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荧光定量PCR与RT-PCR技术检测HCV-RNA的比较观察 总被引:2,自引:1,他引:2
目的 比较荧光定量PCR与RT-PCR(定性)检测不同检材中的HCV-RNA,评价荧光定量PCR技术测定HCV-RNA水平的价值。方法 采用荧光定量PCR及RT-PCR(定性)技术同时检测了71例血液透析患者的血清,血浆,淋巴细胞、尿液标本中HCV-RNA。结果 血清、淋巴细胞,尿液标本中HCV-RNA的荧光定量PCR检出率(46.38%,80.00%),分别高于相应标本中HCV-RNA的RT-P 相似文献
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干扰素治疗前丙肝患者血清及外周血单个核细胞中HCV—RNA的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
本文采用RT-PCR方法对26例干扰素治疗前丙肝患者血清HCV-RNA进行检测,并对14例血清HCV-RNA阴性的标本进行外周血单个核细胞中HCV-RNA进行检测,发现26例血清标本中HCV-RNA阳性率为26.9%,而14例血清HCV-RNA阴性标本,其PBMC中HCV-RNA有3例阳性,阳性率为21.1%。因此,PBMC中HCV-RNA是丙肝病毒血症的又一个诊断指标,是否可作为干扰素疗效判断的 相似文献
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设计了HBV和HCV各一对引物,建立了复合PCR,并对临床标本进行检测,5例HBsAg和HCV抗体均阳性者,其HBV-DNA和HCV-RNA均阳性;20例单HBsAg阳性标本,11例单HBV-DNA阳性,5例HBV-DNA和HCV-RNA均阳性;20份单HCV抗体阳性者,HCV-RNA均阳性,3例合并HBV-DNA阳性;10例慢性NANB抗HCV阴性肝炎标本8份HCV-RNA,1例HBV-DNA和 相似文献
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本文用本所自己合成的引物,对30份怀疑HCV感染血清进行HCVRNART-PCR检测。该30份血清中,22份抗-HCV阳性,其中18份HCVRNA为阳性,8份抗-HCV阴性血清及怀疑阳性血清中,2份HVCRNA为阳性。结果提示,抗-HCV抗体试剂盒用于检测急性HCV感染有其不足之处,结合PCR检测HCVRNA的方法可提高急性HCV感染的检出率。 相似文献
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目的 探讨人血清和外周血单个核细胞(PBMC)中丙型肝炎病毒(HCV)RNA与血清IgG和IgM抗体联合检测对丙型肝炎的诊断价值。方法对以ELISA方法检测所得的46例HCV—IgG阳性的标本用逆转录套式聚合酶锭反应(RT—NestedPCR)检测血清和PBMC中HCVRNA,同时用ELISA方法检测血清中HCV—IgM。结果血清中有17例HCV RNA阳性和6例HCV—IgM阳性,而PBMC中有19例HCVRNA阳性。结论血清中HCV—IgM可作为丙型肝炎的初筛诊断,HCV—IgM可作为HCV近期感染的指标,但二者均不能准确反映病毒在体内的存在情况,而套式PCR方法检测HCVRNA可直接反映HCV在体内的活动情况,其中PBMC中检测HCVRNA的阳性率高于血清,提示HCV可能在PBMC中潜伏乃至复制。 相似文献
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采用逆转录套式聚合酶链反应(RT-nested PCR)和ELISA方法检测血清HCV RNA、抗-HCV,采用鼠单克隆抗体PAP方法检测肝组织内HCV-NS3抗原。结果发现被检测的45例丙型肝炎患者随着病情加重和病程延长,血清抗-HCV和HCV RNA及肝组织HCV-NS3抗原阳性率逐步增高;某些患者抗-HCV和HCV RNA阳性结果不一致;血清HCV RNA阳性肝组织HCV-NS3阳性率明显同 相似文献
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巨细胞病毒即刻早期基因mRNA检测方法的建立 总被引:7,自引:0,他引:7
目的建立快速简便的逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法检测人巨细胞病毒(HCMV)即刻早期(IE)基因mRNA。方法设计合成跨越HCMVIE基因内含子区的一对引物,分别用RTPCR和PCR技术扩增HCMVmRNA和DNA,用Southern杂交鉴定阳性产物。结果HCMVIE基因mRNA表达在感染后6小时即可出现,并持续到感染后至少96小时,RTPCR检测的最低敏感性为100fg总RNA,其他病毒和细胞RNA不能被扩增。结论RTPCR技术检测HCMVmRNA敏感、特异,有望应用于临床作为HCMV活动性感染的早期诊断方法 相似文献
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HCV感染的献血者血清中病毒量的检测及分析 总被引:5,自引:0,他引:5
选取16名经血清HCV-RNAPCR测定为阳性的HCV感染的献血者进行血清病毒含量的检测。这些献血者发生HCV感染的期限约2年,其HCVRNA含量在103.5~105.5拷贝/ml,随着血清中HCVRNA含量的增加,ALT水平异常者的数量似亦相应增加。由于这些HCV感染的献血者均未经过任何与肝炎有关的治疗,所以继续追踪观察的结果将有助于评价血清中病毒含量与HCV致病及预后的关系。 相似文献
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用TthDNA聚合酶行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增丙型肝炎病毒(HVC)5’端非编码序列,对262例肝炎患者血清进行HCVRNA测定,结果HCVRNA阳性者53例,阳性率20.2%。凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗HCVIgG,其中30例测到抗HCV,阳性重叠率56%(30/53);HCVRNA阳性中的15例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录。套式聚合酶链反应检测对照,14例阳性,符合率达93.3%(14/15)。TthDNA聚合酶用于RT-PCR检测HCVRNA5’端非编码序列片段具有敏感性高、特异性强、稳定性好的优点。 相似文献
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王露楠 《国际检验医学杂志》2000,(4)
本文综述了离心及分离血清时间、抗凝剂、贮存温度及样本反复冻融对HCVMRNA测定的影响。表明在临床制备和贮存用于 HCV RNA PCR测定血样本时,应尽量用 EDTA抗凝管,6h内分离血桨;如不用抗凝剂,则在血凝集后立即离心,2h内分离血清;样本长期贮存应在.80℃,避免反复冻融。 相似文献
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TthDNA聚合酶在丙型肝炎病毒RNA检测中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
用TthDNA聚合酶行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增丙型肝炎病毒(HVC)5′端非编码序列,对262例肝炎患者血清进行HCVRNA测定,结果HCVRNA阳性者53例,阳性率20.2%,凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗HCVIgG,其中30例测到抗HCV,阳性重叠率56%(30/53);HCV RNA阳性中的15例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录-套式聚合酶链反应检测对照,14例阳性,符合率 相似文献
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为探讨丙型肝炎IgM抗体测定在血液透析患者中的临床意义,采秀间接ELISA法检测抗HCV IgM。同时采用ELISA测抗HCV IgG,RT-PCR法测HCV RNA,并进行比较。结果示62例血液透析病人中,抗HCV IgM阳性27例(43.6%),抗HCV IgG阳性29例(46.8%),HCV RNA阳性34例(54.8%),任一项阳性37例(59.7%);抗HCV IgM与HCV RNA检测 相似文献
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样本的处理与贮存对HCV RNA测定的影响 总被引:5,自引:1,他引:5
王露楠 《国外医学:临床生物化学与检验学分册》2000,21(4):199-200
本文综述了离心及分离血清时间、抗凝剂、贮存温度及样本反复冻融对HCV RNA测定的影响。表明在临床制备和贮存用于HCV RNA PCR测定血样本时,应尽量用EDTA抗这,6h分离血浆;如不用抗凝剂,则在血凝集后立即离心,2h内分离血清;样本长期贮存应在-80℃,避免反复冻融。 相似文献
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应用PCR检测丙型肝炎病毒PNA的影响因素 总被引:1,自引:0,他引:1
丙型肝炎病毒RNA的血中浓度非常低,大约为每毫升血液中10^3个拷贝数。RNA酶的降解作用在血液标本中HCV RNA往往迅速被破坏。此外,HCV基因序列高度变异的特性直接影响逆转录多聚酶锭反应HCV RNA的阳性检出率。 相似文献
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逆转录PCR检测丙型肝炎病毒RNA王捷,杨太成,江悦华,王晓怀(广州军区总医院医学实验科,510010)丙型肝炎病毒(HCV)是单股正链RNA病毒,流行病学研究表明,大约90%的输血后肝炎均由HCV引起,原发性肝癌的发生也与HCV感染相关[1]。目前... 相似文献