玻璃化冷冻技术在人类胚胎中的应用价值

目的探讨玻璃化冷冻技术在人类胚胎中的应用价值。方法选择2014年3月~2016年2月在我院生殖中心做试管婴儿的264例不孕不育患者,经患者知情同意后,将实施体外受精-胚胎移植术患者卵裂期胚胎和囊胚符合冷冻标准的胚胎进行玻璃化冷冻保存。根据患者情况解冻胚胎移植,观察胚胎复苏后的临床妊娠效果。结果玻璃化冷冻74个周期,解冻胚胎149枚,解冻后存活胚胎147枚,存活率98.66%;种植胚胎56枚,种植率38.10%;临床妊娠42例(单胎27例,双胎14例,宫外孕1例),临床妊娠率为56.76%。结论玻璃化冷冻法是人类胚胎保存的优选方法,获得了理想的复苏率、种植率和妊娠率。     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床初步应用

目的探讨玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用效果。方法应用玻璃化冷冻保存技术冻存了22例患者的96枚4-16细胞期的早期胚胎。结果对82枚冷冻胚胎进行了解冻,存活65枚,胚胎存活率为79.27%（65/82）,存活胚胎均予移植,种植10枚,种植率为15.38%（10/65）,共进行了25个冷冻胚胎移植周期,获得8例妊娠,妊娠率32%（8/25）。结论玻璃化冷冻保存技术是一种冷冻保存人类早期胚胎的有效方法。     

胚胎玻璃化冷冻技术在辅助生殖治疗中的应用

目的探讨人类卵裂期胚胎玻璃化冷冻在临床治疗中的应用效果。方法经患者知情同意后,将实施体外受精一胚胎移植术患者第3天移植后剩余的符合冷冻标准的胚胎进行玻璃化冷冻保存。如果新鲜周期妊娠失败,根据患者情况解冻胚胎,观察胚胎复苏后的临床妊娠效果。结果玻璃化冷冻84个周期,解冻胚胎207枚,解冻后存活胚胎198枚,存活率为95．7％;完整存活胚胎187枚,完整存活胚胎率为90．3％;种植胚胎41枚,种植率为19．8％;临床妊娠28倒,临床妊娠率为33．3％。早期流产3例,足月分娩5例,20例继续妊娠。结论玻璃化冷冻法适于人类早期胚胎的冷冻保存,获得了理想的复苏率、种植率和妊娠率。     

解剖、生理和组胚学

081623封闭式拉细麦管法玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床结果观察/童先宏…∥现代妇产科进展.—2008,17(8).—613～615,619该文作者在早期实验研究的基础上,用自制的封闭式拉细麦管冷冻保存的人类早期胚胎,一共复苏了151个周期,464枚胚胎,丢失胚胎27枚,胚胎存活率88.79%(388/437),移植周期临床妊娠率21.77%(32/147),种植率9.52%(36/378),流产率12.5%(4/32),诞生18例健康婴儿。IVF组、ICSI组、IVM组三种助孕方式获得的胚胎解冻后的胚胎存活率、临床妊娠率、种植率均无差异(P>0.05)。冷冻前胚胎质量对解冻后移植周期的临床妊娠率有明显的影响。当移植至少一枚Ⅰ级或Ⅱ级胚胎时,其临床妊娠率、种植率和流产率分别是28.72%和12.02%和0%,流产率低于常规的新鲜胚胎移植流产率。作者认为,与采用Cryoloop和Cryotip为装载容器的玻璃化冷冻方法相比,该法的临床妊娠相近,但避免了液氮潜在的污染,是冷冻早期胚胎理想的方法。表3参12(周继铭)081624两种短效曲普瑞林降调节方案诱发排卵效果比较/裴莉…∥现代妇产科进展.—2008,17...     

剩余胚胎继续培养囊胚的潜在价值

目的:探讨在新鲜周期中,经ⅣF/ICSI-ET、冷冻后的剩余胚胎在体外继续培养至囊胚的意义。方法:在新鲜周期中,将D3天发育的胚胎选择评分较高的进行移植,部分胚胎玻璃化冷冻保存后,所剩余的胚胎通过序贯微滴培养法在体外继续培养至囊胚阶段,将优质囊胚进行玻璃化冷冻。在未妊娠患者下一周期将其解冻、移植,比较同时期D3通过玻璃化冷冻解冻移植后的卵裂期胚胎与囊胚期胚胎的植入率、妊娠率、单胎率和多胎率。结果:422例不孕症患者D3天移植冷冻后剩余的胚胎1842枚形成囊胚437枚(23.72%),优质囊胚315枚(17.10%);将优质囊胚行玻璃化冷冻;其中42例患者的62枚囊胚在下一周期解冻后移植,其植入率(41.94%)极显著高于243例患者的536枚卵裂期胚胎解冻后移植的植入率(20.90%)(P<0.01);而妊娠率(54.76%)显著高于解冻后卵裂期胚胎的妊娠率(36.63%)(P<0.05);但是单胎率(71.26%vs 85.71%)和多胎率(28.74%vs 13.64%)无显著差异(P>0.05)。结论:囊胚体外培养可以筛选出具有发育潜能的剩余胚胎,最大限度地利用胚胎,从而提高可用胚胎数和临床妊娠率。     

玻璃化冷冻囊胚复苏移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的妊娠结局比较

目的比较玻璃化冷冻囊胚复苏后移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的临床妊娠结局。方法回顾性分析2013年1月至2014年12月在郑州大学第二附属医院生殖中心行玻璃化冷冻复苏后移植囊胚的不孕症患者134例(134个周期)的妊娠情况,其中卵裂期胚胎培养至囊胚冷冻复苏后移植者79个周期(A组),卵裂期胚胎冷冻复苏后继续培养至囊胚再移植者55个周期(B组)。比较2组患者临床妊娠率、着床率及早期流产率。结果 A组79个周期,复苏囊胚数151个,存活囊胚数133个,复苏率88.08%(133/151);获得可移植囊胚72个周期,妊娠周期46个,妊娠率为63.89%(46/72),着床率51.56%(66/128),早期流产率为15.21%(7/46)。B组55个周期227个胚胎,复苏存活170个胚胎,复苏率74.89%(170/227);其中45个周期共形成可移植囊胚93个,囊胚形成率为54.70%(93/170);获得妊娠周期23个,妊娠率为51.11%(23/45),着床率为36.56%(34/93),早期流产率13.04%(3/23)。A组囊胚复苏率高于B组卵裂期胚胎复苏率(P<0.05),且A组着床率显著高于B组(P<0.05),但2组临床妊娠率、流产率、异位妊娠率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冷冻囊胚复苏移植能获得较高的着床率和妊娠率,囊胚可能是玻璃化冷冻胚胎的较好阶段。     

玻璃化冷冻在卵巢过度刺激综合征全胚胎冷冻中的应用

目的比较慢速程序化冷冻法(慢速法)和玻璃化冷冻法(玻璃化法)对卵巢过度刺激综合征全胚胎冷冻分裂期胚胎发育潜能的影响。方法选择为避免过度刺激而行全胚胎冷冻的不孕患者162例,按其冷冻方法的不同,分成慢速程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,并对其随后进行首次解冻移植的胚胎复苏率、胚胎种植率、妊娠率和多胎妊娠率进行分析。结果玻璃化冷冻组72例胚胎解冻后,其溶解率、复苏率、种植率、妊娠率、多胎妊娠率分别为7.84%、96.08%、52.38%、69.44%和50.00%,慢速程序化冷冻组90例胚胎解冻后,上述指标分别为17.79%、90.38%、30.32%、52.22%和19.15%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冷冻法能够更好地保存胚胎复苏后的发育潜能,更适合卵巢过度刺激综合征患者胚胎的冷冻保存。     

玻璃化冷冻与慢速程序冷冻对人ICSI的D3胚胎的效果观察

目的 　比较冷冻环玻璃化冷冻法与慢速程序冷冻法对人ICSI的D3冷冻胚胎复苏的效果。　方法 　将接受卵母细胞浆内单精子注射-胚胎移植（ICSI-ET）患者的取卵周期移植后剩余的D3胚胎分别进行慢速程序冷冻法或冷冻环玻璃化法冷冻 ,比较胚胎复苏后的存活率、妊娠率等指标。　结果 　玻璃化冷冻复苏101个周期 ,411个胚胎、存活392个（95.4%）,种植率18.2%,临床妊娠45例(44.6%) ,其中 3例流产（6.7%）。慢速程序冷冻57个复苏周期 ,234 个胚胎、存活185 个（79.1% ）, 种植率15%,临床妊娠15例 （26.3%）。玻璃化冷冻法的胚胎复苏存活率、完整胚胎率高于慢速程序冷冻法（P<0.05）;种植率高于慢速程序冷冻,但差异无统计学意义。结论 玻璃化法的冷冻复苏率比传统的慢速程序冷冻法高,更适于人类ICSI的D3胚胎的冷冻保存。     

人卵子玻璃化冷冻原因及其技术在辅助生殖中的应用

目的探讨人卵子玻璃化冷冻的原因及其技术在辅助生殖中的可行性和临床应用价值。方法回顾性研究2008年1月~ 2018年10月在南方医科大学南方医院生殖医学中心行卵子玻璃化冷冻的26例患者共27个取卵周期,分析卵子玻璃化冷冻原 因、卵子解冻后受精情况及临床妊娠结局。结果26例患者27个取卵周期共冷冻卵子274枚,卵子冷冻原因主要包括取卵日男 方精子数量及质量差无可用精子、男方处于各种疾病急性期不适宜取精及男方因各种原因未能到场取精等。共19个周期行卵 子解冻,该19个周期共冻存卵子217枚,解冻后存活176枚,卵子解冻存活率81.11%,其中131枚卵子解冻后行卵胞浆内单精子 注射,正常受精98枚,正常受精率74.81%;卵裂88枚,卵裂率89.80%（88/98）;共形成可移植胚胎53枚,其中优质胚胎36枚,优 质胚胎率36.73%（36/98）。15个移植周期共移植胚胎27枚,临床妊娠率为53.33%（8/15）,活产率为33.33%（5/15）。随患者年龄 增加,与<35岁组相比,≥35岁组患者卵子复苏率（82.76% vs 74.42%,P=0.211）、临床妊娠率（77.78% vs 16.67%,P=0.041）及活 产率（55.56% vs 0,P=0.044）均呈下降的趋势。结论卵子玻璃化冷冻可作为不孕夫妻取卵当日因男方因素不能提供精子患者 的临床补救措施;卵子玻璃化冻融后的受精率、临床妊娠率结局良好,卵子复苏率与年龄存在相关性,女性≤35岁者冻卵能够获 得满意的临床妊娠结局。     

不同胚胎冷冻方法对人类早期胚胎解冻后的复苏效果及临床结局的影响

目的 比较玻璃化冷冻与程序化冷冻对人类早期胚胎解冻后复苏效果及临床结局的影响.方法 辅助生殖技术获取的剩余可利用人类胚胎2 884枚,其中采用玻璃化冷冻复苏666个周期,解冻胚胎1 516枚、复苏1 383枚、移植胚胎1 375枚;程序化冷冻复苏506个周期,解冻胚胎1 368枚、复苏1 090枚、移植1 077枚.比较两种方法的复苏效果及临床结局.结果 玻璃化冷冻组胚胎复苏率、胚胎完整率分别为92.02％、92.11％,高于程序化冷冻组的79.68％、69.63％(P＜0.05);两组种植率、临床妊娠率、周期取消率、多胎妊娠率、早期流产率、新生儿胎龄、早产率、新生儿出生体重、出生缺陷率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 玻璃化冷冻较程序化冷冻有更高的胚胎复苏率及胚胎完整率,胚胎利用率高,两种冷冻方法的临床结局相似,适用于人类胚胎的冷冻.     

Comparison of Efficacy of Two Vitrification Solutions for Mouse Morulae

Objective To study the efficacy of two vitrification solutions for mouse morulae Methods Good morulaes of NIH mice were collected and used to test toxicity of the vitrification solutions EDS40 （40% ethylene glycol, 18% dextran and 0.5 tool sucrose） and EFS40 （40% ethylene glycol, 18% ficoll and 0.5 tool sucrose）. Fine vitrified morulae were packaged in 0.25 mL plastic straws and immersed into liquid nitrogen and cryopreserved for about 2-3 months. Then the straws were heated rapidly, washed in Ham＇s F12 medium and cultured. The viability was determined by morphology and blastocyst formation after being cultured for 48 h. Some embryos were transplanted to recipients after being cultured for 12-14 h. The number of pregnant recipients and young born was counted and analyzed by Chi-squared test. Results The toxicity of EDS40 solution was significantly lower than that of EFS40 （P〈0.05） and the number of embryos developed to the blastocysts after vitrification in EDS40 was significantly higher than in EFS40 （P〈0.05）. The number of zona pellucida and the number of pregnancy and birth integrated after vitrification cryopreservation had no significant difference between EDS40 and EFS40 （P〉0.05）. However, the embryo fineness rates after vitrification in EDS40 was significantly better than in EFS40 （P〈0.01）. Conclusion EDS40 solution has less toxicity and better cryoprotect effect on embryos than EFS 40.     

玻璃化与程序化两种不同胚胎冻融方法的临床应用效果比较

目的探讨玻璃化与程序化冻融胚胎的临床应用价值。方法回顾分析广西壮族自治区人口和计划生育研究中心的609个胚胎冷冻周期,其中366个程序化胚胎冻融周期与243个玻璃化冻融周期,比较两种不同冻融方法的胚胎复苏率、胚胎移植率、胚胎种植率、临床妊娠率等指标。结果玻璃化冷冻法与程序化冷冻法比较,其胚胎复苏率（94.75%,74.13%）、解冻移植率（97.94%,87.98%）、种植率（28.88%,16.94%）和临床妊娠率（42.86%,30.75%）,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适于人类胚胎的冷冻保存。     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用

目的 探讨玻璃化冷冻技术在人类早期胚胎冻存中的临床应用价值.方法 回顾性分析本中心822个冷冻胚胎复苏周期,依据胚胎冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组(490个周期)和程序化冷冻组(332个周期),比较两组胚胎复苏率、复苏胚胎完整率、胚胎种植率、临床妊娠率等数据.结果 玻璃化冷冻复苏组与程序化冷冻复苏组胚胎复苏率分别为98.8％和82.9％,复苏胚胎完整率分别为96.8％和63.1％,胚胎种植率分别为32.0％和18.1％,临床妊娠率分别为53.9％和33.1％,两组数据比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适合于人类早期胚胎的冷冻保存.     

应用两种麦管系统对小鼠囊胚的玻璃化冷冻

目的比较两种麦管系统对小鼠囊胚的玻璃化冷冻比较,以期建立一种有效的囊胚冷冻方法。方法分别应用开放麦管系统和传统麦管系统对小鼠扩张囊胚进行玻璃化冷冻,比较冷冻复苏以后囊胚的存活率和孵出率。结果应用开放麦管系统冷冻的小鼠囊胚复苏后的存活率(82.3%)显著高于应用传统麦管系统者(68.6%, P<0.01)。前者冷冻的小鼠囊胚复苏后的囊胚孵出率(70.3%),也明显高于应用传统麦管系统者(57.1%, P<0.05)。结论应用开放性麦管系统进行小鼠囊胚的玻璃化冷冻是一种行之有效的冷冻方法。     

应用两种麦管系统对小鼠囊胚的玻璃化冷冻

OBJECTIVE: To compare open pulled straws with conventional sorans system for the purpose of establishing an effective vitrification method for mouse blastocysts. METHODS: With open pulled straws (OPS) and conventional straws, vitrifi- cation of mouse blastocysts was performed, and the survival and hatching rates of the blastocysts were observed after thawing. RESULTS: After vitrification, the embryo survival in the OPS group (82.3%) was significantly higher than conventional straw group (68.6%, P<0.01), and the hatching rate was also higher (70.3%, P<5 CONCLUSIONS: Vitrification of mouse blastocysts using OPS results in higher survival and hatching rates as compared with conventional straw method.     

胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用(附成功分娩1例报道)

目的 探讨胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用效果。方法 运用玻璃化冷冻技术保存75例患者的397个胚胎，复苏13例69个胚胎，并根据患者的情况进行胚胎移植。结果 69个胚胎中，丢失3个，存活26个，存活率为39，4％。复苏后8例患者因胚胎质量差未移植，另外5例患者共移植了14个胚胎，其中1例获得单胎妊娠，分娩1名健康女要。结论 玻璃化冷冻技术简便、经济，并能够有效地冻存人类早期胚胎，可成为胚胎冷冻方法的另一个选择。     

两种冷冻载体对人胚胎玻璃化冷冻效果的影响

目的探讨不同载体对人早期胚胎玻璃化冷冻复苏的效果。方法采用半封闭式载体冷冻复苏胚胎的患者共265个周期,采用封闭式载体冷冻复苏胚胎的患者共136个周期,均采用玻璃化冷冻办法冷冻体外精-胚胎移植第3日的可利用胚胎,观察胚胎复苏和临床妊娠情况。结果半封闭式麦管冷冻复苏胚胎的患者移植周期258个,取消周期7个;复苏率、临床妊娠率和种植率分别为96．88％、48．44％和32．20％。封闭式麦管冷冻复苏胚胎的患者移植周期132个,取消周期4个;复苏率、临床妊娠率和种植率分别为95．31％、47．72％和32．28％。、两组患者的平均年龄、不孕年限、不孕类型、不孕原因、体外受精或卵胞质内单精子注射（IVF／ICSI）构成比以及胚胎复苏率、移植胚胎数、临床妊娠率和种植率比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 封闭式冷冻载体能获得与半封闭式载体同样的冷冻效果,同时能避免胚胎受病原微生物的交叉污染,是冷冻人早期胚胎的理想方法。     

玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎中的应用

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一,在保存未成熟卵细胞、成熟卵细胞、原核期胚胎、卵裂早期胚胎及囊胚方面均取得成功,并相继有临床妊娠分娩的报道。本文总结了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞和胚胎方面的应用。