人喉癌中p53基因表达和人乳头状瘤病毒感染的初步研究

应用免疫组织化学和多聚酶链反应技术检测４２例喉和喉咽鳞癌，２５例癌旁组织ｐ５３蛋白的表达和１３例癌组织人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６／１８型ＤＮＡ，结果显示：５４．８％的癌组织和２０％的癌旁组织中ｐ５３蛋白呈阳性表达，２３．１％的高分化声带癌中检测的编码ＨＰＶ１６型Ｅ６蛋白的ＤＮＡ，表明ｐ５３蛋白的过度表达和人乳头状瘤病毒感染与喉癌的发生有关，二者起协同作用。     

应用原位多聚酶链反应检测喉癌组织中p53基因

采用原位多聚酶链反应技术检测了５例喉癌石蜡组织切片中ｐ５３基因，结果在全部标本中９０％以上的癌细胞检测到ｐ５３基因，平均拷贝数为２．２４±０．２３。表明该技术可用于单拷贝基因研究，并对其改进和应用进行讨论。     

喉癌p53蛋白表达的临床意义

采用ＬＳＡＢ免疫组化法，以抗ｐ５３蛋白单克隆抗体ＤＯ－１检测４４例喉鳞癌ｐ５３蛋白表达情况。结果显示：２５例喉鳞癌中ｐ５３蛋白呈阳性表达，对照组１６例声带息肉全部呈阴性表达，在与临床指标的相关性分析中发现，ｐ５３蛋白表达与喉癌临床分型、分期及淋巴结转移不相关，而与肿瘤分化程度密切相关。结果表明，ｐ５３蛋白表达与喉癌性有关，可作为喉癌诊断和鉴别诊断的辅助依据，并对肿瘤恶性程度的评估及预后判定有一定价     

应用原位多聚酶链反应检测喉癌组织中p53基因

采用原位多聚酶链反应技术检测了５例喉癌石蜡组织切片中ｐ５３基因，结果在全部标本中９０％以上的癌细胞核检测到ｐ５３基因，平均拷贝数为２．２４±０．２３。表明该技术可用于单拷贝基因研究，并对其改进和应用进行讨论。     

人乳头状瘤病毒和p53基因及H-ras基因在喉癌细胞中的表达

目的：研究喉癌细胞p53基因、H－ras基因突变及其与人乳头瘤病毒（HPV）感染的关系，探讨其在喉癌发生发展中可能起的作用。方法：采用分子生物学技术，包括聚合酶链反应、单链构型多态性分析、限制性内切酶长度多态性分析，及DNA序列分析等方法，对28例喉癌进行人乳头状瘤病毒、p53基因及H－ras基因检测。结果：28例喉癌中有50％在p53基因的第7－8外显子有突变，其中4例行DNA序列分析表明均有碱基替换、插入或丢失；而H－ras基因第12密码子的突变率仅3．57％；高危型HPV（HPV－16或－18）感染在喉癌细胞中有一定的特异性，且与p53基因突变有一定的相关性。结论：在喉癌的发生发展过程中高危型HPV感染和p53基因突变起着重要的作用，且两者之间可能存在某种内在的联系。     

胃肠恶性肿瘤及其切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达

目的 探讨胃肠道恶性肿瘤及其切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达与手术切缘的安全性关系。方法 用PCR－SSCP和免疫组化S－P方法检测20例胃癌和10例大肠癌标本和切缘组织中p53基因突变和p53蛋白表达情况。结果 （1）胃肠道恶性肿瘤组织中有很高的p53基因突变率（63％）和p53蛋白阳性表达率（53．33％）。（2）肿瘤组织中p53蛋白表达是切缘组织中p53蛋白表达的前提。（3）p53基因突变和p53蛋白表达随肿瘤切缘距离的增加而呈现极显著的递减趋势。结论 就p53基因突变和p53蛋白表达而言,距离肿瘤边缘5cm可定为肿瘤的分子切缘。     

p53蛋白在喉癌中表达及其临床意义的研究

目的探讨ｐ５３蛋白在喉癌中的表达特征及其临床意义。方法采用抗ｐ５３蛋白的单克隆抗体，通过ＬＳＡＢ免疫组化技术，对７１例喉癌进行了研究。结果全组病例中喉癌组织ｐ５３蛋白阳性率为６４．８％（４６／７１），而声带小结表达率仅５．０％（１／２０），两者比较差异显著（Ｐ＜０．０５）。研究还发现，ｐ５３蛋白表达与喉癌，淋巴结转移有显著的相关性。结论采用免疫组化技术检测ｐ５３蛋白的异常表达，可作为临床选择治疗方案以及判断预后的有效手段之一。     

喉癌p53基因突变与人乳头状瘤病毒感染的关系

探讨喉癌细胞Ｐ５３基因突变与人乳头状瘤病毒感染的关系及其临床意义。方法应用星普旋转离心柱Ｂ溶液系统,结合聚合酶反应链多态性分析及ＤＮＡ序列分析,对３６例喉癌组织新鲜标本进行ＨＰＶ定型,相对定量及Ｐ５３基因第４于第８外显子突变检测。结果３６例喉癌标本中有１３例发生基因点突变或转码突变,其中１０例为ＨＰＶ１６／１８感染者,且与细胞内病毒含量呈正相关。２４例晚期喉癌有颈淋巴结转移者突变检出率明显高于无转     

喉癌p53基因突变与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的探讨喉癌细胞ｐ５３基因突变与人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）感染的关系及其临床意义。方法应用星普旋转离心柱Ｂ溶液系统,结合聚合酶反应链多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及ＤＮＡ序列分析（ＰＣＲ－ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）,对３６例喉癌组织新鲜标本进行ＨＰＶ定型、相对定量及ｐ５３基因第４至第８外显子突变检测。结果３６例喉癌标本中有１３例发生基因点突变或转码突变,其中１０例为ＨＰＶ１６／１８感染者,且与细胞内病毒含量呈正相关。２４例晚期喉癌（临床Ⅲ－Ⅳ期）有颈淋巴结转移者突变检出率明显高于无转移者（Ｐ＜０．０５）。结论喉癌ｐ５３基因突变与ＨＰＶ１６／１８感染有关,晚期喉癌颈淋巴结转移与ｐ５３基因突变有关。     

喉乳头状瘤p53过度表达及与HPV的关系

为探讨成人型喉乳头状瘤ｐ５３基因表达和ＨＰＶ １６／１８感染之间的关系,利用免疫组化及原位杂交技术,对３２例成人喉乳头状瘤标本进行了ｐ５３和ＨＰＶ检测。结果显示：ｐ５３和ＨＰＶ１６／１的阳性表达率分别为５３．１％和６２．５％。在随访中先后有４例发生了恶变。     

人乳头瘤病毒感染和ras基因突变与喉鳞癌的关系

①目的 探讨人乳头瘤病毒１６．１８型（ＨＰＶ１６．１８）感染及ｒａｓ基因突变与喉鳞癌的关系。②方法 应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析技术,检测４０例喉鳞状细胞癌组织中ｒａｓ基因（Ｎ－ｒａｓ,Ｋ－ｒａｓ,Ｈ－ｒａｓ）第１２密码子的突变情况及ＨＰＶ１６．１８的感染情况。③结果 ４０例标本中检出ＨＰＶ１６阳性１４例（３５％）,ＨＰＶ１８阳性４例（１０％）,９例标本ｒａｓ基     

喉癌p53蛋白表达研究

应用抗ｐ５３蛋白革克隆抗体及ＬＳＡＢ免疫织化染色法检测喉癌及声带息肉ｐ５３蛋白的表达。结果显示：２５／４４（５６．９％）喉癌组织呈阳性反应，１６例声带息肉全部呈阴性反应。ｐ５３蛋白表达与喉癌分型、分期及淋巴结转移不相关，而与肿瘤分化程度密切相关（Ｐ＜０．０１）。有吸烟史者ｐ５３蛋白阳性反应数明显高于无吸烟史者（Ｐ＜０．０５）。结果表明：肿瘤抑制基因ｐ５３突变在喉癌发生中可能是一种比较常见的基因改变，与喉癌恶性程度相关，吸烟可能诱发ｐ５３突变。     

p53和ras基因突变及HPV感染与喉鳞癌的关系

①目的　探讨人乳头瘤病毒 16 ,18型 (HPV16 ,18)感染 ,抑癌基因p5 3和癌基因ras突变与喉鳞癌的关系 ,并初步分析 3种致癌因素的相互关系。②方法　应用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术 ,检测 40例喉鳞状细胞癌组织中 p5 3基因第 5 ,7外显子及ras基因 (N ras ,K ras,H ras)第 12密码子的突变情况 ,同时用PCR技术检测 40例标本中HPV16 ,18的感染情况。③结果　 40例标本检出HPV16阳性标本 14例 ,HPV18阳性标本 4例。 4例标本 p5 3基因第 5外显子第 143密码子发生突变 ,其中 1例HPV16阳性 ,p5 3基因第 7外显子未发现突变。 9例标本ras基因发生突变 (N ras 6例 ,K ras 2例 ,H ras 1例 ) ,其中 2例HPV16阳性 ,但未见 p5 3与ras基因同时发生突变者。HPV阳性和阴性标本中p5 3基因突变率、ras基因突变率的差异均无显著性(χ2 =0 .10 1,1.392 ,P >0 .0 5 )。④结论　HPV感染、p5 3和ras基因突变与喉鳞癌的发生密切相关 ,三者之间的关系尚待进一步探讨。     

喉鳞癌及乳头状瘤组织中人乳头瘤病毒DNA的PCR检测

①目的探讨人乳头瘤病毒１６型和１８型（ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８）与喉鳞癌、喉乳头状瘤的关系。②方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测３４例喉乳头状瘤、８３例喉鳞状细胞癌石蜡包埋组织中ＨＰＶ１６及ＨＰＶ１８的ＤＮＡ．③结果喉乳头状瘤及喉鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率为１４．７１％和３０．１２％，两组比较差异无显著性（χ２＝３．００６，Ｐ＞０．０５）；ＨＰＶ１８在喉乳头状瘤组织中未检出，而在喉鳞癌组织中为６．０２％，两组比较，差异无显著意义（χ２＝０．０８７，Ｐ＞０．０５）。高分化喉鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率显著高于中分化鳞癌（χ２＝６．０３２，Ｐ＜０．０５），而高分化与低分化、中分化与低分化鳞癌之间的差异均无显著性（χ２＝０．３５１，１．５００，Ｐ均＞０．０５）；不同病理分化喉鳞癌组织中ＨＰＶ１８的检出率差异无显著性（χ２＝０．０６０，Ｐ＞０．０５）。④结论喉鳞癌的发生与ＨＰＶ感染密切相关，尤以ＨＰＶ１６明显     

肺鳞癌抗癌基因P53突变与人孔头状瘤病毒感染的分析

本实验收集经病理确诊为肺鳞癌的标本67例，应用免疫组织化学技术检测到P53蛋白的阳性率为61．2％。同时结合聚合酶链反应检测人乳头状瘤病毒（HPV）感染，检出感染标本10例（14．9％），其中4例伴有P53蛋白阳性。表明肺鳞癌中存在着HPV感染。本文结果也提示，P53基因突变与肺鳞癌的分化程度无联系。     

HPV16、HPV18感染及p53蛋白过度表达与肺癌的相关性研究

为研究人乳头瘤病毒１６和１８型（ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８）感染及ｐ５３基因突变与肺癌的关系，应用经病理学证实的肺癌活组织，行聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测癌组织中的ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８；并用ＬＳＡＢ免疫组化法检测相应蜡块标本中ｐ５３蛋白的过度表达。在４８例肺癌组织标本中未检出ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８；ｐ５３蛋白表达呈阳性，阳性率为５４．２％（２６／４８），其中鳞癌６６．７％（１８／２７），腺癌５７．１（４／７），小细胞癌３３．３％（１／３），大细胞癌３３．３％（２／６），类癌２０．０％（１／５）。提示肺癌的发生可能与ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８感染无关，而与ｐ５３基因突变有关，尤以与鳞癌和腺癌关系密切     

膀胱移行细胞癌人乳头瘤病毒的分子生物学研究

目的　研究人类乳头瘤病毒 6、11、16、18型及P53与膀胱移行细胞癌的关系。方法　采用PCR方法检测了 75例膀胱移行细胞癌组织中人类乳头瘤病毒的感染和P53蛋白表达情况。结果　膀胱移行细胞癌组织 6、11、16、18阳性率分别为 6 .7%、5.3%、33.3%和 6 .7% ,低危型人类乳头瘤病毒、6、11)阳性率为 9.3% (7/ 75) ,高危型人类乳头瘤病毒 (16、18)阳性率为 34.7% (2 6 / 75)。同一膀胱癌组织中两种以上(包括两种 )人类乳头瘤病毒亚型感染 8例 ,占 10 .6 %。人类乳头瘤病毒 6、16、18型感染阳性率在肿瘤有无转移组中差异显著 (P <0 .0 5)、人类乳头瘤病毒 16、18阳性率在肿瘤病理分级中有极显著性差异。人类乳头瘤病毒DNA型别的分布在膀胱癌中以 16型为主。P53蛋白阳性表达率为 4 4 %。结论　高危型人类乳头瘤病毒感染与P53异常表达可能与膀胱癌发生有关。     

EXPRESSION OF P53 GENE IN ORAL SQUAMOUS CELL CARCINOMA AND ITS RELATION WITH CLINICAL AND PATHOLOGICAL PARAMETERS AND PROGNOS

ＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦＰ５３ＧＥＮＥＩＮＯＲＡＬＳＱＵＡＭＯＵＳＣＥＬＬＣＡＲＣＩＮＯＭＡＡＮＤＩＴＳＲＥＬＡＴＩＯＮＷＩＴＨＣＬＩＮＩＣＡＬＡＮＤＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡＬＰＡＲＡＭＥＴＥＲＳＡＮＤＰＲＯＧＮＯＳＩＳＯＦＰＡＴＩＥＮＴＳＭａｏＣｈｉ...     

P53蛋白在皮肤基底细胞癌中的表达

（１）目的 探讨Ｐ５３蛋白表达与皮肤基底细胞癌的临床及组织学特征之间的关系，以期阐明皮肤基底细胞癌的发病机制，为临床诊疗提供理论依据。（２）方法 ４２例经常规石蜡包埋皮肤基底细胞癌标本，镜检确定组织学类型，应用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测Ｐ５３蛋白表达。（３）结果 ４２例皮肤基底细胞癌中，１８例Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性表达率为４２．８５％；９例强阳性，强阳性表达率为２１．４０％。Ｐ５３蛋白表达与皮肤基