胃癌患者外周血CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞检测及临床意义

目的观察CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞与胃癌患者的关系,探讨其临床意义。方法用流式细胞术分析胃癌患者外周血淋巴细胞中Treg细胞的表达。结果胃癌患者手术前、后外周血淋巴细胞中Treg细胞比例分别为(6.35±1.85)和(4.54±1.42)%(P<0.05),术后复发时比例为(7.17±1.55)%;化疗前、后分别为(6.47±1.97)%和(8.81±2.01)%(P<0.05)。早期胃癌Treg细胞为(5.88±1.54)%,明显低于进展期胃癌(7.04±1.66)%(P<0.05)。结论胃癌患者外周血Treg细胞在术后1周比例减少,复发时比例上调,提示其参与了胃癌发生、发展的全过程。化疗后Treg细胞增加,可能与药物诱导的增值分化有关。不同进展期病人外周血中Treg细胞的水平有助于了解病情,判断预后。     

Survivin基因在人胎儿血中的表达

目的:观察Survivin基因在人胎儿血中的表达及其意义。方法:实验于2003-10/2004-03在广西医科大学第一附属医院血液科完成。①实验材料:50份胎儿血、40份足月脐带血分别取自广西民族医院及南宁第二人民医院妇产科和本院妇产科,产妇均知情同意,并经医院伦理委员会批准。35份成人外周血为无血液系统疾患的健康献血者。②实验方法:无菌操作条件下取EDTA抗凝骨髓液4mL,常规分离单个核细胞,洗涤后制备合适密度备用。采用RT-PCR技术对50份孕龄为18～32周人胎儿血、40份足月脐带血和35份成人外周血Survivin基因m RNA表达水平进行检测。结果:①Survivin基因在人胎儿血、脐带血及成人外周血表达阳性率的比较:人胎儿血Survivin基因mRNA表达阳性率高于脐血组,差异有显著性意义(68.0%,47.5%,P<0.05)。②Survivin基因在人胎儿血及脐带血中表达水平的比较:人胎儿血Survivin基因mRNA表达水平高于脐带血,差异有显著性意义(0.575±0.276,0.444±0.626,P<0.05)。③Survivin基因表达水平与孕龄的关系:Survivin基因mRNA表达水平随着孕龄增加有下降趋势,对Survivin基因mRNA表达水平与孕龄的相关性进行直线相关分析,结果显示两者之间存在负相关(r=-0.373,P=0.030)。结论:①Survivin基因在人胎儿血及脐带血中均有表达,Survivin基因在人胎儿血中表达水平高于脐带血,在成人外周血中检测不到Survivin基因表达。②随着孕龄增加,人胎儿血中Survivin基因表达水平随之下降。③Survivin基因可能在人胎儿发育过程中起一定作用,具体机制还需进一步研究探讨。     

胃癌患者外周血癌胚抗原、细胞角蛋白20及生存素基因检测的临床意义

目的:研究癌胚抗原(CEA)mRNA、细胞角蛋白20(CK20)mRNA及生存素(survivin)mRNA与胃癌患者诊断、转移的相关性,评估其检测的临床应用价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法联合检测79例胃癌、56例癌前病变及50例正常对照者外周血survivin、CEA、CK20基因的转录,并分析其与临床病理及预后关系。结果:正常对照组外周血未检测到CEA、CK20、survivin mRNA的转录,癌前病变患者survivin转录检测的阳性率为16.1%,平均拷贝数为1.6±0.8。胃癌外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录阳性率分别为48.1%、60.8%、87.3%,其阳性率和肿瘤的分期、淋巴结转移等相关。Survivin mRNA高转录者5年生存率显著低于低转录者。胃癌患者外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录的联合检测对肿瘤预后的判断具有较高的特异度和阳性似然比。结论:实时RT-PCR联合检测胃癌外周血中多个肿瘤标志物基因的表达,是一种较为理想的监测肿瘤复发、判断预后的方法。     

血清结肠癌转移相关基因-1在胃癌患者化疗疗效预测中的效果

目的探讨血清结肠癌转移相关基因-1(MACC1)对胃癌患者化疗疗效的预测作用。方法 MTT法检测MACC1过表达、低表达的胃癌细胞株BCG-823对5-氟脲嘧啶(5-Fu)敏感性的差异。RT-PCR检测MACC1过表达、低表达的胃癌细胞中MACC1 mRNA表达水平。ELISA法检测MACC1过表达、低表达细胞培养液中MACC1蛋白表达水平。分析晚期胃癌患者化疗前外周血中MACC1表达水平与化疗疗效的关系。结果干扰MACC1后,BCG-823细胞中mRNA表达水平下降,过表达细胞中的mRNA表达水平上升,其趋势与细胞培养液中MACC1蛋白表达水平一致。干扰MACC1后,BCG-823对5-Fu敏感性增高,过表达MACC1后其对5-Fu敏感性降低。晚期胃癌患者MACC1蛋白含量较低的患者化疗疗效好于MACC1含量较高的患者。结论 MACC1能够影响胃癌病人对化疗的敏感性,可以有效预测患者化疗疗效。     

外周血TSGF、SCC-Ag、CA125水平表达对宫颈癌预后评估的价值

目的探究宫颈癌患者化疗前检测外周血中TSGF、SCC-Ag、CA125表达水平对预后的评估价值。方法选取本院2013年1月～2014年1月确诊为I期的宫颈癌患者70例,在治疗结束后随访3年,记录患者肿瘤复发情况,比较不同预后患者化疗前外周血TSGF、SCC-Ag、CA125表达水平,分析上述指标对不同预后的评估价值。结果 3年无复发的患者化疗前外周血TSGF、SCC-Ag、CA125表达水平(54.63±12.35 U/mL、2.42±0.60μg/L、27.28±12.28 U/mL)明显低于3年内复发患者的(78.29±18.29 U/mL、3.89±1.25μg/L、36.43±13.05 U/mL)(P0.05)。Spearman相关性分析显示,患者化疗前外周血TSGF、SCC-Ag、CA125表达水平与治疗后3年内复发风险呈正相关(r=0.535、r=0.329,r=0.744,P0.05)。进一步的受试者工作特性曲线(ROC)分析结果显示,宫颈癌患者化疗前对外周血TSGF、SCC-Ag、CA125表达水平联合预测其3年内肿瘤复发的敏感度、特异度及准确性均较高。结论早期宫颈癌患者化疗前对外周血TSGF、SCC-Ag、CA125表达水平联合检测的结果可作为患者预后评估的指标之一。     

外周血生存素mRNA和血管内皮细胞生长因子mRNA对肺癌的诊断价值

目的探讨外周血中生存素(survivin)mRNA和血管内皮细胞生长因子(VEGF)mRNA检测对肺癌的诊断价值。方法选取57例肺癌患者为肺癌组,40例肺部良性病变患者为良性疾病组,30例健康体检者为对照组,检测三组外周血中Survivin mRNA和VEGF mRNA水平,分析两种指标对肺癌的诊断价值。结果肺癌组患者外周血Survivin mRNA及VEGF mRNA表达水平均明显高于良性疾病组和对照组,差异具有显著性(P<0.05)。以Survivin mRNA>1.45、VEGF mRNA>2.13为诊断肺癌的临界值,两者诊断的灵敏度为80.7%、78.9%,特异度为82.9%、78.6%。采用平行试验分析Survivin mRNA和VEGF mRNA联合检测对肺癌的诊断价值,其灵敏度为93.0%,特异度为74.3%。不同性别、年龄的肺癌患者外周血Survivin mRNA和VEGF mRNA表达水平比较,差异无显著性(P>0.05);不同类型、TNM分期以及有无淋巴结转移患者外周血Survivin mRNA和VEGF mRNA表达水平比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论外周血Survivin mRNA和VEGF mRNA可作为诊断肺癌的理想标志物,其水平检测有助于对患者组织类型、TNM分期以及淋巴结转移的判断。     

外周血CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA水平与乳腺癌的关系

目的研究外周血癌胚抗原(CEA)、生存素(Survivin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)mRNA表达与乳腺癌的关系。方法采用逆转录实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测54例乳腺癌患者和23名正常对照组外周血MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA、CEAmRNA和Survivin mRNA的表达水平。以正常对照组结果为正常参考范围,分析乳腺癌患者外周血CEA mRNA和Survivin mRNA表达的阳性率。结果乳腺癌患者外周血可检测到不同水平的CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达。Ⅰ/Ⅱ期及Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌组外周血MMP-2 mRNA表达量高于正常对照组(P<0.01);TIMP-2/MMP-2比值则低于正常对照组(P<0.05、P<0.01);Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达量高于正常对照组(P<0.01)。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血MMP-2 mRNA、CEA mRNA、Survivin mRNA表达量及TIMP-2/MMP-2比值与Ⅰ/Ⅱ期乳腺...     

外周血CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA水平与乳腺癌的关系

目的研究外周血癌胚抗原（CEA）、生存素（Survivin）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）mRNA表达与乳腺癌的关系。方法采用逆转录实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）检测54例乳腺癌患者和23名正常对照组外周血MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA、CEAmRNA和Survivin mRNA的表达水平。以正常对照组结果为正常参考范围,分析乳腺癌患者外周血CEA mRNA和Survivin mRNA表达的阳性率。结果乳腺癌患者外周血可检测到不同水平的CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达。Ⅰ/Ⅱ期及Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌组外周血MMP-2 mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）;TIMP-2/MMP-2比值则低于正常对照组（P〈0.05、P〈0.01）;Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血MMP-2 mRNA、CEA mRNA、Survivin mRNA表达量及TIMP-2/MMP-2比值与Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达的阳性率明显高于Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者（P〈0.01、P〈0.05）。结论采用逆转录real-time PCR检测外周血CEA、Survivin、MMP-2 mRNA的表达以及TIMP-2/MMP-2比值可以成为一种无创性乳腺癌辅助诊断、分期、转移的方法。     

DC-CIK联合化疗对晚期肾癌患者外周血中微转移表达的影响

目的:检测转移性肾细胞癌(mRCC)患者DC-CIK联合化疗前后外周血中G250 mRNA表达的变化,探讨其与生物化学治疗疗效的相关性.方法:31例mRCC患者首先经实时定量逆转录-聚合酶链反应(real-time quantitative RT-PCR,qRT-PCR)检测外周血G250 mRNA为阳性表达,予2周期的DC+CIK联合化疗后,再次检测外周血中G250 mRNA阳性表达情况,并评价DC-CIK联合化疗对肿瘤的疗效.结果:生物化学治疗后31例G250 mRNA阳性的患者外周血中18例(58.1％)表达下降,5例(16.1％)无明显变化,8例(25.8％)表达水平呈上升,与化疗前相比差异有统计学意义(P＜0.01);治疗后,11例部分缓解(PR)(35.5％),9例稳定(SD)(29.0％)、11例进展(PD) (35.5％);mRCC患者外周血中G250 mRNA表达变化与生物化疗疗效显著相关(r=0.498).结论:检测mRCC患者外周血中G250 mRNA变化可用于评价生物化疗的疗效.     

非小细胞肺癌组织中Survivin蛋白的表达及意义

目的探讨凋亡抑制基因Survivin在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表迭情况及其与预后的关系。方法100例NSCLC石蜡标本，应用免疫组织化学SP法及原位杂交方法检测Survivin在NSCLC组织中的表达情况。结果Survivin蛋白阳性表达率为72，0％，Survivin mRNA阳性表达率为76，0％。随TNM分期增高，Survivin蛋白及mRNA阳性表达率增高。淋巴结转移者较无转移者阳性表达率高。Survivin阳性表达与NSCLC组织学类型、分化程度无相关性。Survivin mRNA水平与其蛋白水平表达一致。结论NSCLC组织中Survivin mRNA与蛋白均高表达；Survivin蛋白水平和mRNA水平表达一致；Survivin阳性表达与TNM分期及淋巴结转移密切相关。     

外周血生存素的表达与胃癌生物学行为相关性研究

目的以反转录-聚合酶链式反应-酶联免疫测定(RT-PCR-ELISA)方法,检测胃癌患者外周血中生存素基因的表达。并分析其与胃癌生物学行为的关系,探讨其作为评价胃癌生物学行为及预后检验指标的可能性。方法收集53例胃癌患者外周血,以RT-PCR-ELISA方法检测胃癌患者外周血中生存素mRNA的表达,比较其是否与肿瘤部位、大小、浸润深度、分化程度、淋巴结转移和临床分期具有相关性。结果 53例胃癌外周血中60.4%(32例)生存素mRNA表达阳性。肿瘤>5cm及≤5cm生存素mRNA表达率分别为78.3%、46.0%。浸润深度达浆膜层者外周血生存素mRNA表达率74.2%,高于侵及黏膜下层及肌层的表达率(33.3%),淋巴结有转移者外周血表达率为75.0%,高于无淋巴结转移的表达率(29.4%)。结论生存素mRNA在外周血的表达与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和临床分期均有明显相关性,但与肿瘤部位、分化程度无明显相关。外周血生存素的表达可作为评价胃癌生物学行为及预后的参考指标。     

胃癌患者外周血hTERT mRNA转录水平及临床意义

目的研究胃癌患者外周血中hTERT mRNA的表达，探讨其作为胃癌肿瘤细胞标志物的可行性。方法应用实时荧光定量RT—PCR技术检测96例原发性胃癌、50例胃溃疡和60例健康献血员血清中hTERT mRNA表达水平，并对阳性PCR产物进行克隆、测序。结果胃癌组hTERT mRNA表达水平（12．78±0．97）copies／ml，显著高于良性胃溃疡组（0．93±0．23）copies／ml和健康对照组（0．29±0．17）copies／ml。多变量分析表明，hTERT表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤生长方式、肿瘤分化程度、淋巴管侵犯、静脉侵犯均无显著相关性（P〉0．05），而与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、pTNM分期及CEA有显著相关性（P〈0．05）。结论qRT—PCR具有快速、敏感和特异的特点。定量分析外周血hTERT mRNA转录水平可作为胃癌的肿瘤细胞标志物之一，用于早期诊断。     

CAIX／MN／G250mRNA在肾癌根治术前后表达的检测

目的探讨肾癌相关蛋白CAIX／MN／G250mRNA在肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）手术前后的表达水平及临床意义。方法应用RT—PCR技术检测57例RCC患者癌组织及术前外周血中CAIX／MN／G250mRNA的表达情况,并选择15例癌旁肾组织、15例正常肾组织及40例健康人外周血作对照,对术前外周血CAIX／MN／G250mRNA阳性RCC患者术后随访4周,并对其外周血CAIX／MN／G250mRNA水平进行半定量检测。结果57例RCC患者,其CAIX／MN／G250mRNA阳性率在外周血中为59．6％（34／57）,癌组织中为78．9％（45／57）,显著高于对照组（P〈0．01）。在肾透明细胞癌患者的外周血及癌组织中,CAIX／MN／G250mRNA的阳性率分别为76．2％（32／42）和95．2％（40／42）,均显著高于相应对照组（P〈0．01）。RCC患者外周血及癌组织中CAIX／MN／G250mRNA阳性率均随临床分期的增加而增加（P〈0．01）。34例外周血阳性患者CAIX／MN／G250mRNA水平术前2h、术后7、14、21和28d分别为0．54±0．13、0．56±0．15、0．34±0．13、0．29±0．18和0．22±0．11。RCC患者外周血CAIX／MN／G250mRNA水平在肾癌根治术后随时间的推移呈下降趋势（P均〈0．05）。结论使用RT—PCR技术检测CAIX／MN／G250mRNA对肾癌尤其是透明细胞癌有较好的特异性和敏感性。外周血CAIX／MN／G250mRNA检测可作为肾癌微转移的检测指标用于RCC的诊断、疗效评价及预后判断。     

原发性肝癌患者外周血生存素检测的意义

目的 评价原发性肝癌患者外周血生存素检测对于疾病诊断的价值,与甲胎蛋白(AFP)、肿瘤临床分期的关系.方法 将研究对象分为原发性肝癌组(n=56)、肝硬化对照组(n=22)和正常对照组(n=28).原发性肝癌组患者按照AFP浓度分为AFP正常、升高2个亚组或按照肿瘤临床分期分为3个亚组.各组空腹采集静脉血3 ml,通过双抗体夹心酶联免疫吸附测定法检测生存素浓度.结果 原发性肝癌组外周血生存素浓度高于肝硬化对照组和正常对照组,(87.6±26.1)ng、L VS(51.25±31.3)ng、L、(60.2±32.9)ng、L(P＜0.01);肝硬化对照组与正常对照组外周血生存素浓度差异无统计学意义.原发性肝癌组中AFP正常亚组与升高亚组外周血生存素浓度差异无统计学意义,不同临床分期3个亚组外周血生存素浓度差异亦无统计学意义.根据试验结果绘制受试者工作特征(ROC)曲线.曲线下面积为0.797(P＜0.01).结论 外周血生存素可能是一种有价值的原发性肝癌血清学非特异性辅助诊断指标,对于初次诊断及复发监测具有一定的价值,并有助于血清AFP水平正常的原发性肝癌及早期原发性肝癌诊断.     

Survivin在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的 研究Survivin在正常甲状腺组织和甲状腺癌中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化SP法及实时定量PCR方法对1 2例正常甲状腺组织和35例手术切除的甲状腺癌组织进行Survivin的检测.结果 1.SP法：Survivin在正常甲状腺组织中、乳头状癌中、甲状腺滤泡癌中、髓样癌中,阳性表达率分别为16.7％、60％、69.2％、91.6％,随甲状腺癌的组织学恶性度增高,阳性表达率增高,差异均具有显著性（P＜0.05）.2.TR PCR法：Survivin在正常甲状腺组织中、乳头状癌中、甲状腺滤泡癌中、髓样癌中的相对表达值为32.148±9.513、59.154±10.086、67.25±8.478、86.898±6.944,与正常甲状腺组织相比,Survivin在各组织分型的甲状腺癌中表达显著提高（P＜0.05）.结论 Survivin与甲状腺癌的组织学类型密切相关,有望成为甲状腺癌患者预后判断的重要指标之一.     

Survivin对鉴别诊断良恶性腹水的临床价值

目的探讨腹水中生存素（Survivin）对良、恶性腹水鉴别诊断的价值。方法收集腹水标本62例，分为良性腹水组（n=22）和恶性腹水组（n=40），采用ELISA法测定Survivin，并与腹水细胞学检查结果进行对比分析。结果恶性腹水组Survivin水平为（39．25±14．30）ng／L，明显高于良性腹水组Survivin水平（20．92±6．35）ng／L，（P〈0．01）。卵巢癌引起的腹水中Survivin的水平（51．26±13．70）ng／L显著高于胃癌组（34．51±12．00）ng／L、胰腺癌组（30．72±7．72）ng／L、肝癌组（33．26±10．31）ng／L（P〈0．05）。Survivin诊断恶性腹水的敏感性为80％，特异性为86．4％，诊断准确率为82．3％。Survivin诊断恶性腹水的敏感性明显高于腹水细胞学检查（P〈0．05）。结论腹水中Survivin测定有助于良、恶性腹水的鉴别诊断。恶性腹水中Survivin的含量对恶性腹水的组织来源可能有一定的鉴别诊断作用。     

胃癌患者肿瘤组织和外周血中细胞毒性T细胞的相关性分析

目的研究胃癌患者肿瘤浸润淋巴细胞CD8^＋CD28^＋细胞及CD8^＋CD28^-细胞数量与外周血CD8^＋CD28^＋细胞及CD8^＋CD28^-细胞数量的相关性。方法采用流式细胞术对60例胃癌患者的肿瘤浸润淋巴细胞及外周血淋巴细胞的CD8^＋CD28^＋细胞及CD8^＋CD28^-细胞进行检测，采用直线相关分析两者的相关性。结果胃癌患者外周血淋巴细胞CD8^＋CD28^-、CD8^＋CD28^＋细胞分别为（26．13±8．17）％和（8．15±4．00）％；肿瘤组织中肿瘤浸润淋巴细胞CD8^＋CD28^-、CD8^＋CD28^＋细胞分别为（36．98±15．30）％、（6．02±4．37）％。两者之间具有正相关性（r分别为0．602、0．387，P〈0．01）。结论胃癌患者外周血CD8^＋CD28^-、CD8^＋CD28^＋细胞的检测对了解患者的免疫状况具有一定的价值。     

SEMA3B在胃癌中的表达和临床意义

摘要：目的探讨SEMA3B在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法应用Western Blot及RT—PCR方法检测60例胃癌患者癌组织和正常胃粘膜组织的SEMA3B蛋白及mRNA表达量变化。结果胃癌组织中SEMA3BmR—NA表达量明显高于胃正常黏膜（0．18±0．04vs0．36±0．08，P=0．009〈0．05）。结论SEMA3B在抑制胃癌的发生发展过程中具有重要作用。     

初发免疫性血小板减少症患者外周血中维生素D及其受体mRNA的表达水平和意义

为了探讨维生素D（VD）对初发免疫性血小板减少症（ITP）发病与治疗的作用,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测45例初发ITP患者和30例健康体检者外周血中25羟基维生素D3[25（OH）D3]和1,25-二羟基D3[1,25（OH）2D3]的浓度,利用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）法检测患者外周血VD受体（VDR）mRNA表达水平。研究结果表明,ITP患者外周血中25（OH）D3（10.6±7.7 ng/ml）和1,25（OH）2D3（69.9±29.0 pg/ml）的浓度明显低于健康对照组（13.7±9.1 ng/ml,87.3±19.9 pg/ml）（P〈0.05）,而VDR mRNA的表达（1.588±0.127）明显高于健康对照组（1.055±0.734）（P〈0.05）。结论：VD水平及其受体的表达异常可能参与了ITP的发病,VD及类似物可用于ITP的治疗。     

原发性高血压患者GMP-140的研究—附62例报告

目的：探讨原发性高血压（essential hypeaension,EH）患者外周血中血小板仪颗粒膜蛋白-140（platelet alpha granule membrane protein-140,GMP-140）水平及其单个核细胞中GMP-140基因的表达情况。方法：采用ELISA法测定62例EH患者（EH组）和30名健康体检者（对照组）外周血血清GMP-140含量,用逆转录-PCR法检测外周血单个核细胞中GMP-140mRNA的表达情况。结果：EH组外周血血清GMP-140为（190±70）μ/L,明显高于对照组的（122±50）μg/L（P〈0.01）;EH组单个核细胞GMP-140mRNA表达水平为0.58±0.17,与对照组0.26±0.11比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：EH患者存在GMP-140水平升高,外周血单个核细胞的GMP-140mRNA表达上调可能是EH患者外周血GMP-140含量增高的机制之一。