨细胞在RA骨质破坏的病理机制中发挥着重要作用[1]。RANKL/RANK/OPG系统是近年来发现的与破骨     

探讨IL-17基于RANKL/RANK/OPG通路对类风湿关节炎骨破坏的作用机制

类风湿关节炎(RA)是一种以进行性关节破坏为特征的慢性自身免疫性疾病,病理改变主要以关节软骨及骨破坏为主,其发病机制与诸多细胞因子有着密切的关系,治疗不及时常常导致患者致畸致残。破骨细胞(OCs)在RA骨破坏的病理过程中起关键作用,其调控依赖于OCs形成、分化及活化的过程。白细胞介素-17(IL-17)是由辅助性T细胞17(Th17)产生的多效性细胞因子,相关研究发现它可以调节核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子κB受体活化因子(RANK)/骨保护素(OPG)信号通路促进OCs的成熟及分化,引起骨质破坏。本文通过检索相关文献探讨IL-17通过RANKL/RANK/OPG信号通路在RA骨破坏机制中的作用,为早期RA的治疗提供新的靶点。     

佐剂性关节炎大鼠骨密度及滑膜OPG/RANKL蛋白的改变

目的观察佐剂性关节炎大鼠的骨密度及踝关节OPG和RANKL蛋白的表达。方法取SD大鼠,制成佐剂性关节炎模型,设正常组、模型1组、模型2组。观察各组大鼠造模后第7、14、21、28天不同时间点的关节炎指数。第21天处死模型1组全部大鼠;第28天处死正常组和模型2组的全部大鼠,分别检测取大鼠整体右侧胫骨和距胫骨远端约1cm为兴趣区的骨密度,同时取双侧踝关节滑膜Western-blotting法检测OPG/RANKL蛋白的表达。结果模型1组,模型2组和正常组比较,各时间点关节炎指数积分差异均有统计学意义(P<0.01)。模型1组大鼠兴趣区的骨密度较正常组低(P<0.01);模型2组大鼠兴趣区的骨密度较模型1组和正常组均显著降低(P<0.01);3组大鼠整体右侧胫骨骨密度值无明显差异。模型1组,模型2组的OPG蛋白表达与正常组差异均有统计学意义(P<0.01)。模型1组的RANKL蛋白表达与正常组无差异,而模型2组的与正常组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论佐剂性关节炎大鼠在造模后第21天存在胫骨远端骨丢失,第28天该病变更为加重,而同时整体胫骨的骨密度均未发生明显变化。造模后第21天和28天大鼠关节滑膜的OPG蛋白表达降低。造模后第28天大鼠滑膜的RANKL蛋白高于正常。     

β-蜕皮甾酮对高糖诱导的大鼠成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响

目的 探讨β-蜕皮甾酮对高糖诱导的大鼠成骨细胞增殖、分化和凋亡的影响及分子机制.方法 将大鼠成骨细胞随机分为空白组(5.5 mmol·L-1葡萄糖)、模型组(25 mmol·L-1葡萄糖)、低、中、高剂量实验组(1,5,25μmol·L-1β-蜕皮甾酮+25 mmol·L-1葡萄糖)、p38 MAPK激活组(10μmo...     

唑来膦酸对多发性骨髓瘤成骨细胞增殖及其RANKL/OPG表达的影响

目的研究唑来膦酸对多发性骨髓瘤(MM)患者成骨细胞(OB)增殖及其细胞核因子κ-B受体活化因子配体(RANKL)和护骨素(OPG)表达的影响。方法取MM患者骨髓液密度梯度离心法分离单个核细胞,原代培养,贴壁传代后加入含维生素C、地塞米松、β-甘油磷酸钠的条件培养基,诱导成OB,采用不同浓度唑来膦酸处理培养的OB,分别作用24、48和72 h后,通过①细胞计数试剂盒(CCK-8)检测OB增殖;②RT-PCR检测OB RANKL和OPG mRNA表达;和③酶联免疫吸附实验(ELISA)检测相应细胞培养上清液中sRANKL和OPG浓度来考察唑来膦酸的作用。结果①OB用唑来膦酸处理后,OB的CCK-8实验吸光值呈不同程度升高。②唑来膦酸作用24 h和48 h后,OB RANKLmRNA表达变化不明显。作用72 h,低浓度(10-9 mol.L-1)唑来膦酸显示能降低RANKL mRNA表达(P<0.05)。OB培养上清的sRANKL浓度也呈现类似的变化。③唑来膦酸作用24 h后,OB OPG mRNA表达变化不明显。作用48h,呈不同程度增加,以10-8 mol.L-1浓度最明显(P<0.05)。作用72 h,呈不同程度增加,以10-7 mol.L-1浓度最明显(P<0.05)。结论唑来膦酸有促进OB增殖的作用;唑来膦酸可能下调OB RANKL表达,并且上调OPG表达。     

壮骨止痛方调节OPG/RANKL平衡抗绝经后骨质疏松作用

目的：研究壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠OPG和RANKL的影响,探讨其抗骨质疏松的作用机制。方法：72只200g左右的SD大鼠按体质量随机抽出假手术组12只,造模组60只,造模组采用双侧去卵巢法造模,假手术组只切除卵巢周围相应质量的脂肪。造模成功后,造模组大鼠按体质量随机分为模型组壮骨止痛方高剂量组(13.2g/kg)、中剂量组(6.6g/kg)、低剂量组(3.3g/kg)和戊酸雌二醇组,每组12只。术后第5天开始药物干预,模型组和假手术组给予相应体积的纯净水,持续13周。给药结束后,酶联免疫法检测大鼠血清和骨组织OPG、RANKL含量,免疫组化法检测大鼠骨组织OPG、RANKL蛋白表达。结果：去卵巢后,大鼠血清和骨组织OPG含量显著下降,RANKL含量显著增加;骨组织OPG蛋白表达显著下调,RANKL蛋白表达显著增强。壮骨止痛方组大鼠血清和骨组织OPG含量显著增加,RANKL含量显著下降;骨组织OPG蛋白表达显著增强,RANKL蛋白表达显著下调。与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论：调节OPG/RANKL平衡可能是壮骨止痛方抗绝经后骨质疏松的作用机制之一。     

柚皮素对破骨细胞特异性基因及OPG/RANKL/RANK表达的影响

目的 观察柚皮素对破骨细胞特异性基因组织蛋白酶-K(CATK)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)及骨保护素/核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子(OPG/RANKL/RANK)表达的影响.方法 采用全骨髓细胞诱导法培养破骨细胞,细胞分5组:空白对照组、HG-DMEM诱导组、HG-DMEM+0构.1μmol/L柚皮素组、HG-DMEM+1μmol/L柚皮素组、HG-DMEM+10μmol/L柚皮素组.HE染色、TRAP染色观察破骨细胞形态;分光光度计检测TRAP阳性细胞数;Real time-PCR和Western-blot检测CATK、MMP-9、TRAP及OPG/RANKL/RANK mRNA和蛋白表达.结果 与空白对照组比较,HG-DMEM诱导组TRAP阳性细胞数、TRAP、MMP-9、CATK、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达明显增加,OPG mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05).与HG-DMEM诱导组比较,柚皮素预处理24 h能够明显降低TRAP阳性细胞数、CATK、MMP-9、TRAP、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达,增加OPG mRNA和蛋白表达(P<0.05),呈剂量依赖性.结论 柚皮素能够抑制破骨细胞的生成和分化,该作用可能是通过OPG/RANKL/RANK信号通路抑制TRAP、MMP-9、CATK表达实现的.     

外周血RANKL/OPG比值在类风湿关节炎合并股骨头坏死患者中的意义

目的 探讨外周血RANKL和OPG水平的变化在类风湿关节炎(RA)患者合并股骨头坏死(ONFH)中的意义。方法 回顾性分析2010年1月至2013年10月住院的644例RA患者各项临床及实验室指标,并选择同期体检的158例健康者为对照组,所有观察对象均行骨盆平片检查。对比分析两组观察对象股骨和腰椎骨密度及外周血RANKL和OPG水平。结果 RA患者中骨质疏松(OP)和ONFH发生率明显高于对照组(χ²=31.92,P<0.001;χ²=8.71,P=0.003);伴ONFH的RA患者外周血RANKL水平[214.50(384.05%) vs 82.67(78.86%)]、RANKL/OPG比值(0.41 vs 0.27)高于无ONFH的RA患者(P<0.05),且病程、健康状况问卷(HAQ)评分和双手关节Sharp评分均明显高于无ONFH的RA患者(P<0.001)。服用糖皮质激素(GC)的RA患者其ONFH发生率明显高于未服用GC组(χ²=20.62,P<0.001)。logistic regression多元回归结果显示,服用GC、总股骨区OP的发生、外周血RANKL/OPG比值为RA发生ONFH的危险因素。结论 RA患者合并ONFH的发生率高于健康人群,且与GC的使用、总股骨区OP的发生、RANKL/OPG比值升高密切相关,也与RA局部骨侵蚀存在一定的相关性。     

骨碎补总黄酮对骨质疏松模型大鼠OPG/RANKL/RANK轴系统的影响

目的 研究不同剂量骨碎补总黄酮灌胃对骨质疏松模型大鼠雌激素水平及骨保护素(orthopantomography,OPG)、核因子κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)表达的影响,探讨其对骨代谢影响的可能机制。方法 通过去卵巢法造成骨质疏松大鼠模型,以戊酸雌二醇片0.1 mg·kg^-1及低、中、高不同剂量骨碎补总黄酮(0.054,0.108,0.216 g·kg^-1·d^-1)喂养3个月后,取动脉血,采用放射免疫法测定雌激素水平,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测破骨细胞OPG、RANK和RANKL的表达。结果 与模型组2相比,各给药组雌二醇及OPG的表达量增加(P<0.05),RANK和RANKL的表达量减少(P<0.05),且随着骨碎补总黄酮剂量的增加,雌二醇及OPG表达呈上升趋势,RANK和RANKL表达均呈下降趋势。结论 不同剂量骨碎补总黄酮均影响OPG/RANKL/RANK轴系统,且随骨碎补总黄酮剂量的增加效果越明显,可能是通过调控OPG/RANKL/RANK轴系统使OPG表达增加、RANK和RANKL的表达下降来实现的。     

淫羊藿苷联合GM6001治疗酒精性股骨头坏死大鼠的作用机制及对OPG/RANK/RANKL通路的影响

目的 研究淫羊藿苷联合GM6001治疗酒精性股骨头坏死大鼠的作用机制,同时探究其对骨保护素（OPG）/核因子-κB受体活化因子（RANK）/核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）通路的调节作用。方法 大鼠随机分为对照组、模型组、淫羊藿苷组、GM6001组及联合组（淫羊藿苷＋GM6001）,每组12只。采用ig给予大鼠白酒建立酒精性股骨头坏死大鼠模型,淫羊藿苷组按照60 mg/kg ig给予大鼠淫羊藿苷,GM6001组按照100 mg/kg尾iv GM6001,联合组同时给予淫羊藿苷（60 mg/kg）及GM6001（100 mg/kg）,1次/d,连续8周,对照组及模型组给予生理盐水。旷场实验测定大鼠活动次数、活动总距离,抓力测定仪测定大鼠最大抓力;显微CT仪测定股骨头骨体积分数、骨小梁间距、骨小梁数目、骨小梁厚度;酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清磷、钙水平,血清及股骨头骨形成蛋白-2（BMP-2）、转化生长因子-β（TGF-β）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）水平。苏木精–伊红（HE）染色法测定股骨头组织病理学变化;实时定量聚合酶链式反应（PCR）测定股骨头OPG、RANK、RANKL mRNA水平;免疫印迹法测定股骨头OPG、RANK及RANKL蛋白水平。结果 与模型组比较,淫羊藿苷组、GM6001组、联合组活动次数、活动总距离、最大抓力、骨体积分数、骨小梁数目、骨小梁厚度,血清磷、钙、BMP-2、TGF-β、bFGF水平,股骨头BMP-2、TGF-β、bFGF水平,股骨头OPG mRNA及蛋白水平显著升高（P＜0.05）;骨小梁间距、股骨头RANK和RANKL的mRNA及蛋白水平显著降低（P＜0.05）,且联合组降低更为显著（P＜0.05）。结论 淫羊藿苷联合GM6001能够显著修复大鼠酒精性股骨头坏死,缓解股骨头组织病理学改变,其机制可能与调节OPG/RANK/RANKL有关。     

基于OPG/RANKL信号通路探讨姜黄素对去势骨质疏松模型大鼠骨代谢平衡的影响

目的:探讨姜黄素对去势骨质疏松模型大鼠骨代谢平衡的影响,并探讨其可能机制。方法:将雌性Wistar大鼠随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、雌二醇组[C组(阳性对照),戊酸雌二醇50μg/(kg·d)]和姜黄素低、中、高剂量组[D～F组,55、110、165μg/(kg·d)],每组15只。除A组外,其余各组均采用去卵巢法建立去势骨质疏松模型。造模后,A、B组大鼠均灌胃生理盐水,各给药组灌胃相应药物,体积均为30 m L/kg,每日1次,连续12周。采用酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠血清骨代谢标志物[骨特异性碱性磷酸酶、核心结合因子α1、Ⅰ型胶原交联羧基末端肽、Ⅰ型前胶原氨基端前肽、骨钙素]含量,采用实验动物微型CT影像系统检测大鼠骨密度(BMD)和骨小梁结构参数[相对骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、连接密度(Conn.D)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、结构模型指数(SMI)],采用逆转录聚合酶链式反应法和Western blotting法分别检测下丘脑和股骨组织中骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA及蛋白的...     

含中药骨金散血清对大鼠成骨细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响

目的：本研究旨在探讨含中药骨金散血清对成骨细胞的增殖及OPG/RANKL系统的影响。方法：6月龄雌性大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、骨金散低剂量组和骨金散高剂量组,每组12只,模型组、骨金散低剂量组和骨金散高剂量组大鼠建立去卵巢大鼠骨质疏松的动物模型,4周后低剂量骨金散组和高剂量骨金散组按1.8g/kg和3.6g/kg灌服骨金散,每日一次;模型组和假手术组均每天一次生理盐水灌胃。连续给药8周后处死大鼠,观察骨金散对去卵巢大鼠股骨骨密度的影响,制备含骨金散血清。体外培养成骨细胞,观察含药血清对成骨细胞的增殖和OPG、RANKL mRNA的表达的影响。结果：与假手术组相比,去卵巢大鼠股骨骨密度明显降低（P〈0.01）,低剂量的骨金散组和高剂量组大鼠股骨骨密度高于去卵巢组（P〈0.01）。低剂量的骨金散组和高剂量组血清促进成骨细胞的增殖（P〈0.05）,升高OPGmRNA表达水平（P〈0.01）,降低RANKL mRNA的表达水平（P〈0.01）,使OPGmRNA/RANKLmRNA的表达比值升高（P〈0.01）。结论：中药骨金散能增加去势大鼠BMD,促进成骨细胞增殖,增加成骨细胞OPGmRNA表达,降低RANKLmRNA表达,发挥抑制破骨细胞的骨吸收作用,这可能与其治疗骨质疏松的机制有关。     

葛根素基于内质网蛋白核心 /信号分子 /C/EBP同源蛋白通路对脂多糖诱导成骨细胞骨保护素及核因子 -κB受体 mRNA表达的影响

目的 探讨基于内质网蛋白核心/信号分子/C/EBP同源蛋白(GRP78/PERK/CHOP)通路研究葛根素对脂多糖(LPS)诱导成骨细胞骨保护素(OPG)和核因子-κB受体(RANKL)mRNA表达的影响.方法 体外培养小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1,采用随机数字表法分为对照组、模型组、4-苯基丁酸钠盐(内质网应激抑制剂,4-PBA)组、葛根素组、葛根素+4-PBA组,除对照组,其余各组以LPS处理MC3T3-E1细胞建立成骨细胞炎症模型,以茜素红染色、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒分别检测各组细胞矿化结节相对比例、ALP活性,判定细胞成骨分化情况;以酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测各组细胞培养基上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;以实时荧光定量(qRT-PCR)检测各组细胞成骨相关基因(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)mRNA水平及OPG、RANKL mRNA水平;以免疫印迹检测细胞GRP78、PERK、CHOP蛋白表达.结果 与对照组相比,模型组MC3T3-E1细胞矿化结节相对比例[(8.23±1.18)％比(100.00±0.00)％]、ALP活性[(0.49±0.12)U/mgprot比(1.57±0.35)U/mgprot]、细胞Runx2[(0.41±0.05)比(1.01±0.13)]、OPN[(0.39±0.04)比(1.02±0.15)]、OCN[(0.40±0.03)比(0.99±0.14)]及OPG mRNA[(0.41±0.11)比(1.03±0.17)]水平明显降低(P<0.05),细胞培养基上清液中TNF-α[(602.43±20.01)pg/mL比(381.86±18.16)pg/mL]及IL-6水平[(483.63±16.61)pg/mL比(280.15±11.18)pg/mL]、细胞RANKL mRNA[(3.03±0.62)比(0.99±0.13)]水平及GRP78[(1.31±0.24)比(0.19±0.05)]、PERK[(1.23±0.27)比(0.33±0.08)]、CHOP蛋白[(1.21±0.28)比(0.31±0.07)]表达明显升高(P<0.05).与模型组相比,4-PBA组、葛根素组、葛根素+4-PBA组MC3T3-E1细胞矿化结节相对比例、ALP活性、细胞Runx2、OPN、OCN及OPG mRNA水平均升高(P<0.05),细胞培养基上清液中TNF-α及IL-6水平、细胞RANKL mRNA水平及GRP78、PERK、CHOP蛋白表达均降低(P<0.05).与4-PBA组、葛根素组分别相比,葛根素+4-PBA组MC3T3-E1细胞矿化结节相对比例、ALP活性、细胞Runx2、OPN、OCN及OPG mRNA水平均升高(P<0.05),细胞培养基上清液中TNF-α及IL-6水平、细胞RANKL mRNA水平及GRP78、PERK、CHOP蛋白表达均降低(P<0.05),4-PBA组与葛根素组上述各项指标比较均差异无统计学意义(P>0.05).结论 葛根素可上调OPG mRNA水平,下调RANKL mRNA水平,降低LPS诱导的成骨细胞炎症反应,拮抗LPS对成骨细胞成骨分化的抑制作用,可能是通过下调GRP78/PERK/CHOP通路实现的.