银杏叶提取物对胶质瘤细胞NF-κB表达和NO生成的调控

目的 研究银杏叶提取物(EGb761)对C6胶质瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达和可诱导型一氧化氮合酶(iNOs)、一氧化氮(NO)生成的影响。方法 以脂多糖(LPS)和佛波酯(PMA)诱导体外培养的C6胶质瘤细胞表达可诱导型一氧化氮合酶、产生大量NO，应用激光共聚焦成像系统和NO荧光探针监测细胞内NO浓度变化，逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测EGb761对C6胶质瘤细胞中iNOs基因表达的影响，并探讨这一调控作用的分子机制。结果 EGb761能明显降低C6胶质瘤细胞中iNOs mRNA和蛋白的表达、减少NO的生成，抑制IκB-α的降解和阻止p65／RelA进入细胞核。结论 结果提示EGb761可通过NF-κB信号通路对C6胶质瘤细胞iNOs基因表达和NO的生成进行调控。     

EGb761对星形胶质细胞iNOS基因表达的调控

目的：以脂多糖(LPS)和γ-干扰素(WN-γ)诱导体外培养的大鼠脑星形胶质细胞表达可诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、产生大量一氧化氮(NO)为病理条件下胶质细胞过度活化的实验模型，研究了银杏叶提取物(EGb761)对星形胶质细胞合成一氧化氮的作用以及对共培养的小脑颗粒神经元的作用。方法：应用逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测了EGb761对星形胶质细胞中iNOS基因表达的影响，并探讨了这一调控作用的分子机理。结果：EGb76l能明显降低星形胶质细胞中iNOSmRNA和蛋白的表达、减少一氧化氮的生成、防止活化的胶质细胞损伤共培养神经元，抑制IKB-α的降解和阻止p65／RdA进入细胞核，结果提示EGb761对iNOS基因表达的抑制作用依赖于NF-κB信号通路。结论：实验结果提示EGb761可能对与胶质细胞过度活化有关的神经系统痰病具有治疗、预防的作用。     

雷公藤内酯醇抑制滑膜成纤维细胞COX-2和iNOS表达

目的:研究雷公藤内酯醇对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASF)增殖和表达环氧化酶-2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及合成前列腺素E2(PGE2)、一氧化氮(NO)的影响,并探讨其机制.方法:分离培养人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞,用TNFα(20 μg/L)刺激,同时加或不加雷公藤内酯醇(TP,0～100 μg/L).分别用3H-TdR法、竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)和硝酸酶还原法、半定量逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)法、细胞酶免疫法及蛋白免疫印迹(Western-blot)法,检测滑膜细胞的增殖活性、细胞培养上清液中PGE2和NO的水平,滑膜细胞COX-2和iNOS mRNA表达水平及蛋白表达水平.同时提取各组细胞蛋白,测定其核转录因子NF-κB活性.结果:TP(>20 μg/L)能显著抑制TNFα诱导的RASF COX-2和iNOS表达,并明显减少PGE2和NO的生成,抑制作用与TP浓度呈明显相关性.同时观察到,TP对TNFα激活的RASF核转录因子NF-κB活性有明显的抑制作用(IC50≈35 μg/L),TP对RASF NF-κB活性的抑制程度与其抑制RASF COX-2和iNOS表达的效应相一致.实验未观察到TP对RASF增殖的影响.结论:TP可显著抑制TNFα刺激的RASF COX-2和iNOS的表达及其诱导产物PGE2和NO的生成,这种作用可能通过TP抑制RASF NF-κB的活性而实现.     

重症急性胰腺炎大鼠胰腺NF-κB、iNOS、NO表达及瘦素的干预效应

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织核因子-κB(NF-κB)活化和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、NO表达与胰腺损伤的关系及瘦素的干预效应。方法选取wistar大鼠36只,分成正常对照空白组、重症急性胰腺炎组、外源性瘦素治疗组。以5%牛磺胆酸钠制作SAP模型。外源性瘦素治疗组以瘦素于SAP模型大鼠关腹前行腹腔注射,造模后6h取材,检测胰腺组织NF-κB活性、NO、iNOS含量,同时观察血浆淀粉酶及病理改变等。结果正常对照组胰腺组织几乎无NF-κB活化及iNOS的表达。SAP时胰腺组织NF-κB活化及i NOS、NO高表达,瘦素治疗组胰腺组织NF-κB活性、iNOS、NO含量、血浆淀粉酶降低。NF-κB活化与i NOS表达呈正相关,相关系数为0.79(P0.01),NO含量与组织病理评分也呈正相关,相关系数为0.66(P0.01)。结论 NF-κB活化及iNOS/NO过度表达可能是SAP胰腺损害发生的原因之一。瘦素可能通过抑制NF-κB活化途径而使i NOS的活性表达得以减少,进而使过量NO的生成得以减少,使造成的胰腺病理损害得以减轻。     

路透社医学新闻

纽约(路透社医学新闻)2002-04-24 动物实验表明:转录因子核因子κB(NF-κB)已成为研制偏头痛药物的新目标。 波士顿哈佛大学医学院的 Moskowitz 认为:脑脊膜的炎症是偏头痛的重要病理变化,而 NF-κB 能促进生成一氧化氮(NO)和其他前炎症分子,从而导致偏头痛,它在这一过程中起了重要的作用。研究人员将硝酸甘油注入大白鼠的硬脑膜,然后观察NF-κB对诱生一氧化     

瘦素对重症急性胰腺炎大鼠肺组织NF-κB、iNOS及NO的影响

目的探讨外源性瘦素对重症急性胰腺炎大鼠肺组织核因子-κB、诱生型一氧化氮合酶、NO表达的影响,以及瘦素在SAP肺损伤的治疗效果及作用机制。方法36只大鼠随机分为正常对照组、SAP组和外源性瘦素治疗组。以5％牛磺胆酸钠制作SAP模型。造模后6h取材,检测肺组织NF-KB活性、NO、iNOS含量,同时观察血浆淀粉酶及其病理改变等。结果正常对照组几乎无NF-κB活化,SAP时NF-κB活化及iNOS、NO高表达。瘦素对SAP肺组织NF-κB活性有抑制作用,可使iNOS活性表达降低,并可降低血浆淀粉酶。肺病理可见：给予外源性瘦素后,SAP大鼠肺组织损伤明显减轻。肺组织NF-κB活化与iNOS表达及肺组织病理评分均呈正相关。结论肺组织NF-κB活化及iNOS过度表达可能是SAP肺损害发生的原因之一。瘦素可能通过抑制NF-κB活性途径减少iNOS的表达,从而减少过量NO的生成,减轻SAP肺组织损害。     

NO在炎症及免疫应答中的调节作用

NO在炎症和免疫应答中起着关键的调节作用。NO能够影响炎症反应的进程,如影响cGMP,NF—κB依赖的信号转导通路,调节核转录因子抑削剂IKB的活性,影响多种炎症因子的表达等。本综述讨论了NO在炎症与免疫调节中的应用及作用机制,并探讨了中药在NO相关的疾病中的应用前景。     

炎性细胞因子对滑膜细胞诱导型一氧化氮合酶和一氧化氮表达的作用及其机制研究

目的观察炎性细胞因子IL-1、IFN-γ、TNF-α对滑膜细胞诱导型一氧化氮合酶（iNOS）及一氧化氮（NO）表达和生成的影响,并探讨核因子-κB（NF-κB）在iNOS和NO表达和生成中的作用。方法将人类滑膜成纤维细胞MH7A培养传代后,根据不同的实验要求进行分组,并予相应处理;采用Westernblot法检测细胞内NF-κB和iNOS蛋白表达的变化,细胞免疫荧光法检测NF-κB在细胞中表达及核移位,定量PCR法检测细胞内iNOSmRNA表达的变化,硝基还原酶法检测细胞培养上清液中NO的浓度变化。结果IL-1、IFN-γ、TNF-α单独或联合刺激能促进NF-κB活化,并且使iNOS及NO表达和生成也有所增加（均P＜0.05）;而NF-κB药物抑制剂BAY能降低这3种炎性细胞因子联合刺激所致iNOS及NO的表达和生成（均P＜0.05）。结论炎性细胞因子对滑膜细胞iNOS和NO生成有促进作用,而NF-κB在iNOS和NO生成中起重要作用。     

褪黑素对急性百草枯中毒大鼠肺组织核因子-κB及诱导型一氧化氮合酶的影响及治疗作用的研究

目的 观察褪黑素(MT)治疗前后急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织中核因子-κB(NF-κB)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的变化,探讨它们在百草枯所致肺损伤中的作用.方法 将45只SD大鼠随机分为染毒组、MT治疗组和对照组.3 d后分别测定三组大鼠血清中一氧化氮(NO)及丙二醛(MDA)含量,同时取大鼠肺组织,采用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测NF-κB活性;RT-PCR检测iNOSmRNA的表达.结果 大鼠肺组织NF-κB活性及iNOS mRNA的表达在染毒组明显高于对照组(P＜0.01).经MT治疗后显著降低(P＜0.01),但仍高于对照组(P＜0.01).染毒组大鼠血清中NO及MDA的浓度较对照组明显升高(P＜0.01),经MT治疗显著降低(P＜0.01).结论 NF-κB及iNOS在百草枯所致大鼠肺损伤中起重要作用;MT能减少染毒大鼠肺组织NF-κB的激活,降低其调控的iNOS活性,减轻染毒大鼠肺组织损伤.     

NF-κB与神经系统疾病的关系

核转录因子NF-κB对感染、免疫反应以及控制细胞分化和凋亡起到广泛的效应,这些效应较为明显存于在神经系统中。NF-κB通常以多种亚单位形式存在于各种神经细胞中,通过多个激活途径被激活后从胞浆移位至细胞核内发挥转录激活作用,NF-κB在对神经系统发育和抗凋亡中以及调节胶质细胞活性过程中起到十分重要的作用。本文主要对NF-κB的生物学特性、抗肿瘤机制及神经系统疾病的关系做一综述。     

银杏叶提取物联合依达拉奉对气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO及NOS表达的影响

目的: 观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extraction,EGb)与依达拉奉(edaravone,ED)联合应用对气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠模型脑组织一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法: 采用饥饿、疲劳、高脂饮食等复制大鼠气虚血瘀模型,再用线栓法阻断大脑中动脉2 h,再灌注治疗72 h后,观察EGb、ED及EGb+ED组对气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO及NOS表达的影响。结果: 与模型组比较,EGb和ED均能降低气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO/诱导型NOS (iNOS)、总NOS (TNOS)含量,减轻神经细胞损伤(P < 0.01),尤以两药联用效果更为显著(P < 0.01)。结论: EGb联合EP能更好地降低气虚血瘀型脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO含量,其机制可能是通过降低脑组织iNOS、TNOS蛋白的表达而实现清除自由基,抗氧化,减轻神经细胞损伤,共同发挥脑保护作用。     

银杏提取物细胞调节作用的研究进展

银杏提取物具有重要的药理学作用,如抗氧化清除活性氧自由基的能力,减少血小板聚集和增强神经保护的活性。其在治疗阿尔茨海默病、学习记忆减退、心脑血管疾病、绝经后综合征等疾病中具有重要意义。同时银杏提取物还具有诱导肿瘤细胞凋亡与分化的抗肿瘤能力。该文就银杏提取物在分子水平上对细胞调节作用的研究进展予以综述,以便进一步明确银杏提取物的作用机制。     

枇杷叶三萜酸对慢性支气管炎大鼠肺泡巨噬细胞一氧化氮合酶及一氧化氮表达的影响

目的观察枇杷叶三萜酸(TAL)对慢性支气管炎(CB)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)一氧化氮合酶(iNOS)和一氧化氮(NO)生成的影响,探讨其对慢性支气管炎抗炎作用的部分机制。方法应用卡介苗联用LPS的方法复制大鼠CB模型,观察TAL对CB大鼠AM iNOS表达、活性及NO释放的影响。结果在卡介苗联用LPS诱导大鼠CB模型中,TAL能降低AM iNOS的mRNA及蛋白的表达,并且抑制NO的释放。结论TAL抑制CB大鼠AM iNOS的表达及其活性,从而减少NO的释放可能是其对慢支的治疗与防治作用机制之一。     

银杏叶提取物对阿尔茨海默病记忆功能影响的研究

目的观察银杏叶提取物对阿尔茨海默病(AD)患者记忆功能和局部脑血流量的影响,探讨其对AD的临床疗效。方法选取2009年10月至2011年10月在解放军白求恩国际和平医院神经内科就诊并被确诊为AD的患者220例,用随机抽取号码法分为对照组110例和治疗组110例。对照组患者给予安慰剂治疗,治疗组给予银杏叶提取物治疗,疗程均为6个月。比较治疗前后所有患者的简易精神状况量表(MMSE)评分、单光子发射计算机断层扫描核素显像检测各个脑区放射性比值(RAR)。结果与治疗前相比,治疗组MMSE评分及RAR的各项指标显著升高(P<0.05),对照组MMSE评分及RAR的各项指标与治疗前相比无统计学意义(P>0.05)。结论银杏叶提取物具有提高AD患者记忆力并改善局部脑组织血流量的功效。     

银杏叶提取物对结肠运动的影响机制

目的探讨银杏叶提取物(EGb)对豚鼠离体结肠运动的影响及其机制.方法制备豚鼠离体结肠肠段标本,通过灌流给药的方法观察不同浓度EGb、银杏黄酮等对离体结肠收缩活动的影响.结果 EGb (0.5～50.0 mg/L)可对结肠自主活动产生抑制和兴奋两种不同的影响,其中以抑制作用为主.EGb也可部分拮抗由ACh、5-HT引起的结肠运动的增强效应;并协同血管活性肠肽(VIP)、无钙Kreb液灌流引起的抑制作用;对γ-氨基丁酸、肾上腺素引起的结肠运动抑制效应无显著影响;用M受体阻断剂阿托品预处理可部分阻断EGb对结肠自主活动的影响.银杏黄酮(0.01～0.1 mg/L)可使豚鼠离体结肠运动抑制,且表现一定的剂量依赖性.结论 EGb对豚鼠结肠运动的影响可能是通过影响5-HT、ACh、VIP等肠神经系统递质的释放,经M受体介导以及对平滑肌的直接作用等多种途径实现的.银杏黄酮可能是EGb发挥抑制作用的有效部位.     

银杏叶提取物对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究银杏叶提取物对大鼠急性肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 SD大鼠随机分为假手术对照组、单纯缺血再灌注组、缺血再灌注＋银杏叶提取物处理组。通过阻断大鼠肝门30min后再开放建立肝缺血再灌注损伤模型，在肝脏再灌注90min时测肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和测血ALT、AST，并观察肝组织病理学改变。结果再灌注90min时缺血再灌注（1／R）＋银杏叶提取物处理组的肝组织MDA生成，SOD消耗，血清ALT、AsT升高值均少于L／R组（P〈0．01），且L／R＋银杏叶提取物处理组的肝细胞显微结构损害的改变较L／R组轻。结论 银杏叶提取物通过抗氧化，对急性肝脏缺血再灌注损伤有保护作用。     

银杏叶提取物对心肌细胞肥大的防治作用及其量效关系的研究

目的：在原代培养的新生大鼠心肌细胞上，观察银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba．EGb)及其单体槲皮素(quercetin，Que)对血管紧张素11(AngiotensinⅡ，AngⅡ)诱导的心肌细胞肥大的防治作用。方法：采用改良Lowry法测定心肌细胞总蛋白含量，相差显微镜测量细胞大小作为心肌细胞肥大的指标。结果：EGb和Que能抑制AngⅡ引起的心肌细胞总蛋白含量及直径的增加，其效果与血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)卡托普利(captopril，Cap)相似。结论：EGb和Que能有效地防治心肌细胞肥大的发生和发展。     

银杏叶提取物对帕金森病模型大鼠神经形态学的影响

目的探讨银杏叶提取物（EGb）对帕金森病（PD）模型大鼠神经形态学的影响,了解EGb时PD大鼠多巴胺（DA）能神经元的作用。方法以6-OHDA部分损毁内侧前脑束的方法建立类似于人类PD早期的大鼠模型,通过Nissl染色及免疫组织化学方法观察PD大鼠黑质DA能神经元形态学的改变,并对尼氏体积分光密度（IOD）定量分析。结果GEb组尼氏染色下脑组织病理改变均较模型组轻。模型组尼氏体10D值低于正常组（P〈0.05）;GEb组尼氏体10D值高于模型组（P〈0.05）。模型组SNc、VTA区TH阳性细胞数明显减少,染色变浅,形状不规则,DA残存神经元百分比明显降低。EGb组损伤侧SNc、VTA区TH阳性细胞数增加,染色变深,形状规则,DA神经元残存数量明显升高。结论EGb能够抑制脑黑质DA能神经元的数量减少,减轻PD大鼠的神经元变性,对PD模型大鼠DA能神经元具有保护作用。     

NO与巨噬细胞抗肿瘤细胞毒效应的关系

目的：探讨LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞iNOS mRNA表达，NO产生与巨噬细胞细胞毒作用的关系。方法：应用RT－PCR、硝酸还原酶法、^3HTdR掺入法分别观察LPS诱导的巨噬细胞iNOS mRNA表达、NO产生以及巨噬细胞抗肿瘤细胞毒作用。结果：LPS能够诱导iNOS mRNA表达和NO的生成。iNOS特异性抑制剂充分抑制NO生成的同时，显著降低巨噬细胞对HL－60的细胞毒作用，却不影响巨噬细胞对K562细胞的细胞毒作用。结论：NO是激活巨噬细胞参与的非特异性细胞免疫的重要效应分子之一，但在巨噬细胞对不同肿瘤的抑制效应中发挥的作用不尽相同。