塞来昔布联合卡培他滨对裸鼠人肝癌模型中肿瘤细胞增殖与凋亡的影响

目的研究环氧化酶-2抑制剂塞来昔布（Celecoxib）和化疗药物卡培他滨（Capecitabine）对裸鼠人肝癌模型中肿瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法建立LIC-D35裸鼠人肝癌模型,成瘤后40只裸鼠随机分成4组即对照组、塞来昔布组、卡培他滨组、联合用药组（卡培他滨与塞来昔布）。观察肿瘤大小,计算抑瘤率;采用RT-PCR方法观察肿瘤中COX-2的mRNA表达,并应用免疫组化法Ki一67检测肿瘤细胞增殖水平、末端脱氧核苷转移酶标记法（TUNEL）检测凋亡细胞。结果对照组、塞来昔布组、卡培他滨组、联合组瘤体体积分别为（3880±438）mm3、（3374±465）mm3、（1859±362）mm3和（981±197）mm3;塞来昔布组、卡培他滨组、联合用药组抑瘤率分别为15％、45％和71％。四组中Ki-67阳性率分别为46％、32％、25％和11％;肿瘤细胞凋亡指数D1分别为8％、22％、27％和38％;塞来昔布组、联合组肿瘤组织中COX-2mRNA表达显著低于对照组和卡培他滨组（P〈0．01）。结论塞来昔布可显著抑制裸鼠人肝癌模型中肿瘤细胞COX-2mRNA表达,抑制肿瘤细胞Ki-67表达,诱导肿瘤细胞凋亡。与卡培他滨联合应用可提高抗肿瘤效果。     

塞来昔布对裸鼠结肠癌移植瘤放疗增敏作用的机制研究

为探讨环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对裸鼠结肠癌移植瘤放疗增敏作用的机制,本研究应用人结肠癌SW480细胞建立裸鼠移植瘤模型,并将32只裸鼠随机分为A组（对照组）、B组（塞来昔布组）、C组（放疗组）和D组（塞来昔布＋放疗组）,观察各组裸鼠结肠癌移植瘤的生长情况,并应用免疫组化法检测移植瘤组织中COX-2、8-catenin、血管内皮生长因子（VEGF）、CD34表达,并对CD34阳性血管进行计数,计算微血管密度（MVD）。结果显示,（1）干预30d后,B、C、D组移植瘤瘤体质量及体积均明显小于A组,P〈0．05;而D组移植瘤瘤体质量和体积明显小于B、C组,P〈0．05。（2）免疫组化检测显示,COX-2、β—catenin、VEGF及CD34在各组移植瘤组织中均呈阳性表达。B、c、D组COx-2、p—catenin、VEGF表达水平及MVD均明显低于A组,P〈0．05;而D组各指标明显低于B、c组,P〈0．05。（3）相关性分析显示,COX-2、VEGF、β-catenin及MVD,各指标两两之间均具有显著相关性,P〈O．05。结果表明,塞来昔布可能是通过抑制wnt信号通路来抑制肿瘤新生血管的生成,最终发挥放疗增敏作用。     

塞来昔布联合奥沙利铂对人结肠癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 观察塞来昔布或联合奥沙利铂对人结肠癌裸鼠移植瘤生长的影响并探讨其机制.方法 用人结肠癌HT-29细胞建立移植瘤模型,将裸鼠随机分为对照组、奥沙利铂组、塞来昔布组、联合用药组.给予相应药物35 d后,取移植瘤组织检测COX-2,VEGF mRNA和微血管密度.结果 塞来昔布组、奥沙利铂组和联合用药组抑瘤率分别为34.94%、30.53%和62.87%.奥沙利铂组COX-2,VEGF表达显著高于对照组(分别P＜0.05).奥沙利铂组微血管密度与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).塞来昔布组和联合用药组COX-2,VEGF和MVD与对照组比较均显著下降(分别P＜0.05).结论 塞来昔布可抑制人结肠癌裸鼠移植瘤的生长和肿瘤血管生成.塞来昔布增加了奥沙利铂的抗肿瘤效果.     

塞来昔布对人结肠癌细胞生长及裸鼠肝转移瘤形成的影响

目的探讨塞来昔布对体外培养的结肠癌细胞生长及裸鼠肝转移瘤的影响。方法以人结肠癌细胞株HT-29（COX-2高表达）和HCT-116（COX-2低表达）为研究对象，采用噻唑蓝（MTT）比色法检测塞来昔布对2种细胞的增殖抑制效应，应用流式细胞术检测2种细胞的周期分布情况；将2种细胞接种裸鼠，观察其肝转移瘤形成情况。结果①塞来昔布对人结肠癌细胞株生长的抑制作用呈时间、剂量依赖性效应（P〈0．05，P〈0．01），且对HT-29细胞的作用强于HCT-116细胞（P〈0．05）。②塞来昔布可改变结肠癌细胞株细胞周期的分布，明显降低其增殖指数。③塞来昔布具有明显的抑制裸鼠肝转移瘤生长的作用。结论塞来昔布可能通过抑制COX-2酶活性而抑制结肠癌细胞的分裂和增殖，诱导其凋亡，干预结肠癌的转移与复发。     

塞来昔布抑制人结肠癌细胞Caco-2细胞增生的分子机制

目的研究塞来昔布在体外对人结肠癌细胞Caco-2生长增生及其抗肿瘤的相关分子机制。方法体外培养人结肠癌细胞Caco-2,MTY法检测塞来昔布在相同浓度下,不同时间对于结肠癌细胞增生的影响,并计算Ic。值;RT—PCR法检验COX-2、Survivin的mRNA的表达影响。结果MTF结果显示：相同干预浓度塞来昔布抑制人结肠癌细胞增生,其24h,48h,72h的Ic。分别为：（99．519±10．355）μmol／L、（71．546±6．446）μmol／L、（59．622±15．999）μmol／L;RT-PCR结果显示：人结肠癌细胞Caco-2正常对照组及塞来昔布干预组COX-2mRNA灰度值分别为：0．808±0．021、0．101±0．002（t=19．037,P=0．000）;Survivin mRNA灰度值分别为：0．798±0．031、0．190±0．002（t=18．987,P=0．002）。结论塞来昔布抑制结肠癌细胞增生,塞来昔布抗肿瘤机制可能是通过抑制COX-2及Survivin的mRNA的表达来实现的。     

塞来昔布对膀胱癌裸鼠皮下移植瘤及移植瘤细胞凋亡的影响

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对膀胱癌裸鼠皮下移植瘤及移植瘤细胞凋亡的影响.方法6周龄BALB/c裸鼠8只,建立膀胱癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,分为2组,实验组每kg食物添加1 g塞来昔布,观察塞来昔布对裸鼠健康状况、体重变化及移植瘤变化的影响,并用TUNEL方法检测其对移植瘤细胞凋亡的影响.结果塞来昔布对裸鼠健康状况及体重变化无明显影响(P＞0.05),对移植瘤的生长有抑制作用,肿瘤抑制率为83.7%(P＜0.05),对移植瘤细胞的凋亡有促进作用(P＜0.05).结论塞来昔布可能通过促进肿瘤细胞凋亡等途径对膀胱肿瘤产生抑制作用,可能成为膀胱肿瘤化学预防及治疗的辅助手段.     

塞来昔布对PC12细胞的凋亡作用及对血管内皮生长因子表达的影响

目的体外探讨COX-2抑制剂塞来昔布对PC12细胞的生长影响及血管内皮生长因子VEGF的表达的调控。方法应用噻唑蓝（MTT）比色法观察塞来昔布对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞的生长抑制作用;Wrights-Giemsa染色法观察细胞形态学;流式细胞技术观察细胞在各时间点的凋亡率;Western blot检测VEGF-165蛋白的表达变化。结果塞来昔布呈时间、剂量依赖性抑制PC12细胞,24h半数抑制浓度（IC50）为100μmol/L;各点凋亡率均高于空白对照组;塞来昔布能抑制PC12细胞的VEGF-165蛋白表达,且跟时间正相关。结论 COX-2抑制剂塞来昔布能抑制PC12细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制VEGF蛋白表达。     

埃罗替尼和塞来昔布抑制胆管癌生长和血管生成

目的:观察表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂埃罗替尼与环氧合酶(COX-2)抑制剂塞来昔布对胆管癌荷瘤裸鼠的肿瘤生长协同抑制作用。方法:联合EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-selective tyrosine kinaseinhibitor,EGFR TKI)埃罗替尼和COX-2抑制剂塞来昔布作用于胆管癌细胞株QBC939荷瘤裸鼠,评价药物体内作用效果。结果:埃罗替尼、塞来昔布联合用药显著抑制肿瘤生长,与对照组、埃罗替尼、塞来昔布单药组相比,均有显著性差异。抑制肿瘤生长的作用伴随EGFR下游活性蛋白p-MAPK的下调和VEGF、Ki-67表达的降低。肿瘤组织微血管密度降低。结论:埃罗替尼、塞来昔布抑制胆管癌荷瘤生长,抑制肿瘤细胞增殖,同时抑制肿瘤新生血管。两者具协同作用。靶向抑制EGFR和COX-2通路可以作为胆管癌的潜在治疗方法。     

塞来昔布在手部手术围手术期的疗效评估

目的研究观察塞来昔布在手部手术围手术期的疗效及安全性。方法60例手部手术患者,随机分为两组：实验组（塞来昔布组）（n=30）在术前1小时口服塞来昔布400mg,术后当天口服200mg,手术后第1～5天,每次口服200mg,每日2次;对照组（n=30）给予安慰剂,两组术后均不限制使用患者自控镇痛（PCA）、肌注或口服阿片类药物。分别记录两组患者的术后视觉模拟（VAS）评分、阿片类药物的用量及术后不良反应的发生率。结果实验组在术后第1～3天的VAS评分低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;术后当天和第4,5天实验组和对照组的VAS评分差异无显著性（P〉0．05）。在术后当天至术后第5天内实验组使用阿片类药物的次数少于对照组（P〈0．05）。实验组和对照组在不良反应的发生率上比较。差异无显著性（P〉0．05）。结论在手部手术围手术期使用塞来昔布的多模式镇痛方式对患者有良好的镇痛效果．可以减少术后阿片类药物的使用,并且不增加术后不良反应的发生率。     

选择性环氧合酶-2抑制剂用于食管腺癌化学预防的实验研究

目的探讨选择性环氧合酶．2（COX．2）抑制剂塞来昔布用于食管腺癌化学预防的可行性。方法采用胃空肠吻合加食管空肠吻合术建立混合反流sD大鼠动物模型。分为模型组（60只）和塞来昔布处理组（处理组,60只）;对照组（20只）仅行单纯剖腹术。术后28周取食管进行病理组织学检查．观察炎性反应程度和致癌情况．免疫组织化学染色检测COX-2的表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测前列腺素E2（PGE2）含量。结果模型组与处理组Barrett食管发生率的差异无统计学意义[84％（41／49）比75％（39／52）,P〉0．05],但模型组食管腺癌发生率显著高于处理组[57％（28／49）比17％（9／52）,P〈0．01]。对照组未见Barrett食管或食管腺癌改变。在大鼠正常食管和空肠组织中均未检测到COX-2表达．而在反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌组织中COX-2表达率为100％。模型组食管组织中PGE2含量显著高于无反流组（P〈0．01）,而处理组大鼠食管组织中PGE2含量显著低于模型组（P〈0．01）。结论塞来昔布显著降低了酸和十二指肠液混合反流模型大鼠Barrett食管癌变的危险。COX-2有可能成为食管腺癌化学预防药物的有效作用靶点。     

塞来昔布联合依维莫司对恶性嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤的抑制作用

目的本研究通过观察环氧合酶2(Cox-2)抑制剂塞来昔布与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂依维莫司对大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12的裸鼠移植瘤生长的影响,探讨依维莫司对大鼠嗜铬细胞瘤肿瘤生长和血管生成的抑制作用。方法用大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型,15d后将荷瘤裸鼠随机分为4组,每组12只,分别为依维莫司组(依维莫司灌胃1mg/kg)、塞来昔布组(塞来昔布100mg/kg灌胃)、联合组(依维莫司1mg/kg+塞来昔布100mg/kg灌胃)、对照组(生理盐水灌胃10mL/kg),用药3周,第4周后测量裸鼠移植瘤的体积变化以及裸鼠的生存时间,采用免疫组化方法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,采用Western blotting法检测肿瘤组织中VEGF的表达。结果第4周时移植瘤体积:对照组为(4 159.72±651.84)mm3,依维莫司组为(2 816.49±332.05)mm3,塞来昔布组为(4 018.38±527.46)mm3,联合组为(1 035.28±177.30)mm3,联合组与前3组均存在显著性差异(P0.01)。平均生存时间:对照组(23.3±2.8)d,依维莫司组(36.8±3.6)d,塞来昔布组(26.4±2.4)d,联合组(45.9±4.5)d,用Kaplan-meier,Log-rank方法分析,联合组与前三组的生存函数的差异有统计学意义(P0.05)。实验组肿瘤组织的VEGF表达明显低于对照组(P0.05)。结论塞来昔布联合依维莫司对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤有明显抑制作用,并可降低肿瘤组织中VEGF的表达。     

塞来昔布联合化疗对腹腔镜胃癌根治术患者的临床疗效

目的：评价塞来昔布联合FOLFOX4化疗方案对腹腔镜胃癌根治术患者的疗效和安全性.方法：将已行腹腔镜胃癌根治术患者50例随机分为观察组和对照组,每组各25例.对照组行常规FOLFOX4方案化疗,21 d为1个周期,共6个周期;观察组在常规化疗基础上给予口服塞来昔布400 mg,2次/d.收集术前、术后3周（化疗前）及治疗6个周期后的血清标本,采用酶联免疫吸附试验检测血清VEGF和COX-2水平.结果：50例患者均按期完成治疗,两组患者有效率、临床获益率及生活质量比较差异有统计学意义（P＜0.05）;不良反应比较差异无统计学意义（P＞0.05）;术前及术后3周（化疗前）观察组和对照组患者血清VEGF和COX-2表达差异无统计学意义（P＞0.05）;治疗6个周期后观察组血清VEGF和COX-2水平明显低于对照组（P＜0.01）,且均较化疗前显著下降（P＜0.01）.结论：塞来昔布联合FOL-FOX4方案治疗胃癌根治术后患者效果较单用化疗方案好,能提高有效率、临床获益率及生活质量,且耐受性良好,能够降低血清VEGF和COX-2的表达水平,抑制肿瘤血管新生,有助于减少复发转移.     

膀胱移行细胞癌组织环氧化酶2和基质金属蛋白酶2 mRNA的表达及相关性

目的:探讨膀胱移行细胞癌组织环氧化酶2(COX-2)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)mRNA的表达及两者的相关性。方法:应用RT-PCR方法检测42例膀胱移行细胞癌组织(其中Ta~T1期18例,T2~T4期24例;G1级12例,G2级19例,G3级11例;有转移26例,无转移16例)和5例正常对照膀胱组织COX-2、MMP-2 mRNA的表达,并分析与肿瘤分级分期和转移的关系以及两者的相关性。结果:COX-2 mRNA在Ta~T1期相对表达量为1.038±0.484,T2~T4期为1.489±0.584,均显著高于正常对照膀胱组织(0.460±0.224,P均<0.05);COX-2 mR-NA在G1、G2、G3级分别为0.920±0.442,1.338±0.584,1.632±0.515,均显著高于正常对照膀胱组织(0.460±0.224,P均<0.05)。MMP-2 mRNA在Ta~T1、T2~T4期分别为1.107±0.384,T2~T4期为1.604±0.425,均显著高于正常对照膀胱组织(0.423±0.227,P均<0.05);MMP-2 mRNA在G1、G2、G3级分别为0.971±0.370,1.445±0.378,1.755±0.387,均显著高于正常对照膀胱组织(0.423±0.227,P均<0.05)。COX-2与MMP-2 mRNA表达在有转移及无转移肿瘤组织中分别为1.591±0.455vs0.815±0.430,1.676±0.339vs0.927±0.228,P均<0.01。COX-2与MMP-2 mRNA的表达呈显著正相关(r=0.703,P<0.01)。结论:COX-2与MMP-2 mRNA在膀胱移行细胞癌组织高表达,且随肿瘤分级分期及转移而表达增加,二者在膀胱移行细胞癌的发生发展过程中可能具有协同作用。     

贝伐单抗对裸鼠胃癌移植瘤血管内皮细胞生长因子和核转录因子Sp1表达的影响

目的 观察贝伐单抗对裸鼠胃癌移植瘤生长以及对肿瘤血管内皮细胞生长因子（VEGF）和核转录因子Sp1表达的影响.方法 建立SGC-7901胃癌细胞株裸鼠移植瘤模型,成瘤后分别使用贝伐单抗（BVZ组）和磷酸盐缓冲液（PBS组）治疗4周.绘制肿瘤生长曲线,免疫组织化学染色技术（IHC）检测移植瘤Ki-67、CD34、VEGF及Sp1表达情况,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡.结果 相比PBS组,BVZ组肿瘤生长速度明显减缓（P〈0.05）,肿瘤细胞增殖能力下降,凋亡指数明显增加[（5.3±1.8）％比（16.7±6.7）％,P＜0.01],肿瘤组织内微血管密度下降（4.0±1.0比16.3±1.5,P＜0.001）.贝伐单抗能减少肿瘤内VEGF表达,但对核转录因子Sp1表达水平没有明显影响.结论 贝伐单抗可有效抑制裸鼠胃癌移植瘤生长,减少肿瘤内微血管密度和VEGF表达,但不引起Sp1表达的明显改变.     

胆囊胆固醇息肉与胆固醇结石的胆汁成分比较

目的分析胆囊胆固醇结石与胆固醇息肉病人的胆囊胆汁成分,探讨胆固醇结石和胆固醇息肉形成中各种成分的差异。方法测定20例胆囊胆固醇息肉（息肉组）、20例胆囊胆固醇结石（结石组）和10例非肝胆疾病（对照组）的胆囊胆汁成分。采用HITACHI-7060全自动生化分析仪测定总胆汁酸（TBA）、磷脂（PL）和总胆固醇（TC）;氨基己糖比色法测定糖蛋白;ORION-720A型数字离子酸度计测定游离Ca^2＋浓度及pH值;Agilent-1100高效液相色谱分析仪测定8种结合胆汁酸的含量。结果息肉组和结石组TC[（14.0±0.5）mmol/L,（18.6±1.2）mmol/L]、CSI（1.217±0.039,1.565±0.087）、三羟/二羟胆汁酸比值（0.702±0.084,0.763±0.060）均显著高于对照组TC（9.1±0.8）mmol/L、CSI（0.812±0.075）、三羟/二羟胆汁酸比值（0.585±0.067）（P〈0.05）,而且上述指标结石组显著高于息肉组（P〈0.05）。2组TBA含量分别为（110.7±14.8）mmol/L、（105.8±16.5）mmol/L,显著低于对照组（137.6±33.1）mmol/L（P〈0.05）。结石组糖蛋白（1.8±0.2）mmol/L、游离Ca^2＋（2.2±0.3）mmol/L及pH值（7.9±0.3）显著高于息肉组和对照组糖蛋白（0.6±0.1）mmol/L,（0.7±0.1）mmol/L、游离Ca^2＋（1.2±0.2）mmol/L,（1.1±0.1）mmol/L、pH值（7.0±0.1）,（6.9±0.2）（P〈0.05）。结石组甘氨胆酸（G）/牛磺胆酸（T）比值（2.777±0.217）显著低于息肉组（3.624±0.465）和对照组（3.960±0.377）（P〈0.05）;结石组和息肉组PL/TBA（0.311±0.044,0.292±0.036）显著高于对照组（0.241±0.082）（P〈0.05）。结论胆囊胆汁中总胆汁酸含量的降低和总胆固醇浓度的升高,是形成胆固醇结石和胆固醇息肉的共同因素。结合胆汁酸构成比例、pH值、糖蛋白及游离钙离子浓度在胆囊胆固醇息肉及结石的胆汁中存在差别。     

肾上腺素α1受体亚型与大鼠膀胱出口梗阻所致逼尿肌不稳定的关系

目的：探讨肾上腺素α1受体亚型与大鼠膀胱出口梗阻（BOO）所致逦尿肌不稳定（DI）的关系。方法：利用雄激素诱导前列腺肥大建立雄性SD大鼠膀胱出口梗阻模型,梗阻6周后行允盈性膀胱测压、离体逼尿肌条收缩实验及Western Blotting蛋白印迹实验。结果：BOO动物模型梗阻6周后逼尿肌不稳定的发生率为90％,DI组与对照组相比．排尿压力升高．（69．30±9．90）vs（49．60±8．36）cmH2O（P〈0．05）。剩残余尿量增加（0．29±0．07）vs（0,10±0．05）ml（P〈0．05）。膀胱容量增加（0．59±0．07）vs（0．23±0．05）ml（P〈0．05）。肌条收缩力升高（O．89±0．07）vs（0．43±0．05）g（P〈0．05）。α1D受体蛋白表达程度高于对照组,α1A受体表达程度未发生变化。结论：肾上腺素α1D受体主要参与到大鼠膀胱出口梗阻后逼尿肌不稳定的发生发展中。     

17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤的抑制作用

目的通过观察热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素(17-AAG)对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤生长的影响,探讨17-AAG对大鼠嗜铬细胞瘤肿瘤生长和血管生成的抑制作用。方法用大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12接种于裸鼠皮下,建立移植瘤模型,15d后将荷瘤裸鼠随机分为2组,每组12只,分别为实验组(腹腔注射17-AAG 40mg/kg)和对照组(腹腔注射生理盐水10mL/kg),用药3周。第4周后测量裸鼠移植瘤的体积变化以及裸鼠的生存时间。采用免疫组化方法检测肿瘤组织中HSP90、血管内皮生长因子(VEGF)的表达,采用Western blotting法检测肿瘤组织中HSP90、VEGF的表达。结果第4周时,移植瘤体积的对照组和实验组分别为(5 070.13±630.42)mm3和(2 218.80±336.29)mm3,两组移植瘤体积存在显著性差异(P0.05);平均生存时间对照组和实验组分别为(26.0±5.1)、(42.7±7.5)d,用Kaplan-Meier、Log-Rank方法分析两组的生存函数的差异有统计学意义(P0.05)。免疫组化显示HSP90在对照组中呈高表达(10/12,83.3%),在实验组中呈低表达(4/12,33.3%);VEGF在对照组中呈高表达(11/12,91.7%),在实验组中呈低表达(4/12,33.3%);实验组肿瘤组织的HSP90、VEGF表达明显低于对照组(P0.05)。Western blotting法也显示两种蛋白在实验组上的表达明显低于对照组(P0.01)。结论 17-AAG对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤有明显抑制作用,并可降低肿瘤组织中HSP90和VEGF的表达。