miR125a对胆管癌细胞株QBC939增殖、凋亡影响及可能机制

目的探讨miR125a对胆管癌细胞株QBC939细胞增殖及凋亡的影响及可能机制。方法实时荧光定量PCR检测52例经手术和病理证实的肝外胆管癌,31例癌旁组织及10例正常胆管组织标本miR125a的表达,免疫组化检测MMP-9蛋白表达。miR125a转染胆管癌细胞株QBC939,MTT法检测细胞增殖,流式细胞分析法检测细胞周期,Caspase-3试剂盒检测凋亡,Western blot检测MMP-9蛋白表达。结果胆管癌组织miR125a表达明显下调,低于正常胆管组织(P<0.05),MMP-9明显高于正常胆管组织(P<0.05)。与对照质粒组比较,转染miR125a胆管癌细胞QBC939增殖受到抑制,流式细胞分析法表明转染miR125a的胆管癌细胞QBC939导致G1阻滞,Caspase-3试剂盒检测显示凋亡增加,Western blot分析表明转染miR125a的胆管癌细胞QBC939中MMP-9的表达出现明显的下调。结论miR125a在肝外胆管癌中低表达,它们可能与胆管癌的发生有关。胆管癌细胞株QBC939 miR125a表达上调,能够抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡和G1阻滞,miR125a的作用可能与MMP-9的表达相关。     

参芪扶正注射液对肝癌细胞株H22的抑制作用及机制研究

目的研究参芪扶正注射液体内外对肝癌H22细胞的抑制作用及其机制。方法 MTT法检测参芪扶正注射液体外对H22细胞增殖的影响;利用H22小鼠模型进行体内抗肿瘤作用试验,计算抑瘤率;酶联免疫ELISA法测荷瘤小鼠血清IFN-γ含量;双抗体夹心ABC-ELSA法测荷瘤小鼠血清TNF-α的含量。结果参芪扶正注射液体内外均能抑制H22细胞的生长,具有浓度和时间依赖性;促进荷瘤小鼠血清中IFN-γ和TNF-α的表达。结论参芪扶正注射液体内外均能抑制肝癌H22的生长,其抗肿瘤作用与调节荷瘤小鼠的免疫功能有关。     

马钱苷对肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响及机制研究

目的:研究马钱苷对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:运用CCK-8法检测不同质量浓度(10、25、50、100、150、200、300、400μg/mL)的马钱苷作用24、48 h对HepG2细胞增殖活性的影响。将HepG2细胞分为对照组和马钱苷低、中、高浓度组(50、100、150μg/mL),加药作用24 h后,采用Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡形态学变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡和周期分布情况;采用Western blotting法检测各组细胞中G1/S-特异性周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)、活化的Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)、Caspase-9、Cleaved-Caspase-9蛋白的表达水平。结果:马钱苷对HepG2细胞增殖具有抑制作用,且呈浓度依赖趋势。与对照组比较,马钱苷低、中、高浓度组细胞出现核固缩、碎裂等凋亡现象,细胞凋亡率显著升高(P<0.01);细胞主要阻滞于S期;马钱苷低、中、高浓度组细...     

黄腐醇对肺癌细胞株A549体外抑制作用及其可能机制

目的 探讨黄腐醇对人肺癌细胞株A549的体外抑制作用及其可能机制.方法 体外培养A549细胞,采用MTT法检测黄腐醇10、20 μmol/L或联用N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)5 mmol/L对细胞生长的作用,细胞集落实验检测细胞的集落形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况和活性氧(ROS)含量,Western blot法检测p53、p21、转录激活因子4(ATF4)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白表达.结果 黄腐酵呈浓度和时间依赖性地抑制A549细胞生长(P＜0.05).与对照组相比,黄腐醇10,20 μmol/L均可减少A549细胞集落的数量,促进细胞凋亡,增加细胞内ROS含量以及p53、p21、ATF4、CHOP蛋白表达(P＜0.05);而NAC预处理后,可降低黄腐醇诱导的ROS含量以及细胞抑制率(P＜0.05).结论 黄腐酵能够体外抑制肺癌细胞生长并促进细胞凋亡,可能与黄腐酵升高肿瘤细胞内ROS含量、调节细胞周期和内质网应激相关蛋白的表达有关.     

藏药雪灵芝提取物对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响及机制研究

目的:研究雪灵芝提取物对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响,并探讨其潜在作用机制.方法:采用硅胶柱层析法对雪灵芝乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行分离,以二氯甲烷-甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,分别得到子部位Z1,Z2,Z3和Z4.运用CCK-8法检测不同质量浓度的4个子部位对HepG2增殖活性的作用,Hoechst 3...     

藤黄酸对胃腺癌细胞株AGS凋亡的影响

目的探讨藤黄酸对人胃腺癌细胞株AGS的增殖和凋亡作用。方法用不同浓度藤黄酸处理AGS细胞后,MTT法测定AGS细胞的增殖活性,流式细胞术分析藤黄酸诱导AGS细胞凋亡,Western blot法检测B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)表达的变化。结果藤黄酸能剂量依赖性地抑制AGS细胞增殖、诱导AGS细胞凋亡、下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达;24h半数抑制浓度(IC50)为0.9μmol/L。结论藤黄酸能明显抑制胃癌细胞株AGS的增殖,诱导AGS细胞凋亡。其促凋亡作用可能与Bcl-2、Bax的表达有关。     

白藜芦醇对胃癌细胞MKN-45凋亡的影响及机制

目的 以P53/人B细胞淋巴瘤-xL(Bcl-xL)信号通路为基础,探讨白藜芦醇对人胃癌MKN-45细胞凋亡的影响。方法 体外培养胃癌MKN-45细胞,以不同浓度的白藜芦醇(5、10、20、40、80μg·mL^-1)分别干预细胞24、48、72 h,采用细胞增殖实验检测细胞增殖情况。设空白组和白藜芦醇高、中、低剂量组(30、20、10μg·mL^-1),干预MKN-45细胞48 h, DAPI染色观察细胞核的形态;采用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测细胞中P53、Bcl-xL蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应检测细胞中P53、Bcl-xL mRNA的表达。结果 随着白藜芦醇浓度的增加,能明显抑制胃癌MKN-45细胞增殖;与空白组比较,白藜芦醇中、高剂量组细胞的细胞核逐渐皱缩,甚至破裂;两组细胞的凋亡率明显增加,P53的表达均增加,Bcl-xL的表达均降低。结论 白藜芦醇可激活MKN-45细胞中P53/Bcl-xL信号通路,增加P53的表达,降低Bcl-xL的表达,从而诱导MKN-45细胞凋亡。     

黄芪总黄酮对辐射肝癌细胞的促凋亡作用

目的从细胞和蛋白水平研究黄芪总黄酮（total flavonoids of astragalus,TFA）对辐射肝癌细胞的促凋亡作用。方法以对数生长期的HepG－2肝癌细胞为实验对象,克隆形成实验检测细胞的辐射敏感性;流式细胞技术分析细胞凋亡率;Westernblot技术分析凋亡相关蛋白Fas、Bcl－2、Bax的表达。结果细胞克隆形成实验结果显示,TFA给药照射组能够明显抑制HepG－2细胞增殖,作用强于单纯TFA给药组和单纯照射组。流式分析结果也提示,经6Gv1射线一次性照射6、24h和48h后,TFA预处理组肝癌细胞HepG－2的细胞凋亡率分别为（11．6±2．2）％、（17．3±1．5）％和（20．1±2．8）％,单纯照射组HepG－2的细胞凋亡率分别为（6．±2．3）％、（9.3±3．5）％和（15．8±2．1）％。Westernblot分析结果提示,在肝癌细胞HepG－2中,TFA预处理照射组促凋亡蛋白Fas和Bax的表达量显著高于单纯照射组和对照组;凋亡抑制蛋白Bcl－2的表达量正好与此相反,TFA预处理照射组Bcl－2的表达量明显低于单纯照射组和对照组。结论TFA对肝癌细胞不仅没有辐射保护作用,而且能够增强辐射对肝癌细胞的毒性作用。     

双氢青蒿素对肝癌细胞氨基酸代谢的影响及机制研究

目的:考察双氢青蒿素(DHA)对人肝癌细胞Huh7、BEL-7402中氨基酸类代谢产物的影响,为阐明DHA参与肝癌细胞代谢的调控机制提供理论基础。方法:采用CCK-8法,测定不同浓度DHA(12.5、25、50、100μmol/L)作用24、48、72 h后对两种细胞活性的影响。将两种细胞分别分为对照组和给药组(DHA,25μmol/L),加入不含药或含药培养基后培养24 h,均平行操作3份。对各组细胞样品进行衍生化处理后,采用气相色谱联用质谱(GC-MS)法检测细胞中氨基酸代谢物含量变化,结合SIMCA-P软件分析和化合物谱库的比对,筛选出两种细胞中的差异代谢物;采用Metaboanalyst 4.0软件对差异代谢物进行通路富集分析。结果:与对照组比较,给药组Huh7细胞或BEL-7402细胞中谷氨酰胺、谷胱甘肽、苯丙氨酸、富马酸、牛磺酸等含量均呈下降趋势。上述两种细胞中分别筛选获得28、29个差异代谢物,两者的共同差异代谢物有10个,包括谷氨酰胺、谷胱甘肽、牛磺酸、富马酸、苯丙氨酸等;两者的差异代谢物分别富集到8、6条通路上,其共同富集通路为氨基酸-tRNA生物合成、天冬氨酸-丙氨...     

红景天苷对人舌癌细胞的凋亡作用及机制研究

目的：探讨红景天苷对人舌癌细胞增殖和凋亡的影响,并解释其分子机制,为舌癌的临床治疗提供新的思路。方法：CCK-8法和克隆形成实验检测红景天苷药物对人舌癌细胞增殖能力的影响;Annexin V/PI双染法和TUNEL法检测细胞凋亡情况;PI染色法检测红景天苷对细胞周期的影响;细胞迁移法检测红景天苷对舌癌细胞迁移的影响;免疫印迹法和实时荧光定量PCR法检测细胞内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase 3的表达水平;免疫印迹法检测细胞内ERK和PI3K/AKT信号通路关键蛋白的表达水平的变化。结果：红景天苷能显著抑制人舌癌细胞的增殖且呈剂量依赖性。Annexin V/PI双染法和TUNEL法显示,随着红景天苷浓度的增加,Tca-8113细胞凋亡明显增多。PI染色法显示,红景天苷处理细胞后,G2/M期细胞明显减少。细胞迁移实验表明,红景天苷作用于舌癌细胞后,随着给药浓度的逐渐升高,细胞的迁移能力明显降低。免疫印迹结果表明,红景天苷可以使Bax和Cleaved caspase 3蛋白表达水平升高,Bcl2的蛋白表达水平降低。同时,红景天苷可以抑制ERK和PI3K/AKT信号通路。结论：红景天苷可以明显抑制人舌癌Tca-8113细胞的增殖,诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制ERK和PI3K/AKT信号通路有关。     

Survivin反义寡核苷酸对肝癌细胞株HEPG2的抑制作用

目的观察survivin反义寡核苷酸（ASODN）对肝癌细胞的增殖、凋亡的影响。方法人工合成survivin硫代ASODN,通过脂质体转染肝癌细胞株HEPG2后,用MTT法检测细胞毒作用,流式细胞术检测细胞的凋亡;RT-PCR、Western blot检测survivin mRNA及蛋白的表达。结果survivin ASODN抑制HEPG2增殖,呈剂量依赖性;各survivin ASODN处理组HEPG2细胞凋亡率显著高于对照组（P〈0.01）;survivin ASODN处理组HEPG2细胞survivin蛋白及mRNA的表达水平显著下降（P〈0.01）。结论survivin ASODN能够抑制HEPG2细胞增殖、诱导凋亡。     

醉茄素A对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响

目的 探讨醉茄素A(WA)对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响及其分子机制。方法分别采用WA 0、2、4、6、8μmol/L处理肝癌细胞株HepG2,MTT法检测细胞增殖,筛选出最佳作用浓度。再将HepG2细胞分为WA 0μmol/L组、WA 8μmol/L组和SP600125组[c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125 20μmol/L预孵育1 h,再加入WA 8μmol/L],继续作用24或48 h。采用流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测侵袭细胞数,反转录-聚合酶链反应和Western blot法分别检测磷酸化JNK(p-JNK)、JNK、Bax和Bcl-2的mRNA和蛋白表达。结果 与WA 0μmol/L组比较,WA 8μmol/L组HepG2细胞凋亡率增加,侵袭细胞数减少,p-JNK、Bax mRNA和蛋白表达升高,Bcl-2的mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);而预孵育SP600125后,上述作用被逆转(P<0.05)。结论 WA能够抑制HepG2细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡,可能通过丝裂原活化蛋白激酶/JNK信号通路来实现。     

木霉菌醇对肝癌细胞CBRH7919凋亡及形态变化的影响

目的探讨木霉菌醇(trichomerol)对大鼠肝癌细胞CBRH7919的作用。方法采用SRB细胞活性检测法检测木霉菌醇对CBRH7919细胞活性的影响;用流式细胞仪检测CBRH7919对细胞周期和凋亡的影响;激光共聚焦显微镜观察吖啶橙荧光染色细胞形态变化。结果 SRB检测显示木霉菌醇对CBRH7919细胞作用具有浓度和时间依赖性;木霉菌醇作用后CBRH7919细胞周期S期比例上调,而G1期比例下调;凋亡率具有浓度依赖性;吖啶橙荧光染色发现,细胞有明显凋亡。结论木霉菌醇对肝癌细胞CBRH7919具有良好的抑制作用,并可诱导细胞凋亡。     

三氧化二砷对人肝癌细胞的体外作用及其机制

目的观察三氧化二砷(As2O3)对人肝癌细胞BEL7402的体外作用及其机制.方法采用MTT法观察As2O3对BEL7402细胞的生长抑制率;流式细胞仪测定经不同浓度As2O3处理后的BEL7402细胞周期、凋亡相关蛋白bcl-2阳性细胞百分率、增殖细胞核抗原(PCNA)变化.结果As2O3可显著抑制BEL7402细胞生长,且剂量-效应关系显著(r=0.965 0,P＜0.01),半数抑制浓度(IC50)为4.93 μmol·L-1;As2O3能显著下调PCNA蛋白表达(P＜0.01),并使细胞周期阻滞在G2/M期,但对bcl-2表达无影响(P＞0.05).结论As2O3可有效抑制人肝癌BEL7402细胞生长,其机制可能与下调PCNA表达及阻滞细胞周期有关.     

贝伐单抗对肝癌细胞株HepG2增殖的抑制作用

目的通过体外实验探讨贝伐单抗(bevacizumab)对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用及可能的分子机制。方法MTT法检测贝伐单抗对肝癌细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR分析肝癌细胞株VEGF、Flt-1、KDR mRNA表达量的变化。结果不同质量浓度的贝伐单抗对肝癌细胞株HepG2的增殖有抑制作用;贝伐单抗可诱导肝癌细胞株HepG2的凋亡;贝伐单抗作用于肝癌细胞株HepG2后,其VEGF、KDR mRNA表达量均减少。结论贝伐单抗可能通过阻断VEGF的促增殖作用而抑制HepG2细胞增殖。     

益气活血清热方对胃癌细胞株SGC-7901凋亡的实验研究

目的研究益气活血清热方对胃癌细胞株SGC-7901凋亡的影响。方法根据实验动物学原理制备大鼠含药血清和正常血清,应用MTT、台盼蓝染色以及AO/EB荧光染色法检测益气活血清热方对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响,观察细胞凋亡形态学变化。结果含药血清对SGC-7901细胞存活有明显的抑制作用,随着药物浓度的增加,SGC-7901细胞的凋亡呈增长趋势。结论益气活血清热方能明显抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖。     

甘草甜素对胃癌细胞株SGC-7901凋亡影响的体外研究

目的探讨甘草甜素（GL）抗肿瘤的机制,为GL在抗肿瘤方面的应用提供理论依据。方法采用流程式细胞仪检测胃癌细胞株SGC-7901凋亡。结果50,100,200μmol/LGL能够诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,凋亡率与剂量呈正相关,SGC-7901的凋亡随药物浓度及作用时间变化,细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高,并出现典型的凋亡峰。结论GL能诱导胃癌细胞凋亡,并明显抑制癌细胞增殖,具有抗肿瘤作用。