加氧低温灌流下^31磷—磁共振频谱与肝酶测定在判断大鼠 …

目的 探讨判断经受热缺血的肝脏活力的方法。方法 将１８只ＳＤ大鼠随机分成３组：Ａ组肝脏热缺血时间（ＷＩ）为０ｍｉｎ;Ｂ组ＷＩ为３０ｍｉｎ;Ｃ组ＷＩ为６０ｍｉｎ。各组肝脏冷保存后２～２．５ｈ,采用＾３１磷－磁共振频谱（＾３１Ｐ－ＭＲＳ）测定各组加氧低温灌流３０ｍｉｎ时的离体肝脏频谱,同时测定保存液和灌流液中肝酶的变化。结果 β－三磷酸核酸（β－ＮＴＰ）与亚甲基二磷酸（ＭＤＰ）的比值,Ｂ组与Ａ组比较,     

大鼠热缺血肝脏加氧低温灌流^31磷—核磁共振频谱与病理 …

目的 观察承受不同程度热缺血的离体大鼠肝脏三磷酸腺苷（ＡＴＰ）的再生能力及相应的病理变化,从代谢和形态结构两个方面判断其活力。方法 ＳＤ大鼠１８只,按热缺血时间随机等分成３组：Ａ组,０ｍｉｎ;Ｂ组,３０ｍｉｎ;Ｃ组,６０ｍｉｎ。测定加氧低温灌流的离体肝脏＾３１磷－核磁共振频谱,同时观察灌流前后肝组织病理变化。结果 灌流３０ｍｉｎ时,Ａ、Ｂ、Ｃ３组大鼠肝脏ＡＴＰ／亚甲基二磷酸（ＭＤＰ）平均值为０．４     

大鼠热缺血肝脏加氧低温灌流31磷-核磁共振频谱与病理的对比研究

目的　观察承受不同程度热缺血的离体大鼠肝脏三磷酸腺苷 (ATP)的再生能力及相应的病理变化 ,从代谢和形态结构两个方面判断其活力。方法　SD大鼠 18只 ,按热缺血时间随机等分成 3组 :A组 ,0min ;B组 ,30min ;C组 ,6 0min。测定加氧低温灌流的离体肝脏31磷 核磁共振频谱 ,同时观察灌流前后肝组织病理变化。结果　灌流 30min时 ,A、B、C 3组大鼠肝脏ATP/亚甲基二磷酸(MDP)平均值为 0 .42 3、0 .387、0 .138(C组有 3例测不到ATP峰值 ) ,A、B两组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;C组与A、B两组比较差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。病理改变 :A组肝细胞轻度浊肿 ;B组还有散在肝细胞空泡变 ;C组 ,特别是测不到ATP的 3例肝脏有大片肝细胞空泡变。肝窦内皮细胞A、B两组存在轻度水肿 ,C组肿胀加重。结论　测定加氧低温灌流离体大鼠肝脏能量代谢能有效鉴别其活力。     

血红素氧合酶-1基因在大鼠供肝缺血再灌注损伤中的抗炎作用

目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)基因在大鼠供肝缺血再灌损伤中的抗炎作用.方法 将32只雄性SD大鼠分为实验组(16只)和对照组(16只).将已转染HO-1基因的腺病毒载体和空载体分别注入实验组和对照组供体大鼠腹腔(各8只).36 h后取供肝,冷保存4 h后行大鼠原位肝移植.缺血再灌注6 h后检测血清ALT、AST、TNF-α、肝组织HO-1蛋白的表达以及阳性巨噬细胞计数.采用t检验和秩和检验行统计学分析.结果 (1)实验组血清ALT和AST分别为(439±81)U/L和(1110±73)U/L,对照组分别为(1005±120)U/L和(1583±175)U/L,两组比较,差异有统计学意义(t=11.090,7.050,P<0.05).(2)实验组和对照组血清TNF-α分别为(15±13)μg/L和(52±11)μg/L,两组比较,差异有统计学意义(t=0.009,P<0.05).(3)实验组和对照组肝组织HO-1蛋白的表达分别为0.28±0.07和0.04±0.03,两组比较,差异有统计学意义(T=42.5,P<0.05).(4)实验组中HO-1阳性细胞大量表达于血管区,其阳性巨噬细胞的计数为2±1,显著少于对照组的8±2(t=0.007,P<0.05).结论 HO-1在大鼠供肝缺血再灌注损伤中可能通过抑制肝巨噬细胞的激活,降低TNF-α的释放而发挥抗炎作用.     

血红素氧合酶-1基因在大鼠供肝缺血再灌注损伤中的抗炎作用

目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)基因在大鼠供肝缺血再灌损伤中的抗炎作用.方法 将32只雄性SD大鼠分为实验组(16只)和对照组(16只).将已转染HO-1基因的腺病毒载体和空载体分别注入实验组和对照组供体大鼠腹腔(各8只).36 h后取供肝,冷保存4 h后行大鼠原位肝移植.缺血再灌注6 h后检测血清ALT、AST、TNF-α、肝组织HO-1蛋白的表达以及阳性巨噬细胞计数.采用t检验和秩和检验行统计学分析.结果 (1)实验组血清ALT和AST分别为(439±81)U/L和(1110±73)U/L,对照组分别为(1005±120)U/L和(1583±175)U/L,两组比较,差异有统计学意义(t=11.090,7.050,P<0.05).(2)实验组和对照组血清TNF-α分别为(15±13)μg/L和(52±11)μg/L,两组比较,差异有统计学意义(t=0.009,P<0.05).(3)实验组和对照组肝组织HO-1蛋白的表达分别为0.28±0.07和0.04±0.03,两组比较,差异有统计学意义(T=42.5,P<0.05).(4)实验组中HO-1阳性细胞大量表达于血管区,其阳性巨噬细胞的计数为2±1,显著少于对照组的8±2(t=0.007,P<0.05).结论 HO-1在大鼠供肝缺血再灌注损伤中可能通过抑制肝巨噬细胞的激活,降低TNF-α的释放而发挥抗炎作用.     

血红素加氧酶-1在治疗性高碳酸血症减轻大鼠肝缺血-再灌注损伤中的作用

目的探究血红素加氧酶-1(HO-1)在治疗性高碳酸血症减轻大鼠肝缺血-再灌注损伤中的作用。方法健康成年SD大鼠60只,随机均分为四组:假手术组(C组)、肝缺血-再灌注损伤组(IR组)、治疗性高碳酸血症处理组(A组)、治疗性高碳酸血症处理+锌原卟啉(ZnPP)预处理组(B组)。通过夹闭大鼠肝门静脉,肝动脉及胆管建立部分肝脏缺血-再灌注损伤模型,实验共缺血1h,再灌注6h。C组和IR组:实验全程机械通气吸入50%O2-50%N2;A组和B组:缺血即刻至再灌注结束期间吸入外源性50%O2-45%N2-5%CO2,C组、IR组、A组于实验前24h腹腔注射生理盐水5ml/kg,B组注射ZnPP 5mg/kg。于机械通气前(基础值)、缺血前即刻、再灌注即刻、再灌注后1、2、3、4、5、6h检测动脉血PaCO2;再灌注6h后取血清检测ALT、AST和TNF-α,并取肝组织HE染色观察病理学改变,TUNEL法检测细胞凋亡水平,Western blot法检测HO-1的相对量表达。结果与C组和IR组比较,A组和B组动脉血PaCO2水平明显升高(P0.05)。与C组比较,IR组肝组织损伤严重,IR组、A组和B组血清ALT、AST和TNF-α含量、凋亡指数和A组HO-1相对表达量明显升高(P0.05)。与IR组比较,A组肝组织损伤减轻,A组和B组血清ALT、AST、TNF-α含量、凋亡指数和B组的HO-1相对表达量明显降低(P0.05),而A组HO-1相对表达量明显升高(P0.05)。与A组比较,B组肝组织损伤加重,血清ALT、AST、TNF-α含量、凋亡指数明显升高(P0.05),HO-1相对表达量明显下降(P0.05)。结论治疗性高碳酸血症通过上调HO-1有效减轻肝缺血-再灌注损伤。     

透明质酸酶及基质金属蛋白酶-9在人乳腺癌侵袭与转移中的意义

目的研究透明质酸酶(HAase)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在人乳腺癌侵袭与转移中的意义。方法应用组织匀浆、酶连吸附测定法及免疫组化等方法测定HAase和MMP-9在人乳腺癌中的表达和其病理特征比较。结果①乳腺癌组织学分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组HAase的分别为4.89±2.55、8.03±2.66、12.00±3.96 mU/g(n=10,20,3),Ⅲ级组>Ⅱ级组>Ⅰ级组(P<0.05)。乳腺癌有腋淋巴结转移组HAase表达(8.27±3.26 mU/g,n=23)明显高于无腋淋巴结转移组(5.53±2.82 mU/g,n=10)(t=-2.305,P=0.028)。②MMP-9阳性率在淋巴结转移组为(78.3%,18/23),明显高于无淋巴结转移组(30.0%,3/10)(P=0.016)。③MMP-9阳性组(n=21)HAase(8.57±3.12)mU/g明显高于阴性组(n=12)(5.47±2.85)mU/g(t=2.830,P=0.008)。结论HAase和MMP-9一样,与人乳腺癌侵袭与转移有关。     

硫氧还蛋白2在2-乙酰氨基芴加肝切除诱导的卵圆细胞中的表达及意义

目的 观察硫氧还蛋白2(Trx2)在2-乙酰氨基芴(2-AAF)加肝切除诱导的卵圆细胞增殖中的表达,并探讨其表达的意义.方法 Balb/c小鼠喂饲2-AAF加2/3肝切除方法诱导肝脏卵圆细胞的增殖.经门静脉灌注消化法和等密度离心法分离卵圆细胞,并在体外进行原代培养.免疫荧光和双标法对培养的细胞进行鉴定.免疫组化法检测卵圆细胞的增殖,免疫荧光法检测Trx2在卵圆细胞和肝实质细胞中的表达,TUNEL法检测卵圆细胞和肝实质细胞的凋亡.结果 喂饲2-AAF后引起肝脏损伤,与肝切除前相比,肝切除后肝脏损伤明显加重(P＜0.01),同时有明显的卵圆细胞增殖.卵圆细胞中Trx2的表达明显高于肝实质细胞,同时其凋亡率明显低于肝实质细胞(P＜0.01).结论 喂饲2-AAF加2/3肝切除可以引起严重的肝损伤,促进卵圆细胞增殖,卵圆细胞高表达Trx2可以抑制自身凋亡和损伤,在肝脏功能的恢复过程中起着非常重要的作用.     

缺氧诱导因子-1α与基质金属蛋白酶-2在慢性压迫性颈脊髓损伤大鼠模型中的表达及意义

目的 :探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)在慢性压迫性颈脊髓损伤大鼠模型中的表达及意义。方法 :将80只成年SD大鼠随机分为假手术组和慢性压迫性颈脊髓损伤组(脊髓压迫组),每组40只。大鼠麻醉后充分显露C5和C6椎板,切除C5左侧半椎板,显露硬脊膜,脊髓压迫组在C6椎板和硬脊膜之间置入吸水后可膨胀聚氨酯薄板(1×3×1mm);假手术组只显露硬脊膜不置入压迫物。两组分别通过BBB(Basso Beattie Bresnahan)评分和体感诱发电位(somatosensory evoked potential,SEP)检测评估脊髓功能;于造模后7d、28d、42d和70d时处死大鼠取颈脊髓组织进行HIF-1α及MMP-2免疫组化染色,检测其在各时间点的表达量(IOD值),采用独立样本t检验比较两组各时间点的差异,分析HIF-1α、MMP-2与脊髓功能变化的相关性。结果:造模后7d时,两组BBB评分无显著性差异;SEP潜伏期显著性延长,波幅显著性降低;HIF-1α显著性降低,MMP-2显著性升高。28d时脊髓压迫组BBB评分显著性低于假手术组,SEP潜伏期与7d比较显著性延长(P0.05)、波幅显著性降低(P0.05),HIF-1α表达显著性增高(P0.05),而MMP-2表达显著性降低(P0.05)。42d时,脊髓压迫组BBB评分、SEP潜伏期和波幅与28d时比较无显著性差异,HIF-1α表达显著性增高(P0.05),而MMP-2表达显著性降低(P0.05);70d时脊髓压迫组神经功能较28d时显著性改善,BBB评分显著性增高(P0.05),SEP潜伏期显著性缩短(P0.05)、波幅显著性升高(P0.05);HIF-1α表达较前显著性降低,而MMP-2表达升高,但与假手术组比较仍有显著性差异(P0.05)。HIF-1α表达量与BBB评分呈显著性负相关(r=-0.458,P0.05),MMP-2表达量与BBB评分呈显著性正相关(r=0.903,P0.05)。结论:大鼠慢性压迫性脊髓损伤后具有一定程度的自我修复能力,HIF-1α、MMP-2表达变化与慢性脊髓压迫性损伤后神经功能改善相关。     

大鼠热缺血肝脏移植前活力的无损伤性评定

目的研究不同程度热缺血的离体大鼠肝脏加氧低温灌流时ATP的再生能力,判断供肝活力.方法本实验采用18只SD大鼠,按不同热缺血时间随机分成三组A组,0min;B组,30min;C组,60min.每组6只.冷保存2～2.5h,采用31P-NMR测定加氧低温灌流下的离体肝脏频谱.结果灌流30min时A、B、C三组大鼠肝脏ATP(β-NTP/MDP比值,     

Usefulness of 31P-MRS as a method of evaluating the viability of preserved and transplanted rat liver

We used phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (³¹P-MRS) to evaluate the viability of transplanted rat liver. Wistar rats were used as donors and recipients. The donor livers were preserved in saline (group 1), Euro-Collins solution (group 2), or in University of Wisconsin (UW) solution (group 3) for 3 and 6 h in groups 1, 2 and 3 and for 9 h in groups 2 and 3. Thereafter the livers were orthotopically transplanted. ³¹P-MRS spectra were measured after portal reperfusion. Finally, all the recipients were divided into survivors and non-survivors. Survival rates were better in group 3 than in groups 1 and 2. In the 9-h-preserved livers, the livers in group 3 showed a significantly higher β-ATP/Pi ratio than those in group 2. Comparing survivors and non-survivors in the 6-h-preserved livers in group 2, survivors' livers showed significantly higher (3-ATP/Pi ratio than those of non-survivors. We concluded that ³¹P-MRS is a useful method for assessing viability of rat liver grafts.     

磁共振弥散加权成像对肝癌肝移植术后肿瘤复发的监测

目的 探讨磁共振弥散加权成像(DWI)对肝癌肝移植术后肿瘤复发的监测及其应用价值.方法 对14例肝癌肝移植受者术后进行了监测,采用磁共振(MRI)扫描仪进行常规增强平扫,其中横断位T2加权序列应用FRFSE序列、脂肪抑制T2加权序列应用fs-FRFSE序列、DWI应用SE-EPI序列,对各扫描序列的图像信号进行了分析,判断有无肝癌复发,并分别记录和比较各扫描序列检出的肝癌病灶数.计算和比较各扫描序列间的噪声比(CNR)及肿瘤与肝脏实质间的表观弥散系数(ADC).结果 FRFSE、fs-FRIRFsE及SE-EPI序列对肿瘤的信号强度依次由弱到强,其确认检出病灶数分别为25、27和27个,CNR分别为(25.856±10.122)、(37.988±17.403)和(69.535±32.730),三组间CNR的比较,差异均有统计学意义(P<0.05).肿瘤和肝脏实质ADC分别为(0.00163±0.00078)mm2/s和(0.00140±0.00029)mm2/s,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05),ADC伪彩图中,肿瘤组织信号等于或低于肝脏实质,但色彩不均一.结论 DWI对肝癌肝移植术后肿瘤复发的监测敏感有效,有良好的应用价值.     

肝移植术后早期非肝动脉栓塞性胆道缺血性损伤并发症的预防

目的：探讨肝移植术后早期非肝动脉栓塞性胆道缺血性损伤并发症的预防。方法：对60例同种原位背驮式肝移植病人术中、术后采用改善供肝血液循环的策略。结果：术后6个月内出现胆道并发症3例，发生率为5％（5／60），1例因拔T管时发生胆漏；1例经T管胆道造影导致胆道感染，胆泥形成；1例胆道吻合口渗漏。结论：肝移植术中、术后扩张血管、改善胆管微循环是预防术后早期非肝动脉栓塞性胆道缺血性损伤并发症的重要措施。     

银杏叶提取物对无心跳供肝热缺血损伤保护作用的实验研究

目的　探讨传统中药银杏叶提取物对肝脏热缺血损伤的保护作用。方法　建立猪肝脏在体完全缺血90min的模型。实验分为3组,对照组11头动物,实验组（银杏组）10头动物,前列腺素E1对照组（PGE1组）9头动物。PGE1组和银杏组按分组要求分别于缺血前30min给予PGE1和银杏叶提取物;观测肝组织中自由基、肝脏能量代谢、肝功能及肝组织病理改变等。结果　PGE1组和银杏组上述指标都优于对照组,银杏叶提取物比PGE1具有更强的抗自由基作用,而在其它方面与PGE1相类似。结论　银杏叶提取物是比PGE1更好的热缺血保护剂,能显著减轻供肝的热缺血损伤。