乙肝表面抗原阳性反应血清的乙肝病毒核酸检测分析

[目的]探讨HBsAg血清学阳性反应标本的HBV核酸检测状况. [方法]留取血站6个月志愿者标本6 000例,酶联免疫检测(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)HBsAg阳性标本70例,将阳性标本分组:国产进口两种酶免试剂检测同时强阳性反应标本30例(S/CO≥5);国产进口两种酶免试剂检测同时弱阳性反应标本22例(S/CO<5);单一进口酶免试剂检测阳性反应标本17例;单一国产酶免试剂检测阳性反应标本1例.采用核酸检测技术(Nucleic Acid Test,NAT)对70例酶联免疫检测阳性反应标本进行HBV核酸检测. [结果]两种酶免试剂检测同时强阳性标本(S/CO≥5)组NAT检测结果30例均为阳性;两种酶免试剂检测同时弱阳性标本(S/CO<5)组NAT检测结果20例阳性,2例阴性;单一进口试剂检测阳性标本NAT检测结果10例阳性,7例阴性;单一国产试剂检测阳性标本,1例NAT检测结果为阴性. [结论]HBsAg阳性反应血清的HBV核酸检出率与S/CO值的高低和两种酶联免疫试剂检测结果符合度有一定关联,核酸扩增技术对现行血筛试剂有一定补充作用.     

核酸检测与酶免检测在宁夏地区无偿献血者血液筛查中的应用

目的:对ELISA和NAT检测结果进行分析,找出两种检测方法在血液筛查中的优势、劣势。方法:收集宁夏地区2016年1月到2016年12月无偿献血者标本,进行ELISA和NAT检测,并对检测数据进行比对分析。结果:两种检测方法比对中共检测标本60958份,酶免检测总阳性数为477份,阳性率为0.78%,NAT检测阳性数154份,阳性率为0.25%。ELISA双试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为65.14%,单试剂阳性标本与核酸检测结果的符合率为2.17%,灰区阳性标本与核酸检测结果符合率为0。ELISA检测阴性标本NAT检测阳性数为57例,全为HBV DNA阳性,经电化学发光检测乙肝两对半结果为50例是隐匿性乙肝感染,7例检测结果为阴性。结论:NAT检测假阳性率较ELISA低,ELISA方法漏检主要为隐匿性乙肝感染的漏检。NAT检测方法在献血者血液筛查中优于ELISA检测方法。     

核酸检测技术在血液检测中的应用

目的探讨核酸检测技术应用于血液检测的价值。方法抽取2019年1月至3月5000份献血者血液标本展开研究,先进行受ELISA检测,对于两种试剂均无反应或是对1种试剂有反应的样本进行核酸检测。分析检测结果。结果 ELISA检测结果显示5000份血液样本中有4992份样本经过HBsAg、抗-HIV-1/2均无反应或是只对1种试剂有反应;4992份样本接受核酸检测,52份样本的检测结果呈现为阳性结果,阳性检出率为1.12%(56/4992)。阳性结果使用HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA进行分项定量确证,结果 56份样本中有48份结果为HBV DNA阳性,阳性率为85.71%(48/56),其余8例样本未检出HCV RNA、HIV RNA的阳性。结论血液检测中应用核酸检测技术能够在很大程度上弥补ELISA检测的不足,更早的发现HBV、HCV、HIV病毒,对相应疾病的早期诊断和早期治疗有重要意义,也对输血安全有重要意义。     

献血人群HIV血清学筛查联合核酸检测的应用评价

目的 通过ELISA、核酸检测技术联合检测献血人群HIV感染标志物,为检测策略的制定提供参考依据。方法 选取温州地区无偿献血者血液标本363 156份,进行2遍ELISA+1遍核酸检测(NAT)的筛查模式进行HIV感染标志物检测,反应性标本送温州市疾病预防控制中心进行确证试验,并对HIV检测模式进行分组,A组ELISA单试剂(3代)+NAT、B组ELISA单试剂(4代)+NAT、C组ELISA双试剂+NAT,比较分析各组间筛查反应性率、确证阳性符合率、灵敏度、特异性等指标。结果 检测363 156份献血者血液标本,共筛查出反应性样本348份,确证阳性样本45份,3种检测模式均能将45份确证阳性样本正确检出,但不同组合筛查反应性率、确证阳性符合率差异显著。结论 不同组合模式均有很高的检测灵敏度,引入NAT检测后可减掉1遍ELISA检测,不影响灵敏度的同时提高特异性,可降低假阳性血液报废,更好地促进资源的合理利用。     

无偿献血者血液病原体ELISA与核酸检测结果分析

目的分析酶联免疫吸附试验(ELISA)和核酸检测(NAT)筛查血液HBV/HCV/HIV感染的结果。方法对绍兴市2015年1月—2016年2月采集的52 339份无偿献血者血液标本进行谷丙转氨酶(ALT)检测,并采用2家不同公司生产的ELISA试剂(A/B)进行HBs Ag、梅毒、HCV抗体、HIV抗体检测,排除ALT和梅毒阳性标本后进行HBV/HCV/HIV核酸检测。结果共有52 228份标本用ELISA和NAT作平行检测。以NAT检测结果为金标准,HBV检测阳性169份,阳性率3.24‰;A试剂灵敏度为55.62%,特异度为99.95%;B试剂灵敏度为59.76%,特异度为99.97%。HCV检测阳性11份,阳性率0.21‰;A试剂灵敏度为100.00%,特异度为99.83%;B试剂灵敏度为100.00%,特异度为99.93%。HIV检测阳性5份,阳性率0.10‰;A试剂灵敏度为80.00%,特异度为99.98%;B试剂灵敏度为80.00%,特异度为99.95%;A、B试剂均有1例窗口期漏诊。结论 ELISA联合NAT检测可进一步提高血液病毒检测结果的准确性。     

HBV、HCV、HIV核酸检测试剂在洛阳地区血液筛查中的应用与分析

目的评估国产核酸检测试剂应用于献血者血液筛查的可行性,以及酶免疫分析(enzyme immunoassay,EIA)检测合格血液的输血残余风险。方法采用苏州华益美生物科技有限公司乙型肝炎(乙肝)病毒(hepatitis B virus,HBV)、丙型肝炎(丙肝)病毒(hepatitis C virus,HCV)、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)核酸检测试剂盒及PCR-荧光法,对洛阳市血站经EIA筛查合格的40 195份献血者标本进行核酸筛查。阳性标本经拆分后使用Gen Probe公司试剂进行确认,并采用化学发光法免疫试剂对HBV-DNA阳性样本进行乙肝五项免疫指标检测。结果在40 195份EIA检测合格的献血者标本中,发现25份HBV-DNA阳性(阳性检出率0.622‰),1份HCV-RNA阳性(阳性检出率0.025‰),未发现HIV-RNA阳性。在20份HBV-DNA阳性标本中,发现3份(15.0%)乙肝免疫学指标五项全阴的"窗口期"标本以及17份(85.0%)HBs Ag阴性而HBc Ab阳性的疑似HBV隐匿性感染标本。结论现行血清学EIA筛查方法对于HBV、HCV仍具有一定的输血残余风险,尤其是来自隐匿性HBV感染。在EIA检测后增加核酸检测(nucleic acid testing,NAT)筛查,有助于提高临床用血安全。同时说明国产核酸检测试剂具备较高的敏感性和特异性,试验过程机器运行状态良好,检测数据准确、可靠。     

山东省济南市无偿献血人群HIV筛查策略分析

目的 回顾性分析2016-2021年山东省济南市无偿献血人群血液标本的人类免疫缺陷病毒(HIV)检测结果和追踪数据,为优化HIV血液筛查策略提供数据支持。方法 收集2016-2021年山东省济南市653 135例无偿献血者血液标本,山东省血液中心对所有标本分别进行2遍酶联免疫吸附试验(ELISA)和1遍核酸检测(NAT)试验,所有实验严格按照实验说明书进行阴性或者反应性结果判断,实验结果按照一检ELISA加NAT、二检ELISA加NAT和两遍ELISA加NAT三种检测策略进行统计分析。反应性标本送济南市疾病预防控制中心(CDC)进行免疫印迹(WB)确证试验。结果 653 135例无偿献血者血液标本送检济南市CDC初筛反应性样本642例,经确证追踪共77例为HIV反应性标本,三种检测策略均能将所有反应性标本检出;不同ELISA试剂之间酶免确证反应性符合率比较,珠海丽珠的酶免确证反应符合率最高(39.78%),高于其他试剂,其差异有统计学意义(P<0.05);WB确证阳性的标本,其初筛结果均为双ELISA试剂反应性;同时,WB确证阳性标本的S/CO值普遍偏高,无S/CO值<5者...     

2种策略鉴定ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite血液核酸检测不确定标本的功效分析

目的比较2种策略鉴定ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定献血者标本的效果。方法首先采用Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合试剂和2种不同厂家的ELISA试剂对献血者血液标本进行HBV、HCV及HIV-1/2感染性标志物筛查。ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite血液核酸检测不确定献血者标本再分别进行一次TaqScreen MPX v2.0单人份标本HBV/HCV/HIV核酸联合检测(策略1)、2次Procleix Ultrio Elite HBV/HCV/HIV分项鉴别实验(策略2)。随后对其中的30份血液核酸检测不确定标本进行追踪分析。结果在检测的81 874份献血者标本中,181份为HBsAg、抗HCV、抗HIV的ELISA检测无反应性而经Procleix Ultrio Elite试剂血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定标本(0.22%)。在这些不确定标本中,策略1和策略2试验分别检测出核酸反应性标本33份和38份,均为HBV DNA阳性,两者的检出率差异无统计学意义(P0.05)。追踪结果显示,30份血液核酸检测不确定标本在3个月～6个月内均未出现HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA反应性结果。结论 ELISA无反应性Procleix Ultrio Elite单人份血液HBV/HCV/HIV核酸联合检测不确定标本中存在着一定数量的血液HBV DNA反应性标本,多种厂家试剂联合检测可提升检出效率。     

2016—2019年常州地区无偿献血者酶免和核酸平行检测结果分析

目的分析ELISA和NAT平行的血液筛查模式对降低经输血感染病原体风险的有效性。方法收集常州市2016—2019年270215例无偿献血者血液标本,采用两次ELISA并行检测HBsAg、抗HCV、抗HIV和抗TP。268264例ELISA双阴性标本采用6人份混样(pool)NAT进行HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA的检测,核酸阳性的pool进行拆分单检。结果270215例无偿献血者HBsAg、抗HCV、抗HIV和抗TP的阳性率分别为2.58‰(697例)、1.49‰(402例)、0.23‰(61例)和3.06‰(827例)。268264例酶免阴性无偿献血者HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA阳性率分别为0.86‰(230例)、0.01‰(3例)和0.01‰(2例)。结论ELISA与NAT两种检测方法能相互补充,极大降低了输血感染病原体的残余风险,保障输血安全。NAT能进一步缩短血液传染性病毒的检测“窗口期”,检出隐匿性病毒。     

云浮地区无偿献血者酶联免疫及核酸检测情况分析

目的探讨现有HBV、抗-HCV、抗-HIV检测方法对云浮地区献血者病毒感染情况的有效性。方法 2016年1-11月共22 175例无偿献血者标本,用2种不同厂家的试剂进行酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选出HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP阳性及谷丙转氨酶(ALT)不合格献血者标本,再剩余标本进行核酸联合检测HBV-DNA、HCV-RNA、HIV1-RNA,并对有反应性标本进行拆分试验。结果两种厂家ELISA试剂检测出HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP阳性分别为187、98、7、48例,分别占总献血人数的0.84%、0.44%、0.03%、0.21%;4个项目均有单种厂家ELISA试剂阳性,分别为HBsAg 20例、抗-HCV 13例、抗-HIV 3例、TP 11例,分别占总献血人数的0.09%、0.05%、0.01%、0.05%,ALT不合格296例,占总献血人数的1.33%;用核酸检测法检测21 542例献血者标本,HCV1-RNA、HIV-RNA均暂未发现拆分阳性标本。结论核酸检测能提高HBV、HCV、HIV病毒的检出率,缩短"窗口期";ELISA和核酸联合应用结果互补对于避免输血传播疾病和保障临床血液安全有很大的促进作用。     

核酸扩增与酶联免疫法联合在血液筛查中的初步应用

目的:在酶联免疫法(enzyme immunoassay,EIA)检测的基础上,探讨HBV核酸扩增检测(nucleicacid amplification testing NAT)技术应用于血液筛查的意义。方法:分别使用两种模式(单检或混检)NAT与EIA两遍检测方式同时进行血液筛查,对NAT阳性标本作进一步做鉴别试验和病毒血清标志物。结果:20925份EIA(-)标本共发现28份核酸三项(HBV DNA、HCV RNA、HIV RNA)呈反应性,均为HBV-DNA,即EIA两遍检测合格后的HBV-DNA阳性率0.13%,检测其中11份血清,乙肝标志物均呈阳性。结论:EIA阴性献血者中仍有极少数的HBV感染者,核酸扩增检测和酶联免疫检测互补能够检测出EIA漏检的HBV携带者,对提高HBsAg阴性血液标本中HBV感染检出率具有重要价值。     

临沂市无偿献血者HIV筛查和确证结果分析

目的对临沂市无偿献血者中人类免疫缺陷病毒(HIV)筛查和确证结果进行分析,了解无偿献血者HIV流行情况,制定合适血液筛查策略,降低输血风险。方法临沂市中心血站采用1种国产三代和1种国产四代ELISA试剂,以及核酸检测(NAT)试剂进行HIV筛查,筛查反应性标本送临沂市疾病预防控制中心实验室进行确证。结果 2015年1月-2017年12月共263 898例无偿献血者进行HIV筛查,225份样本筛查呈反应性并送疾病预防控制中心进行确证实验,其中,确证阳性27份;不确定10份。确证阳性中男性26例,女性1例;40岁的有19例,占70. 37%;已婚的19例,占70. 37%;男男同性恋者16例,占59. 25%;首次献血有17例,占62. 96%。核酸检测筛查了223 444份标本,ELISA(-)/NAT(+) 2例,跟踪确证为阳性。结论临沂市无偿献血者中HIV感染者较高,主要集中在40岁以下,多为首次献血者,传播方式为性传播,以男男性行为为主,要做好献血前咨询工作;核酸检测缩短了HIV血清学检测窗口期,对降低输血传播疾病风险起到一定作用。     

核酸检测技术应用于血站献血者血液筛查中的价值

目的:分析在血站献血者血液筛查中应用核酸检测技术(NAT)的价值。方法:选取我血站2016年1月-2017年5月合格献血者血液标本共38658人份,实施核酸3项联合检测,分项确证NAT检测反应性标本。结果:38658人份血液标本实施NAT检测,阳性检出率为0.12%;HIVRNA分项确证检测阳性率为0%,HCVRNA分项确证检测阳性率为0%,HBVDNA分项确证检测阳性率为65.21%。结论:NAT能在ELISA检测阴性的献血者血液标本中筛查到HIV RNA-1,-2、HCV RNA和HBV DNA反应性标本,有助于提升血站献血质量及安全性。     

济南市无偿献血者HBV感染情况分析

目的分析济南市无偿献血者HBV感染情况,为隐匿性乙型肝炎(乙肝)的检测提供依据。方法选择2010年6月—2012年12月采集的无偿献血者血液标本207 705份,均经酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)筛查,经筛查后HBsAg、抗-HCV和抗-HIV-1/2无反应性及仅1种试剂为反应性的标本共203 606份,进行核酸扩增技术(nucleic acid amplification techniques,NAT)检测。结果 ELISA检测HBsAg阳性1 059份,阳性率0.510%;NAT检测NAT阳性130份,阳性率0.064%。检出HBV DNA阳性标本74份,阳性率64.910%。结论 HBV感染仍是导致血液淘汰的重要原因之一,通过NAT检测,可以极大地增加隐匿性乙肝的检出率,降低血液残余风险。要加强采血前征询及HBsAg快检工作,提高实验室检测水平,确保血液安全。     

超敏HBsAg ELISA检测试剂在常规检测合格的献血者中应用的意义

目的:探讨在无偿献血HBsAg筛查中使用超敏HBsAg ELISA的意义。方法:使用一种进口超敏HBsAg试剂和两种国产HBsAg试剂对8692例无偿献血标本进行平行检测,并使用不同区域的三套巢式PCR和检测乙肝三系其他指标对HBsAg结果进行验证。结果:8692例标本中共检测出HBsAg阳性48例,其中HepanostikaHBsAg ELISA试剂32例,英科新创HBsAg ELISA试剂22例,科华HBsAg ELISA试剂14例,对8692例标本进行HBV-DNA测定,有40例获得a表位基因,其中13例为三种HBsAg ELISA试剂检测均阳性8,例为三种HBsAg ELISA试剂检测均阴性8,例为Hepanos-tikaHBsAg ELISA试剂检测阳性。结论:HBsAg超敏试剂的应用能够有效降低HBV输血风险,但也存在一定漏检风险,现有的检测策略需要提高目前使用的ELISA试剂的检测能力,并通过核酸检测技术的推广应用,探索建立酶免技术与核酸诊断相结合的新的血液检测模式,切实提高血液安全。     

南阳献血标本ELISA和NAT筛查及HBV阳性献血者跟踪调查

目的了解南阳地区献血者血液标本血清学及核酸筛查情况,并对部分NAT检测阳性献血者进行追踪检测,为提高血液质量及确保输血安全提供依据。方法选取南阳市中心血站2016年1月~2017年2月采集的无偿献血者血液标本68 450例,分别应用两种不同厂家ELISA试剂进行HBs Ag、抗-HCV、抗-TP、抗-HIV和ALT血清学检测,上述项目合格标本进行NAT检测,并对NAT检测阳性献血者跟踪调查。结果 68 450例献血者中血清学检测共1 417项不合格,其中25例存在两项指标重叠感染;1 392例(2.03%)血清学检测不合格,67 058例献血者血清学检测结果合格;血清学检测合格的67 058例献血者,HBV-DNA阳性55例(0.08%),未检出HCV-RNA和HIV-RNA阳性献血者;成功追踪随访36例献血者中,窗口期感染2例,隐匿性HBV感染34例。结论 ELISA筛查献血者血液标本存在一定的漏检现象,NAT检测可有效降低经输血传播感染性疾病的风险,追踪结果显示隐匿性感染是本地区HBV-DNA阳性献血者的主要感染形式,为输血传播感染性疾病的主要原因。     

淮安市无偿献血者隐匿性乙型肝炎病毒感染情况

目的了解无偿献血者隐匿性乙肝病毒感染情况,评估输血传播乙肝病毒感染风险。方法对淮安市中心血站2016—2017年无偿献血者血液标本,采用两种ELISA试剂和NAT联合筛查,并对结果进行分析。结果 109 373名无偿献血者中,检出HBsAg阳性492例,阳性率为0.45%。ELISA阴性的血液标本中共检测出40例NAT阳性,经拆分,全部为HBV DNA阳性;经随访,未发现HBsAg阳转者,全部为隐匿性感染,感染率为0.037%。结论淮安地区献血者HBV感染呈低流行状态,输血传播乙肝病毒感染风险小。     

实时荧光PCR检测HBsAg阴性、抗HBc阳性献血者血液中HBV DNA研究

目的对乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阴性、乙型肝炎核心抗体（抗HBc）阳性的献血者血液进行经输血传播乙型肝炎病毒（HBV）的风险评估,为完善HBV血液筛查模式及确保临床用血安全提供依据。方法对献血者血液常规检测阴性的标本进行8×45 μL汇集,应用实时荧光聚合酶链反应(PCR)进行混样核酸检测HBV DNA。对血液常规筛查和混样核酸检测合格的标本,进行随机乙型肝炎血清学5项标志物的酶联免疫吸附试验(ELISA)。对获得的HBsAg阴性、混样HBV DNA阴性、抗HBc阳性的标本,进一步采用单份样本（720 μL）实时荧光PCR法检测并定量分析。结果混样标本共检测12 552份,检出HBsAg阴性、HBV DNA阳性标本2份,阳性率为0.02%。随机筛查混样核酸检测阴性标本614份,检出抗HBc阳性标本320份,对此320份标本进行单份核酸检测,检出阳性标本1份,阳性率为0.31%。结论HBsAg阴性、抗HBc阳性献血者血液存在输血传播HBV的风险,应用核酸扩增技术检测血液HBV DNA能大大提高血液安全性。     

两种采血模式核酸检测结果分析

目的对全血和单采血小板捐献人群进行病毒核酸检测,探讨不同献血人群的相对安全性。方法采用Roche cobas s201血液筛查系统对2010年6月—2012年6月ELISA检测双试剂均无反应性及仅1种试剂有反应的全血标本和单采血小板标本进行HBV、HCV和HIV三项联合筛查,对两种人群的核酸检测阳性率进行比较分析,采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果共进行核酸检测标本163 621例,检出阳性标本110例,阳性检出率为0.067%。全血标本和单采血小板标本中阳性率分别为0.067%和0.065%,差异无统计学意义(χ2=0.015,P>0.05)。结论对全血和单采血小板捐献人群均应进行病毒核酸检测。     

探究血清学联合核酸检测在献血者血液检测中的互补性

目的:研究血清学联合核酸检测在献血者血液检测中的互补性。方法:选取2015年8月~2016年8月收治的100例无偿献血者的血液标本作为研究对象,对其TP、HIV、HCV、HBsAg采用ELISA法进行检测,对其ALT采用速率法进行检测,与此同时,要采用核酸检测技术对乙肝病毒HIV RNA、HCV RNA、DNA进行六人份三项目联合检测,分析其检测结果。结果:合格标本有80份,不合格标本20份。其中有1份标本为TP抗体不合格,1份为ALT不合格,所有标本中除去TP抗体、ALT不合格之外,其它标本中,有10例血清学检测有反应性,核酸检测无反应性,3例血清学为无反应性,核酸检测为有反应性,5例为血清学和核酸检测同时为有反应性。ELISA联合核酸检测单试剂阳性1例,双试剂阴性3例。结论:核酸检测能够将输血疾病传播率有效降低,但是也有可能漏检,不能够对血清血检测进行完全替代,为了将检测准确率提高,要联合应用以上两种方式。