食管鳞癌中细胞凋亡、MVD及PCNA、VEGF表达的临床意义

目的研究食管鳞癌中细胞凋亡、PCNA、VEGF、MVD与传统组织病理学因素对食管鳞癌预后的影响.方法该研究采用原位DNA末端标记(TUNEL法)、免疫组化(S-P法)及组织病理学等方法研究食管鳞癌组织中凋亡、PCNA、CD34、VEGF的表达,计算出凋亡指数(AI)、增殖指数(PI)及微血管密度(MVD),并测出VEGF的平均吸光度.结果AI、PI、VEGF、MVD与肿瘤的分化程度、TNM分期有密切关系.低分化程度组和高TNM分期组PI、MVD值、VEGF吸光度明显高于高分化程度组及低TNM分期组(P＜0.01),而其AI值明显低于高分化程度组及低TNM分期组(P＜0.01).浸润深度超过肌层组及有淋巴结转移组VEGF、MVD明显高于浸润深度未超过肌层及无淋巴结转移组(P＜0.01),而AI与浸润深度无关(P＞0.05),PI与淋巴结转移无关(P＞0.05).单因素分析结果显示患者生存率降低与AI、PI、MVD、VEGF、TNM分期、淋巴结转移、分化程度和浸润深度有关.结论细胞凋亡、细胞增殖和血管形成参与了食管鳞癌的形成,并对其生长起促进作用.VEGF与食管鳞癌的血管形成有密切关系,VEGF和MVD表达增高有助于食管鳞癌的浸润转移;患者生存率降低与AI、PI、MVD、VEGF、TNM分期、淋巴结转移、分化程度和浸润深度有关.     

甲状腺癌中端粒酶逆转录酶mRNA和Survivin的表达及意义

目的: 探讨甲状腺癌(TC)中端粒酶逆转录酶(TERT)mRNA和survivin蛋白的表达与细胞增殖和凋亡的关系.方法:采用原位杂交法、末端脱氧核苷酸酶标记法及免疫组化技术检测46例TC中TERT mRNA、细胞凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)和survivin蛋白的表达,20例良性病变作为对照.结果: TC的TERT mRNA和survivin的表达阳性率,增殖指数(PI),凋亡指数(AI)均显著高于对照组;TC中TERT mRNA和survivin的表达均与临床分期有关,survivin还与淋巴结转移有关;二者的表达呈显著正相关;TERT mRNA和survivin阳性表达的TC组织AI明显低于阴性组,而PI均显著高于阴性组(P＜0.05).结论: TERT和survivin特异性的表达于TC组织中,可能通过促细胞增殖和抗凋亡途径,参与TC的发生发展.     

survivin在食管鳞状细胞癌中的表达及其与bcl-2,bax表达的相关性

目的:探讨凋亡抑制基因survivin在食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)中的表达,及其与bcl-2、bax基因表达的相关性.方法:应用SP免疫组织化学法检测85例食管鳞癌组织及对应癌旁正常食管黏膜组织中survivin,bcl-2和bax蛋白的表达.结果:食管鳞癌组织中,survivin蛋白的表达率为77.64%,显著高于癌旁正常食管黏膜组织的表达率7.06%(P＜0.05).survivin蛋白表达与食管鳞癌的TNM分期及淋巴结转移有关(P＜0.05).survivin表达与bcl-2蛋白表达呈正相关(P＜0.05),而与bax蛋白表达无关(P＞0.05).结论:survivin在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用,可能成为食管鳞状细胞癌基因治疗的新靶点.survivin基因可能与bcl-2基因在食管鳞癌的发展中协同作用.     

食管鳞癌组织中survivin、MGMT蛋白的表达及其临床病理意义

目的 探讨凋亡抑制基因survivin、DNA修复酶MGMT在食管鳞癌组织中的表达以及与临床病理因素之间的关系.方法 应用免疫组织化学法(EnVision二步法),检测51例汉族食管鳞状细胞癌组织和18例正常切缘食管粘膜中survivin和MGMT蛋白的表达并分析其与临床病理诸因素之间的关系.结果 survivin在18例正常切缘食管组织中不表达,在51例食管鳞癌组织中34例表达阳性,占66.67%.MGMT在食管鳞癌组织中的表达(80.39%)高于切缘正常食管粘膜(16.67%)(P<0.01);survivin,MGMT蛋白阳性表达率与食管鳞癌的浸润深度、TNM分期有关,差异有统计学意义(P<0.05).此外,survivin在高、中分化组与低分化组中的阳性表达率分别为56.80%和92.00%,两者差异有统计学意义(P<0.05),但MGMT蛋白表达阳性率与肿瘤分化程度无相关性.survivin与MGMT蛋白表达均与食管鳞癌的浸润深度及TNM分期有关(P均<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、大体标本分型及有无淋巴结转移等因素无关(P>0.05);survivin和MGMT蛋白在食管鳞癌组织中的表达无相关性(P>0.05).结论 survivin、MGMT基因在食管鳞癌组织中异常表达并与食管鳞癌组织的分化程度、浸润深度、TNM分期密切相关.     

Survivin、增殖细胞核抗原和Bcl-2在乳腺癌组织中的表达

目的探讨乳腺癌组织中survivin、增殖细胞核抗原（PCNA）、Bcl-2的表达及其与临床病理因素的关系。方法采用免疫组化法检测64例乳腺癌标本中survivin、PCNA、Bcl-2的表达,并分析其与临床病理因素的关系。结果survivin和Bcl-2表达阳性率分别为71.87%和62.5%,且淋巴结转移组survivin表达阳性率高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义（P〈0.05）。PCNA指数（PI）平均为（61.5&#177;10.1）%,并与淋巴结有无转移、肿块大小、临床TNM分期、组织学分级、survivin表达相关（P〈0.05）。结论乳腺癌患者survivin与Bcl-2的表达不相关,有各自不同的机制;PCNA促进肿瘤细胞增殖和进展。     

食管鳞癌组织端粒酶活性与PCNA和CK17关系的研究

目的：通过对食管鳞癌及癌旁组织端粒酶活性测定、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞角蛋白(CKl7)免疫组化染色．了解端粒酶活性与食管鳞癌发生发展及其与PCNA和CK17表达之间的关系；探讨端粒酶活性作为诊断食管鳞癌、判断其生物学行为和预后指标的可能性。方法：食管鳞癌组织30例，癌旁2cm和癌旁5cm组织各25例及正常食管组织3例。标本离体后液氨速冻并深低温保存．以端粒酶PCR—ELISA试剂盒进行端粒酶活性测定，石蜡包理切片HE染色和免疫组化染色观察PCNA和CK17表达。结果：3例正常食管粘膜组织端粒酶活性均阴性。食管鳞癌癌组织86．7％(26／30)，癌旁2cm组织60％(15／25)，癌旁5cm组织8％(2／25)端粒酶活性阳性，三组阳性率有显著性差异(P＜0．01)。癌端粒酶活性与患者年龄，肿瘤大小，浸润深度，淋巴结转移无关；与临床分期(TNM分期)相关(P＜0．05)；PCNA阳性指数在食管鳞癌癌组织、癌旁2cm与癌旁5cm表达三组比较有差异(P＜0．05)；端粒酶与PCNA无相关关系(P＞0．05)；CK17在癌组织表达率为83．3％，三组间CK17表达率有显著性差异(P＜0．01)。癌组织端粒酶活性阳性率与CK17阳性表达率之间存在相关性。结论：正常食管粘膜组织无端粒酶活性表达。癌旁组织中端粒酶活性随与肿瘤间距离的增加逐渐降低，Ⅲ期者端粒酶活性阳性率明显高于临床分期Ⅰ、Ⅱ期者。癌灶端粒酶活性与PCNA阳性指数间无相关关系；与CK17表达有明显相关性，端粒酶活性有可能作临床诊断食管鳞癌和预测其生物学行为及预后的分子生物学指标。     

非小细胞肺癌组织中脆性组氨酸三联体和PCNA的表达

目的:观察人非小细胞肺癌组织中脆性组氨酸三联体(FHIT)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.方法:应用免疫组织化学(SP法)检测80例非小细胞肺癌和40例肺良性病变组织中FHIT和PCNA的表达.结果:非小细胞肺癌组织中FHIT表达阳性率(57.5%)低于肺良性病变组织(90.0%)(P＜0.01);腺癌组织中FHIT的表达阳性率高于鳞癌,且表达阳性率与鳞癌分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关(P＜0.05);非小细胞肺癌组织中FHIT表达阳性率与患者是否有吸烟史有相关性(P＜0.05);非小细胞肺癌组织中PCNA表达阳性率(60.0%)高于肺良性病变组织(10.0%)(P＜0.01);FHIT表达阳性率与淋巴结转移、TNM分期有关(P＜0.05);非小细胞肺癌组织中FHIT和PCNA表达呈负相关(rs=-0.547,P＜0.01).结论:FHIT表达下调是肿瘤细胞增殖活跃的分子基础之一,FHIT与非小细胞肺癌的发生、发展关系密切.     

食管鳞状细胞癌P53蛋白表达和基因突变与预后的关系

目的 检测食管鳞癌P53蛋白表达和基因突变状况与临床病理及预后的关系。方法 采用免疫组织化学(LSAB法)检测222例食管鳞癌P53蛋白表达；用聚合酶链反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)检测55例食管鳞癌P53基因突变，并进行生存分析。结果 食管鳞癌P53蛋白表达阳性率为51．80％，与组织学分级(P=0．001)、TNM分期(P=0．005)、肿瘤浸润深度(P=0．000)、淋巴结转移(P=0．035)有关；P53蛋白阳性表达患者预后差于不表达者(P=0．0190)，特别是TNMⅡ期患者(P=0．0084)。食管鳞癌P53基因大多数变异位于外显子5—8，其中变异热点在密码子24l和282位，P53基因第5，6，7，8，10外显子突变率分别为14．5％、1．8％、5．5％、18．2％、1．8％，总突变率为41．80％。P53基因突变阳性组与阴性组间患者生存时间有显著性差异(P=0．0417)。P53蛋白表达与P53基因突变符合率为82．14％。结论 P53蛋白的过量表达及基因突变，可以作为判断食管鳞癌生物学行为和预后的指标。     

食管鳞癌RhoC和OPN蛋白的表达及其对患者预后的影响

目的研究食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达及其与食管鳞癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组织化学方法(二步法)检测80例食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达情况,探讨它们与食管鳞癌肿瘤大小、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后的关系。结果(1)RhoC蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为66.25%,其表达与淋巴结转移有关(rs=-2.115,P<0.05),而与肿瘤大小、组织分化程度和TNM分期无关(P>0.05);RhoC蛋白阳性表达组患者的术后生存时间较阴性表达组短,(P<0.001);(2)OPN蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为100%,OPN蛋白的表达水平与组织分化程度(χ2=10.766,P<0.05)及淋巴结转移有关(rs=-2.289,P<0.05),而与肿瘤大小和TNM分期无关(P>0.05);OPN蛋白的表达水平越高,患者术后生存时间越短(P<0.05);(3)RhoC蛋白和OPN蛋白在食管鳞癌组织中的表达之间存在正相关性(rs=0.408,P<0.001)。结论食管鳞癌组织RhoC和OPN蛋白的表达与淋巴结转移情况及患者的预后有密切关系,RhoC蛋白和OPN蛋白可作为食管鳞癌预后评价的参考指标。     

胃癌中survivin MMP-9表达与血管生牡关系及对预后的影响

目的:探讨survivin、MMP-9蛋白的表达与癌间质微血管密度(MVD)的值的关系及其对胃癌预后的影响.方法:采用免疫组化S-P法,检测128例胃癌手术标本中survivin、MMP-9、CD34的表达.结果:128例胃癌组织中survivin、MMP-9阳性表达率和MVD分别为60.9%、64.1%、28.68±10.25,三者均与胃癌浸润深度、淋巴结转移、TNM分期密切相关(P＜0.05);survivin阳性表达和MVD与肿瘤组织分化程度和远处转移有关(P＜0.05);三者在胃癌中表达呈正相关(P＜0.05);survivin、MMP-9共同表达者组发生深度浸润(T3～4)与淋巴结转移的比率和MVD明显高于其中之一或二者皆阴性表达者 (P＜0.05);survivin、MMP-9蛋白阳性表达者术后生存率明显低于阴性者(P＜0.05).结论:survivin 、MMP-9与血管形成和胃癌生长、浸润、转移及预后均有密切相关,联合检测survivin、MMP-9、CD34表达可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要指标.     

干细胞与肿瘤干细胞

目的了解干细胞、肿瘤干细胞和恶性肿瘤关系的研究进展。方法复习国内外相关文献,综述肿瘤干细胞与干细胞的关系、肿瘤干细胞与恶性肿瘤发生发展的关系、研究现状、前景及存在的问题。结果正常干细胞和肿瘤干细胞之间存在很强的相似性,其中淋巴造血系统恶性肿瘤和少数实体瘤干细胞分离鉴定的成功有力支持了肿瘤干细胞理论。结论肿瘤干细胞理论可解释很多恶性肿瘤的生物学行为,但目前仍迫切需要相关分离、纯化、鉴定实体瘤干细胞的思路和方法。     

肝星状细胞和胰腺星状细胞的比较

肝星状细胞和胰腺星状细胞在各自纤维化疾病中都发挥着重要作用,两者在诸多方面存在相似之处。文章就两者的生物学特性、凋亡、信号转导通路方面进行总结和比较,以探讨它们之间的关系。     

肝星状细胞和胰腺星状细胞的比较

肝星状细胞和胰腺星状细胞在各自纤维化疾病中都发挥着重要作用,两者在诸多方面存在相似之处.文章就两者的生物学特性、凋亡、信号转导通路方面进行总结和比较,以探讨它们之间的关系.     

回转器模拟失重对SGC-7901、HFE-145细胞增殖和周期的影响

目的探讨模拟失重对胃癌SGC-7901细胞和胃黏膜上皮HFE-145细胞增殖和周期的影响。方法采用回转器模拟失重,两种细胞各分为两组,回转组和1G对照组,实验时间共72h。采用免疫组化法观察两种细胞增殖核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达的变化,应用流式细胞仪测定细胞周期。结果与对照组相比,回转组SGC-7901细胞48h及72hPCNA抗体阳性率明显减少（P〈0.05及P〈0.01）,G0＋G1期细胞显著增多（P〈0.01及P〈0.05）;12h、24h及36h PCNA抗体阳性细胞的比率无显著性差异。与对照组相比,回转组HFE-145细胞12hPCNA抗体阳性率明显减少（P〈0.05）,G0＋G1期细胞显著增多（P〈0.05）。结论回转器模拟失重使胃癌SGC-7901细胞48h及72h时出现细胞周期阻滞、增殖抑制。胃黏膜上皮HFE-145细胞在12h时出现上述变化。     

米非司酮对子宫肌瘤细胞增殖、侵袭及凋亡的影响

目的探讨米非司酮对子宫肌瘤和内膜组织Ki67基因、MMP2基因、Fas基因表达的影响。方法 62例子宫肌瘤患者随机分为对照组24例和治疗组38例,治疗组患者从月经周期第2~3d开始,每日服用25mg米非司酮,连续服用1个月后行子宫手术;对照组病人入院后不服用任何药物,直接手术,术中均取瘤体及内膜组织。用免疫组化SP法检测子宫肌瘤及内膜组织中Ki67、MMP2、Fas基因的表达水平。结果治疗组子宫肌瘤组织Fas阳性率为55.3%,明显高于对照组的29.2%,差异有统计学意义(P0.05);治疗组子宫肌瘤Ki67的阳性表达率为36.8%,明显低于对照组的70.8%,差异有统计学意义(P0.01);治疗组子宫肌瘤MMP2的阳性表达率为36.8%,明显低于对照组的66.7%,差异均有统计学意义(P0.05);但两组子宫内膜组织中Ki67、MMP2和Fas的表达没有显著变化,差异均无统计学意义(P均大于0.05)。结论米非司酮抑制子宫肌瘤细胞的增殖和侵袭转移,促进肌瘤细胞凋亡,这可能是米非司酮治疗子宫肌瘤的作用机理。     

透明细胞性肾细胞癌和肾嫌色细胞癌的临床病理及免疫表型比较

目的 探讨透明细胞性肾细胞癌和肾嫌色细胞癌的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断.方法 对手术切除的57例肾透明细胞癌和22例肾嫌色细胞癌进行临床特点、肉眼观、光镜和免疫组织化学染色.结果 透明细胞性肾细胞癌多有血尿或肾区疼痛临床症状,巨检切面呈多彩状多伴出血、坏死及囊变;嫌色细胞癌临床上大多无症状,巨检切面呈淡棕色,出血、坏死罕见.镜下透明细胞性肾细胞癌胞浆透明或嗜酸性;嫌色细胞癌胞膜厚似植物状、部分胞质嗜酸性可见明显核周空晕.免疫组化染色57例透明细胞性肾细胞癌E-cadherin全阴性表达,Vimentin全阳性表达,而22例嫌色细胞癌两者的表达正好相反,有显著性差异(P<0.01).结论 透明细胞性肾细胞癌与嫌色细胞癌虽在形态上有一定的交叉,但结合临床病理特征及联合检测E-cadherin和Vimentin的表达可做出正确诊断与鉴别诊断.     

香叶木素诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及周期阻滞的机制研究

目的 研究香叶木素对人肝癌HepG2细胞的增殖、凋亡及周期阻滞的影响并揭示其分子机制.方法 MTT方法检测不同浓度香叶木素对肝癌HepG2的细胞活力的影响;流式细胞术检测不同浓度香叶木素处理对HepG2细胞周期阻滞及细胞凋亡的作用;Western blot检测香叶木素处理对细胞p53、Bcl-2、Bax、Cleaved-cas-pase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP、Bak、cdc2、cyclinB1、p21等细胞周期调节或细胞凋亡相关蛋白表达的调节.结果 香叶木素能显著抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并且诱导细胞凋亡(P<0.05);流式细胞术对细胞周期检测示:香叶木素处理HepG2细胞,使G0/G1期细胞比例显著降低,而G2/M期细胞比例显著升高(P<0.05).香叶木素可下调HepG2细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、cdc2、cyclinB1的蛋白表达,上调p53、p21、Bax、Bak,Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase8、Cleaved-PARP等促凋亡蛋白.结论 香叶木素在体外实验能通过激活p53/Bcl-2细胞凋亡通路抑制人肝癌HepG2细胞的增殖及促进细胞凋亡,同时通过上调p53、p21下调cdc2、cyclinB1诱导细胞G2/M周期阻滞.     

乳腺癌干细胞耐放射性与细胞周期的关系

肿瘤的放射疗法是一种建立在细胞周期基础上的治疗方法,乳腺癌干细胞在放疗过程中出现的G2/M期阻滞、衰老途径下调、APE1水平升高及细胞周期调控相关基因p21和p53活性等改变直接或间接导致细胞周期紊乱,均与乳腺癌干细胞的耐放射性密切相关,是分子遗传学和肿瘤生物学研究的热点.     

铁剥夺对K562细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:观察铁剥夺诱导K562细胞的凋亡及对细胞周期的影响.方法:实验组以不同浓度(25 μmol/L、50 μmol/L)的去铁胺处理K562细胞,25 μmol/L去铁胺加等浓度的三氯化铁作对抗组,设空白对照组,分别收集不同时间点(16 h、24 h、32 h、48 h、72 h)的细胞,用磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)进行双标记,荧光显微镜观察凋亡细胞的形态变化.用流式细胞仪分析细胞凋亡率和细胞周期特征.结果:K562细胞经25 μmol/L、50 μmol/L的去铁胺处理后发生了不同程度的凋亡,随着时间延长和剂量增加,细胞凋亡率增加(P＜0.05).细胞周期检测发现25 μmol/L、50 μmol/L的去铁胺处理K562细胞48 h和72 h后,G0/G1期细胞数较对照组升高,S期细胞数和细胞增殖指数均较对照组降低(P＜0.05.结论:铁剥夺可抑制K562细胞增殖并诱导细胞凋亡,机制可能是通过剥夺细胞内铁阻止细胞进入S期.