一株甲型肝炎病毒的检出

按 seigl 氏法,用改进的半提纯法从16份早期甲肝患者粪便中检出一株甲肝病毒,其补体结合效价为1∶128。免疫电镜下可见典型的甲肝病毒颗粒被抗体凝聚。用此病毒检测了患者双份血清,7份恢复期血清的补体结合效价呈4倍或4倍以上的增长。对实验方法作了讨论。     

甲型肝炎病毒感染树鼩的初步研究

国产树鼩口服5％甲肝病毒阳性病人新鲜大便滤波0.5ml,感染后 3～13天的动物粪便中可测出甲肝抗原,排毒持续 15～21天;用此抗原滴定5例甲肝病人双份血清有4倍以上的抗体升高,前者并能被甲肝病人恢复期血清中和;部分树鼩感染后15～45天出现转氨酶升高,食欲减退;感染2～16周的树鼩血清中可测出甲肝病毒抗体,滴度1:40～1:640,抗体阳转率78％,从感染树鼩粪便中分离的抗原为27nm的病毒颗粒,能被甲肝病毒抗体凝集;感染树鼩肝出现充血、水肿,颗粒和脂肪性变,枯否氏细胞增生。     

甲型肝炎抗原的提取和血清学鉴定

从10例典型甲型肝炎患儿的粪便提取到病毒抗原,从甲肝患儿恢复期血清提取到IgG,并使用直接电镜(DEM)、免疫电镜(IEM)、微量补体结合(MCF)、免疫粘连(IAHA)和固相放射免疫测定(SPRIA)等方法对提取到的抗原和抗体进行了全面交叉鉴定,证实为甲肝病毒抗HAv IgG。在提取抗原的方法上,除用差速离心、聚乙二醇沉淀外,还用氯仿去脂,排除了粪便中其它物质的干扰,保证提取到的抗原为特异性甲肝抗原。本文还讨论了IEM、MCF、IAHA和SPRIA方法的优缺点。     

应用微量固相放射免疫测定法(Micro-SPRIA)检测甲型肝炎抗原

自从Feinstone应用免疫电镜法发现甲型肝炎(下称甲肝)抗原以来,有关甲肝的研究进展很快。目前测定甲肝抗原、抗体的方法有补体结合试验、免疫粘附血凝试验(IAHA)及固相放射免疫测定法(Micro-SPRIA)。国内已有免疫电镜及IAHA检测甲肝抗原的报道。最近我们应用国产聚苯乙烯微量细胞毒试验板(4×10孔,上海塑料三厂出品)作为载体,自甲肝患者恢复期血清提取IgG,分别以~(125)Ⅰ或~(131)Ⅰ标记后,对4份甲肝阳性粪便抗原作固相放射免疫测定,获得满意结果。     

关于中国湖北省流行性出血热与朝鲜流行性出血热的病毒病因关系

<正> 在 Lee 等的报告中,证实了中国浙江省流行性出血热患者恢复期血清中,含有高效价的同朝鲜出血热病毒抗原起特异性免疫萤光反应的抗体。实验是应用间接免疫萤光法对三种来源的朝鲜出血热病毒抗原进行的:(1)黑线姬鼠肺(2)Wistar 大白鼠肺(3)A-549细胞系。最近又从中国湖北省的流行性出血热患者得到了10份恢复期血清,3份急性期血清。     

甲型病毒性肝炎早期诊断的研究——血中IgM与粪便中IgA检测的诊断价值

在国内我组于1979年1～3月继上海第一医学院及中国医学科学院之后在电镜下观察到4例病人粪便中有甲肝粪抗原颗粒,确定了沈阳市郊区有甲型肝炎流行。1980年秋季于市郊区儿童中又有肝炎流行,从17例病人血清做甲肝免疫粘连试验检测抗体阳     

特异性IgM抗体测定在甲型肝炎早期诊断上的应用

甲型肝炎(以下简称甲肝)的早期诊断,根据从患者粪便检出病毒抗原或由急性期病人血清检出特异牲IgM抗体。当黄疸出现后,粪便中病毒量甚少,由怠性期病人粪便检出甲肝病毒(HAV)对诊断价值不大。采集急性期病人血清,检测特异性IgM抗体,适于甲肝的早期诊断。固相放射免疫试验(SPRIA)和     

乙型肝炎表面抗原无症状携带者血清中病毒颗粒的电子显微镜观察

本文报告用免疫电镜技术对39例乙型肝炎表面抗原无症状携带者血清中的病毒颗粒进行观察。仅6例病毒颗粒难于确定外,33例均有大量小球形及少量管形病毒颗粒存在,其中19例可见极少量Dane颗粒。此外,并对血清反向被动血凝试验滴度的高低与电镜观察病毒颗粒的多少,以及制备免疫复合物所用的抗原—抗体比例进行了讨论。     

甲型肝炎IgM抗体诊断药盒的应用

建立并应用了适合我国推广使用的酶联免疫吸附试验——测定甲型肝炎IgM 抗体诊断药盒,检测了116例脐带血的甲型肝炎IgM 抗体,全部为阴性;99例甲肝急性期血清皆为阳性;93例甲肝恢复期血清中,30例为阳性;19例乙型肝炎表面抗原阳性者及116例助血员的血清结果皆为阴性。表明本方法是一种诊断甲肝敏感性及特异性均较高的血清学检查方法。本法有助于早期发现患者及亚临床感染者,有助于将甲、乙二种病毒性肝炎分开而减少交叉感染的危险,有助于目前在国内开展的对非甲非乙型肝炎的研究。     

毛蚶传播甲型肝炎的病原学证据——核酸分子杂交和免疫电镜初步结果

本文应用cDNA-RNA分子杂交技术和免疫电镜法,检测上海市1988年初甲型肝炎(甲肝)流行期前的市售毛蚶。将毛蚶鳃和消化腺研碎,经酚-氯仿提取和乙醇沉淀法提取RNA,用~(32)P标记的pHAV(LB) 228甲肝病毒cDNA探针进行杂交。从7份毛蚶样品中检出一份甲肝病毒RNA阳性。另外将毛蚶鳃和消化腺的粗制悬液与甲肝病人恢复期血清孵育后电镜观察,看到形态大小一致的成堆病毒样颗粒,直径约为27mm,与甲肝病人粪便样品中所见病毒样颗粒相似。在7份毛蚶样品中还见到几种不同形态颗粒,大的病毒样颗粒直径可达45mm。     

组织培养抗原和粪便抗原检测甲型肝炎IgM抗体的比较

1979年Duermeyer等首先应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测甲型肝炎(下称甲肝)患者血清中特异性IgM抗体,并提出这一方法可用于早期诊断。尔后,国内外许多学者相继报道这方面的工作。但到目前为止,检测甲肝IgM抗体所用的抗原大多是从感染甲肝病毒(HAV)的狨猴肝或患者粪便中提取而得。狨猴肝来源极其困难,价格昂贵,难以推广。患者粪便抗原虽可使用,但阳性     

柯萨奇B组病毒与心肌炎关系的研究

本文介绍以引起病毒性心肌炎较多的柯萨奇B组病毒为抗原,检测了31例急性心肌炎患者早期及恢复期血清,以及21份对照者血清的中和抗体。结果发现有51.6％病毒性心肌炎患者血清中柯萨奇B组抗体有4倍或4倍以上升高,与对照组相比,有显著差别。提示在病毒分离阳性率较低的情况下,采用早期及恢复期双份血清作抗体测定,对了解心肌炎的病因学有一定价值,可作为临床诊断的参考依据。     

病毒性肝炎病原血清学诊断的临床意义

一、检测甲肝抗体的临床意义抗-HAV是甲肝的总抗体,包括抗-HAVIgM和抗-HAVIgG等。甲肝病人于临床症状出现前血清中抗-HAV即开始升高,可持续数年或终生。在甲肝流行区内可有部分的接触者为隐性感染,他们也能产生抗-HAV。因此。抗HAV是感染甲肝病毒的血清指标。主要应用于调查人群免疫水平.双份血清检测其滴度呈4倍升高者,也可应用于甲肝的现症诊断。     

病毒性肝炎的研究进展

近年来国内外对病毒性肝炎的研究取得较大的进展,现综述于下。病原学一、甲型肝炎(一) 甲型肝炎抗原的发现:近年来用免疫电镜从急性甲型肝炎病人的粪便中,发现一种在血清学与甲型肝炎相关的病毒样颗粒(抗原),其直径为27mμ,而在感染前的粪便则不发现,以这种颗粒为抗原可在甲型肝炎病人血清中检出相应的抗体。这些抗体可凝集粪便中的病毒样颗粒,但对HPsAg与HBcAg则不起反应。此种抗原(HAAg)感染黑猩     

用间接免疫萤光法检测流行性出血热肾组织内抗原的初步研究

流行性出血热(简称出血热)的病原疑为病毒,自40年代即开始提出,直至最近才分离成功。关于在出血热尸体解剖肾脏组织中检测抗原,及用阳性肾组织切片检测抗体,在国内外尚未见报导。我们所用1979年典型出血热患者恢复期血清,并经用美国陆军传染病医学研究所,人肺癌A_(540)细胞培养的朝鲜出血热病毒抗原,鉴定过的IgG抗体阳性血清,用间接免疫萤光法,检测出血热新生儿尸解肾组织细胞浆内,见有明亮萤光物     

甲/戊型肝炎重组抗原的表达、纯化及与传统甲肝疫苗免疫原性的比较

目的比较基因工程重组抗原与传统疫苗的免疫原性;探讨同一载体表达不同抗原的能力和抗原间的相互作用。方法将编码甲型肝炎病毒Vp1aa24-171和戊型肝炎病毒ORF2aa431-615的重组表达质粒pBV220-EAAg342及pBV220-AEAg342转化入大肠杆菌BL-21,筛选出高效表达的菌种进行目的蛋白的表达。用DEAE-sepharose FF和CM-sepharoseFF离子层析交换柱纯化表达重组蛋白,采用SDS-PAGE、Western blotting方法进行分析鉴定。用纯化的重组蛋白及传统甲肝疫苗灭活疫苗与减毒活疫苗免疫小鼠,比较特异性抗体的产生水平。结果表达的重组蛋白相对分子质量约为36000,表达量约占菌体总量的25%;且重组嵌合抗原EAAg342可以形成直径10～20nm的类病毒(virus-like particles,VLP)颗粒。Western blotting证实2种重组蛋白均能分别与甲型肝炎和戊型肝炎患者阳性血清发生特异性反应。免疫小鼠后可诱导产生高滴度的抗戊肝特异性抗体;而抗甲肝特异性抗体水平与传统甲肝疫苗相比较低。结论使用原核系统表达的甲/戊肝重组抗原能够高效表达,2种不同的融合蛋白均分别具有良好的抗原性和免疫原性,具有开发双价疫苗及同时诊断甲型戊型肝炎试剂盒的前景。     

高敏感性及特异性的甲型肝炎IgM抗体诊断药盒

应用来自组织培养的纯化甲肝抗原、羊抗人IgM(μ链特异)抗体、甲肝高滴度IgG 抗体标记物,建立了第二代甲肝IgM 抗体诊断药盒。检测健康成人血清110份,健康儿童79份,HBsAg 阴性的新生儿脐血清78份,红斑性狼疮患者血清22份以及HBsAg 阳性血清101份,结果皆为阴性;检测类风湿因子(RF)阳性血清100份,结果阴性者99份,阳性1份,后者经2ME 处理证实有甲肝IgM 抗体;甲肝急性期血清109份皆阳性。本药盒与HAVAB-M-EIA(AbboTT 公司)酶联免疫药盒对比检测血清76份,阳性45份,阴性31份,符合率100%。     

SARS相关抗肺自身抗体产生机制的初步研究

目的:检测严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中抗SARS病毒抗体与肺组织的反应性.方法:采用酶联免疫吸附法检测SARS患者恢复期血清中抗SARS病毒抗体,并采用肺组织与抗体共同孵育的方法,吸附抗SARS病毒抗体中同肺组织反应的SARS相关抗体.结果:与肺组织共同孵育后,抗SARS病毒抗体被部分中和,中和率为13.6％～32.2％.结论:部分抗SARS病毒抗体可以与肺组织反应,SARS病毒抗原同肺组织抗原有部分同源性.机体对SARS病毒抗原和肺组织的交叉免疫性可能是SARS相关抗肺自身抗体产生的原因.     

国内首例人感染高致病性禽流感病例流行病学调查

目的了解国内首例人禽流感病例的流行病学特征，以预防高致病性禽流感病毒在人间传播。方法采用病例流行病学调查方法，在实验室对痛原体和患者急性期、恢复期双份血清进行检测，同时对与患者密切接触者进行严密的医学观察。结果患者家中于10月6日出现家禽大批死亡，10月10日发病，H5、H7流感病毒核酸、M5流感病毒HA抗原、流感病毒A、B抗原和RSV病毒抗原检查皆为阴性。急性期和恢复期双份血清H5特异性抗体呈4倍以上增高，与患者密切接触者中均未发现异常临床表现。结论经卫生部和WHO专家组鉴定为人感染高致病性禽流感H5N1确诊病例。     

应用特异性IgG亲和力诊断甲型肝炎

目的:急性甲肝病毒(H AV)感染的诊断一般依赖于H AV-IgM的检测。但是H AV-IgM在免疫系统受到多克隆抗原刺激后也可能呈现阳性(例如:免疫的再次活化)。为了提高诊断的准确性,研究出一种H AV-IgG的抗体亲和性试验。方法:128份血清进行抗体亲和试验。11份为以前感染过甲肝、15份急性甲肝、10份预防接种过甲肝疫苗、4份为免疫再次活化,还有84份未经选择的H AV-IgM阳性血清,由常规实验室提供。结果:既往感染患者血清亲和力超过70%,而首发症状后1个月内的急性甲肝的亲和力低于50%。与预期结果相同,免疫再次激活的亲和力超过70%,结果与既…