P300在肾病综合征糖皮质激素耐药中的作用

目的观察原发性肾病综合征(PNS)激素敏感与激素耐药组P300表达的差异,探讨P300在肾病综合征糖皮质激素耐药中的作用,为揭示PNS激素耐药发生机制提供理论依据。方法采用免疫组化法检测正常对照组肾组织及40例PNS患儿(激素敏感组20例,激素耐药组20例)肾活检组织中P300表达差异。结果正常肾组织仅偶见肾小管上皮细胞P300呈阳性表达;PNS患儿肾组织均存在不同程度P300表达,主要分布于肾小管上皮细胞,肾小球系膜区表达微弱或未表达,其他肾固有细胞未见P300表达;激素敏感组肾小管上皮细胞P300表达较激素耐药组明显增多(P<0.01),P300表达密集部位的肾小管形态正常,结构完整;肾小管上皮细胞P300阳性表达与肾小管间质病理积分呈负相关(P<0.01)。结论P300蛋白主要通过肾小管上皮细胞促进GC效应发挥;PNS患儿肾小管上皮细胞P300表达下降,可能是导致GC耐药及增加GC对肾小管上皮细胞损伤的机制之一。     

原发性肾病综合征患儿外周血GRα、GRβ的表达及临床意义

目的探讨糖皮质激素受体α(GRα)和β(GRβ)在原发性肾病综合征(PNS)中的作用及其介导耐药的可能机制。方法选择15例糖皮质激素(GC)敏感型PNS(SSNS)患儿和15例GC耐药型PNS(SRNS)患儿,以及10例健康对照儿童,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组外周血单个核细胞(PBMC)中GRα和GRβ mRNA的表达,并分析其与24 h尿蛋白定量(24 hUTP)及肾脏病理积分的关系。结果 PNS患儿PBMC中GRα和GRβ均有表达,并以GRα为主;三组间GRα mRNA的表达无差异(P>0.05);而SRNS组GRβ mRNA、GRα/GRβ水平均高于SSNS和对照组(P均<0.05)。GRβ mRNA的表达与24 hUTP和病理积分呈正相关(P<0.05),即GRβ mRNA的表达越高,病理积分越高,病理损伤越大。结论 GRβ mRNA可以作为监测PNS患儿病情以及预后的指标。针对SRNS患儿PBMC中GRβ升高,增加激素受体敏感性,有望为SRNS的治疗提供新的思路。     

肾病综合征患儿肾组织中AP-1及TGF-β1的表达与激素疗效关系的探讨

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿肾组织激活蛋白_1(AP_1)、转化生长因子_β1(TGF_β1)的表达与激素耐药、肾脏病理损害的相关性,以期阐明PNS激素耐药的可能机制。方法应用非生物素免疫组化ElivisionTMplus法检测48例PNS(SSNS8例,SRNS20例,SDNS20例)患儿肾组织中AP_1亚基c_Jun和TGF_β1的表达水平,用计分法半定量评价肾脏的病理损害程度。结果①肾小球内和肾小管间质内AP_1和TGF_β1的表达,均为SRNS>SDNS>SSNS(P<0.01)。②SSNS、SDNS、SRNS3组肾小球的病理损害分数分别为4.25±1.49,5.25±1.65,8.10±2.57(SRNS与SDRS比较P<0.01,SDRS与SSNS比较P>0.05);SSNS、SDNS、SRNS3组肾小管间质的病理损害分数分别为4.13±0.99,6.90±1.55,11.10±2.94(P<0.01)。③肾组织中AP_1和TGF_β1的表达与肾小球和肾小管间质病理损害的程度呈正相关(相关系数分别为:0.463,0.352;0.547,0.646,P均<0.05)。结论SRNS患儿肾组织中AP_1和TGF_β1的表达增强,并与肾脏病理损害程度密切相关。     

肾病综合征患儿外周血单个核细胞糖皮质激素受体β表达

目的　探讨原发性肾病综合征 (NS)患儿外周血单个核细胞 (PBMC)内糖皮质激素受体 β(GRβ)mR NA表达与激素 (GC)治疗效应的关系。方法　RT PCR法检测NS患儿PBMC糖皮质激素受体α(GRα)和GRβmRNA表达水平。结果　GC不敏感NS组PBMC内GRβmRNA表达显著高于GC敏感组 (P <0 .0 1) ;GC敏感性与GRβmRNA表达之间呈明显负相关 (r=2 2 .75　P <0 .0 1)。结论　NS患儿外周血PBMC内GRβmRNA不适当表达增加 ,可能是GC治疗不敏感的原因之一     

肾病综合征患儿外周血单个核细胞内GR α和GR β表达的意义

目的　探讨原发性肾病综合征 (INS)患儿外周血单个核细胞 (PBMC)内两种糖皮质激素受体 (GR)亚型———GRα和GRβ表达水平与糖皮质激素治疗效应之间的关系。方法　应用免疫细胞化学方法、WesternBlot和凝胶电泳迁移率变化方法 (EMSA) ,分别检测不同激素效应INS患儿和正常对照组儿童GRα和GRβ免疫阳性的PBMC数目、PBMC细胞内GRα和GRβ蛋白质表达和GR DNA连接活性。结果　 (1)INS患儿PBMC内同时有GRα和GRβ的表达 ,并以GRα表达为主。 (2 )激素敏感型INS患儿GRα阳性的PBMC细胞数为 (5 0 0± 4 5 ) ,激素抵抗型INS患儿为 (4 7 0± 5 5 ) ,两组相比差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ;而激素抵抗型INS患儿GRβ阳性PBMC细胞数 (2 2 0± 3 5 )明显高于激素敏感型INS患儿 (7 5± 2 0 ) (P <0 0 1)。 (3)WesternBlot实验结果显示 ,激素抵抗型INS患儿PBMC核内GRα蛋白量明显低于激素敏感型INS患儿 ,而GRβ蛋白量却明显高于激素敏感型患儿。(4 )激素抵抗型INS患儿的GR DNA连接能力明显低于激素敏感型患儿。结论　INS患儿PBMC内GRα和GRβ表达比例失调、GRβ表达亢进可能与糖皮质激素抵抗的发生有关     

P-糖蛋白170在原发性肾病综合征患儿糖皮质激素耐药中的作用

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿治疗前外周血单个核细胞(PBMC)P-糖蛋白170(P-gp170)与糖皮质激素(GC)耐药的关系。方法采用流式细胞仪(FCM)检测30例PNS患儿PBMCP-gp170的表达,并分析其与复发次数、24h尿蛋白定量(24hUTP)及肾脏病理积分的关系。根据随访结果分成激素耐药型肾病综合征(SRNS)和激素敏感型肾病综合征(SSNS)2组,各15例。10例健康体检儿童作为正常对照组。结果SRNS组患儿PBMCP-gp170的表达量显著高于SSNS组患儿(P均<0.05)。PNS患儿激素治疗前PBMCP-gp170的表达量与复发的次数呈正相关(r=0.399,P<0.05);SRNS患儿激素治疗前PBMCP-gp170的表达量与24h尿蛋白定量(24hUTP)及肾脏病理积分均呈正相关(r=0.576、0.529,P均<0.05)。结论PBMCP-gp170表达增高可能与PNS患儿GC耐药有关,可作为PNS患儿GC耐药的标志之一。PBMCP-gp170表达增高与PNS活动、复发及病理有关,可做为临床判断预后的指标。     

肾病综合征患儿外周血单个核细胞内GRα和GRβ表达的意义

目的探讨原发性肾病综合征(INS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)内两种糖皮质激素受体(GR)亚型--GRα和GRβ表达水平与糖皮质激素治疗效应之间的关系.方法应用免疫细胞化学方法、WesternBlot和凝胶电泳迁移率变化方法(EMSA),分别检测不同激素效应INS患儿和正常对照组儿童GRα和GRβ免疫阳性的PBMC数目、PBMC细胞内GRα和GRβ蛋白质表达和GR-DNA连接活性.结果(1)INS患儿PBMC内同时有GRα和GRβ的表达,并以GRα表达为主.(2)激素敏感型INS患儿GRα阳性的PBMC细胞数为(50.0±4.5),激素抵抗型INS患儿为(47.0±5.5),两组相比差异无显著意义(P>0.05);而激素抵抗型INS患儿GRβ阳性PBMC细胞数(22.0±3.5)明显高于激素敏感型INS患儿(7.5±2.0)(P<0.01).(3)WesternBlot实验结果显示,激素抵抗型INS患儿PBMC核内GRα蛋白量明显低于激素敏感型INS患儿,而GRβ蛋白量却明显高于激素敏感型患儿.(4)激素抵抗型INS患儿的GR-DNA连接能力明显低于激素敏感型患儿.结论INS患儿PBMC内GRα和GRβ表达比例失调、GRβ表达亢进可能与糖皮质激素抵抗的发生有关.     

原发性肾病综合征糖皮质激素耐药机制研究进展

糖皮质激素耐药的确切机制尚未完全明了。现就近年来有关原发性肾病综合征糖皮质激素耐药的可能机制，包括糖皮质激素受体（GR）数量、结构异常，GR表达尤其GRβ表达异常，P－糖蛋白170、多药耐药基因、11β－羟基类固醇脱氢酶、GR信号转录调控异常，肾病综合征临床并发症和病理特征，单基因突变等与激素耐药的关系作一概述。     

Pax2、增殖细胞核抗原、细胞凋亡在肾病综合征激素耐药中的作用

目的观察原发性肾病综合征（PNS）激素敏感与激素耐药组患儿Pax2、增殖细胞核抗原（PCNA）表达及细胞有效凋亡率，探讨Pax2在肾脏檐皮质激素（GC）耐药中的作用。方法采用免疫组织化学法观察PNS患儿40例肾活检组织Pax2、PCNA表达，采用荧光显微镜检测细胞凋亡。结果激素敏感组Pax2适量表达，与PCNA阳性表达呈正相关,激素耐药组，Pax2呈过度表达，与PCNA阳性表达无明显相关性。Pax2始终与细胞凋亡旱负相关。结论Pax2适量表达，通过促进细胞增殖及抑制凋亡，修复受损的小管-间质。Pax2过度表达，细胞增殖与凋亡进一步减少，导致肾小管病理改变加重，使其对激素不敏感共至耐药。     

糖皮质激素对原发性肾病综合征患儿血清细胞因子的影响

目的探讨糖皮质激素(激素)对原发性肾病综合征(PNS)患儿血清IL-1-、6、转化生长因子-β1(TGF-β1)和TNF-α的影响。方法将PNS患儿25例分为激素治疗前和治疗后2组,比较3种不同病理类型血清细胞因子水平,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测其血清IL-1-、6、TGF-β1及TNF-α水平。结果激素治疗前后PNS患儿血清IL-1-、6、TGF-β1、TNF-α水平差异有显著性(P<0.01)。微小病变型肾病(MCD)、膜性增生性肾小球肾炎(MsPGN)、局灶性节段性肾小球硬化(FSGS)3种不同病理类型血清IL-1-、6、TNF-α水平治疗前后差异无显著性(P>0.05);MCD治疗前后血清TGF-β1水平明显低于MsPNG、FSGS(P<0.01),治疗前MsPNG血清TGF-β1水平与FSGS差异无显著性(P>0.05),治疗后FSGS血清TGF-β1水平高于MsP-NG(P<0.01)。结论激素对PNS患儿血清多种细胞因子有抑制作用;不同病理类型PNS TGF-β1表达水平不同;FSGS表达最高,对激素治疗反应最差。     

急性淋巴细胞白血病患儿Bim及c-Myc表达水平与糖皮质激素敏感性的关系

目的 探讨ALL患儿Bim及c-Myc蛋白表达水平与糖皮质激素(GC)敏感性的关系,研究Bim 表达水平是否可作为判断早期GC敏感性的客观指标,从而指导临床治疗和判断预后.方法 采用Western blot方法检测1 μmol·L-1地塞米松作用于人T-ALL GC敏感细胞株(CEM-C7)和GC耐药细胞珠(CEM-C1) 0 h、12 h、24 h、36 h、48 h及72 h后Bim和c-Myc蛋白表达的变化;以30例初诊ALL患儿为研究对象,采用Western blot分析ALL患儿GC诱导前、GC诱导后24 h、48 h、72 h以及第8天Bim蛋白表达情况,探讨Bim表达水平与ALL患儿GC敏感性的关系.结果 地塞米松作用CEM-C7 后12 h Bim表达量开始增加,直到72 h仍维持在较高水平,c-Myc表达水平在地塞米松作用后24 h明显下降,到72 h降至最低,而在GC耐药细胞CEM-C1中 Bim和c-Myc表达水平均无变化.30例初诊ALL患儿,25例GC敏感,5例GC不敏感,Bim表达水平在GC敏感组GC诱导前及诱导后24 h均高于GC不敏感组,差异均有统计学意义(Pa<0.05),但在GC诱导后48 h、72 h及第8天,2组Bim表达水平比较差异均无统计学意义.GC敏感组诱导后不同时间点未发现Bim表达呈增高趋势.结论 GC通过上调Bim表达及抑制c-Myc的表达,而诱导ALL细胞凋亡;Bim有可能作为判断ALL患儿早期GC敏感与否的客观指标,从而指导临床治疗及判断预后.     

儿童原发性肾病综合征肾组织CD2AP表达与足细胞损伤相关性的初步探讨

目的观察原发性肾病综合征(PNS)患儿肾组织CD2AP蛋白和mRNA的表达,探讨其与足细胞损伤的关系。方法以2012年1月至2013年6月上海市儿童医院收治的PNS且行肾活检的病例为PNS组,以同期我院行泌尿系统肿瘤切除患儿为对照组,取远离肿瘤并病理确认为正常肾组织。PNS组和对照组均行常规切片染色,光镜观察肾脏组织病理改变,电镜观察足细胞的结构变化,分别采用q PCR和免疫组化测定肾组织CD2AP mRNA和蛋白的表达。PNS组CD2AP mRNA表达与血清白蛋白(ALB)、SCr、三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、补体C3、24 h尿蛋白定量和肾小球滤过率(e GFR)行相关性分析。结果 PNS组18例、对照组11例进入分析,两组性别和年龄差异无统计学意义。1PNS组肾组织CD2AP蛋白的表达较对照组降低,(1.302±0.885)vs(2.24±1.18),P0.05,且病理表现为局灶节段性硬化(FSGS)的PNS患儿CD2AP蛋白表达最低。2PNS组肾组织CD2AP mRNA的表达较对照组下调,(0.008 58±0.006 12)vs(0.019±0.012),P0.05。3PNS组肾组织CD2AP mRNA表达与血清TG(r=-0.527,P0.05)、24 h尿蛋白定量(r=-0.602,P0.01)呈负相关,与肾组织CD2AP的蛋白表达呈正相关(r=0.788,P0.01),而与血清Alb、TC、补体C3、GFR和SCr无显著相关性。结论 PNS患儿肾小球足细胞中CD2AP的蛋白和mRNA表达降低,特别是病理表现为FSGS的患儿,可能对足细胞病变的诊断有一定帮助。CD2AP的表达量可能与PNS临床指标相关。     

狼疮性肾炎患儿肾组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白PDCD5、Caspase-3的表达

目的探讨狼疮性肾炎(LN)肾脏细胞凋亡与细胞增殖的关系,加强LN发病机制的认识。方法用原位末端标记法(TUNEL)检测31例LN患儿及9例对照的肾组织细胞凋亡,用免疫组化及图像分析的方法检测PCNA(增殖细胞核抗原)及PDCD5、Caspase3的表达。结果(1)LN患儿肾组织中肾小球和肾小管的凋亡细胞、增殖细胞数、增殖细胞数/凋亡细胞数(P/A值)均明显高于对照组(LN组及对照组凋亡细胞、增殖细胞数、P/A值在肾小球分别为0.86±0.26比0.14±0.09,8.45±2.83比0.47±0.25,10.01±2.96比3.37±1.93,均P<0.01;在肾小管分别为1.16±0.42比0.16±0.07,13.73±3.54比1.32±0.15,12.81±3.91比8.94±1.79,均P<0.05)。(2)PDCD5在LN患儿肾小球的表达强度与对照组相比差异无统计学意义(0.09±0.05比0.08±0.02,P>0.05),在肾小管的表达强度明显低于对照组(0.13±0.05比0.21±0.07,P<0.01)。(3)Caspase3在LN患儿肾小球、肾小管的表达强度明显高于对照组(肾小球0.22±0.07比0.05±0.02,肾小管0.08±0.03比0.05±0.01,均P<0.01)。(4)直线相关分析显示:全部观察标本中肾小球凋亡细胞数与Caspase3的表达强度呈正相关(r=0.718,P<0.01),与PDCD5的表达强度无显著相关性(r=0.054,P>0.05);全部观察标本中肾小球、肾小管PDCD5的表达强度均与肾小球、肾小管Caspase3的表达强度无明显相关性(r=0.061,P>0.05,r=0.049,P>0.05)。多元逐步回归分析显示:在α=0.15水平上,全部观察标本中肾小管凋亡细胞数与PDCD5的表达强度呈负相关(回归系数为-3.686,t=-2.875,P=0.007),与Caspase3的表达强度呈正相关(回归系数为4.761,t=1.772,P=0.085)。结论(1)LN患儿肾组织细胞凋亡虽然比对照组增加,但相对细胞增殖来说表现为不足;(2)Caspase3参与了LN患儿肾组织肾小球、肾小管的细胞凋亡;(3)尚不能证实PDCD5参与了LN患儿肾小球细胞凋亡;但可能参与了肾小管的细胞凋亡。     

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目的探讨选用不同中效糖皮质激素(GC)诱导缓解治疗儿童原发性肾病综合征(PNS)的疗效。方法 2008年11月至2010年2月于天津市儿童医院住院治疗的初治PNS患儿54例,随机分为泼尼松组、曲安西龙组、甲泼尼龙组,3组分别给予相应足量激素治疗。动态监测各组24h尿蛋白定量(Upro)、血浆白蛋白(Alb)、血浆胆固醇(Tcho)的变化,同时记录服用GC后尿蛋白转阴的时间。采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患儿外周血单个核细胞(PBMCs)中糖皮质激素受体(GR)GRα和GRβ的mRNA表达水平。结果甲泼尼龙对24h Upro的降低和血浆Alb的升高作用优于曲安西龙和泼尼松,尿蛋白转阴时间甲泼尼龙组及曲安西龙组较泼尼松组短,甲泼尼龙上调GRα的能力优于曲安西龙及泼尼松,而甲泼尼龙及曲安西龙抑制GRβ表达亢进的能力优于泼尼松。结论服用GC后,尿蛋白的转阴时间、Upro与血Alb的动态变化、GR的水平均可作为PNS诱导缓解期综合评价GC疗效的有价值的客观指标。初治儿童PNSGC诱导缓解的治疗阶段选用甲泼尼龙或曲安西龙的疗效优于泼尼松。     

原发性肾病综合征患儿激素冲击治疗前后白细胞介素8基因表达

目的　观察糖皮质激素冲击治疗肾病综合征短时间内对白细胞介素 8(IL 8)在基因转录和蛋白水平的影响。方法　选择未用过或至少 3个月内未用过糖皮质激素的原发性肾病综合征患儿 30例为观察组 ,应用甲泼尼龙冲击治疗 ,分别在治疗前和冲击结束第 2天采血 ,应用ELISA法检测静脉血中IL 8的浓度 ;外周血单个核细胞 (PBMC)IL 8mRNA的表达则采用半定量逆转录聚合酶链反应的方法测定。同时设 18名健康儿童为对照组。结果　 (1)甲泼尼龙冲击治疗前患儿血清IL 8含量为 2 9 5 9(7 14～ 35 2 0 8)ng/L ,治疗后为 10 80 (4 2 7～ 77 86 )ng/L ,较治疗前明显降低 (u =4 2 6 ,P <0 0 1) ;治疗前后患儿血清IL 8含量均高于正常对照组 [10 37(5 4 6～ 33 31)ng/L],差异有显著意义 (u=4 5 3、2 73,P <0 0 1)。 (2 )甲泼尼龙冲击治疗前IL 8mRNA表达为 0 86 2 (0 776～ 0 95 ) ,治疗后为 0(0～ 0 75 4 ) ,前后比较差异有显著意义 (u =3 90 2 ,P <0 0 1)。结论　肾病综合征患儿血清IL 8和PBMCIL 8mRNA表达水平均高于对照组 ,提示IL 8可能参与小儿肾病综合征的发病过程。甲泼尼龙冲击治疗后血清IL 8和PBMCIL 8mRNA表达水平均低于治疗前 ,提示甲泼尼龙冲击疗法对肾病综合征患儿IL 8在蛋白合成和基因转录两个水平上     

雷帕霉素逆转急性淋巴细胞白血病CEM-C1细胞对糖皮质激素耐药的研究

目的探讨雷帕霉素是否可以逆转地塞米松(DEX)耐药的急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞株CEM-C1细胞的GC耐药性。方法以儿童T-ALL GC耐药株CEM-C1和GC敏感株CEM-C7为研究对象,MTT法检测不同浓度(1 000 ng/ml、100 ng/ml、10 ng/ml、1 ng/ml和0.1 ng/ml)雷帕霉素及其联合1μmol/L地塞米松(DEX)作用后对细胞增殖的影响;细胞离心甩片瑞氏染色法观察细胞形态学变化;Annexin V/PI染色法检测对细胞凋亡的影响;PI染色法检测细胞周期改变。结果①不同浓度雷帕霉素作用于CEM-C1和CEM-C7细胞,对细胞生长的抑制作用均呈时间和浓度依赖性,联合应用1μmol/L DEX后,这一生长抑制作用显著增强,24 h IC50约为100 ng/ml。②以终浓度100 ng/ml雷帕霉素作用于CEM-C1和CEM-C7细胞18、24及48 h,细胞形态学与对照相比均无明显变化;Annexin V-PI双染流式细胞术检测均未见明显凋亡;细胞周期测定发现两种细胞均阻滞于G1期,S期细胞比例均明显降低。③以终浓度100 ng/ml雷帕霉素联合1μmol/L DEX作用于CEM-C1细胞后,瑞氏染色发现CEM-C1细胞于24 h出现细胞核改变,48 h出现明显凋亡;Annexin V/PI双染细胞凋亡检测显示细胞凋亡率较单用雷帕霉素及DEX时显著增加,18 h时早期凋亡细胞开始增多,24 h时最为明显;细胞周期测定显示S期细胞比率较单用雷帕霉素时显著降低,而G1期细胞显著增多。结论雷帕霉素能够逆转CEM-C1细胞对GC的耐药性,其机制有待进一步深入研究。     

Change of transforming growth factor beta in peripheral blood mononuclear cell of children with nephrotic syndrome and its significance

OBJECTIVE: Idiopathic nephrotic syndrome (INS) is a common glomerular disease. The pathogenesis of the disease remains unclear. Recent studies indicate that transforming growth factor beta (TGF beta) is the main cytokine involved in glomerular disease. It plays an important role in the development of INS and in occurrence of glomerulosclerosis. The present study aimed to study changes and significance of TGF beta in children with idiopathic nephrotic syndrome (INS). METHODS: Totally 35 cases with INS (13 males, 22 females) were studied. The age of onset was between 2 years and 1 months and 14 years with an average of 8 years and 3 months. The active stage group had 35 cases and the remission stage groups had 25 cases. The cases in active stage group had first onset of the disease with obvious clinical symptoms and abnormal laboratory findings without use of corticosteroids. The cases in remission stage group were asymptomatic without abnormal laboratory findings. Protein in urine was negative over 4 weeks after oral administration of prednisone for 8 weeks. Twenty five cases were steroid responsive and 10 cases were steroid non-responsive among the 35 cases. Thirty healthy young children were enrolled as control. TGF beta was detected by ELISA in peripheral blood mononuclear cell (PBMC) culture medium. The TGF beta mRNA gene expression was measured by in situ PCR in PBMC. RESULTS: (1) Concentration of TGF beta(247 +/- 26) ng/L and TGF beta mRNA expression (0.57 +/- 0.18) in active stage of simple type or nephritis type INS were higher than those of remission stage and control (P < 0.01). Concentration of TGF beta[(125 +/- 16) ng/L] and TGF beta mRNA expression (0.30 +/- 0.12) in remission stage were higher than that of control (P < 0.05). (2) The level of TGF beta protein in nephritis type [(275 +/- 26) ng/L] was significantly higher than that in simple type [(220 +/- 18) ng/L] in active stage INS (t = 6.45, P < 0.01). No significant difference in TGF beta mRNA expression was found between the nephritis type (0.58 +/- 0.15) and simple type (0.55 +/- 0.16) in active stage INS, either (P > 0.05). But these two types were different from the control (P < 0.01). (3) Concentration of TGF beta and TGF beta mRNA expression after therapy was clearly lower than that before therapy in steroid responsive group (P < 0.01). Whereas no significant change was seen in steroid non-responsive group. Both indicators were higher in steroid non-responsive group than in steroid responsive group whether before or after therapy. CONCLUSION: TGF beta may play an important role in the mechanism of INS and its level in PBMC can be used as an immunological indicator for the illness state, therefore, determination of TGF beta level and mRNA may be of some clinical significance.     

血管紧张素受体拮抗剂对应用生长激素之阿霉素肾病大鼠的肾保护作用

目的　探讨生长激素 (GH)对阿霉素肾病大鼠肾损伤的影响及作用机制 ,同时研究血管紧张素受体拮抗剂对应用GH的阿霉素肾病大鼠的肾保护作用。方法　建立阿霉素肾病大鼠模型。将实验动物分为正常对照组、模型组 (阿霉素肾病 )、GH组 (阿霉素肾病 +GH)、伊贝沙坦组 (阿霉素肾病 +GH +伊贝沙坦 )。检测各组第 3、6、9周末的 2 4h蛋白尿。第 9周末检测血压、血白蛋白、甘油三酯、总胆固醇酯、尿素氮、肌酐 ,肾组织血管紧张素转化酶 (ACE)活性和血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )浓度。观察肾脏病理损害情况。免疫组化法测定肾内转化生长因子 β1(TGFβ1)、Ⅳ型胶原 (colⅣ )、纤维连接蛋白 (FN)的蛋白表达水平。结果　GH组的肾小球硬化指数 (49 4± 9 8)明显高于模型组 (12 8± 5 5 ) (P <0 0 1) ,而伊贝沙坦组 (2 6 2± 7 5 )则低于GH组 (P <0 0 1)。各组间 2 4h蛋白尿 ,高脂血症 ,低蛋白血症的指标变化与肾脏损伤程度一致。GH组还出现明显的氮质血症 ,而其余 3组无氮质血症。GH组和伊贝沙坦组的肾组织ACE活性 [(2 8 1± 4 1)U/mg蛋白 ;(2 7 6± 3 4 )U/mg蛋白 ]、AngⅡ浓度 [(17 8± 3 3)pg/mg蛋白 ;(2 7 3± 5 1)pg/mg蛋白 ]明显高于模型组 [(14 6± 4 4 )U/mg蛋白 ;(8 3± 1 9)pg/mg蛋白 ](P <0 0 1)。免     

Effect of macrophage inflammatory protein-1alpha and its mRNA on airway inflammation of mouse asthma model

OBJECTIVE: To study the effect of macrophage inflammatory protein-1alpha(MIP-1alpha) and its mRNA on airway inflammation of mouse with induced asthma. METHODS: Seventy male BALB/C mice were randomly divided into the control group and asthma group (including 7 subgroups, 10 mice each). The control group included group A(24) (the lavaging subgroup was sacrificed 24 h after the last challenge) and group A(0) (the non-lavaging subgroup was sacrificed from 18 h to 24 h after the last challenge); asthma group included group B(3) (the lavaging subgroup was sacrificed 3 h after the last challenge), group B(8) (the lavaging subgroup was sacrificed 8 h after the last challenge), group B(24) (the lavaging subgroup was sacrificed 24 h after the last challenge), group B(36) (the lavaging subgroup was sacrificed 36 h after the last challenge) and group B(0) (the non-lavaging subgroup was sacrificed from 18 h to 24 h after the last challenge). In the experiment, the mice model of asthma was established by the ovalbumin (OVA) challenge methods. Eosinophils (EOS) numbers and differentiated cell numbers in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were counted; the concentrations of MIP-1alpha in serum and BALF were measured by sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (sandwich ELISA); the protein expressions of MIP-1alpha were detected by immunohistochemical techniques; the mRNA expressions of MIP-1alpha were determined by in situ hybridization technique. RESULTS: (1) The concentrations of MIP-1alpha in BALF and serum of group B(3) [(30.2 +/- 4.2) pg/ml, (30.8 +/- 4.6) pg/ml], group B(8) [(35.3 +/- 4.9) pg/ml, (34.9 +/- 5.1) pg/ml], group B(24) [(42.9 +/- 5.8) pg/ml, (41.7 +/- 6.3) pg/ml] and group B(36) [(37.8 +/- 4.7) pg/ml, (35.7 +/- 4.9) pg/ml] were significantly higher than those of group A(24) [(20.9 +/- 3.8) pg/ml, (22.4 +/- 4.3) pg/ml] (P < 0.01); the concentrations of MIP-1alpha in BALF and serum went up at 3 h, reached peak at 24 h, and had descended at 36 h. (2) Immunohistochemistry showed that the protein expressions of MIP-1alpha around the bronchus of group B(0) [(26.4 +/- 6.2)%] were significantly elevated as compared to those of group A(0) [(10.3 +/- 2.5)%] (P < 0.01), the epithelial cell was the chief expression cell. (3) In situ hybridization showed that the mRNA expressions of MIP-1alpha around the bronchus of group B(0) [(23.9 +/- 4.2)%] were significantly increased when compared to those of group A(0) [(8.7 +/- 1.8)%] (P < 0.01), the epithelial cell was the chief expression cell. (4) There was a significant correlation between the concentrations of MIP-1alpha and the numbers of EOS in BALF and between the concentrations of MIP-1alpha and the percentage of EOS numbers in the total cell numbers (EOS%) in BALF. CONCLUSIONS: MIP-1alpha protein and MIP-1alpha mRNA were found strongly expressed in mouse asthma model, the epithelial cell was the chief expression cell; the kinetic characteristic of MIP-1alpha showed that its level increased at 3 h, reached peak at 24 h and declined at 36 h; MIP-1alpha and EOS gathering had a significant correlation.