双氢青蒿素通过调控TGF-β1/Smad信号通路抑制AngⅡ诱导大鼠心肌纤维化

目的 探讨双氢青蒿素对心肌成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响。方法 取1-3天的SD乳鼠心肌成纤维细胞分为对照组、双氢青蒿素组、TGF-β1组。采用MTT比色法对各组细胞增殖情况进行计算,使用PCR法检测TGF-β1mRNA的相对表达量,应用荧光法检测TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达。结果 双氢青蒿素组各时间点的细胞增殖活力均低于TGF-β1组。与TGF-β1组比较,双氢青蒿素组的TGF-β1mRNA表达及蛋白水平均低。双氢青蒿素组的Smad2、Smad3蛋白表达低于TGF-β1组。结论 双氢青蒿素对SD乳鼠的心肌成纤维细胞具有抑制作用,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

针灸预处理对大鼠心肌缺血/再灌注后高迁移率族蛋白B1的影响

目的：探讨针灸预处理对大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）后的保护作用以及对高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达的影响。方法选择60只Wistar大鼠,按随机数字表法分为假手术组、心肌I/R模型组、针灸预处理组,每组20只。采用结扎冠状动脉左室支左心耳下缘约0.5 cm处阻断血流10 min后再灌注1 h制备I/R损伤模型;假手术组仅穿线不结扎;针灸预处理组于I/R前7 d给予每日1次电针内关穴20 min,连续治疗7 d。采用苏木素-伊红（HE）染色,光镜下观察心肌组织病理学变化,半定量积分法计算3组心肌组织病理学评分;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血浆HMGB1、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、心肌肌钙蛋白T（cTnT）的含量,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测心肌组织HMGB1、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、TNF-α的mRNA及蛋白表达水平。结果光镜下可见心肌I/R模型组心肌纤维部分断裂,心肌细胞大片状坏死,边界不清,细胞出现浓缩、破裂、溶解、甚至消失,间质水肿并伴大量炎性细胞浸润;针灸预处理组上述表现较心肌I/R模型组明显减轻。与假手术组比较,心肌I/R模型组HMGB1、TNF-α、cTnT含量和组织病理学评分均明显升高〔HMGB1（μg/L）：9.64±1.16比2.15±.031,TNF-α（μg/L）：91±22比19±5, cTnT（μg/L）：1.50±0.35比0.07±0.03,组织病理学评分（分）：2.5±0.3比0.0±0.0,均P＜0.01〕,HMGB1、MCP-1、TNF-αmRNA和蛋白表达均明显升高（HMGB1 mRNA：1.42±0.16比0.02±0.00,MCP-1 mRNA：0.46±0.06比0.01±0.00,TNF-αmRNA：0.75±0.04比0.03±0.00;HMGB1蛋白：1.08±0.01比0.02±0.01, MCP-1蛋白：0.92±0.03比0.40±0.01,TNF-α蛋白：1.10±0.02比0.35±0.01,P＜0.05或P＜0.01）;与心肌I/R模型组比较,针灸预处理组HMGB1（6.58±0.73）、TNF-α（63±19）、cTnT（1.15±0.31）含量均明显降低（均P＜0.01）,HMGB1、MCP-1、TNF-αmRNA和蛋白表达明显降低（mRNA表达分别为0.74±0.12、0.18±0.02、0.10±0.03,蛋白表达分别为0.40±0.01、0.36±0.02、0.50±0.02,均P＜0.05）,组织病理学评分（1.2±1.0）明显降低（P＜0.01）。结论针灸预处理可减轻大鼠心肌I/R损伤,其机制可能与减轻HMGB1介导的晚期炎症反应有关。     

枸杞多糖通过TGFβ1/Smad3信号通路改善慢性心衰大鼠心肌纤维化

目的 观察枸杞多糖对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用腹主动脉缩窄法(ACC)建立慢性心衰大鼠动物模型,建模成功后,随机分为模型组(CHF组)、枸杞多糖加模型组(LBP组),另建立假手术组(sham组),LBP组给予枸杞多糖100 mg/Kg灌胃,CHF组和sham组给予等量生理盐水灌胃...     

β2肾上腺素受体通过TGF-β1/Smad3信号通路调控创面愈合中纤维增生的作用

目的：探讨β2肾上腺素受体（ADRB2）在创面愈合过程中对纤维增生的调控机制。方法：小鼠背部皮肤注射非特异性敲减ADRB2基因的腺相关病毒（AAV-ADRB2组）和对照病毒（AAV-NC组）21天后,在背部建立全层皮肤缺损创面愈合模型。记录术后1、3、5、7天创面愈合率;采用H-E染色、Masson染色和免疫组化观察创面组织结构、纤维化程度及α-SMA表达;定量PCR检测ADRB2、基质金属蛋白酶（MMP）mRNA水平;western blot检测COL1a1、COL3a1、TGF-β1、Smad3蛋白表达水平。结果：术后第5、7天,AAV-ADRB2组创面愈合率显著下降（P<0.05）,伴随表皮增厚、炎症增多、纤维细胞减少、胶原沉积降低;α-SMA水平显著下降（P<0.05）;I型/III型胶原比例减少（P<0.05）;ADRB2 mRNA水平显著降低（P<0.01）,MMP-1和MMP-8 mRNA水平升高（P<0.01）;TGF-β1/Smad3蛋白水平显著下降（P<0.05）。结论：ADRB2敲减通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路,减少创面纤维化反应和结缔组织含量,提高MMP mRNA水平,降低I型/III型胶原比例。     

高迁移率族蛋白B1的研究进展及其免疫作用

高迁移率族蛋白(HMG)是一类进化高度保守的非组蛋白,在真核生物细胞核内含量丰富,其生物学效应主要是稳定染色体结构并协助其功能,在DNA的复制、转录、重组和修复中具有重要作用.HMGB1可由单核/巨噬细胞等通过非经典的、囊介导的分泌通路而分泌至细胞外.     

大鼠肺移植后高迁移率族蛋白B1表达增强

目的观察大鼠肺移植后肺组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达和血清HMGB1水平的改变。方法 42只大鼠随机分为对照组（6只）、移植2h组（12只）、移植6h组（12只）和移植12h组（12只）,三套管法建立大鼠左肺原位移植模型。使用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应检测肺组织HMGB1mRNA水平,使用免疫印迹法和免疫荧光染色分析肺组织HMGB1蛋白水平。血清中HMGB1、TNF-α、IL-1β和IL-6含量采用ELISA法检测。结果大鼠肺移植后2h肺组织HMGB1mRNA表达和HMGB1蛋白含量即见显著升高（P〈0.01）,并随时间延长而增强。大鼠肺移植后各时间点血清HMGB1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显升高（P〈0.01）。结论大鼠肺移植术后HMGB1表达发生明显改变,HMGB1参与肺移植缺血再灌注损伤过程。     

SARA、TGF-β/Smad信号通路与腹膜纤维化的基因治疗

长期腹膜透析可导致腹膜纤维化,其主要特征是间皮细胞剥落和细胞外基质（ECM）的异常积聚所致的腹膜增厚,使腹膜透析效率降低。腹膜纤维化的产生是多种因素作用的结果,多种促纤维化细胞因子具有重要的调节作用,其中作用最为关键的是转化生长因子-β1（TGF-β1）。最近的研究显示,     

原发性肝癌高迁移率族蛋白B1表达改变及其机制

目的研究原发性肝癌（PHC）组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达改变和诱导机制,及PHC患者血清HMGB1水平变化和意义。方法对38例慢性乙肝、32例乙肝后肝硬化、23例继发性肝癌、39例PHC患者和48例健康对照者的血清HMGB1水平进行测定和分析。采用RT-PCR方法,检测11例PHC组织及其癌旁组织中的HMGB1基因表达水平。观察缺氧培养对肝癌细胞株SMMC-7721HMGB1基因表达和胞外释放的影响。结果PHC患者血清HMGB1水平（13．5±6．3μg／L）明显高于健康对照者（3．9±1．4μg／L）,并与AFP水平、TNM分期有关。PHC组织中HMGB1mRNA表达增强。SMMC-7721细胞经缺氧培养3h后,培养上清液中HMGB1含量即见升高,6h后,HMGB1mRNA表达明显增强（P〈O．01）。结论PHCHMGB1表达增强,缺氧为诱导因素。     

高迁移率族蛋白B1在大鼠肝脏热缺血／再灌注损伤中的作用

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在大鼠肝脏热缺血/再灌注(I/R)损伤中的作用.方法 90只Wistar大鼠被随机分为正常对照组、林格液组、丙酮酸乙酯(EP)治疗组.采用夹闭左、右肝蒂使95%肝脏缺血90 min再恢复血流并切除未缺血的尾叶肝脏制模.林格液组和EP治疗组制模前分别经阴茎背静脉注射林格液4 ml或EP 3.26 g/L(溶于林格液4 ml中),于术后2、8、24、48 h取下腔静脉血检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,处死动物后检测肝组织HMGB1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)含量.结果 林格液组和EP治疗组血清ALT、AST水平均显著高于正常对照组,EP治疗组各时间点ALT及术后2 h、8 h AST水平均显著低于林格液组(P<0.05或P<0.01).林格液组8、24、48 h肝组织HMGB1水平显著高于正常对照组,EP治疗组仅48 h显著升高;EP治疗组在8 h、24 h时HMGB1水平显著低于林格液组;林格液组和EP治疗组在8 h时TNF-α水平均高于正常对照组,而EP治疗组显著低于林格液组(P<0.05或P<0.01).各组IL-10水平无明显差异.结论 HMGB1参与了肝I/R损伤的病理过程.     

高迁移率族蛋白B1在肾脏冷缺血再灌注损伤中的作用

背景：缺血再灌注损伤是临床器官移植不可避免的病理生理过程,冷缺血再灌注损伤具有研究肾移植更强的针对性。目的：观察高迁移率族蛋白B1在大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤中的作用。方法：将SD大鼠随机分为假手术组、冷缺血再灌注组、丙酮酸乙酯（可显著抑制高迁移率族蛋白B1的合成与释放）治疗组。冷缺血再灌注组和丙酮酸乙酯治疗组制冷缺血再灌注模型前分别经阴茎背静脉注射林格液与丙酮酸乙酯,假手术组将腹腔打开后经阴茎背静脉注射林格液,45min后关闭腹腔。结果与结论：冷缺血再灌注组和丙酮酸乙酯治疗组各时间点肌酐、高迁移率族蛋白B1、肿瘤坏死因子α、核因子κB水平均显著高于假手术组（P〈0.01）,其中冷缺血再灌注组上述指标高于丙酮酸乙酯治疗组（P〈0.01）。表明高迁移率族蛋白参与了肾移植冷缺血再灌注的病理过程,丙酮酸乙酯能够减轻肾脏冷缺血再灌注损伤。     

高迁移率族蛋白B1在肾脏冷缺血再灌注损伤中的作用

背景:缺血再灌注损伤是临床器官移植不可避免的病理生理过程,冷缺血再灌注损伤具有研究肾移植更强的针对性.目的:观察高迁移率族蛋白B1在大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤中的作用.方法:将SD大鼠随机分为假手术组、冷缺血再灌注组、丙酮酸乙酯(可显著抑制高迁移率族蛋白B1的合成与释放)治疗组.冷缺血再灌注组和丙酮酸乙酯治疗组制冷缺血再灌注模型前分别经阴茎背静脉注射林格液与丙酮酸乙酯,假手术组将腹腔打开后经阴茎背静脉注射林格液,45 min后关闭腹腔.结果与结论:冷缺血再灌注组和丙酮酸乙酯治疗组各时间点肌酐、高迁移率族蛋白B1、肿瘤坏死因子α、核因子κB水平均显著高于假手术组(P < 0.01),其中冷缺血再灌注组上述指标高于丙酮酸乙酯治疗组(P < 0.01).表明高迁移率族蛋白参与了肾移植冷缺血再灌注的病理过程,丙酮酸乙酯能够减轻肾脏冷缺血再灌注损伤.     

高迁移率族蛋白B1在大鼠移植肺缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在大鼠移植肺缺血再灌注损伤中的作用。方法:BALB/c小鼠随机分为对照组、10μgHMGB1组和100μg HMGB1组,每组各5只,后两组每只分别腹腔注射重组HMGB1 10μg和100μg。三套管法建立SD大鼠肺移植模型并随机分成单纯移植组、移植加0.1mg抗HMGB1抗体组和移植加1.0mg抗HMGB1抗体组,每组各5只,后两组每只分别腹腔注射抗HMGB1抗体0.1和1.0mg。12h后观察各组肺组织的湿干重比、炎症介质(TNF-α、ICAM-1、IL-6)基因表达、病理表现及动脉血气变化。结果:注射重组HMGB1后尤其100μg HMGB1组小鼠PaO2降低,PaCO2、湿干重比升高,TNF-α、ICAM-1、IL-6基因表达增强,肺组织出现病理改变。抗HMGB1抗体处理后,除ICAM-1基因表达外,肺移植大鼠的其他指标均有明显改善,并与抗HMGB1抗体剂量有关。结论:HMGB1在肺移植缺血再灌注损伤中具有重要作用,是肺移植缺血再灌注损伤防治的潜在靶标。     

高迁移率族蛋白B1的细胞生物学效应及其与脓毒症的关系

Goodwin和 John早在 4 0多年前就发现了高迁移率族蛋白 (high m obilitygroup protein,HMG) ,证明它是一类典型的非组蛋白 (nonhistone chromatinprotein,NHCP)。 NHCP及其他众多核内蛋白质通过与 DNA的相互作用 ,参与了细胞核内诸如转录、复制、重组等复杂有序的功能过程。 HMG在细胞核内含量非常丰富并具有广泛功能 ;细胞核外及血清中也存在一定量的 HMGB1。近年来的研究发现 ,核外 HMGB1可能具有“晚期”炎症介质的作用 ,并日益引起了人们的关注 〔1 3〕。在本文中拟重点介绍有关 HMGB1的细胞生物学效应及其与脓毒症关系的…     

重组高迁移率族蛋白B1致小鼠肝损伤实验研究

目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对小鼠肝脏的病理作用。方法 BALB/c小鼠分为正常对照组、重组HMGB1组和重组HMGB1加抗HMGB1抗体组,每组5只,腹腔注射重组HMGB1和抗HMGB1抗体的剂量分别为100μg/只和500μg/只,注射后24 h,观察血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活力、肿瘤坏死因子-α水平以及肝组织形态病理学的变化。另外,采用腹腔注射高剂量的重组HMGB1(500μg),观察小鼠存活情况。结果注射重组HMGB1后,血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活力和肿瘤坏死因子-α水平均明显升高(P0.01),肝组织显示凝固性局部坏死、血管充血并伴大量炎性细胞浸润;同时使用抗HMGB1抗体处理后,血清上述指标明显下降(P0.05),组织坏死和炎性细胞浸润明显减轻。5只小鼠注射高剂量重组HMGB1后24、48 h各死亡1只。结论 HMGB1对小鼠肝脏组织细胞具有损伤作用。     

高迁移率族蛋白B1在炎症诱导早期自然流产中的病理机制研究

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达在炎症因子诱导发生早期流产中的病理机制,为临床提供参考。方法 选取2021年8月至2022年12月珠海市妇幼保健院收治的40例早期自然流产者作为研究组,另选取珠海市妇幼保健院同期40例选择手术终止妊娠者为对照组进行回顾性分析。采集两组研究对象的胎盘组织,比较两组研究对象胎盘组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)水平及HMGB1表达情况,分析血清TNF-α、IL-1及IL-6与HMGB1表达的相关性。结果 研究组研究对象胎盘组织TNF-α、IL-1、IL-6水平及HMGB1表达水平高于对照组(P<0.05)。研究组研究对象人绒毛组织块中TNF-α、IL-1及IL-6水平高于对照组(P<0.05)。研究组研究对象人绒毛滋养细胞平均每cm²血管形成数量多于对照组(P<0.05)。相关性分析显示TNF-α、IL-1及IL-6水平与HMGB1表达呈正相关(P<0.05)。结论 早期自然流产者的机体炎症因子及HMGB1表达水平较高,且与HMGB1表达呈正...     

高迁移率族蛋白B1诱导巨噬细胞Janus激酶/信号转导及转录激活子通路活化的研究

目的 初步探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)致炎效应的信号转导机制。方法 清洁级雄性Wistar大鼠，取其腹腔巨噬细胞，培养3d后以10mg／L HMGB1刺激。刺激完毕后直接在培养瓶中裂解细胞，分别采用免疫沉淀、免疫印迹法和凝胶阻滞分析等技术观察不同时间点Janus激酶2(JAK2)、信号转导及转录激活子—1(STAT1)以及STAT3的活化情况。结果 HMGB1可诱导大鼠腹腔巨噬细胞STAT1、STAT3在短时间内(2h)活化，其中STAT3活化最为迅速，10min即可达到活化高峰。但HMGB1不能在短时间内(2h)诱导JAK2活化。结论 JAK／STAT途径可能参与了HMGB1致炎效应的信号转导机制。     

胞外高迁移率族蛋白B1临床研究进展

30多年前,研究人员从细胞核中提纯了高迁移率族蛋白B1（high mobility group box 1,HMGBl）,HMGB1作为核内一种典型的非组蛋白,长期以来一直集中研究其核内功能,包括参与核小体的构建和稳定、调节基因的转录、参与DNA的重组修复和复制等。1999年Wang等发现,     

化橘红对糖尿病心肌病心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用

目的观察化橘红对糖尿病心肌病（DCM）大鼠心肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的干预作用。方法（1）构建DCM大鼠模型,将40只大鼠用链脉佐菌素处理后,15只血糖浓度<16.7 mmol/L的大鼠纳入空白对照组,剩余的25只血糖浓度>16.7 mmol/L的大鼠随机分为DCM组（n=11）与化橘红组（n=14）。化橘红组大鼠给予化橘红400 mg/(kg·d)灌胃,DCM组和对照组给予等量生理盐水灌胃。测量各组大鼠不同时间点血糖（1、8、16、22周）;测量心功能相关指标;光镜下观察心肌形态学改变,电镜下心肌纤维化定量分析;测定心肌胶原总量;免疫组化测定心肌胶原;Western印迹检测心肌细胞TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白含量;RT-PCR检测TGF-β1、MMP-9、MMP-2、TIMP-1等蛋白的mRNA表达。（2）构建心肌成纤维细胞增殖模型,随机分为两组,化橘红预处理组为血清培养基加0.5 mmol/L化橘红,而对照组为等量血清培养基。检测两组一氧化氮变化、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白,iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况。结果化橘红组的大鼠各时间点血糖、心肌纤维化、心肌胶原总量及各型胶原较DCM组显著下降,心收缩、舒张功能明显改善（P<0.05）,TGF-β1、Smad、MMP-9、MMP-2、TIMP-1蛋白的表达明显下调（P<0.05）,相关蛋白的mRNA表达也明显抑制（P<0.05）。化橘红预处理组一氧化氮、TGF-β1蛋白、c-fos蛋白、p27蛋白,iNOS蛋白、Cyclin D蛋白表达情况较对照组相比明显下降（P<0.05）。结论化橘红对DCM中TGF-β1/Smad通路起到了抑制作用,从而调控其下游的MMPs/TIMPs等通路,改善DCM的心肌纤维化进程,抑制心肌肥厚,减少心肌的损伤。     

大黄对脓毒症大鼠血浆高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的 观察大黄对脓毒症大鼠血清中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,揭示大黄治疗脓毒症的机制.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型,104只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(8 只)、CLP组(48只)、大黄治疗组(48只).分别在术后0、3、8、24、48及72 h活杀大鼠留取血标本,采用酶联免疫吸附法测定TNF-α和HMGB-1的含量.结果 大黄治疗组血浆TNF-α水平在8 h,HMGB1水平在24、48及72 h明显低于CLP组, 差异有统计学意义.结论 大黄通过降低血清中TNF-α和HMGB-1的水平,对脓毒症大鼠具有治疗作用.     

无精子症患者精浆高迁移率族蛋白B1检测的临床意义

目的:通过检测不育症患者精浆中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、C-反应蛋白的含量,探讨HMGB1、C-反应蛋白在不育症患者中的临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验对61例不育(其中梗阻型无精子症18例)患者、20例正常生育男性精浆中HMGB1进行检测,C-反应蛋白采用散射比浊法检测。结果:无精子症患者精浆中HMGB1[(22.68±4.45)μg/L]、C-反应蛋白[(33.71±6.96)mg/L]含量显著高于正常生育组[(12.88±6.84)μg/L;(1.73±0.78)mg/L]及一般不育组[(14.68±8.25)μg/L;(2.34±1.78)mg/L];无精子症患者精浆HMGB1水平与C-反应蛋白水平有很好的相关性,相关系数为0.97。结论:无精子症患者精浆炎性介质HMGBl水平明显升高,可能与炎症免疫反应有关。