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宋惠萍 《中南大学学报(医学版)》1989,(1)
本实验条件下,醛还原酶的最适反应温度为40℃。在25—45℃范围内,K_(iNADPH)随温度上升而增大,K_(mD-)葡萄糖醛酸(K_(mD-Glu))随温度上升而减小,25℃时K_(mNADPH)值最小,反应的活化能为4521±653Cal/mol。温度越高,Alr1的ΔG~≠越大,约3/4的ΔG~≠用以维持过渡态酶一底物复合物的空间构象,以增加分子的有序程度。 相似文献
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醛糖还原酶的分离纯化和性质分析 总被引:11,自引:0,他引:11
利用离心,盐析及DEAE-纤维素,羟基磷灰石,葡聚糖-G100多步层析法将牛睾丸AR分离纯化,醛糖还原酶(aldosereducase,AR),并利用体外酶动力学方法测定其底物特异性,为寻长有效的醛糖还原酶抑制剂提供线索,结果;纯化的酶经SDS-PAGE电泳鉴定示一单一蛋白条带,牛睾丸AR,Mr约为(40000±1000)u,AR底物特异性,按1/Km大小依次排列为:P-硝基苯醛;DL-甘油醛,D 相似文献
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利用离心、盐析及DEAE-纤维素、羟基磷灰石、葡聚糖-G100多步层析法将牛睾丸AR分离纯化,醛糖还原酶(aldosereductase,AR),并利用体外酶动力学方法测定其底物特异性,为寻找有效的醛糖还原酶抑制剂提供线索。结果:纯化的酶经SDS-pAGE电泳鉴定示一单一蛋白条带,牛睾丸ARMr约为(40000±1000)u,AR底物特异性,按1/km大小依次排列为:P-硝基苯醛,DL-甘油醛,D-葡萄糖醛酸,D-木糖,D-半乳糖,D-葡萄糖。 相似文献
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醛糖还原酶抑制剂对大鼠肾脏醛糖还原酶基因表达的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:观察醛糖还原酶抑制剂(ARI)依帕司他对大鼠肾脏AR mRNA水平和肾功能相关指标的影响。方法:运用在单侧肾结扎的基础上注射STZ的方法建立大鼠糖尿病肾病模型,给予醛糖还原酶抑制剂依帕司他灌胃4周,RT—PCR的方法检测各组大鼠肾皮质AR mRNA水平.观察依帕司他对AR mRNA是否有影响以及血清和尿液中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和总蛋白(TP)的变化。结果:给药组大鼠肾脏AR mRNA水平明显高于对照组(P〈0.05);给予醛糖还原酶抑制剂依帕司他4周后,低剂量组(L组)、高剂量组(H组)AR mRNA水平低于模型对照组(M组)(P〈0.05),但L组和H组之间没有差别(P〉0.05)。结论:糖尿病肾病大鼠肾脏AR mRNA水平明显升高,说明AR与糖尿病肾病的发生有关:醛糖还原酶抑制剂依帕司他对糖尿病肾病大鼠肾功能没有影响,但可降低AR mRNA水平。 相似文献
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醛糖还原酶的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
醛糖还原酶是醛-酮还原酶超家族的一员,广泛存在于血管、肾脏、心脏、脑、骨骼肌、视网膜、胎盘、神经等组织中。它以烟酰胺腺嘌吟二核苷磷酸(NADPH)为辅酶催化多种醛、酮类物质还原为醇。除促进糖尿病并发症发生外,还参与多种氧化应激性疾病,参与细胞信号转导和细胞增殖过程。 相似文献
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红细胞醛糖还原酶荧光法的建立及意义 总被引:2,自引:0,他引:2
目的建立一种准确测定醛糖还原酶(AR)活性的方法。方法利用NADPH、DL-甘油醛、磷酸缓冲液和适量红细胞溶血液组成的反应体系,以荧光法测定了红细胞AR活性,并对酶反应最佳条件进行了实验探讨。结果①血红蛋白浓度在1~10μl范围内,随着所加量的增加,反应后的NADPH消耗也逐渐增加,两者之间有很好的相关性;②反应温度对测定结果的影响不很明显;③以NADPH作辅酶时测得酶活性约为NADPH的1/3,这两种辅酶测得的荧光读数有良好的相关性(r=0.92);④pH6.0~6.5时NADPH的消耗最大;⑤批内变异系数(CV)5.27%;批间变异系数(CV)8.98%;⑥该法测定20例正常对照和40例糖尿病人红细胞AR结果表明,糖尿病人AR活性显著高于正常人(P<0.01),且AR活性与血糖值正相关(P<0.01)。结论荧光法灵敏、准确、稳定、特异,为深入研究AR与慢性并发症(DCC)的发生、发展的关系,提供了一个可靠的手段。 相似文献
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中药巴戟天对晶状体醛糖还原酶的抑制作用 总被引:5,自引:0,他引:5
目的研究中药巴戟天对晶状体醛糖还原酶(AR)的抑制作用,以期找到一种治疗糖性白内障的中药。方法提取了中药巴戟天水溶性成分,以比色法检测其对大鼠和猪的晶状体醛糖还原酶的抑制作用。结果①本实验制备的酶液的比活性分别为:猪晶状体0.166μmol.min-1.mg-1protein,大鼠晶状体0.82μmol.min-1.mg-1protein;②巴戟天对猪晶状体醛糖还原酶的半数抑制浓度(IC50)为25 mg.L-1,对大鼠晶状体醛糖还原酶的IC50为46 mg.L-1。结论中药巴戟天水溶性成分对大鼠和猪晶状体醛糖还原酶有抑制作用。 相似文献
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4种药物对醛糖还原酶的抑制作用 总被引:10,自引:0,他引:10
筛选有效的醛糖还原酶抑制剂,用于糖尿病慢性并发症的防治。应用体外酶动力学抑制实验了/观察了4种药物对牛睾丸纯化醛糖还原酶的抑制作用,双倒数作图法确定抑制类型,Dixon和Cornish-Bowden作图法求取药物对酶的抑制常数。 相似文献
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21种中药不同提取部位对人醛糖还原酶的抑制作用 总被引:10,自引:0,他引:10
高血糖引发的糖尿病(中医称为"消渴症")慢性并发症(DCC)诸如神经、肾脏、视网膜病变和白内障等,极大地增加了心脏病、中风、失明、截肢和肾衰竭的危险性[1].现代医学研究证明DCC与多元醇通路相关,醛糖还原酶(aldose reductase,AR)作为多元醇通路的限速酶,就成了延缓和防治DCC的关键因素[2].为此我们研究了21种治疗消渴症中药的不同提取部位对人AR的抑制作用.结果表明,这21种中药对人AR均有不同程度的抑制作用. 相似文献
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醛糖还原酶存在于人体神经、红细胞、晶状体、视网膜等组织器官巾,在多元醇通路巾催化血液巾的葡萄糖生成山梨醇。醛糖还原酶是多元醇通路的关键限速酶。当血糖浓度维持在正常生理水平时,它并不激活,它对葡萄糖的亲和力较低,此时葡萄糖很少转化为山梨醇。在高血糖状况下,如糖尿病,磷酸己糖激酶被饱和,这时醛糖还原酶激活, 相似文献
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醛糖还原酶与糖尿病微血管并发症 总被引:6,自引:0,他引:6
葡萄糖代谢的多元醇通路由醛糖还原酶 (AR)和山梨醇脱氢酶共同构成。醛糖还原酶是该通路的限速酶 ,属还原型辅酶II(NADPH)依赖型醛 -酮还原酶族 ,特异性较差 ,可催化多种醛还原为它们相应的醇 ,将D -葡萄糖还原为山梨醇 ,随后在山梨醇脱氢酶的催化下氧化为果糖。正常 相似文献
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应用荧光分光光度计测定40例非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞内醛糖还原酶(AR)的活性。结果提示:糖尿病患者红细胞AR明显高于健康对照组,并与血糖呈明显正相关。 相似文献
17.
糖尿病病人红细胞醛糖还原酶测定及意义 总被引:3,自引:0,他引:3
应用荧光分光光度计测定40例非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞内醛糖还原酶(AR)的活性。结果提示:糖尿病患者红细胞AR明显高于健康对照组,并与血糖呈明显正相关。 相似文献
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应用荧光法、C18反相高压液相层析和气相色谱法分别测定17例正常人和32例Ⅱ型糖尿病患者(17例有并发症)红细胞内的醛糖还原酶活性、某些核普酸和糖醇浓度。结果显示:Ⅱ型糖尿病患者红细胞内醛糖还原酶的活性高于正常人;有并发症患者的酶活性又高于无并发症患者,证明高血糖能激活醛糖还原酶,激活程度与血糖浓度呈正相关。患者红细胞内NADP+、山梨醇和果糖的浓度高于正常对照;NADPH和NAD+浓度低于正常对照,而此5项指标在两组患者间差异无显著性。 相似文献
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醛糖还原酶抑制剂对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
研究醛糖还原酶抑制防治糖尿产现肾脏病变的意义,利用糖尿产现SD大鼠动物模型观察了醛还原酶抑制剂sorbinil对大鼠尿蛋白和是能脏超微结构的影响,结果:糖尿病鼠用sorbinil治疗后尿蛋白呈下降趋势,肾小球基底膜厚度及系膜基质堆积明显减少。 相似文献
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筛选有效的醛糖还原酶抑制剂,用于糖尿病慢性并发症的防治。应用体外酶动力学抑制实验,观察了4种药物对牛睾丸纯化醛糖还原酶的抑制作用,双倒数作图法(Lineweaver-Burkplots)确定抑制类型,Dixon和Cor-nish-Bowden作图法求取药物对酶的抑制常数。结果:索比尼尔为非竞争性抑制剂,托瑞斯他为反竞争性抑制剂,黄岑甙、黄连素为混合性抑制剂,抑制常数(Ki)分别为:1.08μmol/L,0.12μmol/L,5.0μg/ml和2.7μg/ml结论:本实验方法简便有效,可用于醛糖还原酶抑制剂的初步筛选。 相似文献