镉致成骨细胞增殖、分化及矿化损伤的预后效应

[目的]探讨镉染毒和染毒中止后成骨细胞增殖、分化及矿化等生物学功能的改变。[方法]采用混合酶消化法,分离sD大鼠颅盖骨成骨细胞,在5％CO2、37℃条件下培养24h后,持续镉染毒组以不同浓度的氯化镉（0～2．000μmol／L）持续染毒72h;间断镉染毒组以同样浓度的氯化镉染毒48h后,更换成无镉培养液继续培养24h,以噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖能力改变,用对硝基苯磷酸二钠盐（PNPP）偶氮法检测碱性磷酸酶（ALP）活性。同时,成骨细胞培养7d后,以0．500μmol／L氯化镉持续作用3—13d,然后分别停止作用10、8、6、0d,采用茜素红S进行矿化结节染色并计算面积以观察镉暴露中止后成骨细胞矿化能力损伤的恢复情况。[结果]氯化镉可明显抑制成骨细胞增殖、ALP活性及矿化能力。间断镉染毒组在停止作用24h后,成骨细胞的增殖、分化仍然明显低于对照组（P〈0．05）,与持续作用组比较没有明显改善。同样,间断镉染毒组在停止作用不同时间后,成骨细胞矿化结节数量和面积仍然明显低于对照组（P〈O．05）,与持续作用组相比没有明显恢复。[结论]镉暴露中止一定时间后,镉对成骨细胞的影响作用仍明显存在,表现为对成骨细胞增殖、分化及矿化能力的持续抑制。     

大豆异黄酮和钙对大鼠成骨细胞增殖分化和矿化的作用

为探讨大豆异黄酮和钙对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和矿化的作用 ,体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮和葡萄糖酸钙对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,茜素红染色方法 (ARS)研究对成骨细胞矿化的影响。结果单纯补钙组大鼠成骨细胞增殖、分化和矿化无显著促进作用。大豆异黄酮可显著地促进成骨细胞的增殖和分化 ,并促使成骨细胞形成矿化结节 ,而补充大豆异黄酮同时补钙可使矿化结节团块增大。大豆异黄酮可以提高成骨细胞的增殖和分化 ,补大豆异黄酮并补钙更有利成骨细胞的矿化     

大豆异黄酮类对体外培养大鼠成骨细胞的影响

目的 :　探讨大豆异黄酮类提取物预防骨质疏松症在细胞水平的作用机制。方法 :　以经口给予大鼠大豆异黄酮类提取物后分离的血清作为干预物 ,加入新生 SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞 (OB)中。以噻唑蓝 (MTT)比色法检测细胞增殖情况 ;用对硝基酚磷酸盐法测定 OB碱性磷酸酶 (ALP)活性、用放免法测定 OB骨钙素 (BGP)含量 ,以反映 OB的分化状况 ;酶联免疫(ELISA)法检测 OB分泌细胞因子 IL-6的水平。。结果 :　以大豆异黄酮类提取物灌胃的大鼠血清可使体外培养大鼠成骨细胞 MTT吸光值明显增加 ,成骨细胞 ALP活性显著升高 ,成骨细胞BGP分泌显著增加 ,而其对 IL-6的分泌无明显影响。结论 :　大豆异黄酮类提取物可明显促进体外培养的大鼠成骨细胞增殖和分化 ;对骨吸收似无明显影响。推测大豆异黄酮类对骨质疏松的预防作用机制是促进骨细胞的增殖和分化     

辛伐他汀对人骨髓基质细胞成骨、成脂分化的作用及其机制

[目的]研究辛伐他汀对体外培养的成人骨髓基质细胞成骨分化和成脂分化的影响,并探讨其作用机制。[方法]分离健康成人骨髓基质细胞进行培养,传代后骨分化诱导组和脂肪分化诱导组分别添加10-7mol/L的辛伐他汀,同时进行空白对照。实时荧光定量PCR检测转录因子Cbfa1在成骨细胞中的分化,PPARγ2和LPL在脂肪细胞分化过程中的表达;碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测成骨细胞ALP比活性;流式细胞仪、油红O(oilredO)染色检测细胞成脂分化能力。[结果]骨分化诱导组Cbfa1表达(P﹤0.01)、ALP比活性(P﹤0.05)均高于对照组,脂肪分化诱导组PPARγ2(P﹤0.01)、LPL(P﹤0.05)表达均低于对照组;流式细胞仪脂肪细胞计数及脂肪细胞形成脂滴能力实验组均低于对照组。[结论]10-7mol/L辛伐他汀能促进Cbfa1的表达,增强成骨细胞ALP比活性和细胞外基质矿化;抑制PPARγ2、LPL的表达及脂肪细胞分化。     

人骨髓间充质干细胞诱导成骨分化

目的探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)在体外诱导培养分化为成骨细胞的方法,并研究其生物学特性。方法采用成年人hMSCs传代培养2～3代,经条件培养液诱导培养后,进行形态学观察及MTT实验,RT-PCR分析,蛋白质印迹实验,茜素红染色方法分析细胞矿化作用,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,骨钙素(osteocalcin,OCN)、RUNX2和BMPR2的检测。结果 hMSCs细胞,在诱导培养条件下,细胞碱性磷酸酶ALP活性明显增高,并出现了矿化结节。经过体外成骨诱导的hMSCs表现出增殖、聚集、结节和矿化期的阶段性形态特征。在矿化期骨钙素mRNA OCN表达升高,RUNX2和BMPR2蛋白表达增高。结论 hMSCs易于体外分离培养及扩增,体外成骨定向诱导的hMSCs具有典型的成骨细胞的形态和功能性特征,可以定向分化为成骨细胞。     

抗增殖蛋白1对绝经后大鼠成骨细胞分化的影响及机制研究

目的探讨抗增殖蛋白1(PHB1)对绝经后骨质疏松(PMOP)大鼠成骨细胞(OB)分化的影响及机制。方法从PMOP大鼠模型上提取PMOP OB,分别用PHB1低表达重组腺病毒和PHB1高表达重组腺病毒感染PMOP OB,观察PHB1对体外成骨分化的影响。碱性磷酸酶染色检测PMOP OB增殖分化,茜素红S染色检测PMOP OB矿化,Western Blotting检测相关蛋白表达量。结果高表达PHB1组中ALP活性被抑制,而低表达PHB1显著增强ALP的活性。茜素红S染色结果显示PHB1的高表达显著抑制PMOP OB的矿化,低表达PHB1结果相反。过表达PHB1基因后,PMOP OB中OPN和RUNX2的蛋白表达量下调,PHB1沉默表达后,PMOP OB的OPN和RUNX2蛋白表达量上调。PHB1的高表达与低表达分别下调和上调p-AKT/AKT的相对表达。结论PHB1通过负反馈调节PI3K/AKT通路从而抑制大鼠PMOP OB的成骨分化。     

2001-2010年《营养学报》学术论文的综述(Ⅳ)

<正>7营养学基础7.1蛋白质和氨基酸蛋白质:骨桥蛋白能促进成骨细胞(OB)增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA的表达[726]。白果活性蛋白有较好的抗生物氧化作用[727]。大豆蛋白在体外消化实验中可促进不溶性钙磷复合物的形成,并能结合胆汁酸[728]。大豆分离蛋白在体外使用胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解,可产     

氟化钠对体外培养大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

为研究氟化钠对体外培养的大鼠成骨细胞增殖和分化的影响,用混合酶消化法分离24 h内新生清洁级SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养.采用倒置相差显微镜观察成骨细胞的形态,采用Gomori改良钙钴法对成骨细胞进行碱性磷酸酶(ALP)染色.向1×103个/孔成骨细胞中接种加入0.0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0、100.0、120.0mg/L的氟化钠,培养1～3 d,采用噻唑蓝(MTT)检测增殖活力.向1×103个/孔成骨细胞中接种加入0.0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0、100.0、120.0mg/L的氟化钠,培养3、5、7、9d时,采用PNPP法检测碱性磷酸酶活力.结果 显示,氟化钠作用于成骨细胞第2天时,2.5、5.0mg/L的氟化钠对成骨细胞增殖活力有明显的促进作用(P＜0.05);当氟化钠≥80.0mg/L时,可明显抑制成骨细胞的增殖(P＜0.05).染毒第9天,氟化钠≥40.0mg/L时对成骨细胞ALP活力有明显的抑制作用,差异均有统计学意义(P＜0.05).提示低剂量氟化钠有轻微促进成骨细胞增殖的作用,高剂量氟化钠则能抑制成骨细胞增殖和ALP的活力.     

牛乳骨桥蛋白对大鼠成骨细胞的影响

目的观察乳中骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对体外培养大鼠成骨细胞的影响。方法采用二次酶消化法体外培养成骨细胞,MTT比色法测定骨桥蛋白对成骨细胞的增殖影响,ALP检测试剂盒测定细胞的ALP活性,RT-PCR法检测细胞中OPG/RANKL mRNA的表达。结果在细胞增殖实验中,OPN2.5μg/ml与对照组比较,成骨细胞的增殖不显著(P>0.05),5.0μg/ml组和10.0μg/ml组增殖显著(P<0.05),20μg/ml组和40μg/ml组增殖作用极显著差异(P<0.01);在成骨细胞ALP活性检测中,OPN10μg/ml组和20μg/ml组在第3、5、7和9d可提高ALP的活性(P<0.05),40μg/ml组在各个时期均能提高ALP的活性(P<0.01),2.5μg/ml组和5.0μg/ml组提高ALP的活性不显著;OPN能提高OPG/RANKL mRNA的表达。结论骨桥蛋白能够促进成骨细胞增殖、ALP活性和OPG/RANKL mRNA的表达。     

锌对成骨细胞增殖 分化 矿化活性的影响

目的:探讨锌对成骨细胞增殖、分化、矿化活性的影响。方法:采用MTT法研究锌对成骨细胞增殖活性的影响;采用碱性磷酸酶测定法以及大鼠I型胶原蛋白(Col I)酶联免疫分析法研究锌对成骨细胞分化活性的影响;采用细胞钙茜素红染色法观察不同浓度的锌培养液作用成骨细胞后结节的数量,探讨锌对成骨细胞矿化活性的影响。结果:不同浓度的ZnCl_2培养液均具有促进成骨细胞增殖的作用(P0.05;P0.001);ZnCl_2浓度为1μM的培养液对成骨细胞的分化无影响,而ZnCl_2浓度为5μM和25μM的培养液具有促进成骨细胞分化的作用(P0.05;P0.001),各浓度的ZnCl_2培养液均提高了成骨细胞中Col I的水平(P0.001);不同浓度的ZnCl_2培养液作用于成骨细胞后,细胞内桔红色阳性结节的数量明显增多。结论:锌能促进成骨细胞的增殖、分化、矿化,从而促进骨形成过程。     

微囊藻毒素毒理学的研究进展

水体富营养化现象日益严重及藻类水华的频繁暴发已成为全球广泛关注的环境问题.而微囊藻毒素(Microcystin,MCs)是在蓝藻水华污染中出现频率最高、造成危害最严重的一种环七肽肝毒素.目前,蓝藻水华的研究主要集中在MCs对水产动物及哺乳动物造成的伤害.大量研究表明,作为肝毒素的MCs具有稳定性,不但能够在生物链中积累...     

一种基于ARM系统的多频耳声导抗测试系统的研究

目的：研究多频探测音对某些单一低频耳导抗测试所不敏感病变的鉴别（如：传导链中断，耳硬化症等）。方法：在原有单一低频SY—IA声阻抗中耳功能分析仪的基础上，重点对多频探测音产生电路、恒压声控系统、微处理器控制系统及多频声导抗及相位角检测电路进行了研究与设计。结果：运用多频耳声导抗测试系统可以分别在不同频率探测音下对正常耳、鼓膜松弛耳和听骨链中断耳进行声导抗检测和相位角检测。结论：实验结果表明，基于ARM系统的多频耳声导抗测试系统可以为某些单一低频耳声导抗测试所不敏感病变的鉴别提供进一步的临床依据。     

试论对过度医疗的监管治理

过度医疗已成为社会热点,涉及医疗领域诸多问题。本文在分析过度医疗构成要件及其存在原因的基础上,从完善监管的角度入手,着眼于探讨过度医疗的遏制之道。建议从以下几方面改善监管以治理过度医疗：一是健全医疗机构的法人治理结构;二是改革政府监管机制,主要包括实施正当的监管程序、监管影响评价程序等;三是强化行业自我监督机制;四是实施替代性监管策略,主要是改革医疗付费方式;五是保障公众和舆论对于监管的监督。·     

采用HACCP体系对邮轮“诺如病毒感染”专题调研分析

目的通过对某邮轮诺如病毒感染相关专题调研,发现诺如病毒感染相关的危险因素,以进行针对性改进,降低邮轮群体性诺如病毒感染事件的发生风险。方法通过4个航次的诺如病毒专题随船调研,采用查看工作记录、现场询问、快速检测等手段,采用HACCP体系对食品采购、贮存、加工、供餐、饮用水供应、卫生处理、疫情处置等方面做全面的危险分析,根据结果确定关键点,提出控制措施建议。结果该邮轮在食品采购、贮存、加工和供应,饮用水供应,卫生处理,疫情处置方面都发现了一些问题和风险并提出了控制措施。其中蔬菜样本中检测出诺如病毒是最大的危险点,提示其蔬菜供应和加工环节特别需要采取控制措施。结论通过有针对性的专题调研,利用HACCP原理对诺如病毒感染危险因素进行了针对性改善,降低了群体性感染事件的发生风险。     

超声组织定征在产科的应用研究进展

超声检查是产前诊断中重要的部分,目前主要依靠二维超声成像进行扫查,对图像的诊断依靠超声医生的经验判断,具有很大的主观性.而超声组织定征技术的研究目的则是通过定量分析图像中有关信息,以达到提供客观、准确的诊断信息.本文就近年超声组织定征在产科的应用研究作一总结.     

在用血压计质量状况分析

调查研究了新疆军区驻乌鲁木齐市部队在用血压计、血压表的使用状况。依据《JJG270—2008血压计和血压表检定规程》对该部队的605台血压计、血压表进行检定,结果表明示值误差超差、气密性不符合要求以及袖带破损是造成血压计、血压表不合格的主要因素,为血压计、血压表的正确使用和质量控制提供了借鉴。     

基于SAS的出入境交通工具食源性疾病暴发流行快速溯源调查研究

目的建立基于数据统计分析系统（SAS）的出入境交通工具食源性疾病暴发流行快速溯源调查方法。方法应用4种χ2检验法,结合食源性疾病暴发流行调查样表,分析某口岸国际大型豪华邮轮上暴发的食源性疾病。并采用国际权威的统计分析标准软件SAS分析平台进行编程实现。结果经流行病学快速溯源调查,潜伏期为28.94h,暴露日期估计为2009年9月5日9时33分,鲜奶作为污染食品列为高风险因素,其OR值为9.03（95%CI=2.2~33.63）。结论食源性疾病暴发流行快速溯源调查方法及SAS程序为口岸食源性疾病的防控提供了一种简便、快捷且客观有效的工具。     

探索医疗红包治理之策

由于红包现象成因的复杂性，决定了治理红包的措施必然是综合的、多方面的，而目前治理红包中一个比较突出的问题是“重堵轻疏”，偏重对红色现象的处罚，最近国家卫生部又规定：“收受红包一次，停止执业6个月，两次吊销执业资格，索要红包一次，吊销执业资格”。但笔者认为：这不是解决问题的根本办法，必须标本兼治，重点是加强人力资本管理，采取合理的办法，减少租值消散，加快医疗卫生体制改革，合理调配卫生资源，打破卫生行业的垄断地位，提高医疗服务信息的透明度，在些基础上完善各种监督、处罚机制，才能最级从根本上解决红包问题。     

网页恶意攻击的防范

随着电脑技术的发展,特别是互联网的普及,网络已经紧紧地围绕在我们的周围。同样,在医院中的应用也不例外,网络已成为医院对内对外联络一个重要纽带,大大方便了查阅和共享医疗资料。但随之而来的是安全问题,一些恶意网页会利用软件或系统操作平台等的安全漏洞,修改用户操作系统的注册表及其他程序,从而达到非法控制系统资源、破坏数据、格式化硬盘、感染木马程序及其他目的。本文针对Windows系统的恶意网页的特点作了分析并提出防范方法。