白头翁皂苷B4栓剂改善大鼠痛风药效学研究

目的 研究白头翁皂苷B₄栓剂抗痛风作用。方法 应用混合脂肪酸甘油酯制备白头翁皂苷B₄栓剂;使用尿酸钠诱导大鼠急性痛风性关节炎模型,观察白头翁皂苷 B₄栓剂（9、18、36 mg·kg^-1,直肠给药）对大鼠踝关节肿胀度的影响,试剂盒法检测血清炎症因子单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,HE染色后观察踝关节组织病理学变化;使用氧嗪酸钾诱导大鼠急性高尿酸血症,给予别嘌醇（阳性药,22 mg·kg^-1,ip给药）和白头翁皂苷 B₄栓剂低 、中 、高剂量（9、18、36 mg·kg^-1）,试剂盒法检测大鼠血清中尿酸、黄嘌呤氧化酶（XOD）、尿素氮（BUN）水平,检测肝脏组织中尿酸、BUN、肌酐（CRE）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）水平,HE染色后检测肾脏组织病理学变化;使用角叉菜胶诱导大鼠足肿胀建立炎症动物模型,足容积测量仪观察白头翁皂苷 B₄栓剂对肿胀率的影响;使用甲醛诱导小鼠致痛模型,观察白头翁皂苷 B₄栓剂（13、26、52 mg·kg^-1）对舔足次数的影响。结果 与模型组比较,白头翁皂苷 B₄栓剂能够显著抑制尿酸钠诱导急性痛风性关节炎大鼠的关节肿胀（P＜0.05、0.01、0.001）,降低血清炎症因子 MCP-1、TNF-α、IL-6、IL-1β水平（P＜0.05、0.01、0.001）;降低氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症大鼠血清尿酸、XOD、BUN水平,降低肝脏中尿酸、BUN、CRE和MDA水平,升高肝脏中GSH-Px、CAT水平（P＜0.05、0.01、0.001）,改善肾脏组织病理改变;显著抑制角叉菜胶诱导大鼠足肿胀（P＜0.05）;显著减少甲醛诱导小鼠致痛模型的舔足次数（P＜0.01）。结论 白头翁皂苷B₄栓剂具有抗痛风性关节炎、抗急性高尿酸血症及抗炎镇痛作用。     

白头翁皂苷B5及其衍生物对脂多糖诱导急性肾损伤小鼠药效学研究

目的 酶水解法制备白头翁皂苷B₅的C-28位脱糖衍生物,探究白头翁皂苷B₅及其衍生物对脂多糖（LPS）诱导的急性肾损伤小鼠的药效学作用。方法 通过α-L鼠李糖苷酶水解白头翁皂苷B₅,分离纯化后得到其衍生物,采用ip LPS致雄性BALB/c小鼠急性肾损伤模型。将70只小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松（DEX,阳性药,5 mg·kg^-1）和白头翁皂苷 B₅低、高剂量（20、40 mg·kg^-1）组及白头翁皂苷 B₅衍生物低、高剂量（20、40 mg·kg^-1）组,每组 10只,造模前 2 h和造模后6 h给药。末次给药后6 h摘眼球取血,全自动生化仪计数血液中的白细胞（WBC）和中性粒细胞（Neu）;试剂盒法测定血清中肌酐（CRE）和尿素氮（BUN）水平;ELISA法检测血清和肾组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平;苏木素-伊红（HE）检测肾组织病理变化。结果 与模型组相比,白头翁皂苷 B₅组及其衍生物组小鼠的血清 WBC、Neu、CRE、BUN水平及血清和肾组织中 TNF- α、 IL-6、 IL-1β水平均显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）,肾组织损伤明显减轻。与白头翁皂苷B₅组相比,相同剂量下,白头翁皂苷B₅衍生物组可显著降低WBC、Neu和BUN的数量（P＜0.05、0.01、0.001）;在低剂量下可明显抑制小鼠血清中CRE的水平（P＜0.001）和肾组织中IL-6、IL-1β的释放（P＜0.001）;在高剂量下显著改善肾脏病理损伤程度。结论 白头翁皂苷B₅及其衍生物可以减轻由LPS诱导的急性肾损伤小鼠的肾脏组织损伤程度,相同剂量下,白头翁皂苷B₅的C-28位脱糖衍生物药效优于白头翁皂苷B₅。     

白头翁皂苷B4治疗大鼠子宫肌瘤的作用机制研究

目的 基于大鼠体内实验以及网络药理学探讨白头翁皂苷B₄治疗子宫肌瘤的作用机制。方法 大鼠按体质量随机分为 6组：对照组、模型组、米非司酮（阳性药,1.25 mg·kg^-1）组和白头翁皂苷B₄低、中、高剂量（5、10、20 mg·kg^-1）组,每组 8只。采用雌激素负荷法制备子宫肌瘤模型,于造模成功后ip给药,对照组及模型组每天ip等量0.9%氯化钠溶液。通过对大鼠一般行为学的观察、子宫组织的明场以及病理HE染色切片观察、ELISA试剂盒检测血清与子宫组织中雌二醇、孕酮、雌激素受体的表达水平,明确白头翁皂苷 B₄对大鼠子宫肌瘤是否有治疗作用;通过网络药理学收集白头翁皂苷 B₄与子宫肌瘤的交互靶点,并对其进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络信息的构建以及基因功能富集分析,并将靶点以及药物进行AutoDockVina分子对接分析,确定作用靶点;最终对组织进行相关靶点Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白水平的Western blotting检测进行验证。结果 体内实验结果显示,与模型组比较,白头翁皂苷B₄组大鼠子宫形态明显好转,子宫指数显著降低（P＜0.001）;HE染色显示,白头翁皂苷B₄组大鼠子宫平滑细胞排列整齐,形态正常,色泽均一,肌层炎症细胞浸润减少 ;血清及子宫组织中雌二醇、孕酮、雌激素受体的水平显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）。通过Pubchem数据库筛选得到白头翁皂苷B₄相关作用靶点23个,与子宫肌瘤共同作用靶点8个,富集得到69条KEGG信号通路,主要包括细胞凋亡、脂质和动脉粥样硬化、IL-17、NF-κB、小细胞肺癌、MAPK等相关信号通路。AutoDock Vina结果显示白头翁皂苷 B₄与关键靶点 BCL2、BAX、Caspase3结合良好。与模型组比较,白头翁皂苷 B₄中、高剂量组 Bax、Caspase-3蛋白水平显著升高（P＜0.001）,Bcl-2蛋白水平显著降低（P＜0.001）。结论 白头翁皂苷B₄可能通过BCL2、BAX、Caspase-3等关键靶点诱导凋亡,同时降低雌二醇、孕酮、雌激素受体的表达,从而治疗子宫肌瘤。     

白头翁皂苷B4对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病的治疗作用及其机制研究

目的 考察白头翁皂苷B₄对咪喹莫特诱导的银屑病模型小鼠的炎症及免疫相关指标的影响,探讨其对小鼠银屑病的治疗作用及其机制。方法 将56只BALB/c小鼠随机分成对照组,模型组,阿维A胶囊组（6 mg/kg）,白头翁皂苷B₄低、中、高剂量（5、10、20 mg/kg）组,白头翁皂苷B₄乳膏组（20 mg/kg）,每组各8只。通过局部涂抹5%咪喹莫特乳膏诱导小鼠银屑病模型,各组小鼠口服或涂抹相应药物,14 d后通过银屑病皮损面积及严重程度评分（PASI）评价小鼠皮损程度;HE染色观察皮肤组织病理学形态;血常规检测血液中免疫细胞的变化;酶联免疫吸附试剂（ELISA）检测小鼠皮肤中白细胞介素（IL）-6、IL-12、IL-17、IL-1β的水平。结果 与模型组相比,阿维A胶囊组,白头翁皂苷B₄ 5、10、20 mg/kg组,白头翁皂苷B₄乳膏组小鼠皮损组织棘层厚度减小,真皮层炎症细胞浸润减少,PASI评分、血液中的免疫细胞及皮肤组织中IL-6、IL-12、IL-17、IL-1β的表达水平均显著降低。结论 白头翁皂苷B₄对5%咪喹莫特诱导小鼠银屑病皮损具有明显的治疗作用,其机制可能是通过抑制IL-6、IL-12、IL-17、IL-1β等细胞因子表达发挥治疗作用。     

白头翁皂苷B4对高脂饮食诱导ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的治疗作用及机制研究

目的 研究白头翁皂苷B₄的抗动脉粥样硬化作用及其机制。方法 将雄性的C57小鼠设为对照组,共6只,给予正常饮食;给予 ApoE^-/-小鼠高脂饮食喂养 9周后,随机分为 4组：模型组、辛伐他汀（阳性对照,5 mg·kg^-1）组及白头翁皂苷 B₄低、高剂量（5、20 mg·kg^-1）组,每组7只。ig给药9周,C57对照组和ApoE^-/-模型组给予等量的0.9%的氯化钠溶液。给药的同时造模小鼠仍给予高脂饮食,每周统计 1次体质量,给药 9周后进行取材。通过兽用血常规分析仪检测全血中血小板（PLT）、白细胞（WBC）、中性粒细胞（Neu）及淋巴细胞（Lym）水平;ELISA法检测血清中白细胞介素-6（IL-6）的水平;试剂盒法检测血清中总胆固醇（TC）、游离胆固醇（FC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平;通过全长主动脉油红染色检测主动脉中脂质积累情况;通过苏木精-伊红染色法、Masson染色法和油红O染色法检测主动脉窦的组织病理变化。结果 与模型组比较,在白头翁皂苷B₄及辛伐他汀给药后,体质量呈降低趋势;PLT、WBC、Neu、Lym、IL-6水平均显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）;血清TC、FC、TG、LDL-C水平显著降低（P＜0.001）,HDL-C水平显著升高（P＜0.001）;全长主动脉被染红区域显著缩小（P＜0.001）;主动脉窦油红染色区域面积明显减少,小鼠主动脉窦斑块减少,可见少量泡沫细胞,炎症细胞浸润减少,中膜层平滑肌及弹性纤维排列增厚不明显,胶原含量多且分布规律,胶原间的腔隙减少,油红染色区域面积明显减少。结论 白头翁皂苷B₄对高脂饮食诱导的ApoE^-/-基因敲除小鼠动脉粥样硬化具有治疗作用,其作用机制与减少脂质浸润和炎症反应有关。     

白头翁皂苷组合物对帕金森病和阿尔茨海默病模型小鼠的改善作用

目的 探讨白头翁皂苷 B₄和常春藤皂苷 C（HSC,又名白头翁皂苷 B₅）质量比为 4∶1的组合物对帕金森病和阿尔茨海默病模型小鼠的保护作用及机制。方法 取60只健康雄性C57BL/6小鼠,随机抽取10只作为对照组,剩余50只小鼠ip1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）制备帕金森病（PD）模型,模型构建成功后随机分为模型组、左旋多巴胺片（阳性对照,30 mg·kg^-1）组和白头翁皂苷B₄＋HSC高、中、低剂量（20、10、5 mg·kg^-1）组,每组10只,ig给药14 d,每天1次,对照、模型组小鼠ig等量0.9%的氯化钠溶液。每2天观察动物震颤行为出现与消失的时间,于给药第7、14天展开行为学实验并记录评分;HE染色法观察脑组织黑质病理学变化;免疫组化检测脑组织 α-突触核蛋白表达;实时荧光定量 PCR（qRTPCR）检测小鼠脑组织多巴胺转运体（DAT）、酪氨酸羟化酶（TH）mRNA表达。将 50只 APP/PS1转基因小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐（阳性药,1.5 mg·kg^-1）组和白头翁皂苷B₄＋HSC高、中、低剂量（20、10、5 mg·kg^-1）组,取 10只同背景 APP/PS1转基因阴性小鼠作为对照组,每天1次,连续ig给药28 d,模型组和对照组ig等量0.9%的氯化钠溶液。给药结束后进行行为学实验并记录评分;ELISA法检测小鼠血清中炎症因子白细胞介素（IL-6、IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、环氧化酶 2（COX-2）和氧化应激因子活性氧（ROS）,试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平。结果 在 PD模型小鼠中,与模型组比较,白头翁皂苷 B₄＋HSC显著降低震颤麻痹评分（P＜0.01、0.001）,显著降低旷场实验评分（P＜0.01、0.001）,显著降低爬杆实验评分（P＜0.01、0.001）,显著降低悬挂实验评分（P＜0.01、0.001）,显著降低游泳实验评分（P＜0.01、0.001）,显著降低行为学实验综合评分（P＜0.001）,明显改善黑质体结构损伤,明显降低α-突触核蛋白表达,显著升高小鼠脑组织DAT和TH mRNA水平（P＜0.05、0.01、0.001）。在AD模型小鼠中,与模型组比较,白头翁皂苷 B₄＋HSC显著缩短水迷宫定位航行实验逃避潜伏期（P＜0.001）,明显延长在目标象限的累计停留时间（P＜0.05、0.01、0.001）,显著增加准确穿越平台所在位置的次数（P＜0.05、0.01）,显著降低血清炎症因子水平（P＜0.05、0.01、0.001）,显著降低 ROS水平、升高 SOD和 GSH-Px的水平（P＜0.05、0.01、0.001）。结论 白头翁皂苷＋HSC对 PD和 AD小鼠具有保护作用,可能通过发挥抗炎、抗氧化,改善脑组织和神经元损伤等来实现。     

RP-HPLC法测定白头翁汤中白头翁皂苷B4的含量

目的 建立白头翁汤中白头翁皂苷B₄含量测定的RP-HPLC法。方法 采用Hypersil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-水（体积比28∶72）为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长205 nm,柱温30 ℃,进样量10 μL。结果 白头翁皂苷B4质量浓度在0.1～1.5 g·L^-1内线性关系良好（r=0.999 8）;平均加样回收率为103.1%,RSD为1.2%（n=9）;重复性RSD为1.6%（n=5）。结论 该方法简便、快速、准确、重现性好,为白头翁汤及其新剂型改进提供了一种质量控制方法。     

HPLC法测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B1、B2和B6含量

摘 要 目的:建立HPLC法测定复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B₁、维生素B₂和维生素B₆含量的方法。方法: 采用Insteril ODS-3色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相：0.01 mol·L^-1庚烷磺酸钠（含0.25%三乙胺,用冰醋酸调节pH至3.8)-甲醇（75∶25）,柱温30℃,检测波长为280 nm,流速：1.0 ml·min^-1。结果: 维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆分别在3.98～99.40 μg·ml^-1（r=0.999 7）、4.08～101.91μg·ml^-1（r=0.999 9）、2.08～52.00 μg·ml^-1（r=0.999 9）范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.18%、99.53%、99.27%,RSD分别为0.60%、0.67%、0.71%(n=9)。结论:本法简便、快速、准确,可用于复方吡拉西坦脑蛋白水解物片中维生素B₁、维生素B₂和维生素B₆的含量测定     

维生素B2和B6的同步荧光分析法及其在维生素复合制剂中的应用

本文建立了维生素B₂和B₆的同步荧光分析法。以△λ=58nm进行同步扫描所得的两个同步荧光峰(以发射波长表示,分别位于526nm和389nm)可用以同时分别定量维生素B₂和B₆。方法快速、灵敏。维生素B₂和B₆的工作曲线线性范围分别为0～1μg/ml和0～1.5μg/ml,检出限分别为0.5ng/ml和1ng/ml。方法已应用于三种复合维生素B制剂中维生素B₂和B₆的分析。     

人参皂苷Rg1及其肠内菌代谢产物Rh1对小鼠免疫细胞功能的影响

目的初探人参皂苷Rg₁及其肠内菌代谢产物Rh₁对正常小鼠免疫功能的影响。方法用Rh₁与Rg₁分别处理脾T细胞,B细胞及腹腔巨噬细胞(Mφ);MTT比色法测T和B细胞增殖能力;中性红比色法测Mφ的吞噬功能;Griess法测Mφ释放NO的水平。结果Rh₁能促进脾细胞增殖、下调Con A诱导的T细胞增殖;Rh₁与Rg₁对LPS诱导的B细胞增殖均无明显作用;Rg₁和Rh₁能提高Mφ的吞噬能力和促进NO的释放。结论Rg₁及其代谢产物Rh₁可共同作用于T细胞和Mφ而产生免疫调节作用。     

UPLC法测定维生素B4片的含量

目的:建立UPLC法测定维生素B4片中维生素B4的含量的方法.方法:采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,流动相为0.02 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-甲醇(90:10)(加0.5%的三乙胺,用H3PO4调pH至为4.0),流速为0.3 ml·min-1,柱温为50℃,检测波长为262 nm.结果:维生素B4在2.79～139.50 μg· ml-1浓度范围内,线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为100.2%,RSD为0.3%(n=9).结论:本方法简便准确,重复性好,可用维生素B4片的质量控制.     

高效液相色谱-光化学衍生法测定湖南产莲子中黄曲霉毒素G1、G2、B1、B2

目的对不同来源的湖南产莲子中黄曲霉毒素G_1、G_2、B_2、B_1进行高效液相色谱-光化学衍生法测定。方法采用高效液相色谱–光化学衍生法,采用岛津GL Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇–乙腈–水(35∶13∶52),柱温35℃;光化学衍生器(254 nm)激发波长λ_(ex)=360 nm,发射波长λ_(ex)=450 nm。结果黄曲霉毒素G_1、G_2、B_2、B_1分别在6.7～33.3、11.4～56.8、10.3～51.5、4.1～20.3 pg线性关系良好;平均回收率分别为98.07%、97.72%、96.11%、99.52%,RSD值分别为1.69%、1.40%、2.72%、1.34%(n=6)。9批莲子样品中,有6批未检出黄曲霉毒素,来自于农贸市场农户自存的2批次检出黄曲霉毒素B_1,实验室塑料袋包装储存1年的1批检出黄曲霉毒素B_1、B_2,但质量分数均低于法定标准限量。结论不同来源湖南产莲子中黄曲霉毒素质量分数均低于《中国药典》2020年版规定限量。该法测定结果准确、重复性良好,可为完善莲子安全性控制和质量标准提升提供实验依据。     

高效液相色谱-荧光检测法测定沉香中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2

目的建立高效液相色谱–光化学衍生–荧光检测法测定沉香药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2。方法采用高效液相色谱法,通过免疫亲和柱提取和净化,荧光检测器检测。Agilent Zorbax Ecilpse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–水(45∶55);体积流量:0.8 m L/min;柱温:30℃;进样盘温度:4℃;荧光激发波长为360 nm,发射波长为450 nm。结果黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2分别在9.3~74.4、3.0~24.0、9.3~74.4、3.5~28.0 pg线性关系良好,r均大于0.998 0;检测限分别为1.86、0.60、1.86、0.70 pg,定量限分别为7.44、2.40、7.44、2.80 pg。平均回收率分别为78%、92%、82%、99%,RSD值分别为4.4%、3.0%、4.3%、2.8%。结论所建立的方法结果准确、重复性、稳定性均良好,可用于沉香药材中黄曲霉毒素的质量控制。     

Aflatoxin B1 and fumonisin B1 affect the oxidative status of bovine peripheral blood mononuclear cells

Mycotoxins are secondary metabolites having a high cytotoxic potential. They are produced by molds and released in food and feed. To date, the mechanisms underlying the mycotoxin-induced cytotoxicity have not been fully clarified. The induction of oxidative stress, as a possible mechanism, has been postulated. This in vitro study was focused on the effect of two widely occurring mycotoxins, aflatoxin B₁ (AFB₁) and fumonisin B₁ (FB₁), on the oxidative status of bovine peripheral blood mononuclear cells (PBMC) incubated for 2 and 7 days at different levels of AFB₁ (0, 5 and 20 μg/ml) and FB₁ (0, 35 and 70 μg/ml). Reactive oxygen metabolites (ROM), intracellular thiols (SH), malondialdehyde (MDA) and gene expression of cytoplasmic superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSHPX-1) were measured on PBMC after incubation. The highest concentration of AFB₁ and all concentrations of FB₁ caused an increase (p < 0.05) of intracellular ROM without any time dependent effect. Intracellular SH decreased with 20 μgAFB₁/ml (p < 0.05) and the effect was particularly marked after 7 days of exposure. Intracellular SH were not affected by FB₁ even though a lower (p < 0.05) SH level after 2 days exposure than after 7 days was observed. MDA increased (p < 0.05) in AFB₁ or FB₁ treated PBMC. The exposure to FB₁ for 7 days increased MDA (p < 0.05) only in cells treated with 70 μg/ml. Exposure of PBMC to AFB₁ reduced SOD mRNA while FB₁ decreased both SOD and GSHPX-1 mRNA abundance. These results demonstrate that, even though by different mechanisms, AFB₁ and FB₁ may induce cytotoxicity through an impairment of the oxidative status of PBMC.     

HPLC法测定四维钙片中维生素C、B1、B2的含量

目的：建立高效液相色谱法测定四维钙片中维生素C、维生素B1和维生素B2含量的方法.方法：采用SHISEIDOC18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以0.05％磷酸溶液（含0.005 mol·L-1己烷磺酸钠）-乙腈（88：12）为流动相,流速：1.0ml· min-1,检测波长：244 nm,柱温：30℃,进样量：20μm.结果：维生素C、维生素B1和维生素B2的线性范围分别为7.52～90.24 μg· ml-1（r=1.000 0）,1.32 ～15.82 μg·ml-1（r=1.000 0）和1.27～15.24μg·ml-1 （r=1.000 0）;平均回收率分别为101.63％、99.77％和100.25％,RSD分别为1.51％、1.48％和1.84％（n=9）.结论：本法操作简便,结果准确、可靠,可用于四维钙片中维生素C、B1、B2的含量测定.     

Connective tissue mast cells are the target of formaldehyde to induce tracheal hyperresponsiveness in rats: Putative role of leukotriene B4 and nitric oxide

Formaldehyde (FA) exposure induces upper airways irritation and respiratory abnormalities, but its mechanisms are not understood. Since mast cells are widely distributed in the airways, we hypothesized that FA might modify the airways reactivity by mechanism involving their activation. Tracheal rings of rats were incubated with Dulbecco's modified medium culture containing FA (0.1 ppm) in 96-well plastic microplates in a humid atmosphere. After 30 min, 6 h, and 24–72 h, the rings were suspended in an organ bath and dose–response curve to methacholine (MCh) were determined. Incubation with FA caused a transient tracheal hyperresponsiveness to MCh that was independent from tracheal epithelium integrity. Connective tissue mast cell depletion caused by compound 48/80 or mast cell activation by the allergic reaction, before exposure of tracheal rings to FA prevented the increased responsiveness to MCh. LTB₄ concentrations were increased in the culture medium of tracheas incubated with FA for 48 h, whereas the LTB₄-receptor antagonist MK886 (1 μM) added before FA exposure rendered the tracheal rings normoreactive to MCh. In addition, FA exposure did not cause hyperresponsiveness in tracheal segments incubated with l-arginine (1 μM).