铅致大鼠心肌细胞损伤中蛋白激酶C对缝隙连接蛋白43表达的调控作用

目的 研究醋酸铅染毒大鼠心肌细胞株（H9c2）后蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）、缝隙连接蛋白43（connexin 43，Cx43）及其磷酸化蛋白的表达变化，探讨心肌损伤过程中PKC对Cx43的调控作用。方法 （1）将对数生长期H9c2随机分组，以醋酸铅0、5、10、20 μmol/L梯度浓度处理细胞12 h。（2）将对数生长期H9c2细胞随机分为对照组、醋酸铅组、醋酸铅＋佛波酯（phorbol 12-myristate 13-acetate，PMA）组和PMA组。PMA预处理后的醋酸铅+PMA组、醋酸铅组细胞均给予10 μmol/L醋酸铅染毒12 h，PMA组不予染毒。（3）检测各组H9c2细胞培养上清乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）活性；采用蛋白质印迹法（Western blot）检测各组H9c2细胞内Cx43、PKC蛋白相对表达含量及s368位点的Cx43磷酸化水平。结果 10、20 μmol/L醋酸铅染毒的H9c2细胞存活率较对照组明显降低（P<0.05）；10、20 μmol/L醋酸铅组H9c2细胞培养液LDH活性较对照组显著升高（P<0.05）；5、10、20 μmol/L醋酸铅组Cx43、p-Cx43s368、PKC蛋白相对表达含量与对照组相比差异具有统计学意义（P<0.05），且呈浓度依赖性降低；20 μmol/L醋酸铅组p-Cx43/Cx43显著低于对照组（P<0.05）。与对照组相比，醋酸铅组、醋酸铅+PMA组H9c2细胞培养液LDH活性显著升高（P<0.05），醋酸铅+PMA组细胞培养液LDH活性显著低于醋酸铅组（P<0.05）。与对照组相比，醋酸铅组、醋酸铅+PMA组细胞内Cx43蛋白相对表达含量降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；醋酸铅+PMA组Cx43蛋白相对表达含量显著高于醋酸铅组（P<0.01）。结论 铅致心肌细胞损伤机制可能与PKC、Cx43及其磷酸化蛋白表达降低有关，PKC信号通路对Cx43表达具有调控作用。     

紫外线诱导HaCaT细胞IL10 mRNA及蛋白表达

目的探讨紫外线致机体免疫抑制的作用机制。方法体外培养人角质形成细胞系（HaCaT）,以0.6,1.2,1.8,2.4,3.0,3.6 J/cm^2长波紫外线（UVA）照射,采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力。以2.4 J/cm^2UVA照射HaCaT细胞,于0,2,4,12,24,48 h收集细胞及培养掖,分别采用RT-PCR和双抗夹心ELISA方法,检测白细胞介素10（IL10）mRNA及其蛋白表达。结果3.0,3.6 J/cm^2UVA照射使体外培养的HaCaT细胞活力明显降低（P〈0.05）;0.6～2.4 J/cm^2UVA照射对细胞活力无明显影响（P〉0.05）。HaCaT细胞经2.4J/cm^2UVA照射后12h,IL19 mRNA呈弱表达;照射后24h,培养液中IL10蛋白水平为（17.45±0.65）pg/ml;照射组其他各检测时点及对照组细胞未见IL10 mRNA及蛋白表达。结论正常情况下HaCaT细胞并不表达IL10,UVA照射可诱导其表达。     

WISP1对百草枯诱导肺泡细胞上皮间质转化和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 观察百草枯（PQ）对人肺A549细胞WNT1诱导信号通道蛋白1（WISP1）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响，探讨WISP1在PQ诱导肺泡细胞上皮间质转化（EMT）的作用机制。方法 体外培养A549细胞，采用不同浓度PQ染毒，光学显微镜下观察细胞形态学改变，实时荧光定量PCR方法检测A549细胞中E-钙黏蛋白（E-Cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、WISP1及MMP-9的表达，Western blot测定E-Cadherin、Vimentin、WISP1和MMP-9蛋白表达。结果 （1）PQ染毒后A549细胞形态发生改变，细胞体积增大，空泡增多，随着PQ染毒浓度增加细胞岀现凋亡。（2）伴随细胞形态改变，E-Cadherin水平随PQ染毒浓度增加而降低，以200 μg/ml PQ时最低（P<0.01）；Vimentin浓度增加，以50 μg/ml PQ时最高（P<0.01）。（3）随着PQ染毒浓度增加，WISP1、MMP-9基因和蛋白表达升高，200 μg/ml PQ染毒后第5天WISP1、MMP-9表达达到高峰（P<0.01）。（4）经WISP1 siRNA处理后200 μg/ml PQ诱导细胞的EMT现象减少，E-Cadherin表达较空白siRNA升高（P<0.01），Vimentin浓度下降（P<0.01），WISP1和MMP-9表达降低（P<0.01），两者的降低呈正相关（r=0.986，P<0.01）。结论 WISP1可能参与了PQ诱导的EMT过程，WISP1水平降低抑制了PQ诱导的MMP-9表达。因而推测WISP1与MMP-9可能在PQ所致肺纤维化过程中发挥了作用。     

ERK/AP-1信号通路在亚急性1，2-二氯乙烷中毒性脑水肿中的作用

目的 探究细胞外信号调节激酶/激活蛋白-1（ERK/AP-1）信号通路在亚急性1，2-二氯乙烷（1，2-DCE）中毒性脑水肿形成中的作用。方法 选取40只健康雌性昆明种小鼠随机分为对照组及3个染毒组；染毒组小鼠于染毒柜中1.2 mg/L 1，2-DCE染毒3.5 h/d，分别染毒1 d、2 d和3 d。染毒结束次日取材，观察脑组织病理切片，测定血清白细胞介素-1β（IL-1β）含量；检测各组小鼠脑组织含水量，MMP-9、Occludin、ERK1/2、p-ERK1/2及AP-1的c-Fos、c-Jun亚基蛋白和mRNA表达水平。结果 染毒2 d和3 d组小鼠出现脑水肿病理改变；与对照组相比，染毒2 d和3 d组小鼠脑组织含水量、MMP-9蛋白和mRNA表达水平上调，Occludin蛋白表达水平降低，差异均有统计学意义（P<0.05）；各组ERK1/2蛋白和mRNA表达水平无差别，染毒3 d组小鼠脑组织中p-ERK1/2蛋白、AP-1的c-Fos亚基蛋白和mRNA表达水平及血清IL-1β含量均显著高于对照组（P<0.05）；染毒组AP-1的c-Jun亚基蛋白表达水平均高于对照组（P<0.05）。结论 1，2-DCE可通过诱导小鼠血液生成IL-1β，激活小鼠脑组织中ERK/AP-1信号通路上调MMP-9蛋白表达，破坏血脑屏障通透性，参与1，2-DCE中毒性脑水肿形成。     

血管生成素-1对人绒毛膜外滋养细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9表达的调控作用

目的分析血管生成素-1(Ang-1)对人绒毛膜外滋养细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的调控作用。方法将体外培养的人绒毛膜外滋养细胞株HTR8/SVneo分为空白对照组(未转染)、NC-siRNA组(转染阴性对照siRNA)及Ang-1-siRNA组(转染Ang-1 siRNA)。采用实时定量PCR法检测3组细胞中Ang-1 mRNA的表达,采用Western blot法检测Ang-1、MMP-2及MMP-9蛋白的表达,采用Transwell小室法检测细胞侵袭能力。结果转染48 h后,空白对照组Ang-1 mRNA表达水平为(1.36±0.04),NC-siRNA组Ang-1 mRNA表达水平为(0.98±0.07),Ang-1-siRNA组Ang-1 mRNA表达水平为(0.24±0.02),3组比较差异有统计学意义(F=257.128,P<0.001)。空白对照组Ang-1蛋白水平为(0.54±0.03),NC-siRNA组Ang-1蛋白水平为(0.49±0.07),Ang-1-siRNA组Ang-1蛋白水平为(0.12±0.06),3...     

过氯酸胺对大鼠肺组织中转化生长因子-β1和肿瘤坏死因子-αmRNA表达的影响

目的探讨过氯酸铵（AP）对大鼠肺组织转化生长因子-β1（TGF—β1）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达的影响。方法将100只SD大鼠随机分为5组：48、96和192mg／kgAP染毒剂量组、阴性对照组（生理盐水）和博莱霉素组（BLM5，mg／kg），采用一次性气管内注入染毒，染毒后第3、7、14和28天每组各处死5只大鼠，通过RT—PCR法测定肺组织中TGF-β1和TNF—αmRNA的表达。结果肺组织TGF-β1mRNA表达：第3天3个AP染毒剂量组（1．73、1．38、1．64），第7、14天192mg／kg剂量组（1．31、0．70）以及第28天96、192mg／kg剂量组（1．25、2．25）均比阴性对照组增加，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；阴性对照组、BLM组和48mg／kg剂量组随染毒后时间延长TGF-β1mRNA表达均明显降低，而第28天96、192mg／kg剂量组表达仍较高。肺组织中TNF—αmRNA表达：第3天96、192mg／kg剂量组（1．01、1．13）、第7和14天192mg／kg剂量组（0．74、0．91）、比阴性对照组增加，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；各剂量组TNF—αmRNA表达在第3天最高，而后逐渐下降至正常水平。结论AP可使大鼠肺组织致纤维化细胞因子TGF—β1和TNF—αmRNA表达增加。     

MMP-2以及TNF-α在子宫肌瘤中的意义

目的:探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在人类子宫肌瘤的发病机制中的作用。方法:分析2012年8月~2014年2月在温州市中心医院接受全子宫切除术的19例子宫肌瘤患者的临床资料。探讨和比较卵泡期、黄体期的MMP-2以及TNF-α在HL、HM细胞、平滑肌细胞中的表达差异,并探讨TNF-α不同作用时间下的子宫肌瘤平滑肌细胞中的MMP-2 mRNA表达差异。结果:19例患者,平均年龄43.2岁,卵泡期HL组织的TNF-α(t=3.625,P<0.01)、MMP-2(t=3.722,P<0.01)表达均显著高于HM组织;黄体期HL细胞中的TNF-α(t=3.226,P<0.01)、MMP-2(t=5.291,P<0.01)表达均显著高于HM细胞,而平滑肌细胞中两者表达并无统计学差异(P>0.05);不同TNF-α作用时间所对应的MMP-2 mRNA表达有统计学差异(F=28.38,P<0.01),且时间越长,MMP-2 mRNA表达越高。结论:在子宫肌瘤中,TNF-α和MMP-2呈高表达状态,两者的表达与子宫肌瘤的发病、进展有着密切的联系。     

c-jun氨基末端激酶在UVA诱导人角质形成细胞IL-10表达中的作用

目的探讨c-jun氨基末端激酶(JNK)是否介导UVA诱导的人角质形成细胞IL-10的表达。方法以2.4J/cm2UVA照射体外培养的2×104个/ml人角质形成细胞系(HaCaT)细胞,于照射后不同时点(0～48h)收集细胞并应用免疫荧光法检测磷酸化、非磷酸化JNK的水平。以JNK抑制剂SP600125(终浓度为10μmol/L)预处理人角质形成细胞,收集UVA照射后各时点(0～48h)的细胞及培养上清液,采用RT-PCR和双抗夹心ELISA方法检测IL-10mRNA及其蛋白表达。结果照射组角质形成细胞磷酸化JNK水平在各采样时点均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);照射组角质形成细胞非磷酸化JNK水平于0、2、12、24、48h均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。SP600125预处理的细胞于照射后的各时点均未检测到IL-10mRNA及其蛋白的表达。结论 JNK可能介导UVA诱导的人角质形成细胞IL-10的表达。     

抗氧化剂对砷诱导人正常膀胱上皮细胞HIF-1α 表达的影响[

目的探讨抗氧化剂对砷诱导人正常膀胱上皮细胞HIF-1α表达的影响。方法人膀胱上皮细胞(SVHUC-1)暴露于0、0.5、1、2、4、8、10μmol/L亚砷酸钠(Na As O2)24 h,RT-PCR检测HIF-1α的mRNA水平;选择4和10μmol/L剂量组,分别处理4、12、24、48、72 h,再以RT-PCR法检测HIF-1α的mRNA水平;SV-HUC-1细胞同时暴露于Na As O2和抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)、维生素C(VC),检测HIF-1α的蛋白含量。结果经砷处理后,SV-HUC-1细胞HIF-1α的mRNA含量显著升高(P0.05),并与染砷剂量呈显著剂量-反应关系;抗氧化剂NAC和VC均显著降低了HIF-1α的蛋白水平。结论砷能诱导人正常膀胱上皮细胞HIF-1α表达增加,抗氧化剂NAC和VC对砷诱导的HIF-1α表达具有显著的抑制作用。     

羊水过少产妇胎盘胎膜组织中Caspase7、Cx43蛋白和mRNA的表达特点

目的分析羊水过少产妇胎盘、胎膜组织中Caspase7、Cx43蛋白和mRNA的表达特点,揭示羊水过少的发生机制,为中晚期羊水过少产妇的治疗提供理论依据。方法选取2016年1月-2017年1月在该院产科分娩的足月产妇120例为研究对象,其中羊水过少产妇49例(过少组),羊水正常产妇71例(正常组)。采用免疫组化染色法和RT-PCR法检测两组产妇胎盘、胎膜组织中Caspase7、Cx43蛋白及mRNA表达水平,并探讨其临床意义。结果过少组胎膜及胎盘组织中的Cx43蛋白阳性表达率分别为10.20%、12.24%,显著低于正常组的26.76%、30.99%,差异具有统计学意义(均P<0.05);过少组胎膜及胎盘组织中的Cx43 mRNA表达水平显著低于正常组(t=10.103、9.478,均P<0.05),过少组胎膜及胎盘组织中的Caspase7 mRNA表达水平显著高于正常组(t=12.378、10.736,均P<0.05);过少组胎膜及胎盘组织中的Caspase7蛋白阳性表达率分别为53.06%、57.14%,均显著高于正常组的23.94%、25.35%,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论羊水过少产妇胎盘、胎膜组织中Caspase7蛋白及mRNA高表达、Cx43蛋白及mRNA低表达,相关指标的表达差异可能与羊水过少的发生具有一定的相关性。     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。     

上海市某医院骨科平均住院日影响因素分析

对上海市某医院2003年-2007年骨科出院病人的住院日描述性分析．2003年-2007年骨科的床位利用指数与平均住院日相关性分析．2003年-2007年骨科床位与医护比例分析．2007年骨科前10大病种平均住院目影响因素分别进行单因素相关性分析和多因素逐步回归分析（STATA软件）。通过对骨科10大病种住院日影响因素分析,术前等待天数、手术类型、是否输血分别对10个、9个和8个病种的住院目有影响。输血因素和手术类型是医院不可控、由病人的病情决定的,术前等待天数是管理因素,是最值得医院重视的影响因素。