活动性骨关节结核患者对潜伏感染相关蛋白Rv2659c T细胞免疫应答研究

目的 研究结核分枝杆菌(M.tb)潜伏感染相关蛋白Rv2659c对结核潜伏感染与活动性骨关节结核T细胞免疫应答的特性.方法 使用CFP10-ESTA6蛋白(CE)通过酶联免疫斑点实验(ELISPOT)从健康志愿者中筛选出来感染健康组(42例)和结核潜伏感染组(33例).从住院志愿者中筛选出非结核骨关节病组(35例)及活动性骨关节结核病组(30例).使用Rv2659c蛋白刺激各组人群外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),应用EHSPOT技术检测分泌IFN-γ的效应T细胞斑点数(斑点形成细胞,spot forming cells,SFC),比较其在不同人群中的差异;以潜伏感染组为阳性组,以活动性骨关节结核病组为阴性组,绘制Rv2659c潜伏抗原的ROC曲线,在特异度80％及90％两个点取SFC的cut-off值,评价Rv2659c对结核潜伏感染与活动性骨关节结核的鉴别诊断效能.结果 潜伏感染组的SFC值(2.5/28)显著高于活动性骨关节结核病组(0/2)、非结核骨关节病组(2.5/6.25)及未感染健康组(0/2.5),均P＜0.05.Rv2659c重组蛋白的曲线下面积(AUC)为65.2％,95％可信区间(CI)0.51 ～0.794.特异度80％时,cut-off值为3;特异度90％时,cut-off值为5.Rv2659c蛋白诱导产生细胞免疫应答的阳性率在潜伏感染组最高(54.5％),显著高于活动性骨关节结核病组(20％)、非结核骨关节病组(11.4％)以及未感染健康组(16.7％)3组,均p ＜0.05.结论 Rv2659c诱导活动性骨关节结核患者效应T细胞产生的免疫应答显著低于结核潜伏感染人群;Rv2659c对于鉴别结核潜伏感染人群与活动性骨关节结核病具有一定诊断价值.     

2009年驻京部队入伍新兵结核感染及随访情况分析

目的了解2009年驻京部队入伍新兵结核感染及发病情况,评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在检测结核分枝杆菌感染中的应用价值。方法 2009年907例驻京部队入伍新兵,行胸部X线检查、PPD皮肤试验和ELISPOT检测。PPD皮肤试验阴性者,接种卡介苗7个月后抽查110例,再进行PPD皮肤试验和ELISPOT检测。随访18个月了解结核病发病情况。结果 907例入伍新兵中,PPD皮肤试验和ELISPOT的阳性率分别为50.2%和30.7%。452例PPD阴性和455例PPD阳性者中,分别有132例(29.2%)和146例(32.1%)ELISPOT阳性,两者的一致率为51.4%(466/907)。65.6%的PPD阳性者和27.8%的ELISPOT阳性者[斑点形成细胞(SFC)12.2±21.2]有卡介苗接种;21.3%的PPD阳性者和35.9%的ELISPOT阳性者(SFC 18.3±34.6)没有卡介苗接种。PPD皮肤试验阴性的新兵接种卡介苗7个月后抽查的110例中,85例(77.3%)PPD皮肤试验阳性、21例(19.1%)强阳性,21例(19.1%)ELISPOT阳性、13例(11.8%)强阳性;两者的一致率为38.2%(42/110)。12例新兵发现胸片异常,其中12例(100%)PPD皮肤试验阳性,6例(50%)ELISPOT阳性。随访18个月,均未发现发展为结核病。结论驻京部队入伍新兵的结核感染率低于既往报道,提示卡介苗接种能部分保护人群抵抗结核感染,ELISPOT技术能够更有效地筛查结核感染。     

活动性肺结核患者抗脂阿拉伯甘露糖抗体、结核感染T细胞斑点试验、干扰素γ水平及其诊断价值

目的探讨活动性肺结核(TB)患者抗脂阿拉伯甘露糖(LAM)抗体、结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)、干扰素γ(IFN-γ)水平及其对活动性TB的诊断价值。方法选取自2017年1月至2018年1月湖南省胸科医院收治的116例TB患者为结核组,其中,菌阳性TB患者63例设为菌阳性TB组,再依据肺部CT的变化分为结节组13例、空洞组30例和多处空洞组20例;菌阴性TB患者53例设为菌阴性TB组。另选取同时期于我院检出结核菌素实验阳性(PPD+)的潜伏感染者42例为潜伏组,选取同时期的健康体检者42例为健康组。比较抗LAM抗体、T-SPOT.TB、IFN-γ水平检出活动性TB的阳性率并分析其与病情进展的关系。利用受试者工作特征曲线(ROC)分析抗LAM抗体、T-SPOT.TB、IFN-γ对活动性TB的诊断价值。结果 T-SPOT.TB、IFN-γ检测潜伏组的TB阳性率高于抗LAM抗体检测的阳性率,差异有统计学意义(P<0.05)。抗LAM抗体、T-SPOT.TB、IFN-γ三种方式对空洞组和多处空洞组的阳性检出率均明显高于结节组,差异有统计学意义(P<0.05)。三者联合诊断活动性TB的ROC曲线下面积、敏感度和特异度均高于抗LAM抗体、T-SPOT.TB、IFN-γ单独诊断(P<0.05)。结论抗LAM抗体、T-SPOT.TB、IFN-γ与活动性TB的病情进展有一定的相关性,三者联合诊断活动性TB的灵敏度及特异度提升显著,可为临床提供更可靠的参考依据。     

抗分枝杆菌纯蛋白衍生物抗体特征的研究

 目的 调查不同人群血清抗10种分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD)抗体的特征.方法 采用ABC-ELISA法检测结核患者、健康体检者与OT阴性、强阳性新兵血清抗10种PPD抗体水平.结果 结核患者血清抗BCG和抗胞内分枝杆菌PPD抗体水平显著高于抗人型结核菌PPD抗体水平(P＜0.01);OT强阳性新兵血清抗非结核分枝杆菌PPD抗体水平显著高于OT阴性新兵和健康查体者(P＜0.01).结论 个体环境分枝杆菌接触史对结核患者体液免疫应答有重要影响.胞内PPD和BCG-PPD可用于结核病血清学诊断.     

牛分枝杆菌ESAT-6蛋白抗体间接ELISA方法的建立

利用分子克隆技术,提取结核分支杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6基因,然后对其进行克隆表达,获得高效表达的ESAT-6蛋白,Westem blot证实ESAT-6蛋白可与结核牛阳性血清发生特异性反应.以纯化复性的ESAT-6重组蛋白作为诊断抗原建立的间接ELISA特异性为94%、敏感性为63.35%.交叉反应试验表明,该抗原只与牛副结核病阳性血清有交叉反应,而不与其他5种常见的牛病阳性血清发生交又反应.用间接ELISA方法对285份PPD阳性牛血清、对74份PPD阴性牛血清、79份牛γ-干扰素(IFN-γ)检测阳性血清进行检测,其负荷率分别为62.1%、98.64%、83.5%.实验结果表明建立的间接ELISA方法可以用于牛结核病感染和免疫抗体检测,且具有很好的开发和应用前景.     

结核T细胞酶联免疫斑点试验诊断结核感染的临床应用

 目的 探讨结核T细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)诊断结核感染的临床应用价值。方法 选择结核分枝杆菌感染者103例及非结核病对照者30例,用酶联免疫斑点试验检测外周血单个核细胞经结核特异性蛋白6KD早期分泌靶向抗原,以及培养滤液蛋白10刺激产生γ-干扰素的T淋巴细胞数,并与血清抗结核抗体、结核菌素皮肤试验结果比较。结果 T-SPOT.TB诊断结核感染的敏感性和特异性为95.15% 、93.33%;阳性预则值和阴性预测值为98.00%、84.85% ;阳性似然比和阴性似然比为14.27%、0.05%,均优于血清抗结核抗体、结核菌素皮肤试验(P<0.01),但方法间一致性较弱(Kappa＜0.40,P<0.001),差异有统计学意义。结论 T-SPOT.TB检测在结核分枝杆菌(MTB)感染的筛查,快速早期辅助结核病诊断和排除感染方面意义重大。     

某部2008-2010年入伍新兵急性呼吸道疾病发病情况调查

目的 调查某部入伍新兵急性呼吸道疾病(ARD)的发病率及常见的感染病因.方法 收集某部2008-2010年入伍新兵的咽拭子及外周静脉血标本,采用荧光定量PCR法检测15种呼吸道疾病常见病原体;采用间接免疫荧光法检测抗嗜肺军团菌抗体;采用ELISA法检测血清抗肺炎支原体-IgM和IgG及抗流感病毒抗体.结果 182名20...     

某部乙型病毒性肝炎感染现况调查

目的调查某部乙型肝炎病毒(HBV)在新兵人群中的感染状况,为预防策略提供科学依据。方法根据分散选点、整群抽样的原则,确定某部的调查对象,通过专人询问并填写统一的流行病学调查表,采集调查对象静脉血3～5 ml,分离置于-20℃保存备用,统一采用SPRIA方法检测调查对象血清中HBsAg、抗-HBs、抗-HBc,ELISA方法检测调查对象血清中HBeAg、抗-HBe。结果所有受检人员HBsAg总阳性率为0.48%,抗HBs总阳性率为61.90%;城市新兵与农村新兵HBsAg总阳性率无统计学差异(P>0.05);不同年龄段的新兵HBsAg、抗HBs、抗HBe和(或)抗HBc阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论 部队预防HBV,应同等对待不同入伍年限和兵源地的入伍新兵,有近40%的新兵抗HBs阴性,故有必要广泛对新兵进行乙肝疫苗接种。     

重组结核杆菌rCFP10-ESAT6融合抗原基因在HIV感染者中的特异性T细胞反应

目的检测人类免疫缺陷病毒(HIV)感染患者的结核(TB)特异性T细胞反应,为艾滋病合并结核杆菌感染诊断方法的建立提供理论依据。方法应用融合PCR和基因重组技术,重组并表达结核杆菌蛋白rCFP10-ESAT6抗原蛋白,按照HIV感染和是否伴发结核病将实验对象分为健康对照组(14例)、TB组(7例)、HIV(+)/TB组(14例)及HIV(+)组(72例),以合成的rCFP10-ESAT6蛋白作为抗原,通过酶联免疫斑点技术(ELISPOT)分别检测四组患者外周血的特异性T细胞反应,并对HIV(+)患者相关检测结果及其CD4+计数进行相关性分析。结果重组合成28kD的rCFP10-ESAT6融合蛋白,以此蛋白作为抗原通过ELIS-POT方法检测,在TB组和HIV(+)/TB组中阳性率达到100%,在健康对照组中为7.1%(1/14),在HIV(+)组为20.8%(15/72)。TB组阳性率明显高于HIV(+)组以及健康对照组(P<0.05),HIV(+)组阳性率亦明显高于健康对照组(P<0.05)。HIV感染者可能存在较高比例的潜在结核杆菌感染。相关性分析结果表明ELISPOT检测结果与HIV感染者的CD4+计数之...     

某部甲型肝炎病毒感染调查分析

目的调查某部甲型肝炎病毒(HAV)在新兵人群中的感染状况,为预防策略提供科学依据。方法根据分散选点、整群抽样的原则,确定某部2008—2009年入伍新兵共计1 040人为调查对象。通过专人询问并填写统一的流行病学调查表,采集调查对象静脉血3～5ml,分离置于-20℃保存备用。统一采用ELISA方法检测调查对象血清中抗HAV-IgG、抗HAV-IgM。结果 1 040人受检人员抗HAV-IgM均为阴性,抗HAV-IgG阳性率68.2%,抗HAV-IgG阴性率31.8%;入伍第1年新兵402人,抗HAV-IgG阳性176人(43.8%),抗HAV-IgG阴性226人(56.2%);入伍第2年新兵638人,抗HAV-IgG阳性536人(84.0%),抗HAV-IgG阴性102人(16.0%);不同籍贯新兵抗HAV-IgG阳性率无显著差异;城市新兵抗HAV-IgG阳性率78.8%、农村新兵抗HAV-IgG阳性率45.5%。结论部队预防HAV,应将重点放在入伍第1年及农村入伍的新兵,对这部分人群有必要进行甲型肝炎疫苗接种。     

某部新兵乙肝感染状况和乙肝疫苗接种效果观察

目的调查某部新兵的乙型肝炎病毒(HBV)感染状况和疫苗接种效果。方法采用整群抽样方法抽取630名新兵,进行统一的流行病学调查,采用ELISA方法检测HBV-M,对HBV-M全阴者接种乙肝疫苗,按0、2程序,剂量20μg,接种2月后检测抗体水平。结果该部队新兵中HBsAg阳性3人(0.5%);抗HBs阳性390人(61.9%),抗HBs阴性240人(38.1%),抗HBe和(或)抗HBc阳性28人(4.4%),60名接种乙肝疫苗的新兵中,57人检测HBV-M,抗HBs阳性49人(85.96%)。结论该部队新兵HBV现症感染率远远低于我国普通人群平均感染率,对HBV-M阴性新兵接种乙肝疫苗,按0、2程序,剂量20μg效果较为理想。     

肾上腺髓质素对大鼠肾脏损伤早期白细胞介素-4及γ-干扰素表达的影响

目的 观察外源性肾上腺髓质素(ADM)对肾脏机械性损伤后γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4表达的影响.方法 健康成年普通级Wistar大鼠104只,采用随机数字表法分为四组:正常对照组(8只)、单纯创伤组(32只)、预防组(32只)、治疗组(32只);后三组采用自由落体打击仪直接打击大鼠左侧脊肋区制作肾脏机械性损伤模型.两给药组分别于致伤前、后10 min腹腔注射ADM(0.1 nmol/kg).三组肾脏损伤分别于伤后1,6,12,24 h采用快速心脏采血法处死.提取肾脏,甲醛固定,免疫组织化学染色,观察IFN-γ、IL-4在组织中的表达.结果 (1)IL-4表达:预防组在伤后1 h出现阳性表达,6,12 h阳性表达强度渐升,24 h达高峰,与同时相点单纯创伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组在伤后1 h升高,6 h达高峰,与同时相点单纯创伤组比较,差异有统计学意义(P<0.05);伤后12 h下降,24 h接近单纯创伤组水平.(2)IFN-γ表达:与同时相点单纯创伤组比较,预防组在伤后6,24 h表达明显升高(P<0.05),12 h表达降低(P<0.05);治疗组在1,12,24 h的表达明显低于单纯创伤组(P<0.05).与正常对照组比较,治疗组在伤后1,12 h明显降低.治疗组各时相点IL-4及INF-γ的表达均较预防组明显下降(P<0.05).单纯创伤组IL-4与IFN-γ水平呈负相关关系,预防组IL-4与IFN-γ间呈正相关关系.结论 IL-4与IFN-γ在肾损伤与修复中发挥拮抗作用.外源性ADM的预防性给药及治疗性给药均对IL-4的表达有增强作用.预防性应用外源性ADM的主要作用在于动态调控IFN-γ的表达.

Abstract：

Objective To observe the effects of exogenous adrenomedullin(ADM)on expressions of IL-4 and IFN-γ following mechanical renal trauma in the rats. Methods A total of 104 healthy adult plain grade Wistar rats were,randomly divided into four groups,ie,normal control group(eight rats),simple trauma group(32 rats),prevention group(32 rats,injected with ADM before trauma)and treatment group(32 rats,injected with ADM after trauma).The experimental model of rat with mechanical renal trauma was prepared by striking the ridge of the left rib area with free dropping forrous hammer in all groups except for the control group.Ten minutes before and after mechanical renal trauma,ADM ly.All rats were sacrificed by draining out all the blood in their hearts at 1,6,12 and 24 hours after mechanical renal trauma.Then,the renal tissues were removed and fixed with 10% formalin for observing the positive expressions of IL-4 and IFN-γ by means of SABC staining. Results Compared with the simple trauma group,the positive expression of IL-4 in the prevention group Wag observed at 1 hour,gradually increased at 6 and 12 hours and reached the peak at 24 hours after mechanical renal trauma,with statistical difference(P<0.05).The positive expression of IL-4 in the treatment group WaS increased at one hour and reached the peak at 6 hours after mechanical renal trauma,with statistical difference(P<0.05).Compared with the simple trauma group,the IFN-γ expression in the prevention group was,increased at 6 and 24 hours but decreased at 12 hour,while that in the treatment group was decreased significantly at 1,12 and 24 hours.Compared with the normal control group,the IFN-γ expression in the treatment group was significantly decreased at 1 and 12 hours.The IFN-γ expression in the treatment group was lower than that in the prevention group at every time points,with statistical difference(P<0.05). Conclusions Preventive and therapeutic administration of exogenous ADM can enhance the expression of IL-4.IL-4 and IFN-γ play an antagonistic role in repair ofthe renal injury.The primary role of exogenous ADM is the dynamic regulation of IFN-γ expression.     

肝移植术后结核病临床特征分析

 目的 探讨肝移植术后结核病的临床特征。方法 回顾性分析2009-04至2021-04医院收治的44例肝移植术后结核病患者的临床资料,对其临床表现、实验室及影像学检查、治疗及预后进行描述性分析。结果 患者平均年龄(53.95±9.15)岁,常见症状是发热(52.3%)、咳嗽(50%)、咳痰(36.4%),罹患结核病的中位时间为24(10.00,59.25)个月,其中14例(31.8%)在术后1年内发病。继发性肺结核最常见(68.2%),27.3%的患者合并2种及以上类型的结核,肺外结核和播散性结核发生率分别是25%和15.9%。PPD试验、血结核抗体、γ-干扰素释放试验的阳性率分别为47.4%、75%、67.7%,血结核抗体的阳性率显著高于PPD试验(χ²=4.39,P=0.04)。56.8%患者行侵入性检查,阳性率为92%,确诊率显著高于非侵入性检查(χ²=15.14,P<0.01)。抗结核治疗期间有11例(25%)出现药物性肝损害,住院治疗有效率为90.9%。结论 肝移植术后结核病多发生于术后2年内,早期确诊困难,误诊率高,对反复肺部感染者应筛查结核菌感染,疑似病例应及时行诊断性治疗,侵入性检查有助诊断。     

Tuberculosis infection after humanitarian assistance, Guantanamo Bay, 1995

Upon redeployment to Fort Lewis, Washington, from Operation Sea Signal in Guantanamo Bay, Cuba, 5% of a military police unit was identified as positive for purified protein derivative (PPD). A case-control study was conducted to document the number of converters and to identify risk factors among the soldiers for PPD conversion while in Cuba. Forty-six of the soldiers (3.7% of the unit) met the criteria for PPD conversion as a result of deployment. Forty-four converters and 84 controls completed surveys. Logistic regression showed that statistically significant independent risk factors for PPD conversion included working around coughing migrants (odds ratio [OR] = 6.73, 95% confidence interval [CI] = 2.2-20.4) and birthplace outside the United States (OR = 4.89, CI = 1.3-18.5). Contact in the psychiatric hospital (OR = 0.22, CI = 0.05-0.90) and contact with migrants with known tuberculosis (OR = 0.16, CI = 0.05-0.54) appeared to be protective factors, possibly because known tuberculosis patients and hospitalized patients most likely would be on treatment and rendered noninfectious. With the U.S. military's involvement in humanitarian and refugee operations in countries highly endemic for tuberculosis, service members are at increased risk of acquiring tuberculosis infection. Detection of tuberculosis infection and appropriate treatment should become a higher priority within the U.S. military.     

Screening for Chlamydia trachomatis by the direct fluorescent antibody test in female Navy recruits.

Female Navy recruits at risk for sexually transmitted diseases were screened for Chlamydia trachomatis. The screening method was the direct fluorescent antibody (FA) test. The patients represented all areas of the U.S. Average age was 20.4 years. Patients listed past gynecological infections and current symptoms. The clinical findings of the provider at examination and the results of the direct FA test were correlated. There does not appear to be a reliable office method to predict which patients will have positive FA for Chlamydia. The direct FA test is a good tool to predict infection and institute treatment in high-risk patients.     

一起结核病暴发的流行病学调查

目的总结一起结核病暴发流行的特点。方法以先兆病历为线索,以胸透和结核菌素试验为调查方法,对所在分队进行调查(流行组),并与其他分队作对照(对照组)。结果流行组:发病率11.1%,PPD阳性率55.6%;对照组:发病率为0,PPD阳性率26.0%。结论未及时诊治的痰菌阳性病人和结核菌素阳性的异常增高是结核病暴发流行的先兆,群体生活是结核病暴发流行的条件。