产ESBLs大肠埃希菌基因型分析

目的 了解医院感染的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌医院感染的临床分布及其基因型特征。方法用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs大肠埃希菌151株，应用PCR方法分别扩增产酶菌株的TEM、SHV和CTX-M3种β-内酰胺酶基因，并对PCR扩增结果及ESBLs株临床分布进行分析。结果PCR扩增结果显示，CTX-M、TEM和SHV基因的阳性率分别为92．10％，49．7％和1．30％；48．3％的菌株同时携带多个基因。产ESBLs大肠埃希菌广泛分布于24个临床科室，其中普外科占23．2％，重症监护病房占10．6％。标本分布较为集中，29．8％来自尿液，24．5％来自呼吸道标本，23．9％来自穿刺液。结论医院感染中，产ESBLs大肠埃希菌的主要基因型是CTX-M，尿液、呼吸道标本、穿刺液是其主要来源，产ESBLs菌分布广泛，需引起重视。     

肿瘤患者医院感染产ESBLs大肠埃希菌临床分布与基因分析

目的了解本地区肿瘤患者医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的临床分布及基因型,以指导临床医师合理选择抗菌药物。方法对2014年3月-2016年10月医院恶性肿瘤患者临床标本中分离出的338株产ESBLs大肠埃希菌的分布进行分析,同时随机抽取其中60株应用聚合酶链反应(PCR)方法分别扩增产ESBLs大肠埃希菌常见的β-内酰胺酶基因:TEM、CTX-M和SHV。结果分离的498株大肠埃希菌中,产ESBLs 338株,占67.87%;科室分布以妇瘤科为主,共94株占27.81%;PCR扩增显示,60株产ESBLs大肠埃希菌中,TEM55株,占91.67%,CTX-M1 42株,占70.00%,CTX-M13 42株,占70.00%,SHV24株占40.00%;且携带≥两种耐药基因53株占88.33%。结论本地区肿瘤患者医院感染产ESBLs大肠埃希菌主要分布在妇瘤科及胃肠科等科室;基因型以TEM、CTX-M1、CTX-M13型为主。     

肿瘤患者医院感染产ESBLs大肠埃希菌基因型检测及耐药性研究

目的了解某地区肿瘤患者医院感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的基因型及耐药性。方法用CLSI推荐的双纸片扩散法表型确证试验确定临床标本中产ESBLs大肠埃希菌251株,随机抽取其中50株应用聚合酶链反应(PCR)方法分别扩增产ESBLs大肠埃希菌常见的β-内酰胺酶基因:TEM、SHV和CTX-M;微量稀释法测定产与非产ESBLs菌株对18种抗菌药物的耐药率并进行比较。结果 PCR扩增显示,50株产ESBLs大肠埃希菌中,TEM 48株(96.00%)、CTX-M1 36株(72.00%)、CTX-M13 36株(72.00%)和SHV 20株(40.00%);45株(90.00%)携带2种或2种以上耐药基因。微量稀释法测定产与非产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南及美罗培南的耐药率均为0,但产ESBLs大肠埃希菌的耐药率除哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉维酸以外的其余14种抗菌药物均高于非产ESBLs菌株,多种抗菌药物两者差异均有统计学意义(P0.05)。结论该地区肿瘤患者医院感染产ESBLs大肠埃希菌基因型以TEM、CTX-M1、CTX-M13型为主。产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药趋势。     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌相关耐药基因监测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌中常见的β-内酰胺酶基因的分布情况。方法采用聚合酶链反应(PCR)检测了77株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中TEM、SHV和CTX-M等三种β-内酰胺酶基因,并进行了DNA测序。结果 50株产ESBLs的大肠埃希菌中,41株TEM基因阳性(82.0%),7株SHV基因阳性(14.0%),16株CTX-M基因阳性(32.0%),21株菌两种以上基因型同时阳性。27株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中,21株TEM基因阳性(77.8%),24株SHV基因阳性(88.9%),3株CTX-M基因阳性(11.1%),16株菌两种以上基因型同时阳性。结论产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中携带多种β-内酰胺酶基因,且以TEM和SHV型较为流行。     

胆道感染大肠埃希菌产ESBLs菌株基因分型及耐药性

目的探讨胆道感染的病原菌谱及耐药性,并对产ESBLs的大肠埃希菌进行基因分型。方法胆道感染住院手术患者的胆汁行细菌培养和药敏测定,设计特异性引物PCR扩增。结果 240例胆汁标本中分离出细菌200株,真菌25株,培养阳性率达93.75%,其中大肠埃希菌80株,占35.56%;大肠埃希菌部分出现多药耐药,但对亚胺培南、美罗培南及阿米卡星较为敏感,表型确证试验发现20株为ESBLs菌株,PCR检测发现20株均携带有TEM基因,共携带了5个ESBLs基因,其中还有10株CTX-M-9基因型,6株CTX-M-1基因型,有4株OXA-1基因型,5株SHV基因型;部分菌株携带有≥2个β-内酰胺酶基因。结论胆道感染的主要致病菌是大肠埃希菌,医院分离株呈现多药耐药,以产ESBLs株为主,其主要基因型为TEM基因,但也存在CTX-M、OXA、SHV等多种基因型。     

社区获得性尿路感染产ESBLs大肠埃希菌的耐药性和基因型研究

目的探讨社区获得性尿路感染患者中分离的产ESBLs大肠埃希菌的耐药性和基因型,为临床合理使用抗生素提供科学依据。方法收集社区尿路感染分离的321株大肠埃希菌,用PCR扩增技术检测ESBLs的基因型,用Phoenix100型全自动微生物分析仪进行药敏检测。结果 321株大肠埃希菌中共分离出产ESBLs菌株173株(53.9%),ESBLs大肠埃希菌对舒普深、特治星、呋喃妥因敏感性较好,对氨苄西林、头孢唑啉等高度耐药。PCR扩增结果显示,90.2%产酶株携带CTX-M基因,35.2%产酶株携带TEM基因,3.0%产酶株携带SHV基因。结论社区尿路感染中产ESBLs菌株日益增多,耐药现象较严重,基因型以CTX-M和TEM型多见。     

膀胱癌术后并发大肠埃希菌泌尿系感染的超广谱β-内酰胺酶基因型及耐药性

目的 分析膀胱癌术后并发大肠埃希菌泌尿系感染的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型分析及耐药特征。方法 收集2015年1月-2020年1月从医院收治的膀胱癌术后并发大肠埃希菌泌尿系感染患者尿液标本中分离出的大肠埃希菌102株,筛选产ESBLs菌株并进行药敏试验,采用聚合酶链式反应(PCR)技术检测产ESBLs大肠埃希菌耐药基因,并比较产ESBLs大肠埃希菌基因型耐药率。结果 分离出的102株大肠埃希菌中,共检出产ESBLs菌株58株,检出率为56.86%;58株产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类、头孢菌素类耐药率较高,其中对氨苄西林、头孢曲松、头孢唑林、头孢呋辛以及头孢他啶耐药率为100.00%,其次为氨基糖苷类和喹诺酮类,对碳青霉烯类敏感性良好,其中对厄他培南完全敏感;58株产ESBLs大肠埃希菌中,CTX-M基因型检出率最高,占53.45%,其次为TEM,占27.59%;同时携带两种及以上基因型菌株4株,占6.90%;CTX-M型、TEM型、SHV型、OXA型产ESBLs大肠埃希菌对左氧氟沙星耐药率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 膀胱癌术后并发大肠埃希菌泌尿系感染产ESBLs具有多药耐药基因表型特征,临床需对膀胱癌术后并发泌尿系感染患者产ESBLs大肠埃希菌加强监测,并根据药敏试验结果合理指导临床用药。     

新生儿病房分离产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因检测

目的了解新生儿病房产ESBLs大肠埃希菌的ESBLs的基因型。方法运用多重PCR方法同时检测70株分离自连云港市第一人民医院新生儿病房产ESBLs大肠埃希菌的TEM、SHV、CTX-M基因,并对65株CTX-M阳性菌株中的49株进行CTX-M单基因扩增,将扩增产物测序,测序结果进行网上比对,确定其基因型。结果所检测的70株产ESBLs菌株中,CTX-M单独阳性共55株,CTX-M+TEM同时阳性5株,CTX-M+SHV同时阳性5株;未检出TEM、SHV单独阳性菌株,另有5株菌未检出3种ESBLs基因;测序分析的49株CTX-M阳性菌株中,47株基因型为CTX-M-14,同时检出2株CTX-M-15。结论连云港市第一人民医院新生儿病房的产ESBLs大肠埃希菌基因型以CTX-M型为主,兼有SHV和TEM型;CTX-M型中以CTX-M-14为主;加强产ESBLs菌株基因检测对产ESBLs致病菌的预防控制有一定的指导意义。     

泌尿系感染产ESBLs株耐药基因分型及药敏试验

目的了解泌尿系感染产超广谱β-内酰胺酶 (ESBLs)菌株的主要基因型分布特点及其耐药性. 方法用表型确证试验确定临床尿液标本中,产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌54株,分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR),用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC),并对结果进行分析. 结果 PCR扩增结果显示:CTX-M、TEM和SHV的检出率分别为85.2%、37.0%和9.3%,42.6%的菌株同时携带≥2个基因;MIC测定结果显示:产ESBLs株对亚胺培南的敏感率为100%;对阿米卡星的敏感率高达98.1%;对哌拉西林/他唑巴坦和头孢西丁的敏感率也较高,分别为88.9%和70.4%;其对环丙沙星和氨苄西林/舒巴坦的敏感率则低,分别为25.9%和1.9%. 结论我院泌尿系感染产ESBLs株对亚胺培南的敏感性最高,接近半数菌株同时携带≥2个基因,产ESBLs菌株的主要基因型为CTX-M.     

产超广谱β-内酰胺酶表型及基因型分布

目的了解淮北地区3所医院,临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs表型和基因分布. 方法用1999年NCCLS推荐的初筛试验,从 147株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认,然后用PCR的方法扩增其基因型. 结果116株大肠埃希菌和31株肺炎克雷伯菌中,共检出69株产ESBLs(46.9%),其中大肠埃希菌51株(42.2%),肺炎克雷伯菌18株(58.1%);将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散确证法,头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,检出69株产ESBLs细菌,而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为32株;PCR扩增基因型阳性结果为TEM型 119株、SHV型10株、CTX-M型68株、OXA型18株. 结论淮北地区ESBLs的检出率为46.9%,头孢噻肟检测ESBLs的敏感性明显高于头孢他啶;基因型以CTX-M型为主,有些菌株同时携带≥2种耐药基因.     

新生儿大肠埃希菌败血症的药敏分析及ESBLs基因分型

目的 探讨医院新生儿大肠埃希菌败血症的耐药性,并对产ESBLs大肠埃希菌进行基因分型.方法 采用MicroScanWalkaway 96SI全自动微生物分析仪对45株新生儿败血症分离的大肠埃希菌进行鉴定及药敏试验,PCR检测大肠埃希菌的ESBLs基因分型,并采用SPSS13.O进行统计分析.结果 45株大肠埃希菌对亚胺培南敏感性最高,为100.O％,产ESBLs检出率高达57.8％,产ESBLs的大肠埃希菌对氨曲南、头孢菌素类几乎全部耐药,对含酶抑制剂类药物、碳青霉烯类和头霉素类抗菌药物敏感率较高(73.1％～92.3％);对26株产ESBLs菌株进行基因分型,发现11株携带有TEM基因,12株CTX-M- 14基因型,两株CTX-M-1基因型,5株SHV基因型,同时部分菌株携带有≥2种β内酰胺酶基因.结论 医院新生儿败血症分离大肠埃希菌耐药性严重,以产ESBLs株为主,其主要基因型为CTX-M基因,但也存在TEM、SHV等多种基因型.     

产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因分型及药敏试验结果分析

目的 了解本地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型分布。方法 用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs肺炎克雷伯菌64株，用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)，分别用TEM、SHV和CTX-M通用引物进行聚合酶链反应(PCR)，并对结果进行分析。结果 产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高(100％)；其次为头孢吡肟(84．4％)，哌拉西林／他唑巴坦和环丙沙星的敏感率则分别为71．9％和70．3％。PCR扩增结果显示SHV、CTX-M和TEM基因的阳性率分别为81．3％、65．6％和18．8％；53．1％的菌株同时携带多个基因。结论 该院医院感染产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率最高；最常见的基因型是SHV，其次为CTX-M。     

某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因检测及分型

目的了解某院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生的超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）基因型。方法采用表型确证试验测定并收集该院产ESBLs大肠埃希菌（40株）和肺炎克雷伯菌（20株）,提取质粒DNA。采用特异性引物扩增TEM、SHV和 CTX M系列基因,测序后进行序列分析。结果60株表型确证试验阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,聚合酶链反应（PCR）扩增均阳性,包括TEM、SHV、CTX M 3组和CTX M 9组4种基因型。大肠埃希菌中上述4种基因型阳性率分别为37.50%（15株）、2.50%（1株）、62.50%（25株）、50.00%（20株）;肺炎克雷伯菌上述4种基因型阳性率分别为40.00%（8株）、90.00%（18株）、65.00%（13株）、40.00%（8株）。100.00%的大肠埃希菌和80.00%的肺炎克雷伯菌产生blaCTX M,12.50%(5/40)的大肠埃希菌和25.00%(5/20)的肺炎克雷伯菌携带2种CTX M酶基因。23例TEM基因皆为TEM 1型;19例SHV型基因包括SHV 1型6株、SHV 11型6株、SHV 12型5株及SHV 25型2株,仅SHV 12为ESBLs基因,且均来源于肺炎克雷伯菌;66例CTX M型基因,其中CTX M 14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为45.00%和35.00%,CTX M 55检出率均为35.00%,CTX M 15检出率分别为20.00%和15.00%,检出少量CTX M 3、CTX M 65、CTX M 101及CTX M 123基因型。结论该院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX M 为主,其次为SHV 12。CTX M基因型中以CTX M 14最为常见,CTX M 101及CTX M 123型ESBLs为山东省首次检出。     

产超广谱β-内酰胺酶菌的耐药性与基因型分析

目的 分析医院急诊科3年内产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型,以指导临床用药.方法 采用ESBLs表型确证试验筛选产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌,提取产ESBLs菌的质粒DNA,应用聚合酶链反应(PCR)扩增产ESBLs株质粒TEM、SHV、CTX-M1、CTX-M9和OXA5种基因,并对其扩增物进行DNA序列分析,测定大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对17种抗菌药物的耐药性.结果 共检出143株大肠埃希菌与77株肺炎克雷伯菌,其中84株为产ESBLs菌,占38.2％;ESBLs研究菌株全部携带TEM型、77.4％携带CTX-M9型基因;同一菌株携带2、3、4个基因的菌株比例分别为44.8％、33.3％和7.1％;产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌为多药耐药菌,其中对青霉素类、第一、二、三代头孢菌素类、磺胺类和氟喹诺酮类耐药率高达80.0％～100.0％;碳青霉烯类对产ESBLs细菌仍保持较高的抗菌效果.结论 产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌耐药基因,以TEM型和CTX-M9型为主,携带＞2个耐药基因的产ESBLs菌株比例较高;产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌对含酶抑制剂的抗菌药物、碳青霉烯类抗菌药物仍保持较高的敏感性,研究中发现美罗培南耐药菌株,应引起临床重视.     

皖南地区大肠埃希菌与克雷伯菌属ESBLs表型及基因型的检测

目的研究安徽省南部地区3所医院临床分离株中大肠埃希菌和克雷伯菌属超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的产生情况、耐药性及其基因型分布。方法平皿琼脂对倍稀释法测定79株大肠埃希菌和克雷伯菌属对13种抗菌药物的耐药性;采用2005年CLSI推荐方法对收集菌株进行ESBLs确证试验;用PCR方法对产ESBLs菌株使用8对引物进行β-内酰胺酶基因的扩增,扩增产物回收纯化后测序。结果皖南地区3所医院临床分离大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESBLs株的检出率分别为61.5%和45.0%,ESBLs产生株对CRO、CTX、CAZ、CIP、LEV的耐药率分别为81.0%、81.0%、47.6%、71.4%、50.0%,对亚胺培南和美罗培南100%敏感;PCR及测序结果显示产ESBLs菌株中,大肠埃希菌CTX-M1型12株（50.0%）,CTX-M13型11株（45.8%）,OXA1型11株（45.8%）,TEM型19株（79.2%）;克雷伯菌属CTX-M1型4株（22.2%）,CTX-M13型10株（55.6%）,OXA1型、OXA2型、TOHO1型各1株,TEM型9株（50.0%）。结论皖南地区3所医院临床分离大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESBLs株的检出率和对头孢菌素类及喹诺酮类的耐药率均达到相当高水平,应加强对产ESBLs株的临床监测,同时要加强临床对抗菌药物的合理使用。     

用多重PCR方法进行志贺菌超广谱β-内酰胺酶基因分型

目的 建立了一种志贺菌超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)基因型分类的多重PCR方法,鉴别杭州市1998-2007年产ESBLs志贺菌散发菌株基因型.方法 用纸片扩散药敏法对1998-2007年杭州分离出的195株志贺菌进行产ESBLs筛选,利用多重PCR鉴定CTX-M、TEM、SHV、OXA-1等4个基因型别,并用8次单个PCR验证多重PCR结果.结果 在195株志贺菌中共筛选到17株产ESBLs菌株,阳性率为8.72%,与2005年全国监测点结果(阳性率为6.10%)比较,差异无统计学意义(χ2=1.464,P=0.226);多重PCR结果显示ESBLs基因型分别为:CTX-M型17株(CTX-M-9组亚型11株,CTX-M-1组亚型6株),TEM型2株,OXA-1型10株,无SHV型;多重PCR结果与8次单个PCR结果一致率为94.12%,其中1株OXA-1型结果不一致.结论建立了一种志贺菌ESBLs基因型分类的多重PCR方法,杭州市志贺菌中产ESBLs的比例与全国监测点水平相似,但存在上升的可能.     

大肠埃希菌的耐药特点与产超广谱β-内酰胺酶基因型分布

目的 探讨大肠埃希菌的耐药特点和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型分布.方法 对2009年1月-2010年12月临床分离的231株大肠埃希菌进行耐药性统计和ESBLs基因分析.结果 尿液、痰液为最主要标本来源,占43.29％、22.08％;大肠埃希菌对氨苄西林(耐药率85.28％)等多数β-内酰胺类、环丙沙星(75.76％)等氟喹诺酮类、庆大霉素(52.38％)等氨基糖苷类耐药率较高,对美罗培南(4.33％)等碳青霉烯类、头孢哌酮/他唑巴坦(6.93％)等含他唑巴坦β-内酰胺类抗菌药物耐药率低;CTX-M型、TEM型、SHV型耐药基因均可见,CTX-M型多见,可见复合基因.结论 大肠埃希菌耐药率高,应根据药敏及耐药基因合理使用抗菌药物.