聚合酶链反应及斑点杂交法检测尖锐湿疣皮损乳头瘤病毒

我们在对９５份尖锐湿疣标本作光镜观察的同时又做了斑点杂交及ＰＣＲ检测，以比较其在诊断上的价值。一、资料和方法（一）病例：９５例患者为我院性病门诊患者，临床诊断为尖锐湿疣，男３９例，女５６例。１１份正常皮肤取自女性分娩侧剪外阴皮肤，１８份新鲜宫颈组织取自子宫肌瘤手术病人，分别作病理检查，均证实无异常。（二）检测方法：１．光镜检查及斑点杂交与以前报道相同［人２．ＰＣＲ［２，（）ＰＣＲ模板ＤＮＡ：石蜡包埋标本，切４张１０Ｐｍ厚切片，经二甲苯脱蜡。无水酒精处理，入１００ｐｌ消化液，５５Ｃ孵育３ｈ，新鲜宫…     

聚合酶链反应和斑点杂交方法检测人乳头瘤病毒DNA

目前用于检测ＨＰＶ感染的方法很多，我们对聚合酶链反应（ＰＣＲ）和斑点杂交方法进行了比较研究。一、临床资料１７例尖锐湿疣病例均来自１９９０～１９９１年我院皮肤科和妇科外阴门诊，５％醋酸白试验均阳性。所有病例均取病损活检，经病理诊断为尖锐湿疣。二、方法（一）ＰＣＲ１．寡核着酸引物的设计：根据已公布的病毒基因组序列设计寡核着酸引物序列，扩增４型ＨＰＶ的高保守区Ｅ６区［‘·’］。由于尖锐湿疣主要是ＨＰＶ６、１１型引起，ＨＰＶ６和１１型的基因组Ｅ６区有同源序列，故将ＨＰＶ６、１１型设计了一对共同引物，引物…     

聚合酶链反应检测尖锐湿疣组织中HPVDNA

我们根据引起尖锐湿疣常见的ＨＰＶ６ｂ和１１型的同源序列设计了一对引物，用ＰＣＲ方法对临床诊断的３２例尖锐湿疣组织进行了ＨＰＶＤＮＡ检测。一、病例和方法（一）临床资料：３２例尖锐湿疣和５例假性湿疣均选自我科１９９２年门诊病例，依据有非婚性接触史、皮损部位及形态进行了临床初步诊断。其中男９例，女２８例。年龄２０～４５岁。病程数周至半年。发病部位主要在小阴唇、阴道、龟头及冠状沟等处。３２例尖锐湿疣表现为红色、棕褐色湿润的小丘疹和米粒至黄豆大小疣状、菜花状赘生物。５例假性湿疣均在小阴唇内侧，表现为片状鱼…     

直接原位聚合酶链反应检测尖锐湿疣中的人乳头瘤病毒

评价用直接原位聚合酶链反应(PCR)技术辅助诊断尖锐湿疣(CA)的价值及观察人乳头瘤病毒(HPV)在CA中的组织学分布模式。25例CA中,10例具典型组织学特征的CA均有HPV分布,主要位于表皮浅层,另11例缺乏典型空泡细胞的CA在颗粒层或棘细胞全层测得HPV.直接原位PCR通过标记生物素的寡核苷酸在扩增时直接掺入结合,再用免疫组织化学测定,能在石蜡切片上将病毒检测结果与组织学变化直接相比,有助于病理学家对可疑损害作HPV感染的分析。     

通用引物介导聚合酶链反应检测尖锐湿疣人乳头瘤病毒

人类乳头瘤病毒(HPV)为双链DNA病毒,已发现60多型。近年来聚合酶链反应(PCR)技术作为检测HPV的手段已广泛应用,然而如各型分别检测,则费用大,临床也难以开展。我们依据HPV各型均具有的保守系列,采用可同时检测10多型HPV的通用引物PCR技术(GP-PCR)[1,2],为尖锐湿疣(CA)患者提供了特异性强、简便和经济的检测新途径。病例和方法病例　48例CA均有典型的临床表现,其中男29例,女19例,年龄18～48岁,平均29岁,病程2周～1年半,平均5月。损害分布部位主要在龟头、冠状沟、包皮、阴茎体、阴唇、阴道及会阴肛门等处,损害形态主要有菜花状…     

聚合酶链反应及组织病理诊断尖锐湿疣的比较研究

运用聚合酶链反应及组织病诊断２０例尖锐湿疹，结果表明，ＰＣＲ诊断ＣＡ具有特异性强，灵敏度高及方法简便的特点，组织病理是诊断ＣＡ的一个重要手段，但有明会出现假阴性，作者对ＰＣＲ的特异扩增片段进行了克隆和序列测定，其结果进一步肯定了本方法的可靠性。     

聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒的进展

聚合酶链反应以其特异、敏感和快速准确等特点已广泛用于人乳头瘤病毒感染的临床诊断及流行病学研究。以此为基础 ,结合核酸杂交、酶谱分型、DNA芯片等技术 ,使人乳头瘤病毒研究手段日益增多 ,检测方法逐渐完善。就聚合酶链反应检测人乳头瘤病毒的进展作一综述     

聚合酶链反应及转印杂交对尖锐湿疣复发的病因学研究

用通用引物介导的聚合酶链反应及其产物斑点杂交技术，对１５例复发及相应的原发尖锐湿疣（ＣＡ）皮损中人乳头瘤病毒相关序列进行了检测和分型；同时还对３５例原发ＣＡ周围外观正常皮肤组织ＤＮＡ作了转印杂交分析。结果表明隐性感染是ＣＡ复发的非常重要原因，再感染也是ＣＡ复发不容忽视的原因。     

聚合酶链反应检测尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒DNA

我们应用聚合酶链反应(PCR)检测了39例尖锐湿疣患者疣组织及其中5例患者血液中人乳头瘤病毒(HPV)的DNA,结果显示疣组织中HPV 6型的阳性率为76.92％(30例),HPV 11型的阳性率为12.82％(5例),HPV 6、11型同时阳性率为10.26％,HPV 16、18、31、33、52b、58型检测结果为阳性,5例患者血液中未检测到HPVDNA。检测结果表明:尖锐湿疣患者疣组织中HPV的总阳性率为100％,其HPV亚型主要为HPV 6型和11型,同一患者可同时存在二种HPV亚型的感染,PCR是检测尖锐湿疣HPV DNA快速、准确、有效的方法。     

包头地区尖锐湿疣的发病人群及HPV的型别分析

目的 分析包头地区尖锐湿疣（CA）的发病人群及其人工乳头瘤病毒（HPV）的型别。方法 用HPV通用型和特异型引物6／11、16／18、16、18型对CA组织进行聚合酶链反应（PCR）检测。结果 通用型100％、6／11型66．8％、16型1％、6／11＋16／18型13．3％,其它型10．5％。结论 包头地区CA感染以HPV6／11型为主。HPV感染高峰年龄是20－40岁。女性明显高于男性,尤其是生育期妇女。     

聚合酶链反应检测尖锐湿疣皮损内人乳头瘤病毒

１３个皮损组织取自１３例尖锐湿疣（ＣＡ）患者，１３例基底细胞上皮瘤（ＢＣＣ）组织作为对照，用溴化钠液分离表真皮，从组织中提出的 ＤＮＡ和溴化钠液分别用聚合酶链反应检测 ＨＰＶ ＤＮＡ。１１例ＣＡ表皮中检出 ＨＰＶ ＤＮＡ，ＨＰＶ６有７例，ＨＰＶ１１有４例。３例ＣＡ真皮中发现有ＨＰＶ ＤＮＡ，ＨＰＶ６有２例，ＨＰＶ１１有１例。２例标本因溴化钠液被ＨＰＶ污染未作统计。在ＢＣＣ组织中未发现有ＨＰＶ ＤＮＡ。在某些ＣＡ真皮内含有 ＨＰＶ ＤＮＡ可以解释散发病例的复发性。     

核酸原位杂交和聚合酶链反应法检测78例尖锐湿疣HPV DNA分析

尖锐湿疣(CA)是由人乳头瘤病毒(HPV)感染引起的性传播疾病。为从分子水平上诊断和鉴别诊断尖锐湿疣，我们应用HPV6／11 DNA探针核酸原位杂交和聚合酶链反应(PCR)法对尖锐湿疣组织中HPV进行了检测，报道如下。     

体外经微波和激光处理后的尖锐湿疣皮损中HPVDNA研究

我们研究了12个尖锐湿疣的新鲜标本.每个标本分成三等分,第一等分不作处理;第二、三等分分别用CO₂激光和微波处理.12个未经处理的皮损用聚合酶链反应均检测出HPV DNA(100%).HPV 16和11型各6例.12例皮损经CO₂激光处理后10例(83%)发现HPV DNA.微波处理组HPV DNA 6例阳性(50%),经统计学处理、微波处理后皮损中HPV DNA的阳性率比未处理组明显降低,统计学有显著性差异(χ²=4.18,P<0.05),微波对HPV DNA损害比CO₂激光更有效.     

474例尖锐湿疣患者HPV检测与分型

人乳头瘤病毒（HPV）有多种基因型，已有120多个亚型被确定，约40种涉及生殖道感染，与宫颈癌和宫颈上皮内癌变有关的HPV称高危型，包括16、18、31、33、35、39、45、51、52．56、58、59、68型等；与外生殖器尖锐湿疣等良性病变有关的HPV称低危型，包括6、11、42、43、44型等。高危型HPV的持续感染是宫颈癌的主要原因，因此，对HPV亚型尤其是高危亚型进行分型研究非常必要。本文总结了我科6年来采用聚合酶链反应（PCR）检测性病门诊确诊或疑似尖锐湿疣患者进行的HPV—DNA检测结果，现报道如下。     

宫颈尖锐湿疣的分化程度与HPV亚型的关系

为探讨宫颈尖锐湿疣的分化程度与HPV感染亚型的关系,用PCR方法分析宫颈尖锐湿疣的HPV亚型,电镜观察宫颈尖锐湿疣的超微病理变化,免疫组化方法检测宫颈尖锐湿疣中HPV抗原表达。结果显示,扁平型宫颈尖锐湿疣HPV6/11的感染率明显高于HPV16/18的感染率(P<0.01),乳头型宫颈尖锐湿疣HPV16/18的感染率明显高于HPV6/11的感染率(P<0.01);扁平型宫颈尖锐湿疣主要表现为凹空细胞,乳头型宫颈尖锐湿疣主要表现为细胞核的病理性改变;具有凹空细胞的宫颈尖锐湿疣中,HPV6/11的阳性率明显高于HPV16/18的阳性率(P<0.01),以细胞核病理性改变为特征的宫颈尖锐湿疣中,HPV16/18的阳性率明显高于HPV6/11的阳性率(P<0.01);HPV抗原的表达仅见于HPV6/11感染且凹空细胞明显的宫颈尖锐湿疣。结果表明,宫颈尖锐湿疣的分化程度与HPV感染亚型有关。     

尖锐湿疣HPV的分型及宫颈阴道脱落细胞和疣组织中HPV检测的比较

目的:比较阴道脱落细胞和尖锐湿疣(CA)疣组织中HPV的基因型分布和差异.方法:采用液相芯片技术对116例CA的疣组织以及48例女性患者的宫颈阴道脱落细胞进行HPV分型.结果:116例疣组织中有114例HPV阳性,阳性检出率为98.3%,其中主要的基因型是HPV6型(61.4%),HPV11型(42.9%),HPV16型(5.3%),HPV52型(4.39%),HPV18型(3.51%).宫颈阴道脱落细胞和疣组织标本中HPV亚型的阳性检出率无显著性差异(P0.05).结论:上海地区CA患者HPV感染常见的基因型是HPV6、11、16、52和18型.应用宫颈阴道脱落细胞标本可以替代疣组织对HPV感染进行检测.     

PCR检测石蜡包埋尖锐湿疣组织中人乳头瘤病毒

应用ＰＣＲ从１００％（４０／４０）石蜡包埋尖锐湿疣组织中检测出ＨＰＶＤＮＡ。扩增ＨＰＶＤＮＡ显著地提高了检测速度及敏感性，以致从数张５～１０μｍ厚的石蜡切片中３～４ｈ即能得到结果；且ＰＣＲ扩增产物具有高度的特异性。因此，ＰＣＲ不失为检测ＨＰＶ简便、快速、敏感、特异的方法。     

尖锐湿疣患者外周血中HPV DNA的检测

目的 检测尖锐湿疣(CA)患者外周血中的人乳头瘤病毒(HPV)DNA。方法 采用聚合酶链反应(PCR)检测30例CA患者皮损和外周血中的HPV DNA,20例正常人外周血作对照。采用限制性内切酶RsaⅠ、PstⅠ对HPV作分型鉴定。选取1例皮损与外周血均为阳性的PCR产物进行测序。结果 30例CA患者皮损均检出HPV DNA,血浆中未检测到HPV DNA,有8例外周血单一核细胞(PBMC)中检测到HPV DNA(阳性率为26.7%),20例正常人对照为阴性,两组阳性率经χ²校正检验χ²=4.52,P<0.05,差异有显著性。酶切和测序结果显示PBMC中的HPV型别与其皮损处的型别有一致性。结论 CA患者在HPV感染的病程中可能存在病毒血症,这可能是CA易于复发的原因之一。