铁皮石斛多糖的提取工艺及对小鼠急性肺损伤改善作用的研究

目的 优化铁皮石斛多糖的提取工艺,初步研究其对小鼠急性肺损伤（ALI）的改善作用。方法 以铁皮石斛为原料,采用超声辅助热水浸渍法提取铁皮石斛多糖;以铁皮石斛多糖提取率为响应值,通过单因素实验和Box-Behnken响应面法优化料液比、提取时间、提取温度。通过脂多糖诱导建立ALI小鼠模型,以醋酸泼尼松（5 mg/kg）为阳性对照,考察低、中、高剂量铁皮石斛多糖（50、100、200 mg/kg）对模型小鼠肺湿/干重比和肺组织病理形态（苏木精-伊红染色、Masson染色）的影响。结果 铁皮石斛多糖的最优提取工艺为料液比1∶25(g/mL),提取时间1 h,提取温度58℃;该工艺所得铁皮石斛多糖的平均提取率为37.75%(RSD=1.12%,n=3),与预测值（38.63%）的相对误差为2.28%。与模型组比较,阳性对照组和铁皮石斛多糖各剂量组小鼠的肺湿/干重比均显著降低（P<0.05或P<0.01）,肺组织病理变化（肺泡结构严重破坏,肺泡间隔明显增宽,大量炎症细胞浸润及成纤维细胞增生）均有不同程度缓解。结论 优化的铁皮石斛多糖提取工艺可行,且所得的铁皮石斛多糖对小鼠ALI有一定...     

复方石斛饮品及其主要原料对α-葡萄糖苷酶抑制活性的体外研究

目的建立体外α-葡萄糖苷酶抑制活性评价体系,探讨复方石斛饮品及其主要原料的降糖机制,评价复方石斛饮品的降血糖作用。方法优化抑制剂对α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定条件,以阿卡波糖为阳性对照,以复方石斛饮品及铁皮石斛、桑叶、桑椹水提液为抑制剂样品,测定它们对α-葡萄糖苷酶抑制活性作用,计算抑制率和半数抑制浓度(IC_(50))。结果复方石斛饮品及铁皮石斛、桑叶、桑椹水提液均有α-葡萄糖苷酶抑制活性,半数抑制浓度(IC_(50)):复方石斛饮品41.5 mg/m L、铁皮石斛水提液87.9 mg/m L、桑叶10.8 mg/m L、桑椹15.4 mg/m L、阿卡波糖24.1 mg/m L。抑制活性作用强弱顺序为:桑叶>桑椹>复方石斛饮品>铁皮石斛。复方石斛饮品在高浓度150 mg/m L时抑制率(83.3%)与阿卡波糖抑制率(85.1%)接近。结论桑叶、桑椹水提液抑制α-葡萄糖苷酶活性作用最强,可作为α-葡萄糖苷酶抑制剂产品开发原料;铁皮石斛水提液对α-葡萄糖苷酶抑制活性作用最弱,其降血糖效果可结合其他方法进行评价;复方石斛饮品通过将铁皮石斛与桑叶、桑椹等降糖中药的有机配伍,合理工艺生产加工,对α-葡萄糖苷酶有明显的抑制活性作用,具有降血糖作用。     

铁皮石斛试管苗快速繁殖的研究

兰科植物铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lind1.)的茎为常用名贵中药。多年来,主要依靠采收野生品种供药用和出口,致使野生资源枯竭,现已成为日益稀少的濒危植物。兰属种子和石斛属种子试管繁殖已积累不少资料,但是有关铁皮石斛种子试管繁殖的研究只有少量简单的报道,对其种子在试管繁殖过程中,所需外界条件的研究也不够     

铁皮石斛与铁皮石斛原球茎质量比较的研究进展

铁皮石斛是一种名贵中药材,其药理作用广泛,得到了广泛应用,但其自然繁殖率低,资源形势较为严峻。近年来,研究者们多集中于对铁皮石斛的胚性组织原球茎进行研究,本文通过对比研究铁皮石斛与铁皮石斛原球茎在化学成分、药理作用、石斛多糖成分的提取及测定方法上的差别,以探讨铁皮石斛原球茎成为铁皮石斛新药材资源的可能性。     

真空冷冻和热风干燥对铁皮石斛成分影响及溶出动力学研究

目的：研究真空冷冻和热风干燥下铁皮石斛组织结构、成分溶出及煎煮过程的动力学。方法：以组织结构、浸出物、多糖、多酚含量为指标建立真空冷冻和热风干燥质量对比研究。根据Fick第二定律建立铁皮石斛饮片(5 mm×5mm)煎煮提取液多糖、多酚溶出动力学模型。结果：质量对比研究中表明真空冷冻干燥下浸出物、多糖含量高于热风干燥(P<0.01)。对干燥前后铁皮石斛溶出率进行数学模型拟合发现Weibull拟合方程能较好的描述铁皮石斛饮片的煎煮动力学模型(r²>0.99)。溶出前1 h内真空冷冻干燥下铁皮石斛饮片多糖和多酚溶出率高于热风干燥和鲜品。结论：真空冷冻可以替代热风干燥便于铁皮石斛饮片在短时间内有效成分快速溶出,缩短煎煮时间,提高煎煮效率。且铁皮石斛饮片煎煮动力学数学模型的建立,也为进一步研究铁皮石斛提取内部机制提供理论基础,为工艺研究和生产提供可靠依据。     

一种安徽产野生铁皮石斛内生真菌的分离鉴定及其组织分布

目的 分离鉴定安徽地区野生铁皮石斛内生真菌,旨在丰富其内生真菌资源种类。 方法 通过组织块法对内生真菌进行分离,运用形态学和分子生物学方法进行鉴定。结果 从中分离得到11株内生真菌,鉴定为5属11种。 结论 铁皮石斛内生真菌种类资源广泛分布,为研究其与宿主石斛共生关系提供理论依据。     

铁皮石斛药材含量和检查项方法优化及不同产地品质的比较

目的 优化药典中甘露糖含量测定及甘露糖与葡萄糖面积比的色谱条件,同时比较浙江省不同产地铁皮石斛药材质量,为铁皮石斛适宜产地的选择提供依据。方法 以中国药典2010年版中铁皮石斛甘露糖含量测定方法为基础,对色谱条件进行优化,并用优化后的方法对不同产地铁皮石斛药材质量进行分析比较。结果 优化后的色谱条件：Diamonsil C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈(A)-0.02 mol·L^-1的乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~60 min,14%A;60~61 min,14%→25%A;61~69 min,25%;69~70 min,25%→14%A;70→80 min,14%A),流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为250?nm,柱温为30 ℃,进样量为10 μL。优化后的方法实现了PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)与甘露糖,PMP与样品杂质,盐酸氨基葡萄糖与样品杂质的基线分离。浙江省不同产地铁皮石斛药材在甘露糖含量及检查项比值上有一定的差异,其中富阳铁皮石斛的甘露糖含量最高,为40.8%,萧山铁皮石斛甘露糖与葡萄糖比值最高,为3.9。结论 该方法重复性好,结果准确可靠,可以用于铁皮石斛药材的质量控制。浙江省内不同产地的铁皮石斛质量存在一定的差异,其中建德最适宜人工栽培。     

不同来源石斛对SH-SY5Y细胞缺血性损伤保护作用的比较

目的研究市售种植铁皮枫斗和组培铁皮石斛对谷氨酸损伤的SH—SY5Y细胞的保护作用。方法利用血清药理学方法制备含药血清,用SH—SY5Y细胞建立谷氨酸损伤模型,观察72h损伤细胞增殖情况,MTT实验测定细胞活性,乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的测定研究两种来源石斛对神经细胞损伤保护作用。结果种植和组培石斛均可提高SH-SY5Y细胞谷氨酸损伤的存活率,降低培养液中LDH含量和细胞内MDA含量,提高SOD活力,其中铁皮石斛胚芽的抗氧化能力优于市售铁皮枫斗。结论石斛具有对SH—SY5Y细胞谷氨酸损伤的保护作用;组培铁皮石斛较市售铁皮枫斗保护作用更加显著,初步证明经过组培繁殖的铁皮石斛作用效果优于市售石斛属药用植物。     

黔产铁皮石斛产地干燥技术研究

目的:探寻黔产铁皮石斛最适产地干燥方法。方法:以贵州安龙"仙草谷"石漠化山地栽种的铁皮石斛鲜条为材料,分别采用6种不同铁皮石斛干燥方法,使用紫外分光光度仪测定其中多糖和甘露糖的含量,以折干率、感官评价、提取率、石斛多糖、甘露糖为指标进行评价。结果:六种加工方法铁皮石斛药材的折干率在31%~40%之间,无统计学差异;多糖含量在50%~59%之间,甘露糖含量在26%~33%之间,提取率在11%~17%之间,各指标处理间具有明显差异。结论:综合感官和检测结果评价,铁皮石斛产地干燥时主要以烘干较为合适,且烘干时以50℃烘干较好。     

石斛属菲类成分及其药理作用研究进展

菲类化合物是石斛属植物的特征成分之一,可分为简单菲、二氢菲、双菲及菲醌（酮）等菲衍生物4种类型。综述了金钗石斛、铁皮石斛、束花石斛、细茎石斛、流苏石斛、密花石斛、鼓槌石斛、曲轴石斛、石斛兰和绒毛石斛10种石斛属植物中毛兰菲、鼓槌菲、杓兰素等20个菲类活性成分,并介绍其抗肝纤维化、抗肿瘤、抗炎、抗氧化、降血糖等药理活性,希望为该属植物的新药研发和临床应用提供参考。     

铁皮石斛的亚慢性毒性研究

正铁皮石斛(学名:Dendrobium officinale Kimura et Migo),为兰科石斛属多年生草本植物,具有益胃生津、滋阴清热等功效,用于热病津伤,口干烦渴,胃阴不足,食少干呕等症,收载于2015年版《中华人民共和国药典》[1]。早在《神农本草经》中,铁皮石斛就被称为保健滋补上品,在我国被列为"中华九大仙草"之首,国际药用植物界称之为"药界大熊猫"[2]。现代医学的大量研究表明,铁皮石斛含有丰富的多糖、生物碱、氨基酸、多     

铁皮石斛内生真菌的鉴定及菌株205509的次级代谢产物研究

摘要：目的 鉴定铁皮石斛内生真菌及从中发现活性菌株,探究菌株205509产生的次级代谢产物。 方法 利用分子生物学方法并结合形态特征,对9株铁皮石斛内生真菌进行鉴定;采用琼脂扩散法和MTT法,筛选出次级代谢产物丰富,且具有抑制病原指示菌和人乳腺癌MCF-7细胞系的活性菌株;利用大米固体培养基对活性菌株进行发酵,乙酸乙酯萃取;采用硅胶、反相硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20和HPLC色谱技术进行分离纯化,得到化合物;通过质谱(MS)和核磁共振(1H NMR和13C NMR)等波谱技术并结合文献比对,确定化合物结构。结果 9株铁皮石斛内生真菌分属3个科的3个属,初步判定其中1株为枝顶孢霉属(Acremonium)的一个新种,2株为树粉孢属(Oidiodendron)的一个新种,2株为Acremoniopsis属的未确定种;获得抗菌活性和细胞毒活性较好的菌株205509,并从中分离得到了4个化合物,其中化合物HXW-3浓度为3 μg/mL时对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)和蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)表现出抑制活性。结论 铁皮石斛内生真菌物种较新颖,其次级代谢产物具有较好的生理活性,值得进一步研究。     

铁皮石斛多糖的闪式提取工艺及质量评价

目的 建立铁皮石斛多糖的闪式提取工艺及质量标准。方法 采用闪式提取器常温快速提取铁皮石斛粗多糖,正交试验优化液料比、提取次数、提取温度等参数。对24批不同产地、不同品种石斛的多糖糖含量及单糖组成进行聚类分析,拟定铁皮石斛多糖质量标准。结果 铁皮石斛多糖闪式提取最佳工艺条件为：液料比30 mL·g^-1,浸泡30 min后,常温提取3次,每次提取2 min。采用优化工艺制备的铁皮石斛多糖的糖含量为70.68%~99.82%,单糖组成中甘露糖与葡萄糖比例为3.75~25.60,可与水草石斛、金钗石斛多糖明确区分。结论 闪式提取铁皮石斛多糖工艺高效、稳定,所制备的粗多糖糖含量不低于70%,甘露糖与葡萄糖的含量比值不低于3.5。     

铁皮石斛的PCR-RFLP鉴别方法

目的:建立铁皮石斛专有的分子鉴别方法。方法:通过对铁皮石斛及其近缘种石斛的叶绿体matk基因序列进行对比分析,根据鉴别位点设计特异的铁皮石斛鉴别引物,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)技术进行鉴别。结果:本试验中鉴别引物可成功扩增铁皮石斛及其近缘种石斛,PCR产物为331 bp,铁皮石斛的PCR产物可被Tru9 Ⅰ限制性内切酶切开,而近缘种石斛不能被切开,可通过琼脂糖凝胶电泳成功鉴别。结论:本试验建立的PCR-RFLP鉴别方法可以鉴别铁皮石斛及其近缘种石斛。     

铁皮石斛中多糖和甘露糖含量测定方法的改进及与齿瓣石斛的比较研究

目的：改进铁皮石斛中多糖和甘露糖的含量测定方法并对铁皮石斛与齿瓣石斛中的多糖和甘露糖含量进行分析比较。方法：采用硫酸-苯酚法测定石斛中多糖的含量;采用高效液相色谱法测定石斛中甘露糖的含量。结果：多糖在2.54～12.87 mg· L-1范围线性关系良好（r＝0.9990）,平均回收率为99.02％,RSD为2.6％（n＝6）;甘露糖的平均回收率为101.5％,RSD为1.7％（n＝9）。6批铁皮石斛药材多糖平均含量为45.94％,甘露糖平均含量为32.33％;9批齿瓣石斛药材多糖平均含量为45.12％,甘露糖平均含量为37.88％。结论：所建方法操作比较简单,准确可靠,重现性好,可用于控制铁皮石斛的质量。铁皮石斛与齿瓣石斛多糖含量相当,齿瓣石斛甘露糖含量高于铁皮石斛。     

不同附主铁皮石斛鲜品多糖含量的差异

目的 以花盆基质栽培、水泥桩、竹片及4种不同活树附生栽培的铁皮石斛为试验材料,揭示不同附主对铁皮石斛质量的影响.方法 采用苯酚硫酸法测定其多糖含量.结果 附生在檀香、降香黄檀和马占相思上的铁皮石斛多糖含量较高,达5.0%以上,花盆次之为4.16%,附生在水泥桩和竹片上的含量相等,均为3.10%,龙眼树最低仅2.87%.结论 檀香、降香黄檀和马占相思等珍贵或速生阔叶树作附主材料能较大提高铁皮石斛的质量.     

铁皮石斛制剂的高效液相色谱定性鉴别

目的研究铁皮石斛制剂的高效液相色谱(HPLC)定性鉴别方法。方法以柚皮素为对照,色谱柱为Zorbax SB C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为A(甲醇)-B(0.2%H3PO4水溶液)梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm。结果比较10批次铁皮石斛制剂的HPLC图,选择柚皮素及相对保留时间比为1.11～1.14处色谱峰为参照,可用于铁皮石斛制剂的HPLC鉴别。结论该方法操作简单、专属性强,为铁皮石斛制剂的质量控制提供了可靠的定性鉴别方法。     

铁皮石斛新品种"仙斛1号"的选育及其特征特性研究

目的 保护野生铁皮石斛资源,选育铁皮石斛优良品种.方法 采用系统育种方法从野生铁皮石斛种质资源中选育出符合要求的新品种,石蜡切片技术鉴定铁皮石斛质地特征;ISSR分子标记技术分析品种(系)间遗传差异.结果 经过十余年的系统选育,成功获得了铁皮石斛新品种"仙斛l号".移栽36个月后,"仙斛l号"的新鲜茎叶产量分别比对照增...     

黔产铁皮石斛对阿司匹林诱导胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的保护作用研究

目的 探讨铁皮石斛全提物对阿司匹林诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1细胞损伤的药效作用.方法 体外培养人胃黏膜上皮细胞株GES-1细胞,经阿司匹林处理后,建立阿司匹林诱导GES-1细胞损伤模型;以阿司匹林联合铁皮石斛全提物各浓度预处理GES-1细胞为铁皮石斛组,以阿司匹林联合奥美拉唑预处理细胞为阳性组,并设立阴性对照组,采用MTS法检测细胞存活率,并通过比色法测定细胞上清液中LDH含量.结果 当阿司匹林的浓度为18.5 mmol/L处理GES-1细胞24 h时,细胞的抑制率为40％;铁皮石斛浓度范围0～500 μg/mL内,受损细胞存活率随铁皮石斛剂量增加而升高,LDH释放量逐渐降低(P＜0.05).结论 铁皮石斛对于阿司匹林诱导GES-1细胞损伤具有保护作用.     

铁皮石斛的组织培养与快速繁殖研究进展

目的铁皮石斛是一种珍稀名贵的中药材。目前,铁皮石斛的野生资源紧缺,已无法满足日益增长的市场需求。利用组织培养与快速繁殖技术建立铁皮石斛稳定的快繁体系,是目前铁皮石斛种苗生产的重要途径,也是挽救这一濒危物种的有效途径。本文就外植体、基本培养基、植物生长调节物质、有机添加物、碳源等几个方面因素对铁皮石斛组织培养过程中种子萌发、原球茎增殖与分化、不定芽诱导与增殖、生根与壮苗的影响进行了综述,总结了铁皮石斛栽培管理技术的研究概况,并展望了铁皮石斛组织培养的发展方向。为铁皮石斛商品的开发与利用提供了科学依据。