肠道病毒71型研究进展

肠道病毒71型是手足口病的主要病原体,在世界范围内广泛流行。本文综述了近年来肠道病毒71型感染的病原学、流行病学、致病机制、预防与治疗等方面的研究进展。     

肠道病毒71型研究进展

肠道病毒71型是引起手足口病的主要病原体,感染常导致严重的神经系统症状。最近20年,EV71在亚太地区持续流行并不断引起暴发。由于病毒感染对儿童健康造成的严重危害,EV71已在亚太地区乃至全球引起广泛关注。对病毒以及病毒相关疾病的了解有助于抗病毒药物和疫苗的开发,从而达到预防和控制的目的。本文总结了近年来在EV71流行病学、病毒受体、抗病毒药物和疫苗开发等方面的最新研究进展。     

肠道病毒71型及其相关疾病研究进展

肠道病毒71(EV71)是一种新型肠道病毒.1969年在美国加利福尼亚州患有脑炎的婴儿粪便中首次分离到EV71.EV71感染临床上表现除了无菌性脑膜炎、急性小脑共济失调和急性松弛性瘫痪(AFP)外,还出现了大量手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)[1].     

肠道病毒71型3D蛋白研究进展

目的EV71感染可引起婴幼儿手足口病,甚至导致死亡。近年来由EV71引发的手足口病一直呈上升的流行趋势。目前中国对于手足口病的疫苗研究已进入临床试验阶段,但EV71引起的重症手足口病的发病机制仍不明确。3D蛋白主要负责病毒的复制过程,是抗病毒药物的靶点之一。本文就EV71的3D蛋白的结构功能及针对其作为靶点的抗病毒药物作一综述。     

肠道病毒71型VP1蛋白研究进展

肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)为手足口病的主要病原体。目前,手足口病的发病机制并不完全清楚,临床上缺乏有效的疫苗及特异性治疗药物。作为EV71主要衣壳蛋白,VP1在EV71的吸附和穿入过程中起着重要作用。另一方面,VP1上存在特异性中和性抗原表位,在EV71疫苗研究中占有重要地位。本文主要概括EV71 VP1结构、功能及与之相关疫苗的研究进展。     

肠道病毒71型感染与肺水肿

肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)是小RNA病毒科(Picornaviridae)肠道病毒属成员,是手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)的病原体之一.通常,EV71感染只会引起轻度的手足口疱疹病变及疱疹性咽峡炎(herpangina),且多在一周内自然恢复,但在极少数情况下,能引起严重并发症,包括脑炎(encephalitis)、无菌性脑膜炎(aseptic meningitis)、肺水肿或肺出血(pulmonaryedema or hemorrhage)、急性软瘫(acute flaccid paralysis)、心肌炎(myocarditis)等,其中如果发生肺水肿则病死率极高[1,2].现就EV71感染引起的肺水肿做一综述.     

肠道病毒71型(EV71)感染性克隆的构建

目的构建肠道病毒71(enterovrius 71,EV71)的感染性克隆,为研究EV71毒力基因及新型疫苗设计等建立一个技术平台。方法用RT-PCR方法扩增出EV71FJ08149株全基因组,通过TA克隆组装进TOPO-XL-PCR载体中,获得全长cDNA克隆pFJ08149T5和pFJ08149T25。应用T7聚合酶系统在体外将线性化后全长cDNA克隆转录出RNA并转染RD细胞。通过间接免疫荧光试验、RT-PCR、序列测定及免疫电镜等对拯救病毒进行鉴定。结果 RNA转染后72h观察到典型的肠道病毒致细胞病变,拯救病毒经RT-PCR、间接免疫荧光和免疫电镜检测鉴定为EV71型,表明已成功构建了EV71感染性克隆。结论本研究成功构建出具有感染性的EV71全长cDNA克隆,为深入研究EV71的致病机制等提供了有利的工具。     

深圳市龙岗区肠道病毒71型抗体水平调查

目的了解深圳市龙岗区儿童肠道病毒71型(EV71)抗体水平及自然感染状况,为预防控制儿童手足口病传播与流行提供依据。方法 2012年6月采集528名0～5岁儿童血清标本,采用酶联免疫法检测血清中的EV71IgG。结果 2008～2011年深圳市龙岗区共报告手足口病28 847例,年龄11d～50岁,5岁以下幼儿占总病例数的89.40%(25789/例)。528名儿童中EV71IgG抗体阳性241例,阳性率为45.64%;<1岁龄的婴儿IgG抗体阳性率最低;男童IgG抗体阳性率为46.18%,女童为44.93%,差异无统计学意义(χ2=0.37,P>0.05)。结论 5岁以下幼儿特别<1岁龄的婴儿是应手足口病防控的重点人群。     

河南省肠道病毒71型(EV71)血清流行病学调查

目的通过检测河南省0～12岁健康儿童、手足口病痊愈病人、手足口病现症病人血清肠道病毒71型(EV71)抗体水平,了解手足口病优势病毒株EV71人群感染情况,为预防控制手足口病等提供科学依据。方法在河南省不同地区采集0～12岁健康儿童、手足口病痊愈病人和手足口病现症病人血清共226份,采用微量中和滴定法检测抗EV71抗体。结果健康儿童、手足口病痊愈病人和手足口病现症病人血清EV71中和抗体阳性率分别为51.46%、92.96%和55.77%,差异有统计学意义(P0.05),EV71几何平均滴度(GMT)分别为11.13(8.83～13.99)、66.51(52.09～84.97)和21.93(14.32～33.57),差异有统计学意义(P0.05)。结论手足口病流行地区健康儿童血清EV71中和抗体阳性率较高,EV71阴性感染较普遍。手足口病康复病人能够产生较高滴度的免疫保护性抗体,对EV71病毒再次感染具有一定的保护作用。     

科学防治手足口病,深入认识肠道病毒71型

近期我国有些地区发生了手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)的暴发和流行,出现了较多重症病例.对此,政府高度重视,卫生部已将HFMD列为丙类法定报告传染病,并将安徽省突发公共事件应急预案从三级响应措施提升为二级响应措施.截至2008年5月1日,发病人数3 321例,死亡22例[1-3].     

肠道病毒71型感染手足口病发病机制的研究

手足口病(hand-foot-mouth disease, HFMD)是全球性传染病,感染人群以婴幼儿为主,而肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)是主要病原体.感染EV71除表现HFMD外,还能感染神经系统和其他脏器,引起无菌性脑膜炎、脑干脑炎和脊髓灰质炎样的麻痹性疾病,对儿童健康造成严重危害,已引起高度重视.目前EV71感染HFMD的发病机制仍不清楚,且无有效治疗方法.本文从病毒基因重组和自发突变、宿主基因及受体位点等方面讨论了EV71感染发病的影响因素,并通过动物感染模型的研究对EV71感染HFMD的发病机制进行简要综述;探讨发病机制研究中面临的主要问题,为疾病的防控、临床治疗和有效疫苗的研究提供启发.     

玉溪市肠道病毒EV71型感染流行病学调查

目的了解玉溪市人群EV71病毒感染状况,为防制手足口病提供科学依据。方法采用容量比例概率抽样法(PPS法)对玉溪市峨山、新平县6个乡镇18个行政村人群按年龄分配随机调查。并对调查人群采集静脉血液标本进行EV71抗体检测。结果共调查788人,EV71病毒抗体(EV71-IgG)阳性率为41.37%,不同年龄组EV71-IgG抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=42.24,P0.05),其中5~6岁人群阳性率最高为64.00%,1岁婴儿阳性率最低为20.65%;不同民族EV71-IgG抗体阳性率有显著差异(χ2=13.89,P0.05),彝族相对较高为46.67%,哈尼族最低为21.11%;性别间阳性率差异有统计学意义(χ2=5.63,P0.05),女性高于男性。结论玉溪市人群对手足口(EV71)病原普遍易感,做好人群手足口病防制仍然是今后的工作重点。     

手足口病患儿感染肠道病毒71型全基因组基因特征分析

目的从手足口病患儿粪便中分离肠道病毒71型(EV71),对其进行全基因组测序,了解秦皇岛市EV71全基因组基因特征,为手足口病的综合防治提供依据。方法从秦皇岛市各医院收集手足口病患儿粪便标本,进行EV71检测,阳性标本进行病毒分离及核酸提取,通过RT-PCR进行全基因组序列扩增,通过电泳、测序及序列拼接一系列操作分析其基因特征。结果用提取的核酸扩增出7 406bp的目的基因片段测序后与已记录的EV71相应序列进行比对完全一致,且测序峰图较好,可信度也较高;各基因片段间通过核苷酸序列拼接后得出,秦皇岛市医院EV71全基因组序列长7 406bp,编码区各基因片段的长度分别为:2A450bp、2B297bp、2C987bp、3A258bp、3B66bp、3C549bp、3D1 386bp、VPl 891bp、VP2 762bp、VP3 726bp、VP4 207bp。结论秦皇岛市EV71分离株为C4a型全基因组序列长7 406bp,可为当地手足口病的防控提供参考。     

2010年福建省肠道病毒71型血清流行病学调查

目的 了解经过2008及2009年手足口病流行之后,福建省普通人群血清肠道病毒71型的抗体水平。方法 采集2010年福建省390名普通人群的血清标本,采用中和试验检测血清EV71中和抗体。结果 390名普通人群中和抗体阳性186人,阳性率47.69%。男女性别之间中和抗体阳性率及抗体滴度均没有统计学差异(χ²=0.42,P=0.52>0.05;U=-0.24,P=0.81>0.05)。各个年龄组之间的抗体阳性率及抗体滴度均有统计学差异(χ²=55.69,P=0.00<0.05;H_C=50.36, P=0.00<0.05),抗体阳性率最低的为0~岁年龄组,为16.67%,抗体阳性率随年龄增大而增高。0~4岁年龄组的抗体阳性率为25.33%,5~年龄组的抗体阳性率为61.67%,两者之间的抗体阳性率及抗体滴度均有统计学差异(χ²=48.85, P=0.00<0.05;U=-6.39,P=0.00<0.05)。结论 经过2008及2009年手足口病流行之后,福建省普通人群血清肠道病毒71型的抗体水平仍较低,特别是0~4岁年龄组的儿童。今后福建省仍会出现EV71作为主要病原体之一引起的手足口病疫情,易感人群仍为5岁组以下儿童,应继续加强监测和防控。     

检测肠道病毒71型RT-LAMP技术的建立及其应用

目的为肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)感染的快速诊断建立一种简捷、敏感、特异的基因检测方法,即逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT LAMP)。方法针对EV71 VP1基因的8个区域设计6条特异性引物,建立检测该靶序列的RT LAMP方法,对其特异性及敏感性进行了验证;并对手足口病患者标本进行检测,并与RT PCR及Real time PCR方法进行了比较。结果利用RT LAMP方法能成功检测到EV71 VP1基因区,等温条件下60min内即可完成检测,该方法简便快捷、敏感性高、特异性好;其阳性率高于RT PCR方法（P<0.05）,与Real time PCR结果呈现很好的一致性（P>0.05）。结论RT LAMP方法具有灵敏度高,特异性强,操作过程简捷快速,无需特复杂仪器等优点。适用于EV71感染的快速检测及分子流行病学的监测,具有很好的开发应用前景。     

健康青年肠道病毒71型感染血清流行病学调查

目的 了解入伍新兵人群肠道病毒71型(EV71) IgG抗体的流行分布情况,为今后预防EV71感染提供科学依据.方法 采用血清流行病学调查方法,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,随机抽取北京军区空军2001至2008年8年期间入伍的来自16个省市的364名新兵血清进行了EV71VPI-IgG抗体检测并进行统计分析.结果364名新兵中,陕西省(100％)、湖南省(100％)、福建省(95.46％)和云南省(95.46％)阳性率较高,其余各省阳性检出率相对较低;阳性率63.64％～100.00％,平均阳性率为87.64％,各省间和沿海与内陆地区间阳性检出比较,显著性检验差异有统计学意义.入伍前工作与否,抗体阳性检出率无显著性差异.结论 目前,健康青年对EV71获得稳固免疫力,不易发生暴发流行.     

台湾肠道病毒71型暴发流行:发生与确认

1998年台湾发生肠道病毒 71型 (EV71)暴发流行 ,造成78人死亡 ,2 0 0 0年和 2 0 0 1年又发生小规模流行。流行期间发生大量的手足口病病例 ,其中一些发病的儿童急速死亡 ,因此确认为此病的暴发流行。病毒学和病理学研究表明 :EV 71暴发感染引起心肺衰竭的病变及神经系统的炎症反应 ,是重症及死亡病例最重要的相关病原。血清流行病学研究提示 :EV71至少在 16年前流行过 ,积累的易感人群可能触发 1998年暴发流行。然而 ,EV71神经毒力和宿主基因易感性的改变可能也影响了临床的结果。台湾EV71暴发表明 :此种暴发将受到世界性的关注 ,并将促…     

肠道病毒71型2C蛋白的异源表达及纯化

目的获得高纯度、性状均一的可溶蛋白肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)2C。方法截取2C蛋白的6个包含ATPase/解旋酶等核心结构域的基因片段,分别使用含有His标签和MBP促溶标签的表达载体在大肠埃希菌中进行异源表达,分子筛层析纯化2C蛋白,SDS-PAGE电泳检测表达产物和纯化蛋白。结果成功将EV71 2C蛋白的6个片段进行了克隆表达并纯化,获得了高纯度、性状稳定的可溶蛋白MBP-2C91aa-256aa和MBP-2C118aa-256aa。SDS-PAGE检测2C蛋白纯度达97%以上,分子质量与预期结果一致。纯化的2C蛋白浓度为8.8mg/ml。结论91aa-256aa和118aa-256aa片段的MBP-2C截短蛋白比包含其他片段的截短蛋白性状稳定、均一,MBP标签提高了2C的6个截短蛋白的可溶性。高纯度可溶蛋白的制备为其晶体结构和功能研究奠定了基础。     

2008-2009年江苏省肠道病毒71型分子流行病学研究

目的探讨2008-2009年江苏省肠道病毒71型(EV71)分离株的病毒基因特征。方法选取18份EV71分离株,用一对特异引物进行VP1全基因核苷酸序列扩增,在ABI3130型自动测序仪上测序,序列结果用DNA Star和MEGA4软件进行分析,并与各型参考株进行比较。结果 18株病毒与安徽省阜阳市和山东省临沂市分离的C4a基因型参考株最为相近,核苷酸同源性在96.3%~99.6%之间,氨基酸同源性在99.0%~99.7%之间;而与A、B基因型参考株比较差异较大,核苷酸同源性只在81.8%~84.4%之间,氨基酸同源性在94.3%~97.0%之间;说明本文的18株病毒均属于EV71型C4a基因型。结论 2008-2009年江苏省分离的18株EV71可能与安徽省和山东省分离的EV71有相同的起源,均属于C4a亚型;目前C4a亚型病毒在中国大陆可能有较广泛的分布和传播。     

1型糖尿病免疫学研究进展

1型糖尿病是一种器官特异性自身免疫性疾病.其发病机制复杂,在遗传、环境、免疫等诸多因素的共同作用下,自身抗原免疫耐受丧失,免疫调节失衡,导致针对胰岛β细胞的自身免疫性破坏,导致糖尿病的发生.但其具体病因目前尚不明确,再生基因家族、胰-十二指肠同源盒因子1、嗜铬粒蛋白A、辅助性T细胞(Th)17及胰岛稳态蛋白等均参与1型糖尿病发病的不同环节,同时这些新的免疫学因子的发现,为1型糖尿病的诊断及治疗提供了新的靶点.