斑蝥酸钠对体外培养的EJ细胞的实验研究

目的观察斑蝥酸钠对体外培养的人膀胱癌系EJ细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法 EJ细胞贴壁后分为对照组、1组、2组、3组、4组、5组,分别给予0、0.5、1、5、10、15 g/L浓度斑蝥酸钠处理,24 h后采用流式细胞仪检测细胞周期情况,CCK-8法检测斑蝥酸钠对EJ细胞增值抑制的影响,荧光倒置显微镜下观察细胞的凋亡情况,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况。结果以0.5、1、5、10、15 mg/L 5个浓度的斑蝥酸钠作用于EJ细胞24 h,EJ细胞的增殖出现不同程度的抑制,且与药物浓度成正相关。1、2、3、4、5组抑制率与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。对照组S期细胞比例为8.94%,G2/M期为4.16%,G0/G1期为86.91%,与1、2、3、4、5组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。使用斑蝥酸钠作用EJ细胞24 h后,电泳出现凋亡特有的阶梯状条带,随着药物浓度的增加,凋亡带增多,而对照组则没有出现凋亡带。荧光显微镜下,对照组未出现凋亡小体,加入斑蝥酸钠的药物组有凋亡小体出现,0.5、5 g/L斑蝥酸钠药物组凋亡细胞数较少,15 g/L斑蝥酸钠药物组凋亡细胞数较多。结论斑蝥酸钠对体外培养EJ细胞增殖有显著的抑制作用,诱导EJ细胞凋亡。     

斑蝥酸钠的研究进展

近年来对斑蝥素的研究主要集中于对其抗癌机制的探讨、衍生物的研制和新剂型的开发[1]。相继合成了多种斑蝥素衍生物,如斑蝥酸钠、羟基斑蝥胺、甲基斑蝥胺、去甲斑蝥素等。这些化合物较斑蝥素毒性明显降低,并且药理作用更加明确。这对于进一步开发利用药用斑蝥资源,造福人类健康,具有重要的指导作用。本文对斑蝥素衍生物斑蝥酸钠(sodium cantharidate,SCA)的化学组成、作用机制、临床应用以及新药研发等综述如下:1化学组成斑蝥酸钠是斑蝥素与氢氧化钠共热时水解生成[2]。斑蝥酸钠不仅保持了斑蝥素特有的抗癌活性,且毒副作用比斑蝥素小。斑…     

斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株毒性作用的研究

目的:探讨斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株的毒性作用. 方法:采用5,10,20 μg/ml斑蝥酸钠作用于EJ细胞株2,4,24,48 h后,观察细胞形态改变,MTT法检测药物对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞增殖周期的改变以及细胞凋亡情况. 结果:5 μg/ml斑蝥酸钠作用2,4 h后细胞无明显改变,10,20 μg/ml作用2,4 h后细胞出现水肿、空泡、核固缩以及细胞溶解现象;药物作用细胞后其抑制率显著增高(P<0.05);细胞周期中G2/M期延长,细胞凋亡明显增加(P<0.05). 结论:斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株有明显的毒性作用,通过诱导细胞凋亡的途径抑制细胞生长.     

斑蝥酸钠体外诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨斑蝥酸钠体外诱导肝癌细胞的凋亡。方法 :应用MTT法、流式细胞仪、透射电镜和琼脂糖凝胶电泳综合分析肝癌细胞的变化。结果 :斑蝥酸钠作用 4 8h使肝癌细胞生长明显抑制 ;细胞凋亡率达 4 0 .0 2 %±2 .0 5 % ,并出现典型的凋亡峰 ,细胞增殖于G2 +M期阻滞 ;细胞核染色质出现凝集、边集等超微结构变化 ;细胞DNA电泳也显示了凋亡特有的“梯子”状条带。结论 :斑蝥酸钠体外可诱导肝癌细胞的凋亡 ,细胞生长阻断在G2 +M期。     

斑蝥酸钠对肝癌细胞HepG_2增殖抑制作用的研究

目的研究斑蝥酸钠（cantharidin,CTD）对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用和机制。方法采用免疫组化染色法（I mmunohistochemistry,I H）和33528染色法观察斑蝥酸钠对HepG2细胞增殖的抑制作用,并观察肝癌细胞凋亡的形态学变化及不同剂量斑蝥酸钠对HepG2细胞凋亡率的影响。结果 1.0 mg/L以上斑蝥酸钠对人肝癌细胞HepG2的增殖有显著抑制作用（P〈0.01）,最高凋亡率（47.24%）出现于高剂量组（5.0 mg/L）。结论斑蝥酸钠对人肝癌细胞HepG2的增殖有显著抑制作用,是治疗肝癌较理想的药物之一。     

斑蝥酸钠对肝癌细胞SMMC-7721周期、凋亡及端粒酶影响研究

目的:研究斑蝥酸钠注射液(Disodium cantharidinate)对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721增殖、凋亡及端粒酶的影响。方法:运用倒置显微镜观察细胞形态,采用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞的周期和凋亡情况,Elisa试剂盒检测端粒酶。结果:斑蝥酸钠注射液能明显抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖,促使其凋亡,并能使其端粒酶浓度明显降低。结论:降低肝癌细胞SMMC-7721端粒酶浓度,抑制其增殖,促使其凋亡可能是斑蝥酸钠抗肿瘤作用的主要机制之一。     

斑蝥酸钠诱导人胃癌BGC823细胞凋亡的实验研究

目的观察斑蝥酸钠体外对人胃癌BGC823细胞凋亡的影响。方法应用MTT法及流式细胞仪检测、分析斑蝥酸钠对人胃癌BGC823细胞的生长和凋亡的影响。结果不同剂量斑蝥酸钠作用24 h均可使人胃癌BGC823细胞生长明显抑制(P<0.01),并出现典型的凋亡峰,细胞增殖阻滞于G1期。结论斑蝥酸钠对人胃癌BGC823细胞生长有抑制作用,可诱导胃癌细胞凋亡。      

去甲斑蝥酸钠增加白细胞机理初探

本文实验结果显示去甲斑蝥酸钠具有升高小鼠白细胞的作用,同时还可促使更多的骨髓造血干细胞进入细胞周期;文中讨论了这种作用的可能机理及其临床意义。     

苯乙酸钠对肺癌A549细胞生长的影响

目的:研究抗肿瘤药物苯乙酸钠(NaPA)对体外培养的人肺腺癌细胞株A549抑制率、细胞周期和凋亡的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色、流式细胞仪等方法,观察不同浓度NaPA对人肺腺癌A549细胞株生长、细胞周期和凋亡的影响。结果:NaPA对A549有明显的生长抑制作用,且呈剂量时间依赖性,最大抑制率可达79%。NaPA可阻滞A549细胞的细胞周期,使G1/G0期细胞增多,S期细胞减少,同时诱导A549细胞的凋亡,凋亡率最高可达30.5%。结论:苯乙酸钠抑制A549细胞生长,其抑制作用可能是通过NaPA使细胞周期抑制于G1/G0期和诱导细胞凋亡而实现。     

高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

目的 研究高纯度大豆卵磷脂对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用.方法 测定高纯度大豆卵磷脂对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行正式试验,分别观察高纯度大豆卵磷脂接触CHL 6 h,24 h及加S9后6 h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定.结果 染毒6 h,24 h及加S9后染毒6 h染色体畸变为阴性.结论 高纯度大豆卵磷脂不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用.     

人参皂苷Rb3对中国仓鼠肺细胞染色体畸变作用

目的研究人参皂苷Rb3对中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变作用。方法测定人参皂苷Rb3对CHL细胞的半数抑制浓度(IC50),根据IC50设立不同剂量组,进行染色体畸变试验,分别观察人参皂苷Rb3接触CHL细胞6 h、24 h及加S9后6 h染色体的畸变情况,根据标准进行结果判定。结果染毒6 h、24 h及加S9后染毒6 h染色体畸变为阴性。结论人参皂苷Rb3不能引起CHL细胞染色体产生畸变作用。     

米托蒽醌对中国仓鼠卵巢细胞周期的阻断

作者用显微细胞光度计和细胞计数等方法研究米托蒽醌对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞增殖周期的影响。结果表明,无论是30分钟还是24小时处理,米托蒽醌均抑制CHO细胞生长,且随药物浓度增大,抑制作用加强。用0.10μg/ml、1.00μg/ml米托蒽醌处理对数生长细胞30分钟,换新鲜培养液继续培养23.5小时后,与对照组相比,细胞核面积增大,核质疏松网状;显微细胞光度计测定未发现异常DNA增生;但群体中G_1期细胞频数减少,峰值后移,S期和G_2细胞频效显著增多,说明米托蒽醌使细胞停留在G_2期,阻断CHO细胞周期进程。     

大鼠肝脏细胞及中国仓鼠肾脏成纤维细胞转染条件的优化

目的:应用携带有报告基因β-Gal的质粒对于使用Lipofectamine 2000转染大鼠肝脏细胞及中国仓鼠肾脏成纤维细胞条件进行优化.方法:在96孔板上按不同比例混合Lipofectamine 2000和质粒DNA后转染大鼠肝脏细胞及中国仓鼠肾脏成纤维细胞,成功转染的细胞因可表达β-Gal可分解底物X-gal在染液的存在下可使细胞呈蓝色,故计算蓝色细胞的比例即可了解转染的效率.应用方差分析的方法进行统计分析.结果:对于BHK细胞,当DNA与Lipofectamine 2000的比例为0.27∶0.8(μg∶μL)时转染效率最高,为(43.2±9.3)%;对于BRL细胞,DNA与Lipofectamine 2000的比例为0.10∶0.3(μg∶μL)时转染效率最高,可达(5.7±1.3)%.结论:Lipofectamine 2000可有效转染哺乳动物细胞,不同细胞有不同的最佳转染条件.     

中国仓鼠细胞CTP合成酶cDNA的克隆及测序

用ＲＡＣＥ－ＰＣＲ方法合成了中国仓鼠细胞ＣＴＰ合成酶的ｃＤＮＡ，经克隆到载体并转化大肠杆菌。从大小不同的插入片段中筛选出一个１．３ｋｂ的片段进行测序。结果表明，此片段为ＣＴＰ合成酶的ＣＤＮＡ。     

亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响

目的：研究亚硒酸钠对SGC-7901增殖的影响.方法： 应用集落形成试验研究了亚硒酸钠对SGC-7901细胞集落形成的影响;应用流式细胞仪检测了亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长周期的影响;应用电镜及流式细胞仪观察了亚硒酸钠诱导SGC-7901细胞凋亡的作用.结果： 亚硒酸钠对SGC-7901细胞的集落形成有明显的抑制作用,其抑制作用与其作用浓度和作用时间呈正相关.流式细胞仪检测显示亚硒酸钠作用SGC-7901细胞24 h后,细胞周期发生改变,G1期细胞百分率减少,S期细胞百分率增加,DNA直方图上出现典型的亚二倍体细胞的“凋亡峰”;电镜下可见细胞核固缩,染色质凝集呈新月形紧贴于核膜周边,核膜扭曲等特征.结论： 亚硒酸钠对SGC-7901细胞的增殖具有抑制作用,抑制作用程度与作用浓度和时间呈正相关;亚硒酸钠抑制SGC-7901细胞生长的机理之一是诱导细胞凋亡.     

斑蝥酸钠对人肺癌LAC细胞周期的影响及分子机制的研究

【目的】探讨斑蝥酸钠对人肺癌LAC细胞周期的影响及其分子机制。【方法】取指数生长期的LAC细胞,分别加入2.5、12.5、25μg/mL的斑蝥酸钠和20μg/mL羟基喜树碱(HCPT),并以生理盐水作阴性对照,每组均设3个复孔;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测斑蝥酸钠对人肺癌LAC细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪定量检测药物作用后肿瘤细胞凋亡及p53、bcl-2基因的蛋白表达。【结果】斑蝥酸钠具有显著性抑制人肺癌LAC细胞增殖的作用,其抑瘤效应优于HCPT。斑蝥酸钠作用于人肺癌LAC细胞后引起S期细胞明显减少,细胞被阻止于G0/G1期,部分细胞发生凋亡,效应优于HCPT(P<0.01)。经斑蝥酸钠作用后,LAC细胞的p53基因表达上调,而bcl-2基因表达下调。【结论】斑蝥酸钠抑制人肺癌LAC细胞增殖的作用可能与其能上调p53基因、下调blc-2基因的表达和诱导LAC细胞凋亡有关。     

肺癌原代细胞耐药基因的表达和化疗敏感性的研究

目的探讨ATRA与VD3逆转肺癌细胞多药耐药，提高肺癌细胞化疗敏感性的机制。方法应用原代细胞培养、MTT比色、RT—PCR等方法观察ATRA联合VD3对人肺癌原代细胞、肺腺癌A549细胞株化疗敏感性及MRP、LRP表达水平的影响。结果人肺癌原代细胞MRP、LRP高表达，其表达与肿瘤病理无明显相关，MRP表达阳性与ADM、VP-16、VCR的耐药相关，LRP表达阳性与DDP、CBP、ADM、VP-16、VCR的耐药相关。结论MRP、LRP在肺癌尤其非小细胞肺癌中高表达，可反应肿瘤细胞多药耐药性；ATRA或VD3可下调肺腺癌MRP、LRP基因的表达水平，从而提高肺腺癌的化疗敏感性。     

氨氯吡啶酸对小鼠骨髓细胞微核及CHL细胞染色体畸变的影响

目的：从体内和体外2个试验体系检测95％氨氯吡啶酸原药的致突变性,预测其遗传危害,为其安全使用提供科学依据。方法：采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、中国仓鼠肺细胞(CHL)染色体畸变试验方法检测95％氨氯吡啶酸原药的致突变性。结果：95％氨氯吡啶酸原药各剂量组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率与阴性对照组比较,差异无统计学意义...