黄芪调节哮喘失衡表达转录因子T-bet/GATA-3的研究

目的:观察T细胞特异转录因子T-bet/GATA-3在支气管哮喘中失衡表达,探讨黄芪对其调节作用?方法:50只雄性SPF级SD大鼠随机分为对照组(C组)?哮喘组(A组)?黄芪低(H1组)?中(H2组)?高(H3组)剂量组,20只雄性SPF级致敏SD大鼠脾脏中分离获得CD4+T细胞,分为对照组(C组),OVA干预组(A组),黄芪干预组低(H1组)?中(H2组)?高(H3组)?HE染色观察气道病理改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞因子(IL)-4,5和IFN-γ含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定法检测T-bet和GATA-3 mRNA表达;免疫印迹(Western blot)法检测T-bet和GATA-3蛋白表达?结果:在大鼠肺组织中嗜酸粒细胞(EOS)?淋巴细胞?管壁面积/支气管管腔内周长(WA/Pi)和支气管平滑肌面积/支气管管腔内周长(ASM/Pi)A组比C组明显增多或增厚(P均< 0.01),H1?H2?H3组中不同程度的减少或减轻(P > 0.05);血清中IL-4和IL-5含量A组高于C组(P均< 0.01),H1?H2?H3组剂量组均低于A组(P均< 0.01),血清中IFN-γ含量A组远低于C组(P均< 0.01),H1?H2?H3组明显高于A组(P均< 0.01),CD4+T细胞培养上清液中H1?H2?H3组IL-4和IL-5含量均降低,同时增加IFN-γ含量,与A组比较,差异均有统计学意义(P均< 0.01);肺组织和CD4+T细胞中T-bet mRNA和蛋白表达H1?H2?H3组高于A组(P均< 0.01);而GATA-3mRNA和蛋白表达H1?H2?H3组低于A组(P均< 0.01)?结论:T细胞特异转录因子T-bet/GATA-3在哮喘中失衡表达,黄芪抑制哮喘气道炎症可能通过双向调节T-bet和GATA-3平衡来实现     

黄芪甲苷对肺纤维化小鼠α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达影响

目的:观察黄芪甲苷对肺纤维小鼠肺组织α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的影响,并初步探讨黄芪甲苷对小鼠肺纤维化抑制作用的机制。方法:通过于气管内滴注博来霉素(10 mL/kg)建立肺纤维化模型,空白组为正常饲养的小鼠,假手术组用生理盐水代替。造模后的C57bl/6小鼠随机分成空白组(正常饲养)、模型组(博来霉素造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、假手术组(生理盐水造模+0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃)、黄芪甲苷组(博来霉素造模+黄芪甲苷灌胃)和阳性对照地塞米松组(博来霉素造模+地塞米松灌胃),分别于第14天和第28天处死小鼠后取肺组织,行HE染色和Masson染色,观察小鼠肺组织肺纤维化程度,碱性水解法检测小鼠肺组织内羟脯氨酸的含量,免疫组织化学染色法检测小鼠肺组织α-SMA的表达,免疫蛋白印记法检测小鼠肺组织α-SMA、COL1、COL3的表达。结果:与空白组、假手术组相比,模型组肺纤维化分级较高,肺组织炎症反应明显,羟脯氨酸含量明显升高(P0.05)。与模型组相比,黄芪甲苷组内的羟脯氨酸含量降低(P0.05),肺组织内α-SMA、COL1、COL3的表达减少(P0.05),地塞米松组的表达降低不明显(P0.05)。结论:黄芪甲苷对肺纤维化的干预作用明显,其机制可能与减少成纤维细胞的生成和抑制胶原蛋白的沉积有关。     

基于特异性转录因子T-bet/GATA3通路探讨温肺止咳颗粒治疗哮喘的机制

目的 基于特异性转录因子T-bet/GATA3通路探讨温肺止咳颗粒治疗哮喘的疗效及可能机制。方法 将60只雄性SD大鼠,分为空白组、哮喘模型组、中药组、地塞米松组,每组各15只。通过HE染色镜下观察各组大鼠肺组织的病理改变;测定各组血清白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和干扰素-γ(Interferon-γ,INF-γ)水平;Westem-Blot检测各组肺组织T细胞特异性转录因子T-bet(T-box expressed in T cells, T-bet)和GATA3(GATA-binding protein-3,GATA3)水平;RT-PCR检测各组肺组织T-bet mRNA、GATA3 mRNA、INF-γmRNA、IL-4 mRNA水平。结果 空白组大鼠肺组织肺泡上皮细胞排列整齐,无坏死和脱落,肺泡壁无水肿或充血,肺泡腔及支气管腔内无渗出物,间质未见炎细胞浸润;哮喘模型组肺泡间质中见中度的炎细胞浸润(++),肺泡壁充血(+);中药组及地塞米松组肺泡间质及支气管黏膜下可见轻度炎细胞浸润(+)。哮喘模型组大鼠血清中IL-4含量较空白组明显增高,INF-γ含量明...     

MCMV感染对小鼠脾细胞调节性T细胞比率和Th1/Th2转录因子T-bet/GATA-3表达的影响

目的 在整体水平研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)急慢性感染对小鼠脾细胞中调节性T细胞(Treg)比率和Th1/Th2特异性转录因子T-bet/GATA-3蛋白表达的影响.方法 建立MCMV播散型感染模型,60只模型鼠分别于接种病毒后第1、3、7、14、28.45、60、75、90和120天各处死6只,分离脾细胞;另设60只正常小鼠作为模拟感染对照.流式细胞术检测Treg比率,Western印迹法检测T-bet/GATA-3蛋白表达水平.结果 Treg比率在急性感染末期(28 d)明显低于模拟感染对照组[(1.46±0.27)%vs(2.78±0.29)%,P<0.05];在感染慢性期持续表达上调,60 d时显著高于模拟感染对照组[(4.51±0.24)%vs (2.69±0.12)%,P<0.05].T-bet和GATA-3蛋白表达在感染后3 d分别增至(0.618±0.053)和(0.836±0.061),均显著高于模拟感染对照组水平[(0.205±0.026)和(0.398±0.022)];但是进入感染慢性期后均持续表达下调,在75、90和120 d时均明显低于模拟感染对照组水平.结论 感染急性期McMV上调T-bet和GATA-3的蛋白表达;感染慢性期McMV诱导Treg增殖活化,抑制Th1和Th2分化扩增,CMV诱导Treg扩增可能是其抑制宿主抗病毒免疫,导致慢性持续性感染的重要原因.     

积雪草苷对增生性瘢痕中肿瘤坏死因子αmRNA及Ⅰ型胶原表达的影响

目的 探讨积雪草苷(Asiaticoside)对人增生性瘢痕中肿瘤坏死因子α(Tumour Necrosis Factor alpha,TNF-α)mRNA及Ⅰ型胶原(Type I Collogen)表达的影响.方法 临床上收集烧伤后5-8个月增生性瘢痕标本18例,其中经积雪草苷治疗组和非积雪草苷治疗组各9例.采用原位杂交和免疫组织化学方法,分别检测增生性瘢痕中TNF-αmRNA及I型胶原的表达水平,并利用图象分析.结果 进行结果分析.结果 TNF-α mRNA在增生性瘢痕中主要表达于单核吞噬细胞胞浆,仅少部分表达于基底层细胞胞浆.经积雪草苷治疗的增生性瘢痕中TNF-αmRNA表达明显增多,胞浆浓染,统计学上明显高于非积雪草苷治疗组TNF-α mRNA表达(P＜0.01).Ⅰ型胶原表达于增生性瘢痕中,经积雪草苷治疗的增生性瘢痕中Ⅰ型胶原含量较少,排列整齐,与非积雪草苷治疗组有显著差异(P＜0.05).结论 积雪草苷能促进增生性瘢痕中TNF-α mRNA的表达,减少Ⅰ型胶原合成,达到减轻瘢痕增生的作用.     

USP15及α-SMA在青光眼滤过术后瘢痕组织中表达的实验研究

目的 检测家兔青光眼滤过手术(GFS)术后瘢痕组织中泛素特异性蛋白酶15(USP15)和α-平滑肌动蛋白(α-SMA)的表达,探讨USP15与α-SMA表达的关系.方法 健康成年家兔20只,以右眼为实验组(20只),建立GFS的动物模型,左眼作为正常对照组(10只).随机将实验组分为术后14 d组(10只)、术后28 ...     

构建中空纤维聚砜膜/Ⅰ型胶原支架中3个胶原浓度的比较

目的 Ⅰ型胶原对中空纤维聚砜膜和鼠肾小管上皮细胞NRK-52E粘附的影响.方法 按照中空纤维聚砜膜和0.20%、0.25%和0.30% 3种浓度的Ⅰ型胶原制备支架,分为4组,用原子力显微镜评价其表面的粗糙度,植入鼠肾小管上皮细胞NRK-52E培养7天,观察细胞在材料表面的生长情况,AO-EB染色荧光显微镜观察增殖细胞数目,扫描电镜观察细胞形貌.结果 0.20%、0.25%和0.30% 3种浓度的Ⅰ型胶原制备支架粗糙度均比聚砜膜组明显增加(P<0.05),3组支架上NRK-52E生长增殖的数目均比聚砜膜组明显增加(P<0.01),0.20%、0.25%和0.30%浓度Ⅰ型胶原3组间无显著性差异(P>0.05),细胞形态结构良好.结论 较低浓度(0.20%)Ⅰ型胶原构建的中空纤维聚砜膜/Ⅰ型胶原制备支架是可行的,能增加NRK-52E粘附、生长和增殖.     

人肌腱与皮肤组织及其细胞中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的比较研究

目的探讨利用皮肤成纤维细胞作为肌腱构建种子细胞的可行性.方法取外伤病人术中修剪的多余肌腱和皮肤组织,一部分用于石蜡包埋做组织学检测,一部分用酶消化法培养细胞,取第2代细胞进行细胞学检测.本实验采用偏光显微镜、免疫组织化学技术对人正常肌腱组织和皮肤组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达进行比较;采用免疫细胞化学、免疫细胞荧光、RT-PCR 技术从蛋白水平、RNA水平比较第2代人肌腱细胞和皮肤成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原的情况.结果偏光显微镜下可见肌腱组织中以粗大的Ⅰ型胶原为主,而皮肤组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原交错排列.免疫组织化学和显示石蜡包埋的肌腱组织和皮肤组织的Ⅰ型胶原染色均为强阳性,肌腱组织Ⅲ型胶原染色阴性,皮肤组织Ⅲ型胶原染色阳性.免疫细胞化学和免疫细胞荧光显示第2代肌腱细胞和皮肤成纤维细胞Ⅰ、m型胶原染色均为阳性.RT-PCR灰度分析结果示肌腱组织和皮肤组织Ⅰ型胶原灰度比值为1.25±0.03,Ⅲ型胶原肌腱组织不表达.第2代肌腱细胞与皮肤成纤维细胞Ⅰ型胶原灰度比值为1.09±0.05,Ⅲ型胶原灰度比值为0.93 ±0.08.结论人正常肌腱组织和皮肤组织中在胶原组成上均以Ⅰ型胶原为主.第2代人肌腱细胞和皮肤成纤维细胞的生物学特性相近,均合成Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原.皮肤成纤维细胞很有可能成为肌腱组织工程新的种子细胞.     

人肌腱与皮肤组织及其细胞中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的比较研究

目的探讨利用皮肤成纤维细胞作为肌腱构建种子细胞的可行性.方法取外伤病人术中修剪的多余肌腱和皮肤组织,一部分用于石蜡包埋做组织学检测,一部分用酶消化法培养细胞,取第2代细胞进行细胞学检测.本实验采用偏光显微镜、免疫组织化学技术对人正常肌腱组织和皮肤组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达进行比较;采用免疫细胞化学、免疫细胞荧光、RT-PCR 技术从蛋白水平、RNA水平比较第2代人肌腱细胞和皮肤成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原的情况.结果偏光显微镜下可见肌腱组织中以粗大的Ⅰ型胶原为主,而皮肤组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原交错排列.免疫组织化学和显示石蜡包埋的肌腱组织和皮肤组织的Ⅰ型胶原染色均为强阳性,肌腱组织Ⅲ型胶原染色阴性,皮肤组织Ⅲ型胶原染色阳性.免疫细胞化学和免疫细胞荧光显示第2代肌腱细胞和皮肤成纤维细胞Ⅰ、m型胶原染色均为阳性.RT-PCR灰度分析结果示肌腱组织和皮肤组织Ⅰ型胶原灰度比值为1.25±0.03,Ⅲ型胶原肌腱组织不表达.第2代肌腱细胞与皮肤成纤维细胞Ⅰ型胶原灰度比值为1.09±0.05,Ⅲ型胶原灰度比值为0.93 ±0.08.结论人正常肌腱组织和皮肤组织中在胶原组成上均以Ⅰ型胶原为主.第2代人肌腱细胞和皮肤成纤维细胞的生物学特性相近,均合成Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原.皮肤成纤维细胞很有可能成为肌腱组织工程新的种子细胞.     

变应性鼻炎小鼠模型鼻黏膜组织重塑和转录因子T-bet/GATA-3的表达

【目的】 建立变应性鼻炎小鼠模型,了解鼻黏膜组织重塑情况,探讨核因子T-bet/GATA-3 比值在变应性鼻炎免疫失衡中的意义?【方法】 建立卵清蛋白(OVA)诱导的变应性鼻炎小鼠模型;20只BALB/c 小鼠随机分为正常组和实验组?HE染色观察呼吸道黏膜炎症变化;ELISA法(酶联免疫吸附法)检测血浆中白细胞介素4(IL-4)和干扰素?酌(IFN-γ)的水平;Western blot法检测T-bet?GATA-3蛋白在鼻黏膜组织的表达?【结果】变应性鼻炎小鼠鼻和支气管黏膜均存在组织重塑?与正常组相比,实验组鼻黏膜出现上皮脱落,杯状细胞增生,鳞状上皮组织转化,上皮坏死,固有层和黏膜下层腺体增生,血管扩张,组织水肿,并见特征性的嗜酸性粒细胞浸润?实验组血浆中IL-4和IFN-γ的水平分别是(16.5 ± 4.1)pg/mL和(6.5 ± 1.1)pg/mL,而对照组分别是(7.3 ± 1.7)pg/mL,和(11.4 ± 3.3)pg/mL;实验组血浆中IL-4的含量明显高于对照组,差异具有显著性(P < 0.05),而IFN-γ的量低于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?对照组鼻黏膜T-bet/GATA-3蛋白表达量的比值(0.62 ± 0.17), 明显高于实验组(0.12 ± 0.03;P<0.05)?【结论】 变应性鼻炎小鼠模型鼻黏膜存在组织重塑,可能与转录因子T-bet/GATA-3表达失衡导致下游Th1/Th2细胞免疫失衡和细胞因子IL-4/IFN-γ分泌失调有关?     

阻断Smad3对转化生长因子β1诱导Ⅰ型胶原表达的影响

目的观察siRNA-Smad3对TGF-β1诱导的肌成纤维细胞（C2C12）分泌Ⅰ型胶原的影响。方法用不同浓度的TGF-β1（0、1、5和10ng/mL）干预C2C12细胞24h,200pmol/L siRNA-smad3转染C2C12细胞24h,用ELISA和RT-PCR方法测定Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达。结果0、1、5和10ng/mL TGF-β1干预C2C12细胞,Ⅰ型胶原蛋白（ng/mL）检测结果分别为（616±16）,（713±19）,（783±23）,（853±17）,Ⅰ型胶原mRNA表达（Ⅰ型胶原/β-actin光密度比值）分别为（0.93±0.08）,（1.83±0.17）,（2.50±0.29）,（2.94±0.14）,三组间相互比较P均〈0.01。200pmol/L siRNA-Smad3转染C2C12细胞24h后,用5ng/mL TGF-β1分别干预24h后检测Ⅰ型胶原蛋白：实验组、空白对照组、内对照组分别为（413±20）、（473±29）、（571±29）ng/mL;Ⅰ型胶原mRNA表达分别为（0.78±0.17）、（0.86±0.10）、（1.85±0.19）。内对照组表达增强（与实验组比较P〈0.05）。结论TGF-β1促进C2C12细胞Ⅰ型胶原合成与mRNA表达呈剂量依赖性;siRNA阻断Smad3表达,抑制了TGF-β1促进Ⅰ型胶原合成与mRNA表达的作用。     

川芎平喘合剂对哮喘患者血清Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3平衡的影响

目的:探讨川芎平喘合剂治疗哮喘的临床疗效及对患者血清Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3平衡的影响。方法:选取中医辨证为风哮夹瘀型且符合慢性持续期支气管哮喘诊断的患者,随机分为对照组和治疗组。对照组采用西医常规治疗(吸入沙美特罗/氟替卡松吸入剂),治疗组在对照组基础上加服川芎平喘合剂,疗程均为1个月。监测治疗前后两组中医证候积分、哮喘控制测试(ACT)评分、肺功能,检测外周血γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)水平及转录因子T-bet、结合蛋白-3(GATA-3)的mRNA表达变化,评价临床疗效。结果:两组中医证候积分均较治疗前显著下降(P0.01),ACT评分、肺功能指标[1秒用力呼气容积占预计值%(FEV1%)、最大呼气峰流量占预计值%(PEF%)]均较治疗前明显升高(P0.01),且治疗组的改善作用均优于对照组(P0.01或P0.05);两组血清IFN-γ、T-bet mRNA均明显升高(P0.01),血清IL-4、GATA-3 mRNA均明显降低(P0.01),且治疗组对IFN-γ/IL-4及T-bet/GATA-3的调节作用均显著优于对照组(P0.05)。治疗组总有效率为96.7%,对照组为80.0%,两组总体疗效差异有统计学意义(P0.05)。结论:川芎平喘合剂对哮喘的疗效确切,且可能与调节患者Th1/Th2及相关转录调节因子T-bet/GATA-3的平衡有关。     

转录因子GATA结合蛋白3对哮喘易感基因ADAM33表达的影响

目的:探讨转录因子GATA结合蛋白3(GATA binding protein 3,GATA3)对解整合素-金属蛋白酶33(a disintegrin and metalloproteinase 33,ADAM33)基因启动子活性及mRNA表达的影响。方法:以人正常肺上皮BEAS-2B细胞DNA为模板经PCR扩增得到ADAM33基因启动子区1 953 bp片段。通过双酶切、连接、转化等步骤将该片段克隆至pGL3-Basic载体构建ADAM33启动子重组质粒,并将其转染至人HEK293T、BEAS-2B细胞中;利用双荧光素酶报告基因技术检测HEK293T、BEAS-2B细胞中所构建的质粒启动子活性。将HEK293T、BEAS-2B细胞分为pcDNA-GATA3组和pcDNA3.1对照组,分别转染GATA3过表达质粒和空白对照质粒,用双荧光素酶报告基因技术检测荧光素酶活性;用实时荧光定量PCR检测BEAS-2B细胞中ADAM33 mRNA相对表达水平。结果:通过PCR、双酶切和测序鉴定,成功构建含ADAM33启动子片段的重组质粒;重组质粒的ADAM33启动子活性较pGL3-Basic对照组...     

氧化苦参碱对皮肤创面愈合中PCNA、α-SMA及Type Ⅰ collagen的影响

目的 探讨氧化苦参碱对小鼠皮肤创面愈合中血清增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及细胞Ⅰ型胶原蛋白(Type Ⅰ collagen)的影响.方法 昆明小鼠背部手术制备1.5 cm×1.5 cm全层皮肤缺损创面模型.自第1d始,除对照组给予等量生理盐水外,余各组分别按20、40、80 mg/kg给...     

体外诱导条件下大鼠骨髓基质细胞骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA的表达

目的　研究体外培养大鼠骨髓基质细胞诱导条件下 ,成骨分化标志骨钙素和 型胶原 m RNA水平的表达。方法　采用成骨诱导剂 (含地塞米松 10 - 8mol/ L、β甘油磷酸钠 10 mm ol/ L和抗坏血酸 AA 5 0μg/ml)对培养状态下的不同代大鼠骨髓基质细胞进行成骨诱导 ,提取 RNA,采用 RT- PCR方法 ,以β-肌动蛋白 c DNA为内参照 ,检测骨钙素和 型胶原 m RNA的表达。结果　与对照组相比 ,接受成骨诱导剂作用的大鼠骨髓基质细胞随诱导时间的延长骨钙素和 型胶原 m RNA出现高表达 ,且维生素 D为诱导骨钙素 m RNA表达的必需成分。结论　体外培养的大鼠骨髓基质细胞保持成骨未分化状态 ,无骨钙素和 型胶原 m RNA的表达 ,诱导后可向成骨分化 ,骨钙素和 型胶原 m RNA表达升高     

针刺对穴“迎香-合谷”对变应性鼻炎大鼠Th1、Th2细胞因子及转录因子T-bet/GATA-3的影响

目的：探讨“迎香-合谷”对穴对过敏性鼻炎大鼠Th1、Th2相关细胞因子及转录因子T-bet、GATA-3的影响。方法：大鼠随机分成空白组、模型组、对穴组3组。建立卵清蛋白（OVA）AR大鼠模型,观察大鼠一般情况并进行行为学评分,造模成功后第2天开始对对穴组行针刺干预,1次/d,20 min/次,共10d。干预结束后观察大鼠一般行为、行为学评分及鼻黏膜组织形态学改变,鼻腔灌洗液涂片染色后镜检计数嗜酸性粒细胞（EOS）,ELISA检测大鼠血清总IgE、IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-5含量,Western blot法和免疫组化法（IHC）检测大鼠鼻黏膜组织特异性转录因子T-bet、GATA-3蛋白水平和阳性蛋白的表达情况。结果：造模后,除空白组外,模型组、对穴组大鼠行为学观察评分均大于5分,提示造模成功。针刺对穴“迎香-合谷”干预后,对穴组、西药组大鼠行为学评分较模型组明显下降（P<0.05）。镜检示模型组鼻黏膜结构明显破坏,纤毛排列不连续,参差不齐,局部充血肿胀,上皮细胞大量脱落坏死,杯状细胞增生,有明显炎症细胞浸润。对穴组鼻黏膜病理程度较模型组明显减轻。与模型组比较,经对...     

促红细胞生成素对血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞增殖及Ⅰ/Ⅳ型胶原和纤维连接蛋白表达的影响研究

目的 探讨促红细胞生成素（EPO）对血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）诱导的系膜细胞增殖及Ⅰ型胶原（ColⅠ）、Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）和纤维连接蛋白（FN）表达的影响。方法 将体外培养大鼠肾小球系膜细胞分为4组：对照组,AngⅡ组（0.1、1.0、10.0 μmol/L）,EPO组（1、10、100 U/L）,AngⅡ+EPO组（EPO 1、10、100 U/L预处理1 h后加AngⅡ 1.0 μmol/L）。各组处理0、24、48 h时,CCK-8法检测系膜细胞增殖情况,免疫印迹法检测系膜细胞ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表达水平,ELISA法检测系膜细胞培养上清液中ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白水平。结果 单独给予AngⅡ或EPO均可刺激系膜细胞增殖,AngⅡ组亚组和EPO组亚组24、48 h时系膜细胞增殖水平均高于对照组,且48 h时高于24 h时,24 h时高于0 h时,差异均有统计学意义（P＜0.05）;单独给予AngⅡ或EPO均可促进系膜细胞合成及分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN,除EPO 1 U/L亚组Col Ⅰ蛋白表达水平与对照组间差异无统计学意义（P＞0.05）外,AngⅡ组亚组和EPO组其他亚组ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。与AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 1 U/L亚组比较,AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 10 U/L亚组和AngⅡ1.0 μmol/L+EPO 100 U/L亚组在24、48 h时系膜细胞增殖水平及ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表达水平均下降,差异有统计学意义（P＜0.05）,但与对照组及同浓度单纯EPO亚组比较,AngⅡ1.0 μmol/L+EPO组各亚组24、48 h时系膜细胞增殖水平及ColⅠ、Col Ⅳ和FN蛋白表达水平均增高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 Ang Ⅱ能刺激系膜细胞增殖,促进系膜细胞合成及分泌ColⅠ、Col Ⅳ和FN,EPO亦有一定程度类似作用,但两者同时存在时,EPO可拮抗AngⅡ诱导的系膜细胞增殖及ColⅠ、Col Ⅳ和FN的合成及分泌,提示EPO除可纠正肾性贫血外,可能对AngⅡ诱导的肾小球硬化具有抑制作用而保护肾功能。     

卤夫酮对肝硬化大鼠Ⅰ型胶原、金属蛋白酶组织抑制剂-1和α-肌球蛋白基因表达的影响

目的 探讨卤夫酮预防大鼠肝硬化的效果和机制.方法 60只雌性SD大白鼠随机分为3组,每组20只,分别建立正常组、肝硬化组和卤夫酮组动物模型.采用RT-PCR法检测3组肝脏Ⅰ型胶原、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1和α-肌球蛋白(α-SMA)的mRNA表达.结果 RT-PCR检测显示肝硬化组Ⅰ型胶原、TMP-1和α-SMA分别较正常组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),而卤夫酮组较肝硬化组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);3项指标在正常组和卤夫酮组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 卤夫酮通过抑制Ⅰ型胶原、TIMP-1和α-SMA mRNA的转录,具有预防肝纤维化或肝硬化的作用.