HCV/HBV重叠感染重症肝炎患者的临床与病理

探讨HCV／HBV重叠感染重症肝炎的发病机制。用直接酶标法检测肝组织内HCVAg，用PAP法检测肝组织内HBsAg、HBcAg。在264例肝病肝组织中共检出15例HCVAg阳性患者(5．7％)，肝内HCVAg阳性细胞表现为脑浆型9例、核浆型2例、核型4型。脑浆型HCVAg阳性患者肝组织内还检出HBsAg阳性5例、HBcAg阳性3例，脑浆型HCVAg阳性肝细胞疏松水肿，并可见淋巴细胞围绕。HCV／HBV重叠感染重症肝炎组与单纯HBV阳性重症肝炎组相比较，前者肝损害程度严重，结果提示HCV与HBV二者有相互促进作用，从而加重肝脏的损害。     

乙型肝炎患者血清及肝组织中HBV DNA含量与肝脏炎症指标的相关性研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA与肝组织HBV DNA及其肝脏炎症指标的相关性.方法 随机选择慢性乙肝患者51例做血液HBV DNA检测,并行肝穿刺取肝组织,分别进行肝组织HBV DNA检测及组织学检测.结果 慢性乙型肝炎患者肝组织HBV DNA检出率明显高于血清内,肝组织内HBV DNA含量明显高于血液内.结论 乙型肝炎患者血清HBV DNA与肝脏炎症程度无显著性差异,无相关性,不能真实反映肝组织内HBV DNA感染及复制情况.肝组织内HBV DNA与肝脏炎症程度有显著性差异,呈反向相关.     

单项抗-HBs阳性肝炎的临床与病理分析

目的 分析单项抗-HBs阳性肝炎的临床与病理特征,提高对单项抗-HBs阳性肝炎的认识。方法 对72例单项抗-HBs阳性肝炎患者进行肝炎病毒血清学检测、肝功能检查、血清HBV DNA检测及肝穿刺活组织病理和免疫组化检查。结果 72例患者除去4例脂肪肝和3例Dubin-Johnson综合征外,另65例中89.2％为慢性肝炎(58/65),其中慢性肝炎轻度占慢性肝炎79.3％(46/58)。与病理诊断比较临床诊断的正确率为61.1％,在慢性肝炎轻度则较高为71.7％。临床表现和肝功能变化与肝组织炎症活动度密切相关。3.2％的患者示肝内HBsAg或/和HBcAg阳性,而血清HBV DNA检测7.9％阳性。结论 单项抗-HBs阳性肝炎多为慢性肝炎,临床表现轻,炎症活动度和纤维化程度较轻,但体内仍可有HBV复制,仍可发展为肝硬化。肝穿刺病理及免疫组化检测有助于明确诊断。     

肝组织HBV DNA定量检查的临床意义

目的 由于对HBV感染的研究不断深入,抗病毒治疗亟待寻找判定效果的可靠方法,HBV DNA检测,特别是血液和肝组织定量检测显得极其重要。方法 不加选择在HBV感染者作肝活检时留取小粒肝组织,同时采血作HBVDNA定量检查。结果 急慢性HBV感染病例均示肝组织内HBV DNA检查明显高于血内检出率,同时肝组织HBV含量明显高于血液内含量。结论 肝组织检测HBV DNA可以明显提高HBV感染诊断率,血内HBV DNA阴转时不能说明肝组织内亦已阴转,血内HBV DNA阴转不宜随即停止治疗。     

DNA缺口末端标记技术检测病毒性肝炎肝组织细胞凋亡

目的:探讨病毒性肝炎患者细胞凋亡情况及其临床意义。方法:应用DNA缺口末端标记技术检测了28例各型病毒性肝炎肝组织细胞凋亡密度和分布,以8例正常肝组织为对照。结果:DNA缺口末端标记技术能较好地检测肝细胞凋亡,阳性细胞多单个散在于肝小叶内,以门管区周围较多见。比较各型肝炎的凋亡细胞密度发现,重型肝炎的凋亡细胞密度高于慢性肝炎和肝硬变(P均<0.01);慢性肝灸和肝硬变的凋亡细胞密度高于急性肝炎(P<0.01)。结论:细胞凋亡可能与病毒性肝炎的慢性化有关;也可能是重型肝炎的发病机制之一。     

慢性肝病患者血清和肝组织乙,丙型肝炎标志物的检测及意义

目的:探讨血清免疫学标志物与血清、肝组织HBV DNA、HCV RNA的关系。方法:对病理诊断为慢性肝炎、肝炎后肝硬化的22例患者进行了血清免疫学标志物、斑点杂交HBV DNA的检测,并采用PCR技术对血清、肝组织的HBV DNA、HCV RNA分别进行了检测。结果:8例病理诊断为慢性肝炎的患者血清HBsAg、抗-HBc、HBeAg、抗-HBe、抗-HBs、抗-HCV阳性者分别为3例、4例、0例、1例、2例、0例,斑点杂交HBV DNA阳性1例,血清、肝组织PCR HBV DNA阳性分别为4例、6例,HCV RNA阳性分别为3例、4例,14例病理诊断为肝炎后肝硬化的患者血清HBsAg\抗-HBc、HBeAg、抗-HBe、抗-HBs、抗-HCV阳性数分别为14例、4例、2例、7例、0例、3例,斑点杂交 HBV DNA阳性7例,血清、肝组织PCR HBV DNA阳性分别为10例、10例,PCR HCV RNA阳性4例、4例。结论:对乙、丙肝免疫学标志物的分析应结合PCR检测结果;慢性肝病病理学改变与感染HBV和/或HCV有关,以HBV感染为多见,少数为HCV感染;血清和肝组织PCR HBV DNA、HCV RNA具有一致性,血清检测结果基本可反映肝内病毒复制状况。     

重型病毒性肝炎272例血清病原学特点与转归

目的:探讨重型病毒性肝炎病原学特点与预后。方法:收集各型重型病毒性肝炎272例,分析其病原学分型及HBV不同病原学模型与重型肝炎预后的关系。结果:272例重肝中HBV感染为主要原因,占92.6％,其次为HEV感染占9.7％,乙肝小三阳伴HBV DNA阳性组死亡、未愈率明显高于乙肝大三阳伴HBV DNA阳性组(P<0.001)。结论:HBV是重型肝炎的主要病原,肝细胞坏死的程度与HBV复制指标强弱无直接关系,但与HBV前C区发生基因突变有关。     

DNA缺口末端标记技术检测病生肝炎肝组织细胞凋亡

目的：探讨病毒性肝炎患者细胞凋亡情况及其临床意义。方法：应用ＤＮＡ缺口末端标记技术检测了２８例各型病毒性肝炎肝组织细胞凋亡密度和分布，以８例正常肝组织为对照。结果：ＤＮＡ缺口末端标记技术能较好地检测肝细胞凋亡，阳性细胞多单个散在于肝小叶内，以门管区周围较多见。比较各型肝炎的凋亡细胞密度发现，重型肝炎的凋亡细胞密度高于慢性肝炎和肝硬变（Ｐ均〈０．０１）；慢性肝炎和肝硬变的凋亡细胞密度高于急性肝炎（Ｐ     

肝组织HBVDNA定量检查的临床意义

由于对HBV感染的认识正在不断深入，抗病毒治疗急待寻找判定效果可靠的方法，HBVDNA检测，特别是血液和肝组织定量检测显得极春重要。不加选择对HBV感染作肝活检时留取小粒肝组织，同时采血作HBVDNA定量检查。急慢性HBV感染病例均示肝组织内HBVDNA检查明显高于血内检出率，同时肝组织HBV含量明显高于血液的含量。肝组织检测HBVDNA可以明显提高HBV感染诊断率，血内HBVDNA阴转时不能说明肝组织内亦已阴转，血内HBVDNA阴转不宜随即停止治疗。     

乙肝患者肝组织及外周血单个核细胞HBV DNA检测

用PCR方法对148例乙肝患者的肝组织及外周血单个核细胞HBV DNA进行检测，同时对肝组织进行病理组织学诊断。结果显示：148例乙肝患者的肝组织与PBMC内HBV DNA的检出率有一致性倾向，PBMC内HBV DNA的检出率与肝组织的损害程度呈正相关。     

慢性乙型肝炎患者血清、肝内HBV DNA定量及肝组织HBV DNA载量与肝组织损害程度的关系

目的 了解慢性乙型肝炎患者血清、肝内HBV DNA定量及肝组织HBV DNA载量与肝组织损害程度的关系.方法 经血清学及肝穿刺病理证实为慢性乙型肝炎患者38例,分为2组(HBeAg阳性组及HBeAg阴性组).采用ELISA法测定HBV-M、实时荧光定量检测血清及肝内HBV DNA定量、肝组织HBV DNA载量.结果 HBeAg阳性组血清、肝内HBV DNA定量及肝组织HBV DNA载量均高于HBeAg阴性组(P均<0.001);血清HBV DNA定量随肝脏纤维化程度加重而升高(P<0.01),但与肝脏炎症程度未见明显相关;肝组织HBV DNA载量则随肝脏炎症及纤维化程度加重而降低(P<0.001).结论 血清HBV DNA定量与肝组织纤维化程度呈正相关,肝组织HBV DNA载量则与肝组织的炎症及纤维化程度呈明显负相关.     

慢性乙型肝炎患者肝组织中HBV cccDNA定量与病情的相关性分析

目的探讨肝组织HBV cccDNA定量对慢性乙型肝炎（乙肝）患者病情的影响。方法应用FQ—PRC法检测42例乙肝患者肝组织HBVcecDNA、肝组织和血清HBV—DNA水平,同时对肝组织行常规病理染色判断肝组织炎症及纤维化程度;SP法检测肝组织中HBsAg、HBcAg表达,化学发光法检测HBV标志物。分析肝组织HBVceeDNA与组织和血清HBV-DNA、肝细胞内HBsAg、HBcAg水平及肝脏炎症、纤维化程度的关系。结果肝组织HBVeecDNA定量与组织及血清HBV—DNA定量呈正相关（r=0．807,P〈0．001;r=0．627,P〈0．001）;与肝组织炎症活动度及纤维化程度无明显相关性：肝组织HBVcccDNA定量与肝细胞内HBsAg表达无明显相关性,而与HB—cAg表达呈正相关（r=0．486,P〈0．05）。结论检测肝组织内HBVceeDNA可更精确反映HBV复制程度;对乙肝诊断、抗病毒治疗及选择停药时机具有重要价值。肝组织HBV cccDNA与血清HBV-DNA定量及HBcAg联合检测可指导抗病毒治疗。     

各型HBV感染者血清和肝细胞β2微球蛋白的意义

目的动态观察各型HBV感染者血清β2微球蛋白（β2MG）水平及肝内表达，研究其临床意义方法HBV感染者128例中，无症状携带着（ASC）12例，急性肝炎（AH）26例，慢性肝炎（CH）56例，重型肝炎（SH）18例，肝硬变（LC）和原发性肝癌（HCC）各8例。设正常对照30例，用RIA和免疫级化法分别测定血清和肝内β2MG，与肝损害程度比较，分析临床意义结果除ASC外，各型乙肝和LC，HCC血清β2MG均有升高，其中，以SH，LC，CH和HCC为著；AH，SH肝细胞β2MG表达明显增强（正常肝细胞不表达），且其分布与肝组织炎症坏死区一致．血清β2MG水平和肝内表达强度与血清胆红素水平呈正相关．动态观察发现，AH于恢复期血清β2MG降至接近正常，SH死亡组β2MG水平明显高于存活组.结论β2MG参与HBV感染发病机制中肝组织免疫病理损害过程，动态观察血清β2MG水平可在一定程度上反映AH和SH的预后和转归。     

慢性活动型肝炎患者肝组织内HBAg与血清HBV标志的关系

近年来对HBAg在肝组织内的分布研究较多,并认为其在肝细胞的定位与肝病活动及病毒复制有关,为研究肝组织内HBAg与血清HBV标志的关系,我们采用ABC法检测了50例CAH患者肝组织内的HBsAg和HBcAg,现将结果报告如下。材料与方法一、观察对象:50例CAH患者,男44例,女6例,年龄13～45岁。病理诊断按1984年南宁会议修订的“病毒性肝炎防治方     

慢性HBV感染者肝脏HBV cccDNA含量相关因素分析

目的探讨慢性HBV感染者肝组织中HBV cccDNA含量与血清病毒标志物、HBV DNA及肝脏病理分级的关系,为临床评价抗病毒治疗效果及疗程确定提供理论依据。方法以2007年5月-2008年2月住院的30例慢性HBV感染者为研究对象,应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测患者肝组织中HBV cccDNA、肝组织总HBV DNA（HBV tDNA）和血清HBVDNA,同时用化学发光免疫分析法检测HBsAg、HBeAg定量,分析感染者肝组织内HBV cccDNA与肝组织内HBV DNA、血清HBVDNA、HBsAg及HBeAg定量水平之间的关系,并比较肝组织中HBV cccDNA含量与肝脏病理炎症和纤维化分级的关系。采用Pear-son简单相关和Spearman等级相关法进行相关性分析。结果 30例慢性HBV感染者肝组织中均可检出HBV cccDNA,范围在3.15×103～1.06×107拷贝/mg;肝组织cccDNA定量与肝组织总HBV DNA定量呈正相关（r=0.375,P〈0.05）,与血清HBV DNA无相关性（r=0.174,P〉0.05）;肝组织中HBV cccDNA水平与血清HBsAg定量呈高度正相关（r=0.562,P〈0.001）,而与血清HBeAg定量无相关性（r=0.152,P〉0.05）。肝组织cccDNA定量与肝组织炎症活动度（G）及纤维化程度（S）无相关性（r=0.082,P〉0.05）。结论慢性HBV感染者肝组织内HBV cccDNA成稳定的中等水平复制;血清HBV DNA载量不能直接代表其肝组织中的HBV cccDNA水平;血清HBsAg定量可作为反映肝组织中HBV cccDNA水平的指标。     

肝病患者肝组织内CMV感染的初步研究

本文应用免疫组织化学方法检测140例急、慢性肝炎患者肝组织内CMV抗原,发现15例阳性(10.7%),有9例同时存在HBV感染,其中3例为三重感染。15例CMV抗原阳性肝炎中,11例为慢性肝炎。以同法检测20例肝细胞性肝癌患者肝组织中CMV抗原,发现1例阳性。结果提示CMV感染为病毒性肝炎的病因之一;CMV肝炎与其他病毒性肝炎及慢性肝脏疾病可同时存在;CMV肝炎可能存在慢性化倾向。     

慢性乙型肝炎患者肝组织HBV cccDNA、总HBV DNA与血清HBV DNA的相关性及其与临床的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者肝组织HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）、肝组织总HBV DNA（HBV tDNA）与血清HBV DNA之间的相关性及其与临床的关系。方法 78例慢性乙型肝炎患者入选本研究。肝组织β- globinDNA、HBV cccDNA和HBV tDNA采用实时荧光定量PCR方法检测,平均每个肝细胞HBV cccDNA和HBV tDNA含量（拷贝/cell）=HBV cccDNA（实测值）/β-globin DNA（实测值）和HBV tDNA（实测值）/β3-globin DNA（实测值）,肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA含量的计算单位定义为log₁₀拷贝/10⁶cell;采用实时荧光定量PCR、ELISA法检测血清HBVDNA和HBV标志物;采用免疫组织化学方法检测肝细胞中HBsAg和HBcAg的表达。统计分析采用pearson相关分析及t检验。结果 （1）肝组织HBV cccDNA与HBV tDNA定量呈正相关（r=0.696,P<0.001）;肝组织HBV cccDNA与血清HBV DNA定量呈正相关（r=0.304,P<0.01）;肝组织HBV tDNA与血清HBV DNA定量呈正相关（r=0.341,P<0.01）;（2）肝细胞内HBcAg定性检测阳性患者的血清HBV DNA定量明显高于阴性患者,且差异有统计学意义（P<0.05）;肝细胞内HBcAg定性检测阳性患者与阴性患者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量差异均无统计学意义和（P均>0.05）;（3）肝细胞内HBsAg定性检测阳性患者的血清HBV DNA定量明显高于阴性患者,且差异有统计学意义（P<0.05）;肝细胞内HBsAg定性检测阳性患者与阴性患者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量差异均无统计学意义（P>0.05）;（4）HBeAg（+）/抗-HBe（-）患者血清HBV DNA定量明显高于HBeAg（-）/抗-HBe（+）患者,且差异有统计学意义（P<0.05）;HBeAg（+）/抗-HBe（-）患者肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量与HBeAg（-）/抗-HBe（+）患者比较差异均无统计学意义（均P>0.05）;（5）肝组织HBV cccDNA、HBV tDNA以及血清HBV DNA三者与肝脏炎症活动度及纤维化程度均无显著相关性（P>0.05）。结论 （1）血清HBV DNA定量结果并不一定能完全反映患者肝组织中HBV cccDNA和HBV tDNA含量,尤其在血清HBV DNA<500拷贝/mL时,肝组织中仍存在HBV cccDNA和HBV tDNA,且含量大小不等。（2）肝细胞内HBcAg定性检测阳性或者HBsAg定性检测阳性患者的血清HBV DNA定量均明显高于阴性患者;而两者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量均没有显著差异;（3）HBeAg（+）/抗-HBe（-）患者血清HBV DNA定量明显高于HBeAg（-）/抗-HBe（+）患者,而两者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA均没有显著差异;（4）肝组织HBV cccDNA、HBV tDNA及血清HBV DNA与肝脏炎症活动度和纤维化程度均无显著相关性。     

乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA与松弛环状DNA对核苷(酸)类药物耐药变异的比较

目的 了解肝细胞内HBV共价闭合环状DNA( HBV cccDNA)核苷(酸)类药物耐药变异的情况,并比较其与松弛环状DNA(rcDNA)耐药变异的异同.方法 取40例慢性HBV感染肝移植患者的部分肝组织,采用十二烷基硫酸钠-蛋白质沉淀法结合DNA提取试剂盒分离提取肝内的HBV cccDNA和rcDNA.将抽提产物用不降解质粒的ATP依赖DNA酶酶切纯化后,用跨HBV基因组双链缺口并涵盖常见核苷类耐药位点(rt169～rt250)的引物行单轮PCR或套式PCR选择性扩增cccDNA.另用不跨双缺口的引物PCR扩增肝组织内的HBV rcDNA和患者肝移植术前的血清HBV rcDNA.用直接测序法对上述扩增产物进行基因测序并分析核苷(酸)类药物耐药位点的检出情况.结果 40例患者中,31例肝组织内检测到HBV cccDNA,35例肝组织检测到HBV rcDNA,21例肝移植术前血清中检测到HBV rcDNA.测序结果显示,2例肝组织内cccDNA、rcDNA和血清rcDNA均检测到rtM204Ⅰ变异;有2例患者肝内cccDNA、rcDNA分别存在rtM204Ⅰ、rtQ215H变异,而血清rcDNA未检测到相应变异;3例血清中分别存在rtM204V、rtM204V、rtV173L+ rtL180M+rtM204V变异,而肝内cccDNA和rcDNA未检测到相应变异.结论 慢性HBV感染者肝细胞内cccDNA可出现核苷(酸)类药物耐药变异,且肝组织内的cccDNA、rcDNA耐药变异株与血清中的rcDNA耐药变异株不完全一致.     

乙肝e系统阳性慢性肝炎54例HBV-DNA与临床关系

血清和肝组织中HBV—DNA的检测,对HBV感染的临床研究具有重要价值。我们从1983年9月开始,对乙肝患者血清和肝组织中HBV-DNA存在状态与临床关系进行观察,本文就其中HBe系统阳性的慢肝患者54例进行分析。材料与方法一、对象:54例患者系1983年9月～1985年8月在我院诊治,并经肝穿活检病理学诊断者。年龄自13～60岁,平均31.4岁。其中慢性迁延型肝炎11例,慢性活动型肝炎36例,慢性活动型肝炎伴肝硬化7例。另有非乙型肝炎和药物性肝炎患者10例作为对照。     

病毒性肝炎患者中感染丙型肝炎病毒分析

在377例病毒性肝炎患者中感染HCV42例(11.14％),其中输血后肝炎感染率最高,可达80％。HCV能与其他肝炎病毒存在双重感染,其中与HBV为多见。在各型肝炎中又以慢活肝和肝硬化感染率最高。提示乙肝向慢性化或肝细胞癌变演化过程中,与感染HCV有关。