不同栽培料对白毒鹅膏菌生长的影响

鹅膏属（Amanita）全球已知约500种,多数种为外生菌根菌;不少种可食,是世界各地著名的食用菌;有些种含剧毒,全球每年都有误食毒菌而中毒死亡的记录,其中绝大多数皆是因误食毒鹅膏所致。迄今,在我国可靠记载的鹅膏属真菌大约有80种,包括近来发表的20个新种（或变种）和20个我国的新记录种。在我国,鹅膏属真菌中的绝大多数种都可能是菌根菌,它们与松科、壳斗科、桦木科以及杨柳科的许多重要森林植物形成共生互惠的外生菌根关系。     

放线菌酮快速诱导小鼠肝细胞凋亡的实验研究

目的　研究放线菌酮 (CHX)诱导小鼠肝细胞凋亡的作用机制。方法　利用琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、电镜、活细胞荧光染色、HE染色等方法观察CHX诱导肝细胞凋亡的情况。结果　 ( 1)2 0mg kg以上剂量的CHX作用 1h即可出现典型的肝细胞凋亡 ,溴化乙啶和吖啶橙荧光染色为桔黄色 ,HE染色可见核固缩、浓染以及凋亡小体形成 ,凋亡细胞周围无炎性细胞浸润。电镜观察可见肝细胞体积变小 ,染色质固缩。 ( 2 )电泳结果显示 :不同剂量的CHX处理的小鼠其肝细胞NDA呈典型的“Ladder”电泳条带。 ( 3 )流式细胞术分析 :在CHX 2 0mg kg ,作用 1h以后即可见到肝细胞凋亡峰 (AP峰 )。随CHX剂量增加和作用时间的延长 ,凋亡率也逐渐增高 ,凋亡细胞的NDA含量减少。 ( 4)C myc基因表达量随CHX剂量增加和作用时间的延长而增加 ,但bcl 2基因表达呈下降趋势。结论　CHX可以快速诱导小鼠肝细胞凋亡 ,在凋亡过程中C myc基因表达量增加 ,bcl 2基因表达量降低 ,细胞凋亡率与CHX剂量和作用时间有一定的线性关系     

鹅膏菌毒性成分中毒特征及开发应用研究进展

目的 探究鹅膏菌的毒性成分种类、中毒特征及其在医药和生物学领域内的应用前景,提供客观认识鹅膏菌安全性的新视角,为鹅膏菌的进一步合理开发和安全利用提供参考。方法 通过检索国内外相关文献,针对鹅膏菌毒性成分、中毒特征及开发利用的现代研究进行整理、分析和归纳。结果 鹅膏菌主要含有多肽、氨基酸、生物碱等毒性成分,但其成分组成和含量会受品种、使用部位等多种因素影响;中毒特征主要表现为胃肠道症状和急性肝肾损伤。同时毒性成分在抑菌、抗肿瘤、抗炎等药物开发和生物学研究中也具有开发利用价值。结论 鹅膏菌具有重要的开发价值,了解鹅膏菌毒性成分种类、作用机制和安全剂量,有助于为鹅膏菌的临床安全使用及开发利用提供参考。     

鹅膏毒肽染毒对大鼠心肌细胞的损伤

鹅膏毒肽是由氨基酸组成的环肽化合物,存在于许多种类的蘑菇中。因误食含有鹅膏毒素蘑菇而中毒死亡的事件在世界各国都普遍发生。人们对于鹅膏菌毒素的研究重视已久。据有关研究报道鹅膏毒肽中毒可导致心电图异常和心肌酶的升高[1],但心肌细胞损伤的病理改变及其与心肌酶变化的     

苯巴比妥诱导小鼠肝细胞增殖和阻断肝细胞凋亡的作用与小鼠肝内局部 …

AIM: To study the association of phenobarbital (Phe) inducing hepatocyte proliferation and blocking hepatocyte apoptosis with local humoral factor in liver. METHODS: The ratio of liver/body weight, DNA content, regressive rate of hyperplastic liver, and DNA fragmentation were used to investigate whether the Phe-treated mouse liver extract (PMLE) and PMLE-95 (PMLE heated at 95 degrees C for 30 min) possessed Phe-like effects on mouse liver. Meantime, the effects of pretreatment with trypsin, RNAase, and DNAase on the activity of PMLE-95 were observed, and the differences of components between PMLE-95 and NMLE-95 (normal mouse liver extract, NMLE heated at 95 degrees C for 30 min) were analyzed with HPLC. RESULTS: PMLE-95 stimulated hepatocyte proliferation and prevented hepatocyte apoptosis caused by withdrawing Phe in mice, and the activity of PMLE-95 was eliminated after the pretreatment with trypsin. On the chromatograms PMLE-95 had 5 main peaks, while NMLE-95 had only 4 peaks. CONCLUSION: The effects of Phe on the liver were mediated by an intrinsic protein or peptide substance produced in response for the stimulation of Phe in mouse liver.     

放线菌酮快速诱导小鼠肝细胞调亡的实验研究

目的 研究放线菌酮（ＣＨＸ）诱导小鼠肝细胞凋亡的作用机制。方法 利用琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、电镜、活细胞荧光染色、ＨＥ染色等方法观察ＣＨＸ肝细胞凋亡的情况。结果 ⑴２．０ｍｇ／ｋｇ以上剂量的ＣＨＸ作用１ｈ即可出现典型的肝细胞凋亡,溴化乙喧和吖喧橙荧炎染色为桔黄色,ＨＥ染色可见核固缩、浓染以及凋亡小体形成,凋亡细胞周围无炎性细胞浸润。电镜观察可见肝细胞体积变小,染色质固缩。⑵流式细胞术分析：在Ｃ     

萘乙酸对小鼠肝细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨萘乙酸对小鼠肝细胞增殖与凋亡的影响。方法 将50只健康昆明种小鼠随机分为5个组,即正常对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组和阳性对照组,每组10只,雌雄各半,试验周期为4个周。用MTT法检测肝细胞增殖活性,用免疫组化的方法检测肝组织的PCNA、Bcl-2和Caspase-3表达水平。结果 高剂量组和正常对照组的肝细胞增殖活性分别为0.794±0.019和1.055±0.019,差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量NAA组PCNA阳性表达率为11.2%,正常对照组为33.1%,经检验差异有统计学意义(P<0.05)。高、中剂量NAA组Caspase-3阳性表达率分别为37.9%和8.2%,正常对照组为6.3%,经检验差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组和正常对照组Bcl-2阳性表达率分别为12.1%和31.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 萘乙酸能够抑制小鼠肝细胞增殖活性和PCNA、Bcl-2表达水平,并促进Caspase-3的表达,促使凋亡的发生。     

新城疫病毒诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：研究新城疫病毒Lasota株（NDV－L）杀伤肿瘤细胞及诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法：通过噬斑形成单位、HA效价、MTT法等方法检测NDV－L对细胞的杀伤作用;通过Giemsa's染色法、倒置相差显微镜、透射电镜、DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测NDV－L诱导肿瘤细胞凋亡的作用。结果：NDV对肿瘤细胞有选择性杀伤作用。经NDV－L诱导后,肿瘤细胞呈现典型的凋亡特征。结论：NDV除通过自身复制直接杀伤肿瘤细胞外,还具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

蒙药那如-3抑制辐射诱导小鼠肝细胞凋亡的影响研究

目的 研究蒙药那如-3对辐射诱导小鼠肝细胞凋亡的影响.方法 采用60Coγ射线照射小鼠,观察小鼠30 d存活率和死亡动物存活时间.用原位末端标记法和流式细胞仪观察受照小鼠肝细胞凋亡及p53表达,再用Western blot进一步测定p53的表达水平.结果 蒙药那如-3能呈剂量依赖性提高受照小鼠的30 d存活率,延长死亡动物存活时间,照前2 h给予蒙药那如-3效果最佳.蒙药那如-3能明显抑制受照小鼠肝细胞凋亡及抑制肝细胞p53的表达.结论 蒙药那如-3抑制受照小鼠肝细胞的凋亡,这可能与其抗辐射作用有关.     

氯丙嗪对撤除苯巴比妥钠诱导的小鼠肝细胞凋亡有抑制作用

AIM: To study the inhibitory effect of chlorpromazine (Chl), verapamil, and aspirin on hepatocyte apoptosis induced by the cessation of phenobarbital (Phe) treatment in mice. METHODS: Liver DNA content, ratio of liver weight/body weight, DNA fragmentation, DNA electrophoresis, the end-labeling test (TUNEL), and the morphologic changes of liver cells as indices of liver mass and hepatocyte apoptosis were applied to investigate (1) the kinetic process of hepatocyte proliferation induced by Phe 75 mg.kg-1 i.p. and the regression of hyperplastic liver caused by withdrawal of Phe in mice, (2) the effect of Chl 25 mg.kg-1, verapamil 50 mg.kg-1 or aspirin 60 mg.kg-1 i.p. on mouse hepatocyte apoptosis, and (3) the time course of effects of Chl on the regression of liver size and DNA fragmentation content after withdrawal of Phe. RESULTS: The process of hepatocyte proliferation and regression induced by administration and withdrawal of Phe in mice consisted of 4 phases: proliferation, plateau, rapid regression, and slow regression phases. In the rapid regression phase, the typic changes of hepatocyte apoptosis were found, which was prevented in early period by the Ca(2+)-calmodulin antagonist Chl, but not by verapamil or aspirin. CONCLUSION: The Ca(2+)-calmodulin played an important role in the hepatocyte apoptosis caused by withdrawal of Phe.     

乌头碱中毒肝细胞凋亡的观察

乌头碱是中药乌头主要成分，它是一种毒性剧烈的生物碱。中医上常用以治疗多种疾病，时有服用过量、投毒他杀发生中毒死亡。因此需要检测、鉴定。乌头碱口服吸收快，排泄也快，主要在肝脏和肾脏代谢以尿排除体外。由于乌头碱最易因组织腐败及碱性作用而被水解破坏，因而难以检测。有关乌头碱中毒的实验病理形态学研究，国内外尚未见报道。     

水飞蓟煎剂治疗急性鹅膏肽类毒素致肝损伤的实验研究

目的探讨水飞蓟煎剂治疗急性鹅膏肽类毒素所致肝损伤的解毒机制。方法选用健康sD大鼠32只,随机分成4组（每组8只）：正常对照组、中毒对照组、水飞蓟煎剂1g／mL组、水飞蓟煎剂3g／mL组。除正常对照组外,其余3组均制成急性鹅膏毒蕈中毒鼠模型。造模后每日给予相应药物,3d后观察大鼠的存活情况,并采血检查谷丙转氨酶（A坍）、谷草转氨酶（AST）和用紫外分光光度法测定肝细胞RNA聚合酶活性。结果中毒对照组的血浆ALl’和AST较正常对照组明显增加（P〈0．01）,不同剂量水飞蓟煎剂灌胃治疗3d后,2组血浆ALT和AST较中毒对照组明显降低,2组问比较差异有统计学意义;中毒对照组肝细胞RNA聚合酶活性明显低于正常对照组（P〈0．01）,水飞蓟煎剂治疗组肝细胞RNA聚合酶活性明显高于正常对照组（P〈0．01）,同时治疗组之间呈量一效关系（P〈0．01）。结论水飞蓟煎剂对鹅膏毒蕈中毒肝有明显保护作用,且作用呈量一效关系,其机制可能与提高肝细胞RNA聚合酶活性有关。     

靶向Survivin基因siRNA诱导肝癌细胞凋亡的实验

目的探讨靶向survivin的siRNA转染肝癌细胞阻抑survivin表达,及其对肝癌细胞凋亡、增殖与细胞化疗敏感性的影响。方法设计合成特异性靶向survivin的siRNA序列。肝癌细胞株HepG2接种于6孔培养板内,分为5组:空白对照组、阴性对照组和低、中、高浓度转染组(分别给予50,100和200nmol.L-1siRNA转染)。作用36h后收集各组细胞。Westernblot法检测各组细胞survivin蛋白表达情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测survivinmRNA表达水平,流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡指数,四氮唑盐(MTT)法检测氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂(DDP)对各组细胞的生长抑制率。结果各浓度siRNA转染组细胞survivin蛋白和mRNA表达有不同程度减弱。各浓度siRNA转染组细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.05),高浓度转染组最明显(P<0.05)。各浓度siRNA转染组细胞增殖指数明显低于各对照组(P<0.05),高浓度转染组最明显(P<0.05)。等浓度化疗药物5-FU和DDP对各浓度siRNA转染组细胞的抑制率明显高于对照组(P<0.05),高浓度转染组最明显(P<0.05)。结论不同浓度survivinsiRNA转染能下调survivin蛋白和mRNA表达,诱导肝癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性。     

东亚钳蝎毒诱导K562细胞凋亡的实验研究

目的 研究东亚钳蝎毒（BMK）在体外诱导白血病细胞株K562凋亡的作用。方法 流式细胞仪检测细胞凋亡率，应用RT．PCR检测野生型p53基因的表达。结果 经BMK作用于细胞后，细胞的总凋亡率均有升高；RT—PCR检测提示经BMK作用后的K562细胞p53基因的表达上调。结论 BMK能诱导K562细胞凋亡，可能促进P53基因表达上调是其机制之一。     

天南星醇提取液诱导人K562细胞凋亡的实验研究

目的:探讨天南星醇提取物对人K562细胞的细胞凋亡作用.方法:采用四唑盐比色法(MTT)测定天南星醇提取物对人K562细胞的抑制作用,采用流式细胞术检测天南星醇提取液对人K562细胞凋亡的影响.结果:天南星醇提取液可明显抑制人K562细胞株的增殖,实验组与对照组间差异有统计学意义(P<0.01).IC<,50>达到65.07 μg·mL<'-1>.流式细胞学检查发现天南星提取物处理后的人K562细胞出现凋亡现象,且有一定的量效和时效关系.结论:天南星醇提取液能抑制体外培养人K562细胞的增殖,可能是通过诱导K562细胞的凋亡来实现的.     

雷公藤甲素诱导人肝细胞凋亡的机制

目的 探讨雷公藤甲素诱导人肝细胞L-02凋亡的机制.方法 将L-02细胞分为对照组和雷公藤甲素50 nM实验组,处理48 h后,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率、活性氧(ROS)的荧光强度,试剂盒检测细胞色素C的浓度以及半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)和Caspase-3的活性,Western blot检测细胞中B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)的表达.结果 与对照组相比,实验组细胞存活率下降,细胞凋亡率上升,Bcl-2表达下调,Bax表达、细胞色素C浓度、ROS荧光强度、Caspase-9和Caspase-3活性均明显上调(P＜0.05或P＜0.01).结论 雷公藤甲素可以抑制L-02细胞的存活,通过激活线粒体凋亡途径促进L-02细胞凋亡,下调Bcl-2与Bax比率,促进细胞色素C释放,诱导ROS生成,进一步破坏线粒体膜,增加细胞色素C的释放,激活Caspase-9和Caspase-3介导的细胞凋亡通路,最终诱导细胞凋亡.     

牛磺酸对原代培养大鼠肝细胞的促凋亡作用研究

目的探索分离培养原代正常大鼠肝细胞的条件和方法,研究牛磺酸对原代培养的正常大鼠肝细胞的促凋亡作用。方法使用经典的两步灌注法分离原代肝实质细胞后贴壁培养,记录细胞生长状况,台盼蓝拒染法测定细胞活率、绘制生长曲线。经用不同浓度的牛磺酸培养24 h后,用TUNEL法测定牛磺酸对原代培养大鼠肝细胞致凋亡作用,测定细胞凋亡率(AI)。结果两步灌注分离取得的肝细胞活率>70%,贴壁生长良好,从生长曲线可看出培养第3天进入对数生长期;TUNEL实验3个给药组AI分别为:3.71%,29.72%,42.56%。结论两步灌注法是一种细胞产量高,损伤小,纯度高的分离原代正常大鼠肝细胞的方法;高浓度的牛磺酸对体外培养肝细胞有一定致凋亡作用。     

牛磺酸对原代培养大鼠肝细胞的促凋亡作用研究

目的探索分离培养原代正常大鼠肝细胞的条件和方法,研究牛磺酸对原代培养的正常大鼠肝细胞的促凋亡作用。方法使用经典的两步灌注法分离原代肝实质细胞后贴壁培养,记录细胞生长状况,台盼蓝拒染法测定细胞活率、绘制生长曲线。经用不同浓度的牛磺酸培养24 h后,用TUNEL法测定牛磺酸对原代培养大鼠肝细胞致凋亡作用,测定细胞凋亡率(AI)。结果两步灌注分离取得的肝细胞活率>70%,贴壁生长良好,从生长曲线可看出培养第3天进入对数生长期;TUNEL实验3个给药组AI分别为:3.71%,29.72%,42.56%。结论两步灌注法是一种细胞产量高,损伤小,纯度高的分离原代正常大鼠肝细胞的方法;高浓度的牛磺酸对体外培养肝细胞有一定致凋亡作用。     

TGF-β1抑制伤寒沙门菌诱导巨噬细胞RAW 264.7凋亡的实验研究

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β1在伤寒沙门菌诱导巨噬细胞凋亡过程中的调节作用。方法:ELISA检测伤寒沙门菌诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7培养上清中TGF-β1分泌水平,实时定量PCR检测伤寒沙门菌诱导小鼠巨噬细胞TGF-β1mRNA的表达,流式细胞术观察外源性TGF-β1对伤寒沙门菌诱导巨噬细胞凋亡的影响。结果:伤寒沙门菌感染组巨噬细胞TGF-β1的分泌和mRNA的表达水平显著高于对照组(P<0.05);伤寒沙门菌热杀死组、伤寒沙门菌感染组巨噬细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),LPS 伤寒沙门菌感染组的巨噬细胞凋亡率显著高于细菌脂多糖(LPS)组(P<0.05);1~100μg/L3个浓度的TGF-β1组的巨噬细胞凋亡率显著低于伤寒沙门菌感染组(P<0.05),并呈一定的剂量依赖关系。结论:伤寒沙门菌能够诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7表达TGF-β1,不同剂量的外源性TGF-β1能够抑制伤寒沙门菌诱导巨噬细胞凋亡的过程,提示TGF-β1在伤寒沙门菌诱导巨噬细胞的凋亡过程具有调节作用。