基因治疗兔颈椎间盘软骨终板钙化的实验研究

目的探讨基因治疗退变颈椎间盘软骨终板钙化的效果。方法选用25只4个月龄新西兰免,分为正常对照组、模型浅层组、模型深层组、基因浅层组、基因深层组,每组5只。除正常对照组外,余建立家兔颈椎动力平衡失调模型组,诱导颈椎间盘退变。术后7个月。基因组将带有转化生长因子β1(TGF-β1)基因的重组质粒DNA注入C2-3、C3-4、C4-5椎间盘中,每个椎间盘用量为20μL。1个月后用耳缘静脉气栓法处死各组动物,切取C4-5椎间盘(包括上、下部分椎体),在形态学上评定颈椎间盘退变程度,测定各组动物颈椎软骨终板钙化层厚度,进行组间比较。结果模型浅层组、模型全层组与正常对照组比较,颈椎软骨终板钙化层明显增厚(P<0.01),而基因组软骨终板钙化明显抑制(P<0.05)。结论软骨终板钙化是颈椎间盘退变的始动因素,二者呈高度正相关。基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显的抑制作用。     

中西药与基因治疗家兔退变颈椎间盘对软骨终板钙化影响的研究

目的了解家兔颈椎软骨终板钙化与颈椎间盘退变的关系,探讨抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用及基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有无抑制作用。方法选用35只4月龄新西兰兔,建立家兔颈椎动力平衡失调模型,诱导颈椎间盘退变（正常对照组不作处理）。术后7个月,药物治疗组（浅层、全层）给予抗骨增生胶囊和葡立胶囊（剂量按体重折算）,灌胃2次／日,连用1个月,基因治疗组则将带有转化生长因子β1（TGF-β1）基因的重组质粒DNA注入C2-3、C4—5椎间盘中（每个椎间盘用量为20μl）。1个月后用耳缘静脉气栓法处死各组动物,切取C4-5椎间盘（包括上、下部分椎体）,在形态学上评定颈椎间盘退变程度,测定各组动物颈椎软骨终板钙化层厚度,进行组间比较。结果模型浅层组、模型全层组与正常对照组比较,颈椎软骨终板钙化层明显增厚,有统计学差异,而抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用、基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显抑制作用（P〈0．05）。结论软骨终板钙化是颈椎间盘退变的始动因素,二者呈高度正相关。抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用及基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显的抑制作用。     

溶髓方对大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡的影响

目的：观察溶髓方对大鼠椎间盘退变中软骨终板细胞凋亡的影响。方法：选取36只winstar大鼠,鼠龄6周,体质量为（100±20）g,随机分成假手术组、模型对照组、溶髓方实验组,每组12只。建立大鼠颈椎动办平衡失调模型,诱导椎间盘退变,造模1周后实验组予溶髓方中药灌胃1月,假手术组和模型对照组喂等量生理盐水。在术后9周、18周、36周处死每组四只动物,HE染色观察腰椎间盘细胞凋亡状况,TUNEL检测法计算细胞凋亡指数,评估椎间盘退变程度。结果：对照组中椎间盘细胞数量减少、细胞形态变化明显,细胞外基质中胶原水平减少,并出现大量裂隙,溶髓方可部分延缓这一过程：溶髓方可以部分抑制椎间盘细胞凋亡,随着培养时间延长,对照组各组椎间盘软骨终板的细胞凋亡指数明显升高,溶髓方则可抑制软骨终板凋亡细胞的增加。结论：溶髓方可抑制椎间盘软骨终板细胞的凋亡,对椎间盘具有保护作用。     

补肾健腰合剂抗大鼠椎体软骨终板老化的实验研究

目的：评估补肾健腰合剂抗大鼠椎体软骨终板老化的作用。方法：取22月龄雌性SD大鼠50只,随机分为大剂量补肾健腰合剂组、中剂量补肾健腰合剂组、小剂量补肾健腰合剂组、雌激素组及老龄模型组;另取6月龄雌性SD大鼠10只作为青年对照组,连续给药45天。常规组织切片,HE染色,测量椎体软骨终板血管芽相对面积。结果：椎体软骨终板血管芽相对面积比较,大剂量补肾健腰合剂组和青年对照组明显高于老龄模型组（P〈0.05）;中剂量补肾健腰合剂组、小剂量补肾健腰合剂组、雌激素组虽高于老龄模型组,但差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：大剂量补肾健腰合剂可以增加椎体软骨终板血管芽面积,延缓椎体软骨终板的老化,可作为椎间盘退变的预防用药之一。     

益气化瘀方对大鼠颈椎间盘软骨终板内血管的影响

目的：探讨益气化瘀方对椎间盘软骨终板内血管状态的影响。了解椎间盘营养供应的情况。方法：选择8月龄清洁级SD雄性大鼠50只，选择5月对照组，5月模型组为本实验观察时段，大鼠随机分为对照组，模型组，益气化瘀方，活血通络方，芬必得组，每组10只，雌雄各半，体视学分析，Dissector自动计数分析软骨终板内血管芽的数量，面积；免疫组化检测血管内皮生长因子（VEGF）在软骨终板的表达情况，进行VEGF与血管芽之间的相关性分析。结果：益气化瘀方可以增加血管芽的数量和面积，与活血通络方作用相似，优于芬必得；模型组软骨终板内VEGF表达明显，但表达率减少；益气化瘀方VEGF表达量降低，但表达率增加明显。VEGF的表达与血管芽密度有正相关。结论：益气化瘀方可以增加血管芽数量和VEGF的表达，促进血管修复，再生和增加椎间盘营养供应的作用。     

手法对实验性退变兔颈软骨终板超微结构的影响

为观察手法干预对实验性退变兔颈软骨终板中软骨细胞和胶原的影响。选25只成年新西兰家兔建立颈椎间盘退变模型并随机分为正常对照组、模型组、手法预防组、手法治疗组,应用透射电镜观察手法干预对实验性退变兔颈软骨终板中软骨细胞和胶原的影响。结果模型组软骨终板中出现大量的空泡变性软骨细胞及固缩软骨细胞,甚至溶解消失;胶原纤维排列极不规整,甚为松散,出现大量胶原溶解等病变。手法干预(手法预防组、手法治疗组)能不同程度地延缓软骨终板中软骨细胞和胶原的上述病变,并且手法早期干预的效果优于晚期干预。提示改善软骨终板营养可能是手法防治椎间盘退变的主要途径之一。     

颈复康颗粒对颈椎动静力失衡大鼠颈椎间盘形态学改变的影响

目的 观察颈复康颗粒对颈椎动静力失衡大鼠颈椎间盘形态学改变的影响.方法 将SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组、颈复康颗粒组、莫比可组各12只,建立动静力失衡性大鼠颈椎间盘退变模型,给药4周后每组取4个标本2张连续切片,观察组织病理学改变,测量软骨终板非钙化层与钙化层厚度比值、软骨终板内血管芽数量,检测各组退变椎间盘血管内皮细胞生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、转化生长因子β(TGF-β)表达.结果与对照组比较,模型组大鼠颈椎间盘出现退行性改变,软骨与椎体交界面血管芽数量减少,软骨终板非钙化层与钙化层比值下降,大鼠颈椎间盘中VEGF表达增加、IGF-1和TGF-β表达下降(P＜0.01);与模型组比较,颈复康颗粒组血管芽数量增加(P＜0.01),颈复康颗粒组及莫比可组椎间盘组织形态学改善(P＜0.01或P%0.05),软骨终板非钙化与钙化层厚度比值增加(P＜0.01),大鼠颈椎间盘中VEGF表达下降、IGF-1和TGF-β表达增加(P＜0.01).结论 颈复康颗粒通过调节细胞因子VEGF、IGF-1、TGF-β的表达,改善大鼠颈椎间盘退变模型形态学的表现,从而减少椎间盘细胞外基质降解,延缓椎间盘退变.     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨按压手法延缓大鼠椎间盘软骨终板退变的机制研究

目的 基于Wnt/β-catenin信号转导通路,探讨按压手法治疗对退变大鼠腰椎间盘软骨终板的作用机制,为腰椎间盘退变相关疾病的治疗与研究提供新的方向。方法 采用大鼠去前肢双足直立的造模方法建立大鼠腰椎间盘退变模型,正常组为对照组,对造模后大鼠分别给予按压手法、假按压连续干预60 d。干预结束后采用HE染色和番红固绿染色观察各组椎间盘组织病理变化,评估按压手法对腰椎间盘退变大鼠的治疗效果,通过Western Blot和实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)技术检测大鼠退变椎间盘软骨终板中Wnt/β-catenin信号通路中关键分子Wnt3a、β-catenin、糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)及其下游因子基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)的蛋白和mRNA表达水平变化。结果 病理结果表明,与正常组相比,模型组椎间盘软骨终板结构与界限不清,软骨细胞出现明显肥大,分布广泛,番...     

溶髓方对大鼠椎间盘退变中软骨终板IL-1β的影响

目的:观察溶髓方对大鼠椎间盘退变中软骨终板IL-1β的影响。方法:选取36只wista大鼠,鼠龄6周,体重为(100±20)g,随机分成假手术组、模型对照组、溶髓方实验组,每组12只。建立大鼠颈椎动力平衡失调模型,诱导椎间盘退变(假手术组仅作颈背后正中皮切开缝合),造模1周后实验组予以溶髓方中药灌胃1月,假手术组和模型对照组喂等量生理盐水。在术后9周、18周、36周处死每组四只动物,用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测椎间盘中白介素-1β含量,并在形态学上评定椎间盘退变程度。结果:对照组中椎间盘中白介素-1β含量明显升高,椎间盘细胞数量减少、细胞形态变化明显,细胞外基质中胶原水平减少,并出现大量裂隙,溶髓方可部分延缓这一过程:溶髓方可以部分抑制椎间盘细胞减少,随着培养时间延长,对照组各组椎间盘软骨终板的白介素-1β含量明显增加,溶髓方则可抑制IL-1β含量的增加。结论:溶髓方可抑制炎性因子白介素-1β含量的增加,阻止椎间盘细胞数量的凋亡,对椎间盘具有保护作用。     

血管内皮生长因子及其受体在离体培养椎体终板退变过程中的表达

目的:研究持续压力对椎体终板内血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)表达的影响,进一步探讨椎体终板退变的发生机制。方法:将16只新西兰白兔处死后在无菌条件下取出脊柱运动节段,随机分为对照组与压力组,均放入离体加载和培养装置中进行培养,其中压力组予持续29.4N压力,对照组不予压力,于培养前及培养后第3,7及14天,两组各取8个标本,对其椎体终板进行苏木精-伊红染色,应用ELISA与实时PCR检测VEGF及VEGFR的表达。结果:椎体终板形态完整性在持续压力条件下逐渐被破坏;VEGF蛋白浓度在新鲜标本终板中为(450.74±9.74)ng/L,持续压力导致VEGF蛋白浓度降低为(327.57±6.00)ng/L,与对照组(392.88±2.13)ng/L相比,差异有统计学意义(P<0.05)。VEGFR蛋白浓度在新鲜标本终板中为(11.02±2.31)ng/L,持续压力导致VEGF蛋白浓度显著降低为(8.11±2.17)ng/L,与对照组(10.02±1.53)ng/L相比,差异有统计学意义(P<0.05)。实时PCR检测显示持续压力导致VEGF基因相对表达量减少(0.842±0.002),与对照组(0.965±0.005)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:持续压力导致离体培养兔脊柱运动节段内椎体终板VEGF的表达减少,提示VEGF参与了椎间盘退变过程。     

腰椎终板弥漫性变性的MRI诊断及意义

目的探讨腰椎终板弥漫性变性的磁共振成像(MRI)表现及其临床意义。方法回顾性分析12例腰椎终板弥漫性变性的影像表现及临床资料。结果本组青壮年发病高(平均年龄49岁),男性多,从事重体力劳动者多。12例腰椎终板变性呈弥漫性分布,伴椎间盘膨出或突出10例(其中轻度膨出9例,膨出伴突出1例),伴Schmorl结节2例,伴腰椎不稳2例。按Modic分型:Ⅰ型4例,Ⅱ型7例(其中1例同时2个终板合并I型改变),Ⅲ型1例。结论腰椎终板变性是造成腰痛的重要原因之一。MRI能反映该病的病理特点,是优于CT的最佳检查方法。     

蛋白酶在骨关节炎软骨退变中的作用

蛋白酶在骨关节炎软骨退变中的作用上海中医药大学（２０００３２）郑清波，施杞骨关节炎是骨伤科临床上的常见病，主要表现为关节疼痛、僵硬、功能活动障碍。其主要病理特征是关节软骨发生缓慢、渐进性退变。目前认为，引起骨关节炎的初始因素是生物力学的改变。复制骨关...     

补阳还五汤对兔退变椎间盘软骨终板Fas/FasL表达的影响

目的：观察补阳还五汤对兔退变椎间盘软骨终板凋亡基因Fas/FasL表达的影响,探讨其对椎间盘退变的防治作用。方法：参照文献＂异常应力负荷及椎间失稳法＂建立兔腰椎间盘退变模型,并用病理切片确认造模是否成功。将造模后兔随机分成模型组和治疗组,分别予生理盐水和补阳还五汤治疗;治疗后1、2月各处死4只兔取腰4/5椎间盘下位软骨终板,RT-PCR测定其中Fas/FasL的表达水平。结果：造模后2个月,椎间盘病理切片见纤维环结构破坏、髓核突出,证明造模成功。模型组软骨终板内Fas/FasL的表达逐渐增强,治疗组软骨终板内Fas/FasL的表达逐渐减少;与模型的比较具有显著差异（P〈0.05）。结论：补阳还五汤具有防治椎间盘退变的作用,抑制Fas/FasL基因在退变椎间盘软骨终板中的过度表达,抑制软骨终板内细胞凋亡是部分作用机制。     

中性蛋白酶在椎间盘退变中的作用

中性蛋白酶在椎间盘退变中的作用彭宝淦贾连顺王拥军施杞＊上海长征医院骨科（２００００３上海）关键词椎间盘退变中性蛋白酶椎间盘退变已被公认为是引起脊柱退行性变的根本原因，但引起椎间盘本身退变的机理目前仍不清楚，椎间盘由纤维环、髓核及软骨终板构成，其主要...     

退变椎间盘相邻终板的Modic改变及其临床意义

人类椎间盘退变后相邻终板、终板下骨质的MRI信号改变称为Modic改变。     

半乳糖凝集素-3在卵巢上皮性肿瘤中的表达

目的:探讨Galectin-3在卵巢上皮性肿瘤中的表达。方法:采用免疫组织化学EnVisionTM二步法检测Galectin-3(半乳糖凝集素-3)在卵巢上皮性肿瘤中的表达。结果:Galectin-3在卵巢囊腺癌中的阳性表达明显高于嚢腺瘤和交界性嚢腺瘤(P<0.05)。结论:Galectin-3在卵巢囊腺癌中显示出高表达。     

细胞因子在椎间盘退变中的研究进展

正腰痛好发于中老年人,但现有的环境及生活方式使得腰痛趋于年轻化。就美国研究统计表明其发病率已经位居第二位~([1])。Buchbinder等~([2])研究发现,大量人群会因为腰腿部疼痛难忍而影响工作,并且为此花费了大量的医疗资源。椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)是一个非常复杂的过程,现有研究发现主要与椎间盘细胞凋亡异常、生物力学机制、自身免疫反应机制等相关。无论何种学说,     

桂枝加葛根汤通过SDF-1/CXCR4信号轴改善大鼠椎间盘终板软骨细胞退变的研究

[目的]探讨桂枝加葛根汤在体外力学刺激诱导的大鼠终板软骨细胞退变中的作用与机制.[方法]分离培养大鼠的终板软骨细胞,采用Flexcell FX-5000TM细胞应力加载系统建立终板软骨细胞退变模型,实验分为对照组、模型组、桂枝加葛根汤组(造模前200 mL/L桂枝加葛根汤含药血清处理细胞24 h)、桂枝加葛根汤+SDF...     

中医药对退行性椎间盘各结构相关信号通路影响的实验研究进展

从椎间盘的不同结构:髓核、纤维环、终板三个方面,分别总结中医药对退行性椎间盘相关信号通路的影响.中医药治疗包括中药提取物、经典方剂、针刺、针刀等手段,在椎间盘退变过程中发挥减少细胞外基质降解、降低炎症反应、促进细胞增殖、抑制细胞凋亡,进而延缓椎间盘退变的作用,而在3种椎间盘结构中均参与调节的信号通路包括MAPK、Wnt/β-catenin、NF-κB等经典信号通路.从分子水平研究椎间盘退变的机制,为实现椎间盘退变的中医药精准医疗提供依据.     

Galectin-9在食管鳞癌中的表达及与术后早期复发转移的关系

目的探讨半乳糖凝集素-9(Galectin-9)在食管鳞癌及癌旁组织中的表达情况及与食管鳞癌临床病理特征和术后早期(≤1年)复发转移的关系。方法采用RT-PCR和Western blotting方法检测89例食管鳞癌组织及15例癌旁组织中Galectin-9 mRNA和蛋白表达情况,并分析其与食管鳞癌患者的临床病理参数及术后早期复发转移之间的关系。结果食管鳞癌组织中Galectin-9 mRNA和蛋白表达水平均明显低于癌旁组织(P均<0.05);Galectin-9 mRNA和蛋白表达与肿瘤分化程度及淋巴转移密切相关(P均<0.05),而与性别、年龄、肿瘤长度、浸润深度、病理分期无关(P均>0.05),术后早期(≤1年)复发转移患者Galectin-9 mRNA和蛋白表达水平均明显低于未复发转移者(P均<0.05)。结论 Galectin-9表达缺失参与了食管癌的发生、发展,有可能成为判断食管鳞癌术后早期复发转移的参考指标。