重组β-防御素2多肽对脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡的影响

目的：观察重组β-防御素2多肽预处理对脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡的影响。方法：SPF级SD大鼠48只随机分成对照组和防御素组，采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症模型，防御素组在CLP前48h经气管插管气道滴注10^7PFU重组腺病毒（含有β-防御素2编码基因），而对照组则同法给予对照腺病毒（不合β-防御素2编码基因）。分别于CLP后0、12、36和72h处死大鼠，取肺组织，采用透射电镜，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡，采用电镜、苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织病理变化。结果：TUNEL检测显示，对照组大鼠CLP后12、36和72h肺组织细胞凋亡指数显著增加（P〈0．01）；与对照组相比，防御素组CLP后相应时间点肺组织细胞凋亡指数显著降低（P〈0．05）。HE染色可见，两组大鼠CLP后12、36和72h肺泡及肺泡间质充血、水肿，炎症细胞渗出，肺泡腔不同程度狭窄。与对照组相比较，防御素组相应时间点肺组织内炎症细胞渗出减少，间质水肿减轻。结论：重组β-防御素2多肽预处理能抑制脓毒症肺组织的细胞凋亡，对急性肺损伤（ALI）具有保护作用。     

不同目标血糖脓毒症大鼠肝、肺损伤的病理分析

目的：利用盲肠结扎穿孔伴严重腹腔感染造成的脓毒症模型,探讨胰岛素不同目标血糖对脓毒症肝、肺组织形态的影响。方法选取40只SD大鼠随机分为5组,通过盲肠结扎穿孔术（CLP）法制备大鼠脓毒症模型,按分组进行不同处理：假手术组（Sham组）,CLP组,目标血糖控制A组、B组和C组,每组8只。CLP术后12 h处死,通过组织形态观察,对肝、肺损伤不同病理积分进行评估。结果肝、肺组织病理总评分在CLP及血糖处理后明显高于Sham组（P＜0．05）。在单项肝、肺的观察指标中,A组与Sham组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）;3组血糖组肝、肺损伤程度随着血糖水平升高病变渐进加重,两两比较差异有统计学意义（P＜0．05）。肺损伤主要表现为肺泡壁毛细血管充血、肺小叶及间质水肿、支气管炎,CLP组与血糖控制A、B、C 3组比较,与A、B组差异有统计学意义（P＜0．05）,与C组差异无统计学意义（P＞0．05）。肝损伤主要为肝细胞水样变性及脂肪变性,CLP组与血糖控制A、B、C 3组比较,差异有统计学意义（P＜0．05）,CLP组出现了明显碎片状坏死。结论脓毒症大鼠的肝、肺损伤程度随着血糖水平升高逐渐加重,控制血糖可使脓毒症模型鼠的肝、肺的损伤减低。     

血管内皮凋亡对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的影响

目的：从肺微血管内皮细胞凋亡可能对肺造成的潜在影响着手，研究重症急性胰腺炎(severe acute panereatitis，SAP)肺微循环变化与急性肺损伤的密切关系．方法：将SAP大鼠分别在1，3，5，7，9和12h点剖杀，取肺组织行组织病理观察、组织含水量、微血管通透性等检测；并检测肺组织中血管内皮细胞凋亡及凋亡相关基因Bax及Bcl-2的蛋白表达．结果：SAP制模后肺损伤程度随时间而逐渐加重，肺组织含水量及微血管通透性逐渐升高；肺组织血管内皮细胞凋亡随时间呈增加的趋势；Bax蛋白表达与凋亡变化的规律一致，Bcl-2蛋白表达则与凋亡变化的规律相反．结论：SAP合并急性肺损伤进展过程中，肺血管内皮细胞凋亡所引起的微循环障碍是引起肺损伤的重要原因之一．     

血必净通过上调血红素氧合酶-1减轻脓毒症诱导肺损伤

目的 探讨血必净（XBJ）是否能通过上调血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）的表达,来减轻脓毒症小鼠的肺损伤（ALI）。方法 本实验在哈尔滨医科大学附属第一医院肝脾外科中心实验室进行。采用改良盲肠结扎穿孔法（CLP）制作脓毒症小鼠模型。48只雄性C57BL/6小鼠,随机分为假手术组（Sham组,n=12）、模型组（CLP组,n=12）、血必净组（XBJ+CLP,n=12）和HO-1抑制剂组（XBJ+ZnPP+CLP组,n=12）。血必净进行干预时,造模前2h经尾静脉注射血必净（2ml/kg）,HO-1特异抑制剂锌卟啉ZnPP（40μmol/kg）在给予血必净1h后经腹腔注射,其余各组给予等体积的生理盐水。术后12h后处死,光镜下观察肺组织的形态学改变,检测肺组织的湿干重比值（W/D）,测定小鼠血清中的炎性介质（TNF-α、IL-6）,采用Western blot法以及免疫组化法检测肺组织HO-1的表达情况,Western blot法检测HO-1上游转录因子——核因子E₂相关因子2（Nrf-2）的表达情况。用单因素方差分析（ANOVA）进行4组间比较,再进行Turkey检验,进行两组间多重比较差异有统计学意义（P<0.05）。结果 与参照组（Sham组）相比,CLP组血清中TNF-α、IL-6水平均明显增加（32.45±9.62 vs 573.51±105.26,47.38±11.84 vs 853.72±198.56pg/ml,P<0.05）,光镜下观察肺损伤及炎性细胞浸润程度明显加重（肺损伤评分：3.24±1.38 vs 12.32±3.45,P<0.05）,肺组织W/D比值增加（4.52±0.34 vs 5.98±0.85,P<0.05）,蛋白印迹法及免疫组化法检测结果显示肺组织中HO-1、Nrf-2的蛋白表达含量均轻度的增加（P < 0.05）。给予血必净（XBJ）干预后,与CLP组相比,血清中TNF-α、IL-6释放均减少（573.51±105.26 vs 327.45±68.52,853.72±198.56 vs 504.72±113.28pg/ml,P<0.05）,肺组织病理损伤及炎性细胞浸润程度减轻（肺损伤评分：12.32±3.45 vs 6.34±1.68,P<0.05）,肺组织W/D比值减少（5.98±0.85 vs 4.75±0.56,P<0.05）,肺组织中HO-1、Nrf-2蛋白表达含量均明显增加（P<0.05）。XBJ对于肺组织的上述保护作用被HO-1抑制剂ZnPP所逆转,HO-1抑制剂组的肺损伤程度与CLP组差异无统计学意义（肺损伤评分：12.32±3.45 vs 11.45±2.85,P>0.05;肺W/D值：5.98±0.85 vs 5.73±0.64,P>0.05）。结论 血必净对于脓毒症小鼠所诱发的急性肺损伤具有保护作用,其可能机制为上调HO-1通路减轻炎性反应,继而减轻肺损伤。     

自由基代谢在大鼠脓毒症肝损伤发病机制中的作用

目的：采用大鼠盲肠结扎穿孔（CLP）复制脓毒症模型造成急性肝损伤,探讨自由基代谢在脓毒症肝损伤发病机制中的作用。方法：将Wistar大鼠随机分为对照组、假手术组和模型组,每组叉分6h、12h、24h和48h四个时间点。动态观察血清丙氨酸转氨酶（ALT）、血清和肝组织中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的变化。结果：从血清含量变化和肝脏细胞形态学检测确认CLP脓毒症模型造成了肝损伤。CLP组血清和肝组织MDA于6h时间点增高,48h达到峰值,血清和肝组织GSH—Px活性亦于6h时间点降低,48h达到最低值。结论：脓毒症所致的肝细胞损伤与自由基代谢紊乱有关。     

大剂量地塞米松对SAP肺损伤的治疗作用

目的: 探讨大剂量地塞米松对重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的治疗机制及作用. 方法: 建立SD大鼠急性胰腺炎模型,随机分为对照组、SAP组及地塞米松治疗组. 取肺组织行组织病理观察、组织含水量、微血管通透性及肺髓过氧化物酶(MPO)活性检测,同时检测肺组织中血管内皮细胞凋亡及TNF-α,ICAM-1基因表达. 结果: SAP组大鼠微血管内大量白细胞浸润,肺组织血管内皮细胞凋亡增加;治疗组肺间质水肿及白细胞浸润程度均较SAP组减轻,微血管内皮细胞数量明显减少. SAP组与对照组相比,肺组织含水量、微血管通透性、MPO活性及TNF-α,ICAM-1基因表达均明显升高,地塞米松治疗组上述指标均较SAP组明显好转(P<0.01). 结论: 大剂量地塞米松可通过抑制炎症介质、改善血管内皮细胞的功能损伤、降低肺组织血管通透性等作用治疗SAP肺损伤.     

颗粒蛋白前体对脓毒症急性肺损伤小鼠肺组织核转录因子-κB的表达的影响

目的：探讨颗粒蛋白前体（progranulin,PGRN）对脓毒症急性肺损伤（acute lung injury,ALI）的影响及可能机制。方法：将C57BL/6小鼠随机分为对照组（Control组）、急性肺损伤组（CLP组）、颗粒蛋白前体治疗组（CLP+PGRN组）。采用盲肠结扎穿刺术（cecal ligation and puncture,CLP）构建小鼠脓毒症ALI模型,CLP+PGRN组在CLP处理半小时后使用PGRN腹腔注射。24 h后麻醉并处死小鼠,取小鼠肺HE染色观察肺组织病理损伤;TUNEL法检测肺部细胞凋亡情况;免疫荧光染色检测肺组织中核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)水平;Western blot法检测NF-κB、总p65和磷酸化p65表达水平;RT-qPCR检测NF-κB和炎症细胞因子水平。结果：和Control组相比,CLP组和CLP+PGRN组肺损伤加重,促炎细胞因子升高,肺组织中细胞凋亡增加,NF-κB、p65和p-p65的表达水平明显增加;与CLP组相比,CLP+PGRN组肺组织损伤和凋亡减轻,促炎细胞因子降低,抑...     

盐酸戊乙奎醚对脓毒症小鼠肺血管内皮细胞黏附分子-1和髓过氧化物酶影响

目的:探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对脓毒症小鼠肺组织血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平、髓过氧化物酶(MPO)活性和β抑制蛋白-1(β-arrestin-1)表达的影响。方法:建立脓毒症小鼠模型,实验动物随机分为假手术组、盲肠结扎穿孔模型组(CLP组)和盐酸戊乙奎醚组(PHC组),每组10只。各组小鼠于造模12h时间点采血检测血乳酸水平,收集肺组织检测VCAM-1水平、MPO活性和β-arrestin-1mRNA的表达。结果:与假手术组比较,CLP组血乳酸值、肺VCAM-1水平和MPO活性升高,β-arrestin-1mRNA表达降低;与CLP组比较,PHC组可降低血乳酸值、肺VCAM-1水平和MPO活性,而增加β-arrestin-1mRNA表达。结论:盐酸戊乙奎醚预处理,可以通过上调β-arrestin-1的表达,从而降低VCAM-1水平和MPO活性,减轻脓毒症小鼠肺损伤。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的评价盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达的影响。方法健康雄性SD大鼠108只,4⁵月龄,体质量300³50 g,采用随机数字表法分为:假手术组（S组）、脓毒症模型组（CLP组）和盐酸戊乙奎醚+脓毒症模型组（PH组）,每组36只。CLP组和PH组采用盲肠结扎穿孔（CLP）制备脓毒症大鼠模型。PH组于模型制备前1 h时静脉注射盐酸戊乙奎醚0.1 mg·kg^-1,S组和CLP组给予等容量生理盐水。分别于术前2 h（TO）、术后2、12、24、48和72 h（T1^T5）时随机取6只大鼠,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,采用考马斯亮兰法检测BALF总蛋白;测定肺组织湿/干质量比;采用分光光度法检测肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性;采用Elisa和RT-PCR检测肺组织HMGB1含量和mRNA表达水平。结果与S组比较,CLP组肺组织湿/干质量比、BALF总蛋白含量、MPO活性、HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达升高（P<0.05）;与CLP组比较,PH组肺组织湿/干质量比、BALF总蛋白含量、MPO活性、HMGB1含量和HMGB1 mRNA表达降低（P<0.05）。结论预先给药盐酸戊乙奎醚可下调脓毒症大鼠肺组织中HMGB1表达,这可能是其减轻肺损伤的一个重要机制。     

核因子-KB在脓毒症大鼠肾细胞凋亡中的作用

目的 研究脓毒症时核因子-kB（NF-kB）在肾细胞凋亡信号转导中的作用，探讨脓毒症时肾功能降低的机制。方法 将30只大鼠随机分为5组，其中6只作为对照组，另外24只采用盲肠结扎穿孔术（CLP）复制脓毒症模型，以术后2h、3h,4h,5h时限分为4组作为实验组。各组均测定肾脏组织NF-kB蛋白及肾细胞凋亡的情况，同时测定肾功能的变化。结果 CLP术后肾组织NF-kB蛋白表达升高，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）；4h组NF-kB的含量达高峰，3h组相对较弱。CLP术后肾细胞凋亡数目与肾组织NF-kB蛋白表达相反。CLP术后血清尿素氮及肌酐增加，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 CLP所致的脓毒症过程中，NF-kB蛋白表达升高，其活性增强可抑制肾细胞凋亡。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠脓毒症肺损伤的影响

目的 研究盐酸戊乙奎醚(长托宁)对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响.方法 采用盲肠结扎穿孔复制大鼠脓毒症肺损伤动物模型,30只SD大鼠随机分为假手术组,脓毒症肺损伤组和长托宁(0.45 mg/kg肌肉注射)治疗组,每组10只,检测4 h后各组大鼠肺泡灌洗液白蛋白浓度,肺组织湿干重比(W/D)及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,应用免疫组织化学的方法检测肺组织毛细血管内皮细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达.结果 长托宁治疗组大鼠肺泡灌洗液白蛋白浓度、 W/D、肺组织MPO活性与脓毒症肺损伤组有显著差异(P＜0.05),肺组织血管内皮ICAM-1的表达显著低于脓毒症肺损伤组(P＜0.05).结论 长托宁通过抑制肺血管内皮细胞ICAM-1的表达,对大鼠脓毒症肺损伤具有保护作用.     

盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠心肌损伤的相关研究

【摘要】目的 通过盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠心肌细胞凋亡率的变化,探讨心肌细胞凋亡与心肌损伤的关系。方法 将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（SH组,n=20）及脓毒症组（CLP组,n=20）,采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症动物模型,24小时后,检测各组的血清脑钠肽(BNP)、肌钙蛋白I(cTnI)水平。观察心肌组织病理变化、心肌组织TNF-α的表达水平及心肌细胞凋亡率。结果 CLP组出现明显的心肌损伤,CLP组血清BNP、cTnI高于SH组（P＜0.01）,心肌组织TNF α、心肌细胞凋亡率高于SH组（P＜0.01）。结论 心肌细胞凋亡在脓毒症心肌损伤发病机制中可能起着重要的作用。     

氯胺酮对急性肺损伤大鼠肺组织HMGB1表达的影响

目的:探讨氯胺酮在盲肠结扎穿孔术(CLP)脓毒症肺损伤大鼠中对肺组织HMGB1表达的影响.方法:45只SPF级雄性成年Wister 大鼠随机分为三组:(1)假手术组(sham组)、(2)盲肠结扎穿孔(Cecal ligation and puncture.CLP)组(CLP组)、(3)氧胺酮干预组(KET组).CLP组和KET组施行盲肠结扎穿孔术.术毕半小时开始给药,KET组给予5%氯胺酮50g/kg,im,q12h;Sham组和CLP组则给予等容积生理盐水a在术后6h、24h、72h各随机处死大鼠5只,分别作为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组,无菌留取大鼠肺组织、动脉血待测.采用热干法测肺组织湿/干(weVdry,W/D)重比值;光镜下观察肺脏组织形态学变化,并进行中性粒细胞计数:测定各组大鼠不同时问点动脉血氧分压(PaO2);免疫组织化学法(IHC)和逆转录聚合酶链(RT-PCR)法分别检测肺组织HMGB1蛋白和HMGB1mRNA.结果:与CLP组相比,氯胺酮组在CLP术后6h、24h和72h时间点PaO2较CLP组明显增高,而肺组织W/D比值、中性粒细胞计数、HMGB,免疫组化及HMGB.mRNA表达明显降低(P<0.05).结论:氯胺酮能够抑制CLP脓毒症大鼠肺组织HMGB1mRNA和蛋白表达水平,减轻肺组织PMN浸润,减轻CLP诱导的大鼠肺损伤的程度.     

肺微血管内皮细胞表型改变与博菜霉素所致大鼠肺纤维化的关系

目的：观察博莱霉素所致肺纤维化大鼠微血管内皮细胞（LMVECs）超微结构及血清CTGF的变化，探讨肺微血管内皮细胞表型及与博莱霉素损伤肺纤维化间的关系．方法：SD大鼠45只，随机分为3组：博莱霉素（BLM）组，肺炎链球菌组及正常对照组，每组15只，分别气管滴注博莱霉素及肺炎链球菌造模，对照组滴注生理盐水．电镜观察外周肺组织内皮细胞超微结构，同时测定血清CTGF含量．结果：光镜及电镜显示肺炎组与BLM组的不同改变．肺炎组组织学及肺微血管内皮细胞超微结构表现为典型的急性炎症损伤修复，之后肺组织结构恢复正常．BLM组表现为肺组织损伤的持续进行，肺微血管内皮细胞7d开始增殖并出现形态学的改变，且贯穿实验各个阶段，最终胶原明显沉积于肺泡间隔．血清CTGF测定：肺炎组3d开始增高，第7d骤降至（5．04&#177;0．82）ng／L，第21d恢复至（12．06&#177;0．43）ng／L．BLM组全程增高，第7d至（12．53&#177;2．36）ng／L，第21d增至高峰（19．45&#177;0．41）ng／L．结论：肺微血管内皮细胞功能的转变及其分泌CTGF时相和量的异常可能是博莱霉素所致肺纤维化发生发展的重要环节．     

脓毒血症中肝脏结构和功能关系的研究

目的：探讨脓毒症时TNF—α与肝细胞调亡的关系以及对肝功能的影响。方法：采用盲肠结扎穿孔术（CLP）致脓毒症模型，动物随机分为正常对照组和脓毒症组。分别于术后30分钟、60分钟、120分钟、180分钟处死动物，测定肝组织和血浆TNF-α和Bcl-2蛋白的含量，并检测肝细胞凋亡的情况。同时测定肝脏的功能。结果：CLP后肝组织和血浆中TNF-α持续升高（P〈0.01），但30分钟与60分钟的变化不明显（P〉0．05），Bcl-2变化则与此相反。肝组织细胞凋亡数目呈进行性增加（P〈0．01）。同时丙氨酸转氨酶ALT＼天冬氨酸转氨酶AST也呈现异常改变，肝脏功能恶性发展（P〈0．01）。结论：CLP后肝脏产生大量TNF-α，与肝细胞凋亡有密切关系，使肝功能受到损伤。     

β1受体阻滞剂上调肠道上皮细胞HO-1对脓毒症大鼠肠道功能的保护作用

目的 探讨β₁受体阻滞剂艾司洛尔（Esmolol）能否上调血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）起到对脓毒症大鼠肠道功能的保护作用。方法 本实验于哈尔滨医科大学附属第一医院外科中心实验室完成。40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为4组：假手术组（sham组,n=10）、脓毒症组（CLP组,n=10）、艾司洛尔干预组（Esmolol+CLP组,n=10）、HO-1抑制剂组（Esmolol+ZnPP+CLP组,n=10）。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症大鼠模型,Esmolol组通过静脉输注艾司洛尔注射液,速度为15mg/（kg·h）,Esmolol+ZnPP+CLP组术前1h腹腔内注射ZnPP溶液（40μmol/kg）,术后同速静脉输注艾司洛尔注射液。其余各组大鼠腹腔注射等体积生理盐水,并且静脉输注等渗盐水,速度2ml/（kg·h）。术后12h处死大鼠,ELISA法检测各组血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素（IL-1β）水平,采用蛋白印迹法及免疫组化法检测大鼠肠组织HO-1表达水平,光学显微镜观察大鼠肠组织病理变化情况。结果 与Sham组相比,CLP组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平均明显升高（43.71±6.24pg/ml vs 2742.69±221.71pg/ml,52.69±14.15pg/ml vs 482.73±125.49pg/ml,P<0.05）;肠组织中HO-1水平表达升高（P<0.05）;肠组织病理损伤明显。与CLP组相比,Esmolol+CLP组血清TNF-α、IL-1β水平均明显下降（2742.69±221.71pg/ml vs 968.81±99.46pg/ml,482.73±125.49pg/ml vs 156.15±38.29pg/ml,P<0.05）;肠组织HO-1水平表达明显升高（P<0.05）;肠组织病理损伤程度减轻。与CLP组相比,Esmolol+ZnPP+CLP组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平无明显差异（2742.69±221.71pg/ml vs 2545.18±173.74pg/ml,482.73±125.49pg/ml vs 474.43±113.98pg/ml,P>0.05）;肠组织病理损伤程度无明显差异。结论 Esmolol能改善脓毒症诱发的肠道损伤,其可能是通过上调HO-1通路来减轻肠组织炎性反应,继而减轻肠道损伤。     

PDX通过P38 MAPK通路促进脓毒症性ARDS抗菌肽cathelicidin表达

目的：探究PDX对脓毒症性ARDS抗菌肽cathelicidin（CAMP）的影响及其具体机制。方法：C57BL/6小鼠行盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型,分为：假手术组（Sham组）、脓毒症组（CLP组）、治疗组（CLP+PDX组）、抑制剂组（CLP+PDX+SB203580组）、溶剂对照组（CLP+PDX+DMSO组）、PDX组。采用HE染色观察肺组织损伤情况,进行肺损伤评分,菌落形成单位（CFU）检测细菌清除情况,qPCR检测肺组织CAMP基因表达情况,Western blot检测肺组织CAMP蛋白表达以及P38 MAPK、ERK MAPK通路激活情况。结果：与Sham组比,CLP组ERK MAPK通路无显著变化,P38 MAPK通路受到抑制,CAMP表达显著升高（P＜0.05）;与CLP组相比,CLP+PDX组小鼠肺组织出血、炎性细胞浸润减轻,CFU显著降低,P38 MAPK通路明显活化,且CLP+PDX组中CAMP表达进一步升高（P＜0.05）。结论：PDX通过调控P38 MAPK通路促进脓毒症性ARDS CAMP的表达。     

电针刺激通过JAK1/STAT3通路减轻脓毒症大鼠的急性肺损伤

目的 探讨电针对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响及作用机制。方法 采用SPF级SD大鼠60 只,用随机数字表法分组。假手术组（SHAM）15 只：只开腹而不结扎盲肠;脓毒组共45 只,采用盲肠结扎穿孔制术（CLP）脓毒症肺损伤模型制备,制备成功后随机分为脓毒症急性肺损伤组（ALI）15 只：不做进一步处理;脓毒症急性肺损伤+电针非穴位组（ALI+SEA）15 只、脓毒症急性肺损伤+电针穴位组（ALI+EA）15 只：针刺双侧内关穴及足三里,电刺激的频率、强度与时间与ALI+SEA组保持一致。于CLP后12 h后处死大鼠,称量大鼠肺组织,测定大鼠肺组织湿/干重比值（W/D）,HE 染色检测肺组织病理变化,Tunel染色计算肺组织凋亡细胞比例,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的浓度,蛋白质免疫印迹试验（Western blot）检测凋亡相关蛋白Bax、Caspase-3表达以及核转录因子JAK1/STAT3信号通路中重要蛋白JAK1、STAT3的表达。结果 ALI与SHAM相比呈现出明显的肺损伤病理表型,表现为肺湿/干重比值增加（P<0.01）,血清中TNF-α和IL-6水平显著上升（P<0.01）,组织内JAK1、STAT3、Caspase-3、Bax表达水平显著上调（P<0.01）;ALI+SEA与ALI相比以上指标无显著性变化（P>0.05）;ALI+EA与ALI+SEA组比,能显著的减轻脓毒症诱发的肺部病理变化,表现为肺湿/干重比值升高受到抑制（P<0.01）,血清中TNF-α和IL-6上升得到缓解（P<0.01）,组织中JAK1、STAT3、Caspase-3、Bax的表达升高显著下调（P<0.01）。结论 电针可关联JAK1/STAT3通路的机制,抑制脓毒症大鼠炎性介质的释放及细胞凋亡,减轻脓毒症大鼠的肺损伤。     

受体相互作用蛋白140在脓毒症急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其作用

目的 探讨受体相互作用蛋白140 (receptor interacting protein140,RIP140)在脓毒症急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其在炎症反应过程中的作用.方法 36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组和盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症肺损伤3、6、12、24 h组.HE染色观察肺组织病理变化;免疫组化检测RIP140在肺组织的表达分布;Western blot及免疫荧光观察肺泡巨噬细胞RIP140的表达变化及定位;RT-qPCR测定肺泡巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平变化.结果 CLP组可见明显肺损伤病理改变且随时间进展逐渐加重.RIP140在脓毒症肺损伤大鼠肺组织中主要表达于炎性渗出细胞,且随时间进展,表达RIP140的细胞数量逐渐增多.CLP术后6h大鼠肺巨噬细胞RIP140蛋白表达水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,且主要表达于细胞核.CLP术后3h大鼠肺巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,下调肺泡巨噬细胞RIP140的表达可明显抑制IL-1 β、TNF-α、IL-6 mRNA的表达.结论 脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞可通过上调RIP140表达增强肺组织炎症反应,从而参与早期急性肺损伤的炎症应答.     

C5a反义肽对实验性脓毒症小鼠肺损伤的作用研究

目的研究C5 a反义肽(NH2-EARLQRVFLYVNPS-COOH)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)致脓毒症小鼠发生肺损伤的保护性作用。方法实验组小鼠CLP后即经尾静脉注射反义肽R4 1、2、4、8 mg/kg,浓度0.5mg/m l),观察不同剂量R4对小鼠96 h生存率的影响,并对肺组织进行病理观察,检测肺髓过氧化物酶(MPO)活性,检测动脉血氧分压、肺湿干比。结果相较于对照组,治疗组小鼠在R4使用浓度2 mg/kg时96 h生存率明显提高(P<0.05),动脉氧分压升高(P<0.01)、MPO和肺湿/干比降低(P<0.01)、病理改变减轻。结论反义肽R4在小鼠体内有良好的拮抗C5 a作用,对脓毒症小鼠肺的急性损伤有保护作用。