β-紫罗兰酮抑制SGC-7901细胞潜在的转移作用

目的观察β紫罗兰酮对人胃腺癌细胞(SGC7901)潜在转移的影响。方法采用细胞生长曲线,酶谱法和RTPCR技术,我们检查了不同浓度(25、50、100和200μmolL)β紫罗兰酮对SGC7901细胞生长,IV明胶酶的活性(MMP2和MMP9),nm23H1基因和金属蛋白酶抑制剂(TIMP1和TIMP2)在SGC7901细胞表达情况。β紫罗兰酮处理时间为24小时和48小时。结果β紫罗兰酮可抑制SGC7901细胞增殖。用不同浓度的β紫罗兰酮处理SGC7901细胞8天的抑制率分别为25.93%、28.21%、74.36%和90.11%。β紫罗兰酮作用于SGC7901细胞的IC50值为89μmolL。β紫罗兰酮不影响SGC7901细胞的基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的活性。然而,β紫罗兰酮可明显地促进nm23H1基因、TIMP1和TIMP2的表达,呈现剂量-反应关系。结论β紫罗兰酮可抑制SGC7901细胞的生长和增殖。可能通过上调nm23H1,TIMP1和TIMP2来影响SGC7901细胞潜在的转移。然而,β紫罗兰酮对SGC7901细胞的IV型明胶酶活性没有影响,因而,β紫罗兰酮抑制SGC7901细胞的转移需要进一步研究。     

β连环蛋白与T细胞抑制物过表达对子宫内膜癌细胞活性的影响

目的探讨β连环蛋白(β-catenin)与T细胞抑制物(ICAT)过表达对人子宫内膜癌细胞系HEC-1A活性的影响,为临床诊治提供参考依据。方法重组腺病毒载体ICAT转染HEC-1A细胞为ICAT过表达组,空白腺病毒载体转染HEC-1A细胞为空载腺病毒组,同时设置空白对照组,转染48 h后通过RT-PCR和Western blot法鉴定各组细胞ICAT表达情况;CCK-8法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期,并进行Transwell细胞迁移和侵袭试验。结果转染48 h后,ICAT过表达组细胞ICAT mRNA和蛋白相对表达量明显高于空载腺病毒组与空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.05),空载腺病毒组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。转染后第3天、第4天ICAT过表达组细胞增殖速度明显高于空载腺病毒组与空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.01)。转染后第3天,ICAT过表达组G0/G1期细胞比例明显低于空载腺病毒组与空白对照组,S期细胞比例明显高于空载腺病毒组与空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.01);G2/M期细胞比例在3组细胞间差异无统计学意义(均P>0.05)。Transwell细胞迁移和侵袭试验显示,ICAT过表达组迁移和侵袭细胞数明显多于空载腺病毒组和空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论HEC-1A细胞过表达ICAT后,细胞增殖、迁移和侵袭能力明显增强,可能与ICAT过表达影响细胞周期及上皮细胞间充质转化有关。     

过氧化物酶增殖活化受体-γ与胃癌的相关性研究进展

PPAR-γ是一类由配体激活的核转录因子,为核激素受体超家族中的成员,其生物功能复杂多样。本文综述了PPAR-γ及其配体与胃癌的发生发展的相关性。     

亚慢性氟染毒对大鼠骨组织病理改变和β-连环蛋白表达的影响

目的观察亚慢性氟染毒对大鼠骨组织中β-连环蛋白表达的影响,探讨β-连环蛋白在氟致骨损伤中的可能作用。方法 40只Wistar大鼠按体重随机分成4组,染氟组大鼠饮用含氟50、100和150mg/L的自来水,对照组大鼠饮用自来水,3个月后测定大鼠血清及骨组织氟含量,Real-time RT-PCR法和免疫组化法检测骨组织中β-连环蛋白mRNA和蛋白质表达情况。结果 HE染色显示染氟组大鼠病理学改变呈现骨皮质增厚、骨小梁增多等骨硬化表现,骺板肥大软骨细胞大量堆积且排列紊乱。染氟组大鼠骨组织中β-连环蛋白mRNA表达显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),而且随染毒剂量升高,β-连环蛋白mRNA表达逐渐升高。免疫组化显示染氟组大鼠骨组织中β-连环蛋白主要由成骨细胞和破骨细胞表达,骺板软骨肥大细胞也有阳性表达。结论β-连环蛋白在亚慢性氟染毒大鼠骨质硬化的发生中发挥重要作用。     

染料木黄酮对胃癌细胞侵袭转移的抑制作用

目的:研究染料木黄酮(genistein)对胃癌细胞侵袭转移的影响,并初步探讨其作用机制。方法:运用MTT法观察染料木黄酮对人胃癌细胞系SGC-7901细胞粘附能力的影响;用BoydenChamber膜侵袭系统,观察对SGC-7901游走和侵袭的影响;免疫细胞化学法观察对SGC-7901细胞TGF-β1表达的影响。结果:染料木黄酮作用后,SGC-7901细胞粘贴率降低(P<0.05),游走穿膜细胞数(83±4)和侵袭穿膜细胞数(35±3)均明显低于对照组(114±7,60±4,P<0.05),并且能降低TGF-β1的表达。结论:染料木黄酮能有效抑制胃癌侵袭转移。其作用机制可能与通过降低TGF-β1的表达,抑制胃癌细胞异质粘附、运动能力有关。     

类风湿关节炎患者外周血β-连环蛋白及DKK1的变化特征及其与关节损伤的相关性分析

目的 探讨类风湿关节炎（RA）患者外周血β-连环蛋白和DKK1水平的变化及其与关节损伤的相关性.方法 采用双能X线骨密度仪测量108例RA患者（观察组）和1 10例健康体检者（对照组）股骨（股骨颈、Ward区、大转子、总股骨区）和腰椎（L2.3.4）的骨密度,所有RA患者摄双手X线并进行Sharp评分;采用酶联免疫吸附试验法检测两组外周血β-连环蛋白和DKK1水平.多元分析采用多元线性回归和Logistic回归分析.结果 观察组外周血DKK1水平较对照组明显升高[（8.2±5.0）mg/L比（6.1±4.2）mg/L],差异有统计学意义（t=2.452,P=0.025）,β-连环蛋白水平与对照组比较差异无统计学意义（t=15.947,P=0.142）.RA患者各测定部位的骨密度均明显低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）;观察组骨质疏松发生率为31.5％（34/108）,明显高于对照组的15.5％ （17/110）,差异有统计学意义（x2=9.289,P=0.005）.相关性分析显示：RA患者外周血DKK1水平与红细胞沉降率（ESR）、28个关节疾病活动性评分（DAS28）、碱性磷酸酶（AKP）和双手X线关节间隙狭窄评分呈正相关（P＜ 0.01或＜0.05）;外周血β-连环蛋白水平与ESR和AKP呈正相关（P＜ 0.01或＜0.05）.多元线性回归分析显示：病程、健康状况问卷（HAQ）、DKK1影响双手X线关节间隙狭窄评分;而年龄、病程、HAQ影响双手X线骨侵蚀评分.多元Logistic回归分析发现：双手X线Sharp评分为RA患者股骨发生骨质疏松的危险因素;而年龄为RA患者腰椎发生骨质疏松的危险因素.结论 RA患者外周血DKK1水平明显升高,β-连环蛋白水平无明显变化;外周血DKK1水平与RA患者疾病活动性和关节间隙狭窄相关.     

金属β-内酰胺酶最佳酶抑制物的研究

目的探讨临床微生物实验室金属β-内酰胺酶最佳酶抑制物选择,建立一种避免金属酶漏检的方法。方法以Cucl2、Hgcl2、Fecl2、二乙烯三胺五乙酸、乙二胺四乙酸、2-巯基丙酸、巯基乙醇、巯基乙酸与头孢他啶(CAZ)药物纸片增效法测定质控菌株金属酶,从中评估出抑菌最强的酶抑制物与头孢他啶(CAZ)联合检测临床分离的100份耐亚胺培南和(或)头孢他啶铜绿假单胞菌,结果与聚合酶链反应(PCR)检测金属酶基因进行比较。结果增效法检测100份耐亚胺培南和(或)头孢他啶铜绿假单胞菌中有9份金属酶阳性,与PCR检测结果一致,阳性株中3株IMP-1扩增阳性,6株VIM扩增阳性,经基因测序确认为VIM-2型。结论用EDTA、2-巯基丙酸和头孢他啶(CAZ)药物纸片联合检测金属酶,可避免金属酶的漏检,其方法简便,结果可靠,可在基层微生物实验室开展使用。     

血浆1,3-β-D-葡聚糖诊断恶性血液病患者侵袭性真菌感染的临床研究

目的 探讨血浆1,3-β-D葡聚糖用于诊断恶性血液病患者侵袭性真菌感染的临床价值。方法 选取确诊或怀疑侵袭性真菌感染的恶性血液病患者418例及同期无真菌感染的恶性血液病患者366例。结果 以≥50pg/ml为阳性诊断标准时BG结果阳性者334例,阳性率42.60%,以≥20pg/ml为阳性诊断标准时BG结果阳性者408例,阳性率52.04%,以≥20mg/ml为阳性标准时该试验的敏感性和阴性预测值均明显高于≥50pg/ml为阳性标准,两种标准之间差异有统计学意义(P<0.05);而两种标准的特异性和阳性预测值差异无统计学意义。结论 通过1,3-β-D葡聚糖检测可以对恶性血液病患者侵袭性真菌感染进行早期诊断,而且医师可以根据经验以不同的阳性界值对其敏感性和特异性进行调节,即减少预防用药造成的毒性和增加的费用,又避免了侵袭性感染危及患者生命。     

β-胡萝卜素对三种人癌细胞影响的研究

自从Ｐｅｔｏ等人１９８１年首次提出［１］β－胡萝卜素（β－Ｃａｒｏｔｅｎｅ,β－Ｃ）可能对降低人类癌症发生率有一定作用后,多数文献报道β－Ｃ具有潜在的肿瘤化学预防作用［２,３］,但有不同观点［４］。本研究采用体外细胞培养方法,以中国地鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）为对照细胞。系统比较了接近或高于人体生理浓度的β－Ｃ对人肝癌细胞（Ｑ３）、人喉癌细胞（ＨＥＰ－２）和人胃癌细胞（ＳＧＣ）等三种人癌细胞增殖能力、细胞存活数量、活细胞蛋白含量及形态改变的生物学干扰作用,为人类癌症的早期预防和辅助治疗提供细胞学的实验…     

丙烯酰胺作业工人和正常人群血清中β-葡萄糖醛酸酶(β-G)的测定

周围神经组织的β-G活性于周围神经损害的恢复期可以升高。本文对69名丙烯酰胺作业工人进行血清中β-G测定并与50名对照组比较,未见差异。但具有周围神经损害临床体征及肌电图异常的丙烯酰胺作业工人血清中β-G活性较对照组增高(P<0.05)。血清中β-G的变化不如神经肌电图的异常率高,且易受一些生理病理因素的影响,故非丙烯酰胺中毒理想的诊断指标。本文用两种方法测定130名不同地区、不同性别健康成人的血清β-G,结果两法一致,无地区差别,但两法在男女之间差异皆显著。     

β-羟基丁酸通过抑制HDAC1/3上调β样淀粉肽处理的SH-SY5Y细胞TrkA的表达

目的 探讨β-羟基丁酸(β-hydroxybutyrate,BHB)对β样淀粉肽(β-amyloidpeptide,Aβ)处理的神经细胞保护作用及其可能的机制,为防治阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)提供依据。 方法 将体外培养的SH-SY5Y细胞进行分组,单纯BHB组、BHB干预组细胞以终浓度为5 mM BHB预处理3 h,再向Aβ处理组、BHB干预组细胞加入终浓度为20 μM的Aβ,同时设立对照组,24 h后收集细胞;采用qRT-PCR、Western Blot法检测各组细胞TrkA、HDAC1和HDAC3 mRNA及其蛋白相对表达水平。以siRNA沉默HDAC1/3,分析细胞TrkA mRNA及其蛋白相对表达水平。 结果 与对照组相比,单纯BHB组细胞的TrkA mRNA及其蛋白相对表达水平明显升高(P<0.05)、HDAC1和HDAC3 mRNA及其蛋白相对表达水平显著降低(P<0.05),Aβ组细胞TrkA mRNA及其蛋白相对表达水平显著降低(P<0.01)、HDAC1和HDAC3 mRNA及其蛋白相对表达水平显著升高(P<0.01);与Aβ组相比,BHB干预组TrkAmRNA及其蛋白相对表达水平显著升高(P<0.01)、 HDAC1和HDAC3 mRNA及其蛋白相对表达水平显著降低(P<0.01)。沉默HDAC1/3后细胞TrkA mRNA及其蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05)。 结论 BHB可通过抑制HDAC1/3,上调Aβ处理的SH-SY5Y细胞TrkA的表达。     

钙敏感受体通过胱硫醚-γ-裂解酶 抑制巨噬细胞泡沫化的机制研究

摘要:目的　探讨高表达的钙敏感受体（CaR）是否能通过增强胱硫醚-γ -裂解酶（CSE）的表达来促进H2S的分泌进而抑制巨噬细胞向泡沫细胞的转化。方法　敏感硫电极法检测细胞中H2S含量的变化;油红O染色检测阳性细胞的相对含量;HPLC测定细胞内胆固醇含量;ELISA法检测细胞因子白细胞介素-10（IL-10）、巨噬细胞游走抑制因子（MIF）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的分泌情况;Western blot法检测各组细胞中CaR、CSE、CD36和ACAT-1的表达。结果　与空白对照组比较GdCl3组和NaHS组均能明显增加细胞H2S的分泌,而NPS2390 组明显降低细胞H2S的相对含量;GdCl3和NaHS组阳性细胞率明显降低,细胞内 胆固醇酯（CE）、游离胆固醇（FC）和 总胆固醇（TC）含量也均明显下降,而 NPS2390 组阳性细胞率明显增多,细胞内CE、FC和TC含量也均明显增加;GdCl3和NaHS组细胞上清中TNF-α和MIF含量均明显降低,IL-10的含量明显增多,而NPS2390组细胞培养的上清中TNF-α和MIF的含量均明显增加,IL-10 的含量明显降低;GdCl3和NaHS组CD36和ACAT-1的蛋白表达均明显降低,而 NPS2390组 CD36和 胆固醇酰基转移酶（ACAT-1）的蛋白表达均明显增强;GdCl3组CaR和CSE的蛋白表达均明显增加,而NPS2390组CaR和CSE的蛋白表达均明显被抑制;GdCl3组CSE的蛋白表达明显增加,而CSEsiRNA组和GdCl3+ CSEsiRNA组CSE的蛋白表达均明显被抑制;GdCl3 组H2S的相对含量明显增加,而GdCl3+CSE siRNA组和CSE siRNA组H2S的相对含量均明显降低。结论　CaR可以通过增强巨噬细胞内CSE的表达来促进H2S的分泌,进而抑制巨噬细胞向泡沫细胞的转化。     

乳腺癌患者癌组织P16蛋白及β-连环蛋白和P53蛋白表达与HPV感染的关系

目的 探讨乳腺癌患者癌组织P16蛋白、β-连环蛋白(β-catenin)、P53蛋白表达与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法 采用免疫组织化学法检测126例乳腺癌组织及癌旁正常组织、85例乳腺纤维瘤组织中P16蛋白、β-catenin以及P53蛋白的表达,并分析其与HPV感染、乳腺癌临床病理特点及预后的相关性。结果 HPV、β-catenin和P53蛋白在乳腺癌组织中的表达高于乳腺纤维瘤组织和癌旁正常组织,P16蛋白在乳腺癌组织中的表达低于乳腺纤维瘤组织和癌旁正常组织(P<0.05)。69例出现淋巴结转移的乳腺癌患者中,HPV阳性率为75.36%,高于未出现淋巴结转移的乳腺癌患者(P<0.05)。HPV感染与肿瘤分期以及是否出现淋巴结转移有关(P<0.05),P16、β-catenin、P53蛋白表达与乳腺癌患者肿瘤分期以及是否出现淋巴结转移有关(P<0.05)。HPV阳性、β-catenin阳性患者2年生存率低于阴性患者,P16蛋白阳性患者高于阴性患者(P<0.05),P53蛋白阳性生存率与阴性相比,差异无统计学意义。结论 HPV感染可能通过调控P1...     

β-胡萝卜素-15,15’-加单氧酶在鸡体内的组织特异性研究

目的本试验旨在研究β-胡萝卜素-15,15’-加单氧酶(βCMOOX)的组织特异性。方法使用半定量RT-PCR的方法研究三黄鸡体内βCMOOXmRNA在不同组织内的表达,并用高效液相色谱法测定各组织中βCMOOX的活性。结果研究表明βCMOOXmRNA在正常鸡的心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肠道、睾丸和骨骼肌组织中均有表达,且在空肠内表达水平最高(P<0.01),在肺中几乎没有表达;βCMOOX在各组织内(除肺脏外)均有活性,且空肠和十二指肠内活性最高(P<0.05)。结论β-胡萝卜素15,15’-加单氧酶在鸡体内的分布具有组织特异性。     

Let-7i通过MDM4抑制绒毛外细胞滋养层细胞的迁移和侵袭

目的探讨Let-7i、MDM4蛋白水平和子痫前期(PE)发生的相关性,为PE病因学提供新的思路。方法收集2017年1-12月于甘肃省妇幼保健院就诊的行剖宫产的重度PE孕妇20例和正常足月妊娠行剖宫产的孕妇18例胎盘组织,实时荧光定量PCR (QPCR)检测Let-7i的表达,免疫组织化学和Western nlot检测MDM4蛋白的表达;以人绒毛外滋养层细胞HTR-8/Svneo为研究对象,采用细胞转染技术构建Let-7i过表达细胞,以转染Let-7i-NC的作为对照组,转染Let-7i再分为实验组1和实验组2,其中实验组2中加入50μmol/L的MDM4蛋白抑制剂SJ 172550,实验组1中加入等体积的生理盐水,然后Transwell测定细胞侵袭和迁移能力。结果 QPCR结果显示正常胎盘组织中Let-7i相对表达量明显高于PE胎盘组织,差异有统计学意义(P0. 05);免疫组织化学检测结果显示MDM4在PE胎盘呈强阳性表达,而在正常胎盘组织呈弱阳性或阴性表达;Western blot结果显示MDM4在PE胎盘组织中的相对表达量明显高于正常胎盘组织,差异有统计学意义(P0. 05)。Matrigel侵袭实验结果显示过表达Let-7i后细胞的侵袭能力明显降低,差异有统计学意义(P0. 05),加入MDM4蛋白抑制剂SJ 172550后侵袭能力又得到明显提高。Transwell迁移实验结果显示过表达Let-7i后细胞的迁移能力明显降低,差异有统计学意义(P0. 05),加入MDM4蛋白抑制剂SJ 172550后迁移能力又得到明显提高。实验组1中MDM4蛋白表达水平明显高于对照组和实验组2,提示过表达Let-7i能够明显提高MDM4蛋白表达水平。结论 Let-7i和MDM4均参与调控滋养层细胞迁移和侵袭,且Let-7i是通过MDM4来实现的,本研究为子痫前期等滋养层细胞功能障碍疾病诊断和治疗提供了新的思路。     

大肠埃希菌β-内酰胺酶、质粒AmpC酶与Ⅰ类整合酶基因研究

目的探讨大肠埃希菌β-内酰胺酶、质粒AmpC酶与Ⅰ类整合酶基因的存在状况。方法采用M-H药敏平板对40株临床分离的大肠埃希菌进行抗菌药物敏感试验,PCR方法检测8种β-内酰胺酶基因、2种质粒AmpC酶与Ⅰ类整合酶基因。结果40株大肠埃希菌呈多重耐药,β-内酰胺酶基因TEM、SHV、LEN、CTX-M-1、CTX-M-9、VEB、GES、PER阳性率分别为55.0%、7.5%、55.0%、12.5%、45.0%、5.0%、45.0%、35.0%,质粒AmpC酶基因ACT-1、DHA阳性率分别为57.5%、40.0%,Ⅰ类整合酶基因intⅠ1阳性率为47.5%。结论临床分离的大肠埃希菌多重耐药严重,β-内酰胺酶基因、质粒AmpC酶基因、Ⅰ类整合酶基因携带率高。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶与Ⅰ类整合酶基因研究

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌中β-内酰胺酶和Ⅰ类整合酶(intⅠ1)基因存在状况。方法对35株肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测TEM、SHV、OKP、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX-M-9群、GES、PER、VEB、OXA-10、ACT-1、LEN、DHAi、ntⅠ1基因。结果35株肺炎克雷伯菌中检出β-内酰胺酶基因22株,阳性率62.9%;intⅠ1阳性21株,阳性率60.0%。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶基因和intⅠ1基因携带率高。     

吉林市肠杆菌科细菌产AmpC酶及超广谱β-内酰胺酶的研究

目的：筛查吉林市耐药性肠杆菌科细菌产AmpC β-内酰胺酶（AmpC酶）和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,为临床用药提供参考依据。方法：收集北华大学附属医院及化工二院住院患者标本中分离出的207株肠杆菌科细菌,表型确证试验确定产ESBLs的菌株,酶粗提物三维试验粗筛出产AmpC酶菌株。结果：207株肠杆菌科细菌中产ESBLs者95株（占45．9％）,产AmpC酶者52株（占25．1％）。结论：AmpC酶和ESBLs是肠杆菌科细菌耐药的两类主要酶。     

β-内酰胺类抗菌药物对阴沟肠杆菌AmpC酶的诱导性研究

目的分析亚胺培南、头孢吡肟、头孢曲松和氨曲南4种β-内酰胺类抗菌药物对阴沟肠杆菌AmpC酶诱导前后耐药性的变化,并对部分突变菌株进行ampD基因的测序及序列分析。方法选择野生型和高诱导型阴沟肠杆菌各5株,进行抗菌药物诱导实验;检测菌株诱导前后的体外抗菌活性(MIC),并进行三维试验、等电点测定及抑制试验的检测,选择诱导突变的1194E菌株4株进行ampD基因扩增、测序。结果β-内酰胺类抗菌药物对野生型菌株诱导前后的MIC值变化不明显,而对高诱导菌株诱导前后的MIC值变化较大,以头孢曲松和氨曲南诱导后的MIC值增高最为明显,可达10.7~128.0倍;ampD基因测序结果提示,经抗菌药物诱导的突变株中,ampD基因序列中有多个位点发生突变,并且发生突变的位点基本相同。结论尽管作为诱导剂的抗菌药物不同,但ampD基因序列中发生突变的位点基本相同。     

miR-5590-3p介导TGFBR2表达对胃癌细胞HS-746T侵袭和增殖的影响

目的:探讨微小RNA(miR)-5590-3p对转化生长因子βⅡ型受体(TGFBR2)基因表达的抑制作用及对胃癌细胞HS-746T侵袭和增殖的影响。方法:体外培养胃癌细胞系,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胃癌组织和细胞系中miR-5590-3p的表达。采用脂质体转染法分别转染miR-NC和miR-5590-...