逆灸关元穴对不同月龄更年期大鼠肿瘤坏死因子α及脾脏雌激素受体α的影响

目的：观察逆灸关元穴对不同月龄更年期大鼠血清和子宫肿瘤坏死因子α及脾脏雌激素受体α表达的影响．以及逆灸对更年期大鼠免疫功能的影响及脾脏雌激素受体α的调节机制。 方法：实验于2003-11／2004-06在北京中医药大学针灸学院针灸机理实验室完成。选用健康SD雌性大鼠128只，4月龄16只，体质量（250&;#177;20）g，为4月龄对照组。10月龄112只。体质量（300&;#177;20）g，按照随机数字表法分为7组，每组16只。分别为12，14，16月龄逆灸组，10，12，14，16月龄对照组。采用自然老化方式进行实验。逆灸组大鼠均在10月龄开始艾炷灸（小号），灸前暴露关元穴区（鼠后下肢根部在下腹琏线的中点）直径约1．5～2．0cm区域皮肤，轻抓大鼠．让其仰躺在于掌上，将艾炷点燃后，直接放置在关元穴上施灸．每次灸一壮。灸后局部皮肤略潮红。灸2次／周。共灸8周。4，10，12，14，16月龄对照组除同逆灸组轻抓仰躺外小做任何处理。大鼠于4，10，12，14，16月龄采用放射免疫法测定血清、子宫肿瘤坏死因子α；采用免疫组织化学法测定脾脏雌激素受体α。 结果：纳入动物128只，均进入结果分析。①与4月龄对照组比较，10，12，14，16月龄对照组大鼠血清肿瘤坏死因子α呈先降后升趋势，16月龄对照组明显高于4月龄对照组，差异有显著性意义[分别为（2．598&;#177;0．830），（1．826&;#177;0．379）μg／L，P〈0．05]；子宫肿瘤坏死因子α为先升后降趋势，差异均有显著性意义（P〈0．05）；与同月龄对照组比较，各逆灸组血清肿瘤坏死因子α呈先升后降趋势，即12，14月龄上升，其中12月龄逆灸组明显高于12月龄对照组，差异有显著性意义[分别为（2．755&;#177;0．357），（1．290&;#177;0．251）μg／L，P〈0．05]，16月龄逆灸组明显低于16月龄对照组[分别为（1．692&;#177;0．238）。（2．598&;#177;0．830）μg／L，P〈0．05]；予宫肿瘤坏死因子α则12，16月龄逆灸组明显高于12，16月龄对照组，差异均有屁著性意义[分别为（15．329&;#177;4．613），（10．730&;#177;1．366）μg／g；（11．622&;#177;1．884），（8．814&;#177;1．405）μg/g，P〈0．05]，14月龄略下降（P〉0．05）。②与4月龄对照组比较，10，12，14，16月龄对照组大鼠脾脏雌激素受体α的阳性表达（A）呈波动性下降，其中16月龄对照组明显低于4月龄对照组（分别为9384．605&;#177;446．939，12813．915&;#177;770．039，P〈0．01）。与同月龄对照组比较，各逆灸组脾脏雌激素受体α的阳性表达（A）比各对照组均上升，其中12，16月龄逆灸组明显高于12，16月龄对照组，差异有显著性意义（分别为16233．762&;#177;519．358，11294．618&;#177;350．804；11195．763&;#177;431．613，9384．605&;#177;446．939，P〈0．01．0．05）。 结论：更年期大鼠随月龄增加，免疫因子肿瘤坏死因子α已出现紊乱。逆灸可通过平抑此期血清肿瘤坏死因子α异常波动，提高子宫肿瘤坏死因子α含量和脾脏雌激素受体α的表达水平以迭凋节大鼠更年期免疫功能。并这种调节效应凸显于12月龄和16月龄。     

逆灸关元穴对自然更年期大鼠下丘脑雌激素受体α和促肾上腺激素释放激素及血浆促肾上腺激素的调节

目的:观察逆灸关元穴对更年期大鼠下丘脑和血液中应激激素及下丘脑室旁核雌激素受体的影响,探究逆灸对更年期大鼠应激影响及中枢雌激素受体α调节机制。方法:实验于2003-11/2004-06在北京中医药大学针灸学院针灸机理实验室完成。①选用健康SD雌性大鼠128只。其中,4月龄(年轻)16只为年轻正常组。随机将10月龄大鼠112只分为7组:12,14,16月龄逆灸组;10,12,14,16月龄对照组;每组16只。自然老化鼠。所有逆灸组大鼠均在10月龄开始艾炷灸,将艾炷点燃后,直接放置在关元穴上施灸,每次灸一壮。灸后局部皮肤略潮红。1周灸2次,共灸8周。10,12,14,16月龄对照组及年轻正常组除轻抓仰躺外不做其他处理。②每组取10只采用放射免疫法测定下丘脑促肾上腺激素释放激素、血浆促肾上腺激素水平。每组取其余6只采用免疫组化法测定下丘脑雌激素受体α含量。③组间计量资料差异比较采用单因素方差分析。结果:大鼠128只均进入结果分析。①下丘脑室旁核雌激素受体α表达:各模型对照组随增龄,呈波动上升趋势,14和16月龄对照组明显高于年轻正常组(P<0.05,0.01)。各逆灸组均低于同月龄对照组,其中逆灸16月龄组明显低于16月龄对照组(P<0.05)。②下丘脑促肾上腺激素释放激素含量:模型对照各组随增龄呈波动下降趋势,14和16月龄组明显低于年轻正常组(P<0.05～0.01)。逆灸14月龄组明显低于同龄对照组(P<0.05)。③血浆促肾上腺激素水平:模型对照和逆灸各组随增龄升高,14和16月龄组明显高于年轻正常组(P<0.01)。逆灸12和16月龄与同月龄对照组相近(P>0.05),逆灸14月龄组明显低于同月龄对照组(P<0.05)。结论:随增龄更年期大鼠处在一种应激紊乱与失调状态,逆灸可使随后12,14,16月龄大鼠紊乱的应激激素得到一定的调整,并这种作用可能与逆灸调节下丘脑雌激素受体α表达有关。     

脑心通对局灶性脑缺血大鼠行为学和脑组织肿瘤坏死因子α的影响

目的：探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后行为学及脑组织肿瘤坏死因子α表达的影响。方法：实验于2004-03／11在河北医科大学第二医院神经内科实验室进行。取成年健康雄性SD大鼠150只，制造大鼠局灶性大脑中动脉阻断造模手术后，将大鼠随机分为5组，即脑心通4g／kg组、2g／kg组、1g／kg组、生理盐水和假手术组，各组又分为6，24，48，72h，7d 5个亚组，每亚组均为6只大鼠。脑心通各剂量组均为灌胃给药，生理盐水组给同体积的生理盐水，于相应时间点进行行为学评分后处死动物快速取脑，观察脑含水量的变化，病理切片苏木精一伊红染色观察组织病理学改变，免疫组织化学的方法测定肿瘤坏死因子α的动态变化。结果：实验中有8只大鼠死亡，后随机补充，进入结果分析仍为150只大鼠。①行为学评分：大鼠在大脑中动脉阻断后手术对侧肢体存在不同程度瘫痪，在术后48和72h时神经功能缺损最为明显，7d时神经功能基本恢复正常。②病理观察：除假手术组外，其余各组在脑梗死后6h局部可见少量散在炎性细胞浸润；梗死后48h，炎性细胞浸润明显增多；并持续到7d。③脑组织含水量：与假手术组相比，其他各组在各时间段均增加。术后24，48h脑心通4g／kg组为(78．95&;#177;1．36)％，(79．44&;#177;1．01)％，脑心通2g／kg组为(79．03&;#177;0．87)％，(80．46&;#177;1．54)％，低于同期的脑心通1g／kg组和生理盐水组[(79．21&;#177;0．68)％，(82．02&;#177;1．76)％．(79．30&;#177;1．11)％，(82．68&;#177;0．91)％，P&;lt;0．05]。④肿瘤坏死因子d阳性细胞表达：与假手术组相比，其他各组在各时问段均增加，梗死后6h开始增多，48h达高峰。术后24，48h脑心通4g／kg组为(27．6&;#177;2．1)，(18．4&;#177;1．5)个，脑心通2g／kg组为(38．4&;#177;2．1)，(23．2&;#177;3．3)个，低于同期的脑心通1g／kg组和生理盐水组[(50．4&;#177;5．6)，(30．8&;#177;5．3)，(52．8&;#177;3．7)，(33．0&;#177;4．7)个，P&;lt;0．05]。结论：脑心通可能通过减轻脑水肿，降低脑内肿瘤坏死因子α的表达减少炎性细胞的浸润，从而对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。     

阿托伐他汀对脓毒症大鼠肿瘤坏死因子α的影响

目的 探讨阿托伐他汀对于脓毒症大鼠模型肿瘤坏死因子α的影响.方法 选择由大连医科大学实验动物中心提供的体质量184～202 g健康雄性SD (Sprague-Dawley)大鼠,采用盲肠结扎法(CLP)制作大鼠脓毒症模型,随机分为对照组、脓毒症组、阿托伐他汀低剂量组和阿托伐他汀高剂量组,各组分别在术后0,3,6,12,24h各取5只大鼠采血,分离血浆检测TNF-α的浓度,观察和比较各组大鼠活动度、小肠组织病理改变.采用SPSS 13.0软件包,于各时间点行重复测量资料方差分析.结果 0h各组血浆TNF-α浓度比较差异无统计学意义(P＞0.05).对照组血浆TNF-α浓度变化不明显,在3,6,12,24h阿托伐他汀低剂量组与阿托伐他汀高剂量组较脓毒症组和对照组、比较差异均具有统计学意义(P＜0.01),明显低于脓毒症组.阿托伐他汀高剂量组较阿托伐他汀低剂量组血浆TNF-α浓度明显降低(P＜0.01),差异具有统计学意义.脓毒症组大鼠脓毒症表现最强,阿托伐他汀组明显减轻,高剂量组较低剂量组减轻更为明显,对照组没有相关表现或仅有轻微表现.结论 阿托伐他汀可以抑制TNF-α的表达,减轻炎症反应.     

逆灸关元穴对自然更年期大鼠下丘脑雌激素受体α和促肾上腺激素释放激素及血浆促肾上腺激素的调节

目的：观察逆灸关元穴对更年期大鼠下丘脑和血液中应激激素及下丘脑室旁核雌激素受体的影响，探究逆灸对更年期大鼠应激影响及中枢雌激素受体α调节机制。方法：实验于2003—11／2004—06在北京中医约大学钊灸学院针灸机理实验室完成。①选用健康SD雌性大鼠128只。其中，4月龄（年轻）16只为年轻正常组。随机将10月龄大鼠112H分为7组：12，14，16月龄逆灸组；10，12，14，16月龄对照组；每组16只。自然老化鼠。所有逆灸组大鼠均在10月龄开始艾炷灸，将艾炷点燃后，直接放置在关元穴上施灸，每次灸一壮。灸后局部皮肤略潮红。1周灸2次，共灸8周。10，12，14，16月龄对照组及年轻正常组除轻抓仰躺外不做其他处理。②每组取10只采用放射免疫法测定下丘脑促肾上腺激素释放激素、血浆促肾上腺激索水平。每组取其余6只采用免疫组化法测定下丘脑雌激素受体α含量。③组间计量资料差异比较采用单因素方差分析。结果：大鼠128只均进入结果分析。①下丘脑室旁核雌激素受体α表达：各模型对照组随增龄，呈波动上升趋势，14和16月龄对照组明显高于年轻正常组（P〈0．05，0．01）。各逆灸组均低丁同月龄对照组，其中逆灸16月龄组明显低于16月龄对照组（P〈0．05）。②下丘脑促肾上腺激素释放激素含量：模型对照各组随增龄呈波动下降趋势，14和16月龄组明显低于年轻正常组（P〈0．05-0．01）。逆灸14月龄组明显低于同龄对照组（P〈0．05）。③血浆促肾上腺激素水平：模型对照和逆灸各组随增龄升高，14和16月龄组明显高于年轻正常组（P〈0．01）。逆灸12和16月龄与同月龄对照组相近（P〉0．05），逆灸14月龄组明显低于同月龄对照组（P〈0．05）。结论：随增龄更年期大鼠处存一种应激紊乱与失调状态，逆灸可使随后12，14，16月龄大鼠紊乱的应激激素得到一定的调整，并这种作用可能与逆灸调节下丘脑雌激素受体α表达有关。     

充血性心力衰竭患者肿瘤坏死因子-α和可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ变化及其意义

目的　探讨充血性心力衰竭 (CHF)时肿瘤坏死因子 α(TNF α)和可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFRⅡ )的变化及其与CHF的关系。方法　CHF患者 4 5例和年龄匹配的正常对照组 17例 ,根据NY HA分级 ,将CHF患者分成Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级 3组 ;根据体重分成恶病质组及非恶病质组。用酶联免疫法测定sTNFRⅡ ,用放射免疫法测定TNF α。结果　CHF患者血清TNF α和sTNFRⅡ较对照组明显升高 ,TNF α在Ⅲ、Ⅳ级时显著升高 ,sTNFRⅡ在心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级时均显著升高。不同病因的CHF之间TNF α和sTNFRⅡ无显著差异 ,恶病质组及非恶病质组之间无明显变化。血清TNF α与sTNFRⅡ呈正相关 (r =0 .5 14 1,P <0 .0 1)。结论　血清TNF α和sTNFRⅡ水平与CHF的严重程度密切相关 ,可作为判断CHF严重程度及预后的指标。     

超短波对脑血管病可溶性自细胞介素α受体及肿瘤坏死因子α、干扰素α的影响

目的 探讨超短波对脑血管病患者可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－ ２Ｒ）、肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）、干扰素α（ＩＦＮ－α）的影响。方法　　４０例脑血管病患者随机配对分成治疗组、对照组各２０例。两组均接受常规药物治疗,治疗组另外增加胸部超短波治疗作用于胸腺,治疗前后分别测定外周血清ＳＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－α含量变化。结果治疗组治疗后ＳＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦ－α均减少（ｔ＝２．９８、３．９２,Ｐ＜０．０１）;ＩＦＮ－α增加（ｔ＝３．８６,Ｐ＜０．０１）。结论　　超短波治疗能提高患者机体的总体免疫平衡状态。     

脑心通对局灶性脑缺血大鼠行为学和脑组织肿瘤坏死因子α的影响

目的:探讨脑心通对大鼠局灶性脑缺血损伤后行为学及脑组织肿瘤坏死因子α表达的影响。方法:实验于2004-03/11在河北医科大学第二医院神经内科实验室进行。取成年健康雄性SD大鼠150只,制造大鼠局灶性大脑中动脉阻断造模手术后,将大鼠随机分为5组,即脑心通4g/kg组、2g/kg组、1g/kg组、生理盐水和假手术组,各组又分为6,24,48,72h,7d5个亚组,每亚组均为6只大鼠。脑心通各剂量组均为灌胃给药,生理盐水组给同体积的生理盐水,于相应时间点进行行为学评分后处死动物快速取脑,观察脑含水量的变化,病理切片苏木精-伊红染色观察组织病理学改变,免疫组织化学的方法测定肿瘤坏死因子α的动态变化。结果:实验中有8只大鼠死亡,后随机补充,进入结果分析仍为150只大鼠。①行为学评分:大鼠在大脑中动脉阻断后手术对侧肢体存在不同程度瘫痪,在术后48和72h时神经功能缺损最为明显,7d时神经功能基本恢复正常。②病理观察:除假手术组外,其余各组在脑梗死后6h局部可见少量散在炎性细胞浸润;梗死后48h,炎性细胞浸润明显增多;并持续到7d。③脑组织含水量:与假手术组相比,其他各组在各时间段均增加。术后24,48h脑心通4g/kg组为(78.95±1.36)%,(79.44±1.01)%,脑心通2g/kg组为(79.03±0.87)%,(80.46±1.54)%,低于同期的脑心通1g/kg组和生理盐水组[(79.21±0.68)%,(82.02±1.76)%,(79.30±1.11)%,(82.68±0.91)%,P<0.05]。④肿瘤坏死因子α阳性细胞表达:与假手术组相比,其他各组在各时间段均增加,梗死后6h开始增多,48h达高峰。术后24,48h脑心通4g/kg组为(27.6±2.1),(18.4±1.5)个,脑心通2g/kg组为(38.4±2.1),(23.2±3.3)个,低于同期的脑心通1g/kg组和生理盐水组[(50.4±5.6),(30.8±5.3),(52.8±3.7),(33.0±4.7)个,P<0.05]。结论:脑心通可能通过减轻脑水肿,降低脑内肿瘤坏死因子α的表达减少炎性细胞的浸润,从而对大鼠缺血脑组织损伤产生保护作用。     

烫伤大鼠组织肿瘤坏死因子α受体基因表达的变化

目的：观察烫伤后机体主要脏器肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）及其受体（ＴＮＦＲ）ｍＲＮＡ表达的变化规律及二者的平衡关系。方法：采用大鼠３５％Ⅲ度烫伤模型,分别于伤前、伤后１２、２４、４８、７２小时活杀动物。留取组织和血标本分别检测组织ＴＮＦα、ＴＮＦＲｍＲＮＡ表达及器官功能指标。结果：烫伤后组织ＴＮＦα基因表达明显增强,而ＴＮＦＲｍＲＮＡ表达则呈持续降低趋势。同时,烫伤后各组织ＴＮＦα／ＴＮＦＲｍＲＮＡ比值显著增加,其中以肺组织升高最为显著。相关分析表明,肝组织ＴＮＦＲｍＲＮＡ表达、ＴＮＦα／ＴＮＦＲｍＲＮＡ比值与血清谷草转氨酶（ＧＯＴ）呈显著相关（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）,肾组织ＴＮＦＲｍＲＮＡ表达与血清肌酐（ＳＣｒ）呈显著负相关（Ｐ＜０．０１）。结论：烫伤可明显上调机体主要脏器ＴＮＦαｍＲＮＡ的表达,而ＴＮＦＲ基因表达则呈下调反应,提示ＴＮＦα和ＴＮＦＲ比例严重失调可能参与了烧伤后多器官功能损害的病理生理过程。     

肿瘤坏死因子-α与血沉关系的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与红细胞沉降率(血沉,ESR)的关系。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清TNF-α及可溶性肿瘤坏死因子受体-Ⅰ(sTNFRⅠ)水平,采用魏氏法测定血沉;体外加入TNF-α、sTNFR-Ⅰ及sTNFR-Ⅱ后魏氏法测定血沉。结果肿瘤患者和糖尿病患者的血清TNF-α、sTNFR-Ⅰ水平及ESR值均显著高于正常对照组,且血清TNF-α、sTN-FR-Ⅰ水平与ESR值之间均有相关关系;ESR值愈大,血清TNF-α、sTNFR-Ⅰ水平愈高;体外加入TNF-α可以使ESR增快。结论TNF-α和sTNFR-Ⅰ与ESR之间存在相关关系,TNF-α和sTNFR-Ⅰ可以影响ESR。     

预先艾灸对随后不同阶段更年期大鼠促性激素释放激素、卵泡刺激素和黄体生成素的干预作用

目的:观察逆灸关元穴对更年期大鼠促性激素释放激素、卵泡刺激素和黄体生成素等相关激素的影响,以及逆灸对更年期下丘脑-垂体-卵巢轴稳态维护的机制。方法:实验于2003-11/2004-06在北京中医药大学针灸学院针灸机理实验室完成。①选取鼠龄4个月的健康大鼠10只为年轻正常组,另将鼠龄10个月的大鼠70只数字表法随机分为2组,逆灸组(n=30),自然对照组(n=40),根据处死时的鼠龄,逆灸组又分12,14,16月龄3个时间点,自然对照组分10,12,14,16月龄4个时间点,每个时间点10只。②逆灸组于10月龄时采用艾炷直接灸大鼠关元穴,每次1壮,2次/周,灸后局部皮肤略潮红,共灸8周;其他2组不干预。③各组于相应时间点分批取材,采用放射免疫方法检测血浆卵泡刺激素、黄体生成素水平,下丘脑及血液促性激素释放激素水平。结果:大鼠80只全部进入结果分析。①血浆卵泡刺激素水平:自然对照组16月龄大鼠高于年轻正常组[(23.757±6.212),(10.565±0.817)U/L,P<0.05],逆灸组16月龄大鼠低于同月龄自然对照组[(17.952±2.231)U/L,P<0.05]。②血浆黄体生成素水平各组比较差异不显著(P>0.05)。③卵泡刺激素/黄体生成素比值:自然对照组16月龄大鼠大于年轻正常组(0.171±0.021,0.094±0.006,P<0.05),逆灸组16月龄大鼠小于同月龄自然对照组(0.125±0.007,P<0.05)。④下丘脑促性激素释放激素水平:自然对照组14,16月龄大鼠低于年轻正常组[(3.566±2.387),(3.032±0.602),(12.041±4.815)mg/L,P<0.05,0.01],逆灸组12,14,16月龄大鼠均高于同月龄自然对照组(P<0.05)。⑤血浆促性激素释放激素水平:自然对照组16月龄大鼠高于年轻正常组[(99.425±21.657),(23.816±6.058)ng/L,P<0.05],逆灸组12,16月龄大鼠显著高于同月龄自然对照组(P<0.05)。结论:更年期大鼠随月龄的增加,下丘脑-垂体-卵巢轴促性激素释放激素、卵泡刺激素和黄体生成素等相关激素逐渐紊乱,逆灸关元穴可缓解更年期各激素的紊乱状况,对下丘脑-垂体-卵巢轴稳态维护具有保护作用。     

预先艾灸对随后不同阶段更年期大鼠促性激素释放激素、卵泡刺激素和黄体生成素的干预作用

目的：观察逆灸关元穴对更年期大鼠促性激素释放激素、卵泡刺激素和黄体生成素等相关激素的影响，以及逆灸对更年期下丘脑-垂体-卵巢轴稳态维护的机制。方法：实验于2003—11／2004—06在北京中医药大学针灸学院针灸机理实验室完成。①选取鼠龄4个月的健康大鼠10只为年轻正常组，另将鼠龄10个月的大鼠70只数字表法随机分为2组，逆灸组（n=30），自然对照组（n=40），根据处死时的鼠龄，逆灸组又分12，14，16月龄3个时间点，自然对照组分10，12，14，16月龄4个时间点，每个时间点10只。②逆灸组于10月龄时采用艾炷直接灸大鼠关元穴，每次1壮，2次／周，灸后局部皮肤略潮红，共灸8周；其他2组不干预。③各组于相应时间点分批取材，采用放射免疫方法检测血浆卵泡刺激素、黄体生成素水平，下丘脑及血液促性激素释放激素水平。结果：大鼠80只全部进入结果分析。①血浆卵泡刺激素水平：自然对照组16月龄大鼠高于年轻正常组[（23．757&;#177;6．212），（10．565&;#177;0．817）U／L，P〈0．05]，逆灸组16月龄大鼠低于同月龄自然对照组[（17.952&;#177;2231）U/L，P〈0．051。②血浆黄体生成素水平各组比较差异不显著（P〉0．05）。③卵泡刺激素／黄体生成素比值：自然对照组16月龄大鼠大于年轻正常组（0．171&;#177;0．021，0．094&;#177;0．．006，P〈0．05），逆灸组16月龄大鼠小于同月龄自然对照组（0．125&;#177;0．007，P〈0．05）。④下丘脑促性激素释放激素水平：自然对照组14，16月龄大鼠低于年轻正常组[（3．566&;#177;2．387），（3．032&;#177;0．602），（12．041&;#177;4．815）mg／L，P〈0．05，0．01]，逆灸组12，14，16月龄大鼠均高于同月龄自然对照组（P〈0．05）。⑤血浆促性激素释放激素水平：自然对照组16月龄大鼠高于年轻正常组[（99．425&;#177;21．657），（23．816&;#177;6．058）ng／L，P〈0．05]，逆灸组12，16月龄大鼠显著高于同月龄自然对照组（P〈0．05）。结论：更年期大鼠随月龄的增加，下丘脑-垂体-卵巢轴促性激素释放激素、卵泡刺激素和黄体生成素等相关激素逐渐紊乱，逆灸关元穴可缓解更年期各激素的紊乱状况，对下丘脑-垂体-卵巢轴稳态维护具有保护作用。     

逆针关元穴对自然更年期大鼠血脂的调节作用

目的:探讨逆针关元穴对自然老化的更年期雌性大鼠血脂紊乱的调节作用。方法:实验于2004-03/06在北京中医药大学针灸学院针灸机理实验室完成。选取健康9.5个月龄SD雌性大鼠56只为实验动物。选择与人类更年期综合征病理变化更为近似的自然老化术制备模型。采用随机抽签的方法将实验动物分成2组,自然对照组和逆针组。自然对照组按照自然月龄分为4组,自然10,12,14,16月龄组,每组8只。各组每天只进行抓取刺激,不作针刺。逆针组在与自然组一同养至10月龄后,采用逆针大鼠关元穴,在关元穴下约2分处将针直刺2分,后斜向上完全刺入,留针20min。留针过程中让大鼠自由活动。2次/周,持续针刺8周,并于进入更年期的12,14,16月龄后分别取材。每年龄组8只。自然对照组与逆针组同批取材。血液标本均于上午8:00～11:00采集。经处理后采用比色法测定血清总胆固醇,三酰甘油,高密度脂蛋白胆固醇,低密度脂蛋白胆固醇,按操作说明书进行。组间采用单因素方差分析。结果:56只大鼠均获得检测,无缺失值。①血清总胆固醇水平:自然12,16月龄组比自然10月龄组显著上升[(3.46±0.18),(3.19±0.16),(3.01±0.28)mmol/L,P<0.05]。逆针12,16月龄组与同龄自然组比较显著下降[(2.97±0.19),(3.46±0.18)mmol/L,P<0.05];[(2.93±0.10),(3.09±0.16)mmol/L,P<0.05]。②三酰甘油水平:自然16月龄组与自然10月龄组比较,呈显著上升趋势[(2.17±0.38),(0.99±0.09)mmol/L,P<0.01]。逆针16月龄组与自然16月龄组比较显著下降[(2.02±0.24)(2.93±0.10)mmol/L,P<0.01]。③血清高密度脂蛋白胆固醇水平:逆针12,16月龄组比自然10月龄组显著上升[(1.33±0.17),(1.42±0.12),(1.12±0.11)mmol/L,P<0.05]。逆针12月龄组与同龄自然组比较显著上升(P<0.05)。④低密度脂蛋白胆固醇水平:自然12月龄组与自然10月龄组比较呈显著上升趋势(1.77±0.22),(1.36±0.22)mmol/L,P<0.01]。逆针12,16月龄组与同年龄自然组比较显著下降(P<0.05～0.01)。结论:逆针关元穴能调整更年期大鼠的血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平,有效调节脂代谢紊乱。     

注射肿瘤坏死因子-α对大鼠脑缺血再灌注的影响

背景一些研究提示肿瘤坏死因子-α预注射对小鼠局灶性脑缺血可产生保护作用,脑缺血耐受与血浆肿瘤坏死因子-α水平增高有关.另一方面,肿瘤坏死因子-α是与脑卒中有关的一个有害细胞因子,抗肿瘤坏死因子-α循环抗体对再灌注损伤起保护作用.目的探讨脑缺血再灌注前、后不同时期注射肿瘤坏死因子-α对大鼠脑缺血灶的影响,是保护作用还是毒性作用.设计随机对照实验.单位哈尔滨医科大学附属第二医院神经科.材料实验于2002-01/2002-04在哈尔滨医科大学动物实验中心完成;选择健康雄性Wistar大鼠120只,随机将大鼠分为8组预注射肿瘤坏死因子-α 0.05,0.5,1.0μg及磷酸盐缓冲液对照组,后注射肿瘤坏死因子-α 0.05,0.5,1.0μg及磷酸盐缓冲液对照组,每组15只.方法制备大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型.缺血前48 h或缺血2 h再灌注后,在大鼠小脑延髓池内分别注射不同剂量肿瘤坏死因子-α(0.05 μg,0.5 μg,1.0μg)或磷酸盐缓冲液.①各组取8只大鼠,于脑缺血2 h再灌注22 h,麻醉下处死取脑,制备TTC切片,用计算机图像分析系统测定每个脑片面积及梗死面积,然后计算梗死体积百分比.②各组取7只大鼠,于缺血2 h再灌注22 h后,麻醉下处死取脑,行HE、GFAP和ICAM-1免疫组化染色,用显微镜和计算机图像分析系统分析组织病理和免疫组化切片,计算胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数目及每侧半球细胞内黏附分子-1阳性血管数.主要观察指标①各组大鼠脑梗死体积百分比.②各组大鼠脑组织病理学观察.③各组大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达情况.结果120只大鼠全部进入结果分析.①脑梗死体积百分比肿瘤坏死因子-α 0.5 μg预注射组及1.0μg预注射组脑梗死体积减小,0.5μg预注射组脑梗死体积百分比减小70.9%,1.0 μg预注射组减小66.5%;肿瘤坏死因子-α 0.5 μg后注射及1.0 μg后注射组脑梗死体积增加,0.5 μg后注射组脑梗死体积百分比增加22.3%,1.0 μg后注射组增加46.7%.肿瘤坏死因子-α 0.5 μg预注射组与1.0 μg预注射组间比较无显著差异(P＞0.05),肿瘤坏死因子-α 0.5 μg后注射组与1.0 μg后注射组间比较有显著差异(P＜0.05).②病理变化肿瘤坏死因子-α0.5 μg预注射组及1.0 μg预注射组脑组织变性坏死程度减轻;肿瘤坏死因子-α0.5 μg后注射及1.0 μg后注射组脑组织变性坏死程度加重.③胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白的表达肿瘤坏死因子-α0.5 μg预注射组及1.0 μg预注射组胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达减少(P均＜0.05);肿瘤坏死因子-α 0.5μg后注射及1.0 μg后注射组胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达增加(P均＜0.05);肿瘤坏死因子-α 0.5 μg预注射组与1.0 μg预注射组间比较无显著差异(P均＞0.05),肿瘤坏死因子-α 0.5 μg后注射组与1.0 μg后注射组间比较有显著差异(P均＜0.05).结论①肿瘤坏死因子-α预注射对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用,该作用与星形胶质细胞的修复作用无关,而与细胞间黏附分子-1表达减少有关.②在脑缺血再灌注后给肿瘤坏死因子-α则加重脑缺血,该作用与细胞间黏附分子-1表达增加有关.③脑缺血前或脑缺血后给予肿瘤坏死因子-α决定了它的作用效果,这两种作用都有剂量依赖性.     

注射肿瘤坏死因子-α对大鼠脑缺血再灌注的影响

背景：一些研究提示肿瘤坏死因子-α预注射对小鼠局灶性脑缺血可产生保护作用，脑缺血耐受与血浆肿瘤坏死因子-α水平增高有关。另一方面，肿瘤坏死因子-α是与脑卒中有关的一个有害细胞因子，抗肿瘤坏死因子-α循环抗体对再灌注损伤起保护作用。目的：探讨脑缺血再灌注前、后不同时期注射肿瘤坏死因子-α对大鼠脑缺血灶的影响，是保护作用还是毒性作用。设计：随机对照实验。单位：哈尔滨医科大学附属第二医院神经科。材料：实验于2002-01／2002-04在哈尔滨医科大学动物实验中心完成；选择健康雄性Wistar大鼠120只，随机将大鼠分为8组：预注射肿瘤坏死因子-α0．05，0．5，1．0μg及磷酸盐缓冲液对照组，后注射肿瘤坏死因子-α0．05，0．5，1．0μg及磷酸盐缓冲液对照组，每组15只。方法：制备大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型。缺血前48h或缺血2h再灌注后，在大鼠小脑延髓池内分别注射不同剂量肿瘤坏死因子-α（0．05μg，0．5μg，1．0μg）或磷酸盐缓冲液。①各组取8只大鼠，于脑缺血2h再灌注22h，麻醉下处死取脑，制备TFC切片，用计算机图像分析系统测定每个脑片面积及梗死面积，然后计算梗死体积百分比。②各组取7只大鼠，于缺血2h再灌注22h后，麻醉下处死取脑，行HE、GFAP和ICAM-1免疫组化染色，用显微镜和计算机图像分析系统分析组织病理和免疫组化切片，计算胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数目及每侧半球细胞内黏附分子-1阳性血管数。主要观察指标：①各组大鼠脑梗死体积百分比。②各组大鼠脑组织病理学观察。③各组大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达情况。结果：120只大鼠全部进入结果分析。①脑梗死体积百分比：肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组及1．0μg预注射组脑梗死体积减小，0．5μg预注射组脑梗死体积百分比减小70．9％，1．0μg预注射组减小66．5％；肿瘤坏死因子-α0．5μg后注射及1．0μg后注射组脑梗死体积增加，0．5μg后注射组脑梗死体积百分比增加22.3％，1．0μg后注射组增加46．7％。肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组与1．0μg预注射组间比较无显著差异（P〉0．05），肿瘤坏死因子-α0．5μg后注射组与1．0μg后注射组间比较有显著差异（P〈0．05）。②病理变化：肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组及1．0μg预注射组脑组织变性坏死程度减轻；肿瘤坏死因子-α0．5μg后注射及1．0μg后注射组脑组织变性坏死程度加重。③胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白的表达：肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组及1．0μg预注射组胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达减少（P均〈0．05）；肿瘤坏死因子-α0．5μg注射及1．0μg后注射组胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达增加（P均〈0．05）；肿瘤坏死因子-α0．5μg预注射组与1．0μg预注射组间比较无显著差异（P均〉0．05），肿瘤坏死因子-α0．5μg后注射组与1．0μg后注射组间比较有显著差异（P均〈0．05）。结论：④肿瘤坏死因子-α预注射对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用，该作用与星形胶质细胞的修复作用无关，而与细胞间黏附分子-1表达减少有关。②在脑缺血再灌注后给肿瘤坏死因子-α则加重脑缺血，该作用与细胞间黏附分子-1表达增加有关。③脑缺血前或脑缺血后给予肿瘤坏死因子-α决定了它的作用效果，这两种作用都有剂量依赖性。     

唑来膦酸对大鼠成骨细胞护骨素及肿瘤坏死因子αmRNA表达的影响

背景：唑来膦酸属于第3代双瞵酸盐类药物,在临床上被广泛应用于治疗骨吸收增加类疾病,其对破骨细胞的作用及影响已取得了共识,而对于成骨细胞的影响尚有争议。目的：观察唑来膦酸对大鼠成骨细胞增殖、分化和护骨素及肿瘤坏死因子αmRNA表达的影响。方法：体外培养新生24h内SD大鼠颅盖骨来源的成骨细胞,用10-5～10-9mol/L唑来膦酸进行干预,分别于干预后第3,5,7天采用MTT法来测吸光度值,以检测唑来膦酸对大鼠成骨细胞增殖的影响;硝基苯基质动力学法和RT-PCR在干预后72h,测量细胞碱性磷酸酶活性和护骨素及肿瘤坏死因子αmRNA的表达。结果与结论：较高浓度（10-5mol/L）的唑来膦酸明显抑制成骨细胞增殖,10-7～10-9mol/L唑来膦酸不影响成骨细胞的分化。10-5～10-9mol/L唑来膦酸能使成骨细胞护骨素mRNA表达增加,肿瘤坏死因子αmRNA表达下降。说明唑来膦酸在低浓度时不影响成骨细胞的增殖及分化,其可通过调节成骨细胞护骨素、肿瘤坏死因子αmRNA的表达,来发挥其抗骨吸收的作用。     

唑来膦酸对大鼠成骨细胞护骨素及肿瘤坏死因子αmRNA表达的影响

背景:唑来膦酸属于第3代双瞵酸盐类药物,在临床上被广泛应用于治疗骨吸收增加类疾病,其对破骨细胞的作用及影响已取得了共识,而对于成骨细胞的影响尚有争议。目的:观察唑来膦酸对大鼠成骨细胞增殖、分化和护骨素及肿瘤坏死因子αmRNA表达的影响。方法:体外培养新生24h内SD大鼠颅盖骨来源的成骨细胞,用10-5～10-9mol/L唑来膦酸进行干预,分别于干预后第3,5,7天采用MTT法来测吸光度值,以检测唑来膦酸对大鼠成骨细胞增殖的影响;硝基苯基质动力学法和RT-PCR在干预后72h,测量细胞碱性磷酸酶活性和护骨素及肿瘤坏死因子αmRNA的表达。结果与结论:较高浓度(10-5mol/L)的唑来膦酸明显抑制成骨细胞增殖,10-7～10-9mol/L唑来膦酸不影响成骨细胞的分化。10-5～10-9mol/L唑来膦酸能使成骨细胞护骨素mRNA表达增加,肿瘤坏死因子αmRNA表达下降。说明唑来膦酸在低浓度时不影响成骨细胞的增殖及分化,其可通过调节成骨细胞护骨素、肿瘤坏死因子αmRNA的表达,来发挥其抗骨吸收的作用。