天冬多糖的提取与单糖组成分析

目的 从常用中药天冬中提取多糖,并建立柱前衍生化高效液相色谱法分析天冬多糖的单糖组成. 方法采用水提醇沉法提取天冬多糖. 用2 mol•L^-1 硫酸溶液将多糖水解成单糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)与水解后的单糖进行衍生化反应;衍生产物采用反相高效液相色谱法分离,并在250 nm波长处检测,研究天冬多糖的单糖组成. 结果 水提醇沉法提取的多糖经过精制后,所得多糖的平均含量可达95.84%. 用高效液相色谱法检测天冬多糖中单糖组成比例为甘露糖:鼠李糖:葡萄糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:阿拉伯糖(2.18:0.95:1.00:1.62:2.06). 结论 该多糖提取及精制方法可得到含量较高的天冬多糖. 柱前衍生的高效液相色谱法可用于天冬多糖的单糖组分分析,该法操作简便,结果 准确,适用于多糖中的单糖组成分析.     

虎掌南星多糖含量及单糖组成研究

目的:研究虎掌南星多糖的含量及其单糖种类及摩尔比。方法:首先采用水提醇沉的方法提取虎掌南星多糖并用苯酚-硫酸法来测定其粗多糖含量;再用柱前衍生化-高效液相色谱法来测定单糖组成并通过标准回归方程计算单糖摩尔比。结果:虎掌南星多糖提取率为4.65%,含有量为56.3%,由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,其单糖摩尔比为3.54∶3.36∶313.39∶9.01∶1.69。结论:苯酚-硫酸法具有显色稳定,操作简便,重复性良好等优点,可用于虎掌南星多糖含有量的测定;柱前衍生化高效液相色谱法具有简单、准确、快速、重现性好等优点,可用于虎掌南星多糖中单糖组成分析。     

高效液相色谱法分析松茸多糖的单糖组成

目的:测定松茸多糖中单糖的组成及其摩尔比。方法:松茸多糖采用2 mol·L-1三氟醋酸水解后通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生,用高效液相色谱法梯度洗脱测定;检测波长250 nm。结果:松茸多糖由D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖、D-木糖组成,摩尔比为18.92∶2.68∶1.63∶1。各单体线性关系良好,r>0.998。D-葡萄糖、D-半乳糖、D-阿拉伯糖、D-木糖平均回收率分别为94.0%,88.5%,93.9%,95.9%。结论:该方法简便、准确、重复性良好,适用于分析松茸多糖中单糖组成。     

高效毛细管电泳法分析附子多糖中单糖组分

目的分析经分离纯化的附子多糖的单糖组分。方法单糖经α-萘胺衍生化以后,用硼砂作电泳介质,实现高效毛细管电泳分离,得到标准的α-萘胺衍生单糖的毛细管区带电泳谱图。将附子多糖水解成单糖,用相同的方法实施电泳,得到多糖的毛细管区带电泳谱图。结果最佳试验条件,运行缓冲液为75 mmol/L、pH=10.5的硼砂水溶液,分离电压为20 kV,进样压力为0.5 psi,进样时间为15 s,柱温为25℃。通过与标准谱图对照分析,附子多糖由葡萄糖和半乳糖组成。结论高效毛细管电泳能有效分析附子多糖中单糖组分,灵敏度高,分离效果好。     

麦冬多糖单糖组成的分析方法研究

目的:建立一种麦冬多糖中单糖组成的高效液相色谱(HPLC)-蒸发光散射(ELSD)测定方法。方法:以三氟乙酸(TFA)水解麦冬多糖,采用Waters XBridgeTMAmide色谱柱,乙腈-水-三乙胺(75∶25∶0.2)为流动相,ELSD检测器监测麦冬多糖的酸水解产物,优化麦冬多糖的全水解条件,并对麦冬多糖的单糖组成进行分析。结果:麦冬多糖由果糖和葡萄糖组成,其全水解条件为以0.02 mol·L-1TFA为水解试剂,在110℃下水解2 h。HPLC-ELSD方法验证结果表明,该单糖组成测定方法的精密度和重复性良好,果糖和葡萄糖的加样回收率分别为95.9%～104.4%和91.3%～104.1%(RSD<5.9%)。麦冬多糖中果糖和葡萄糖的摩尔比约为15∶1。结论:本研究为麦冬多糖中单糖组成的准确测定提供了方法。     

间接高效液相色谱法分析测定金铁锁多糖的单糖组成

为了研究高效液相色谱法分析测定金铁锁多糖中主要所含单糖的组成及其比例,将多糖样品加硫酸水解,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后用HPLC-DAD进行分析测定,并将单糖对照品同法衍生化后测定得到各单糖衍生化物的标准曲线,对样品水解液中主要所含单糖进行测定分析。结果显示14.85 mg金铁锁多糖中含有半乳糖(5.02 mg)、葡萄糖(2.51 mg)、木糖(1.20 mg)、鼠李糖(0.31 mg),其摩尔比为15∶7∶4∶1。实验表明该分析测定方法灵敏、准确、可行。     

新疆药桑叶、枝多糖中单糖的组成分析与测定

目的:分析新疆药桑叶、枝多糖中单糖的组成并对其进行测定。方法:采用水提醇沉法提取新疆药桑叶、枝中的多糖,用2mol·L-1H2SO4将多糖水解成单糖,以1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化;采用反相高效液相色谱法测定各单糖。结果:桑叶、桑枝多糖均是由甘露糖、鼠李糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖等单糖组成。7种单糖在25min内可很好地分离。结论:本方法操作简便、灵敏度高、结果准确,可用于新疆药桑的质量控制。     

HPLC分析大蒜多糖中的单糖

目的建立一种反相高效液相色谱法（RP—HPLC）分析大蒜多糖中的单糖组成及摩尔比。方法大蒜多糖样品经2mol·L^-1硫酸降解为单糖后,经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生化,采用Shimadzu VP—ODS柱（150mm×4．6mm,5μm）分离,以乙腈-醋酸铵缓冲溶液（取醋酸铵7．708g加水溶解并稀释至1000mL,用醋酸调pH5．5（22：78）为流动相,流速为0．8mL．min^-1,在245nm处检测单糖的衍生化产物。结果大蒜多糖中甘露糖（Man）、鼠李糖（Rha）、葡萄糖醛酸（GlcUA）半乳糖醛酸（GalUA）、葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gal）、阿拉伯糖（Arab）7种单糖的摩尔比为4．31：4．23：4．19：9．13：27．4：4．99：3．81。结论本方法灵敏度高,结果准确可靠,可用于大蒜多糖的单糖组成测定及质量控制。     

树舌多糖组分的高效液相色谱分析

目的:分析树舌多糖组分的重均相对分子质量(Mw)及其分布,分析树舌多糖的单糖组成.方法:采用高效凝胶液相色谱法、示差折光检测器测定多糖组分的重均相对分子质量;气相色谱法测定单糖组成.结果:树舌多糖由3种具有不同重均相对分子质量的多糖组分组成;树舌多糖中含有6种单糖.结论:高效液相凝胶色谱法可有效分析树舌多糖组分的质量控制.     

红色诺卡菌细胞壁骨架中化学成分的鉴别与单糖含量测定

目的 分析鉴别红色诺卡菌细胞壁骨架（Nr-CWS）中的化学成分,并对其中的单糖成分进行分析测定。方法 首先,采用UHPLC-Q-TOF/MS方法对Nr-CWS提取物中的化学成分进行分离与分析,通过与Metlin数据库中代谢物成分信息比对,快速鉴别其中化学成分。然后,对Nr-CWS提取物中多糖水解后衍生化,采用UHPLC-MS/MS法对单糖衍生物进行定量分析,测定单糖的含量。结果 共鉴别出Nr-CWS提取物中的64个化学成分,主要包括氨基酸、单糖、脂肪酸等成分。此外,建立了8种单糖柱前衍生化的UHPLC-MS/MS含量测定方法,含量测定结果表明,Nr-CWS中阿拉伯糖和半乳糖的含量最高,说明阿拉伯糖、半乳糖是组成Nr-CWS中多糖的主要组成成分。结论 通过对Nr-CWS中的主要化学成分进行了分离与分析,对多糖水解后的单糖成分进行含量测定,为今后开展Nr-CWS活性成分的筛选及药理作用机制的研究奠定基础。     

高效毛细管电泳法测定灵芝多糖中单糖的组成

目的：采用高效毛细管电泳法测定灵芝多糖中单糖的组成。方法：灵芝多糖水解后，经PMP衍生化，高效毛细管电泳分析。电泳条件：缓冲液为50mmol&#183;L^-1硼砂溶液（pH9．3）；柱温25℃；电压20kV；检测波长200nm；气压进样3．445kPa，进样时间5s。结果：灵芝多糖中含葡萄糖、半乳糖、木糖、甘露糖的摩尔比为4．5：2．8：1．3：3．6。结论：该方法具有简单、快速、分离效率高等特点，可用于测定灵芝多糖中单糖的组成。     

薄芝糖肽结构组成分析

采取薄层层析法分析单糖组成,高效液相色谱法测定分子量及其分布,高碘酸氧化、Smith降解等方法确证糖苷键类型,紫外、Tricine-SDS-PAGE和β-消除等方法确证结合态蛋白的存在,利用柱前衍生化高效液相法测定氨基酸的组成,对薄芝糖肽(Ganoderma Capenseglycopeptide,GCGP)结构组成进行研究。结果:GCGP的多糖部分由葡萄糖组成,连接方式为1→6和1→2两种,含有结合态蛋白,氨基酸组成分析显示GCGP富含谷氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、半胱氨酸,碱水解结果表明GCGP含微量色氨酸。糖肽连接方式初步定为O-连接。     

柱前衍生化HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成

目的建立PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)柱前衍生化HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成。方法采用水提醇沉法提取黄河滩枣多糖,多糖水解后进行PMP衍生化,HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成及摩尔比,并对等度和梯度洗脱两种模式的测定结果进行分析比较。结果黄河滩枣多糖由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖等六种单糖组成,它们的摩尔比约为0.54∶0.50∶0.27∶2.03∶5.40∶1.00,等度和梯度洗脱测定结果基本一致。结论本实验改进的等度洗脱方式更加简便易行,快速准确,适用于黄河滩枣多糖的单糖组成分析。     

灵芝孢子多糖两纯组分的单糖组成研究

目的：对灵芝孢子多糖的2个纯多糖组分GLPSl和GLPS3的单糖组成进行分析。方法：将灵芝孢子多糖原料精制，SephacrylS一400SF型凝胶分离纯化得2个主要组分GLPSl和GLPS3，经酸水解后TLC法和HPLC法鉴别单糖组成，改良的1一苯基一3一甲基一5一吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化HPLC法分析单糖组成比例，同时采用LC—MS联用技术鉴定单糖PMP衍生化产物。结果：GLPSl的单糖组成为D一甘露糖：D一葡萄糖：D一半乳糖=1：9．228：1．474；GLPS3的单糖组成为D一甘露糖：D．葡萄糖：D．半乳糖=1：15．900：3．686。结论：灵芝孢子多糖二纯组分均含D一甘露糖，D．葡萄糖和D一半乳糖，仅各单糖的比例不同。     

栉孔扇贝不同部位多糖的提取分离及抗肿瘤活性研究

目的 研究栉孔扇贝不同部位（柱、性腺、肝脏、外套膜、鳃、足）多糖的抗肿瘤活性。方法 以新鲜栉孔扇贝为原材料,经胰蛋白酶水解、醇沉后得到栉孔扇贝不同部位多糖,通过柱前衍生高效液相色谱法进行栉孔扇贝不同部位多糖的单糖组成分析,以人宫颈癌细胞（Hela）和人肝癌细胞（HepG2）为对象对栉孔扇贝不同部位多糖的抗肿瘤活性进行研究。结果 从新鲜栉孔扇贝中提取得到六种多糖,分别为栉孔扇贝柱多糖（CFCP）、栉孔扇贝性腺多糖（CFGOP）、栉孔扇贝肝脏多糖（CFLP）、栉孔扇贝外套膜多糖（CFMP）、栉孔扇贝鳃多糖（CFGIP）、栉孔扇贝足多糖（CFFP）,其中CFCP仅含一种单糖,其余五种多糖均含十种单糖,且单糖摩尔比各不相同。栉孔扇贝六种部位多糖对Hela细胞的抑制率均随多糖浓度的增大而增大,其中CFLP抑制率最强。CFCP、CFGOP、CFMP对HepG2细胞的抑制率均较弱,CFLP、CFGIP、CFFP对HepG2细胞的抑制率均随多糖浓度的增大而增大,其中CFFP抑制率最强。结论 栉孔扇贝不同部位多糖对Hela细胞的抑制率由高到低依次为CFLP>CFGOP>CFMP>CFGIP>CFFP,对HepG2细胞的抑制率由高到低依次为CFFP>CFLP>CFGIP。同时,CFFP、CFMP、CFGIP、CFLP、CFGOP五种多糖对Hela细胞的抑制作用普遍高于HepG2细胞。     

柱前衍生化HPLC分析蒲公英多糖的单糖组成

目的合理优化衍生方法测定蒲公英多糖中单糖的组成及摩尔比。方法采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生,用反相高效液相色谱法进行测定。色谱条件为：ZORBAX-C18柱;流动相：0.1mol·L^-1的磷酸盐缓冲液（pH6.7）-乙腈（83∶17）;流速：1mL·min^-1;检测波长：245nm;进样量：20μL;柱温：室温。结果蒲公英多糖由D-鼠李糖、葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和D-阿拉伯糖组成,以不同方法提取的各单糖含量的摩尔比为：水提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.088∶0.500∶0.190∶0.340;超声提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.050∶0.350∶0.080∶0.320;酶提取法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.270∶0.630∶0.330∶0.460;超声协提取同酶法,Rha∶Glc∶Gal∶Ara=0.078∶0.550∶0.130∶0.170。结论改进后的衍生化方法和等度洗脱的色谱方法具有操作简单、快速、重复性好等特点,可用于蒲公英多糖中单糖组成和摩尔比的测定。     

竹黄多糖SB-Ⅰ及SB-Ⅱ的组成研究——Ⅰ.竹黄多糖SB-Ⅰ及SB-Ⅱ的检定及克分子比测定

将水解后的多糖转化成硅醚衍生物和还原乙酰化衍生物,用气相层析法和气相-质谱法检定了竹黄多糖SB-Ⅰ由L-阿拉伯糖、D-半乳糖、D-葡萄糖组成,竹黄多糖Sb-Ⅱ由L-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-半乳糖、D-葡萄糖组成。纸层析未检出阿拉伯糖。采用OV-225固定液的填充柱,对L-阿拉伯糖、D-核糖、D-木糖、L-鼠李糖、D-甘露糖、D-半乳糖、D-葡萄糖七种单糖的还原乙酰化衍生物的分离检定获得满意结果。并在该柱上测定了竹黄多糖组成中的单糖的克分子比。     

柱前衍生化–高效液相色谱法测定蒙古黄芪多糖中单糖的组成

目的测定蒙古黄芪多糖中的单糖组成。方法蒙古黄芪多糖样品用三氟乙酸溶液水解成单糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化,采用HPLC法于245nm波长处检测各单糖。结果蒙古黄芪多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖组成,物质的量比分别为0.02∶0.05∶0.17∶1∶0.18。结论此方法简单、快速、重复性好,可用于蒙古黄芪多糖中单糖组成分析。     

紫芝多糖肽GS-PPA的特性研究

目的研究紫芝菌丝多糖肽的结构性质。方法应用柱色谱方法进行分离、纯化得均一体多糖肽。高效凝胶渗透色谱法测定分子量,红外扫描、β-消去反应、高效液相法检测游离氨基酸、氨基酸种类和柱前衍生化高效液相色谱法,分析多糖中单糖组成等,并阐述多糖的结构。结果该多糖的重均分子量、数均分子量和分子量分布分别为183476、170988和1.07。红外扫描有典型的多糖吸收峰,糖苷键为β型。GS-PPA由17种氨基酸组成,游离氨基酸几乎等于0。单糖组成及摩尔比为Man∶Rib∶GlcuA∶Glu∶Gal∶Ara∶Xyl∶Fuc=2.1∶0.09∶004∶87.7∶2.6∶0.09∶0.5∶1。总糖和肽的含量分别是86.95%和4.74%。结论从紫芝菌丝体中分离出一种GS-PPA高分子量的多糖肽,多糖与肽为O-糖苷键连接。     

柱前衍生化HPLC测定新疆芜菁多糖中的单糖

目的 分析测定芜菁多糖中单糖的组成.方法 采用水提醇沉法提取芜菁多糖,用H_2SO_4将多糖水解成单糖,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化,RP-HPLC分离检测.结果 测得芜菁多糖是由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖等单糖组成.6种单糖在25 min内可很好分离,并对各种单糖进行了方法学考察.结论 本法测定多糖的单糖组分操作简便、灵敏度高、结果准确可靠,可用作芜菁多糖的质量控制.