基因转录因子NF-κB研究进展及其医药学意义

基因转录因子NF-κB由诺贝尔奖得主Baltimore于80年代中期发现以来,在短短10余年间就召开了3次国际专门研讨会,说明其在生命科学研究进展中的重要性。NF-κB分子家族已成为理解细胞外信号如何诱导高等真核细胞基因表达的一个焦点。本就NF-κB的分子结构、生物学功能、激活机制及其信号传导、在医药学中的意义、检测方法的进展,作一概要综述。     

核转录因子NF-κB——肿瘤基因治疗的新焦点

NF κB是一种重要的核转录因子 ,由一个复杂的体系组成。它存在于多种细胞 ,参与多种生理、病理过程的基因调控 ,并在细胞的抗凋亡过程中起着至关重要的作用。NF κB系统由NF κB家族及其抑制物IκB家族共同组成。NF κB的激活是肿瘤细胞抵抗TNF等抗肿瘤药物作用的重要机制。通过抑制IκB的降解来抑制NF κB的激活可以导致肿瘤细胞的大量凋亡。因此 ,通过基因治疗来抑制NF κB的活性 ,再辅以常规的化疗将有望成为一个有效的肿瘤治疗方法     

转录因子NF-κB在内毒素休克中的作用

目的探讨内毒素休克大鼠组织炎性介质的表达特征及其和核转录因子NFκB(nuclearfactorkappaB)的关系。方法应用免疫组织化学技术检测脂多糖(lippolysaccharice,LPS)内毒素休克大鼠肝肾组织转录因子NFκB、炎性介质ICAM1、VCAM1、iNOS的表达。结果LPS内毒素休克大鼠肝肾组织转录因子NFκBp65,炎性介质ICAM1、VCAM1、iNOS阳性细胞率高于正常对照组;炎性介质ICAM-1、VCAM-1、iNOS阳性细胞率与NF-κBp65阳性细胞率成正相关。用吡咯烷二硫氨基甲酸(pyrrolidinedithiocarbmate,PDTC)抑制转录因子NFκB的内毒素休克大鼠炎性介质ICAM1、VCAM1、iNOS阳性细胞率低于LPS组。结论核转录因子NFκB在LPS引起的大鼠内毒素休克炎性介质的表达中起调节作用。     

蝎素组分Ⅲ对THP1细胞NF-κB转录因子的影响

目的:研究蝎素组分Ⅲ(Scorpion venom crudeⅢ,SVC-Ⅲ)对THP1细胞中NFκ-B转录因子的影响。方法:用RT-PCR方法检测THP1细胞中p65和IKK1基因的表达;Western blot检测细胞p65蛋白的表达;荧光素酶报告基因的方法观察NF-κB的转录活性。结果:1μg/L浓度的SVC-Ⅲ在mRNA和蛋白水平均对NFκ-B有促进表达作用,并增强NFκ-B的转录活性;10μg/L浓度的SVC-Ⅲ则未显示出促进作用;100μg/L浓度的SVC-Ⅲ反而表现出一定的抑制作用。结论:SVC-Ⅲ能以剂量依赖的方式调节THP1细胞NFκ-B转录因子的表达和活性。     

核转录因子NF-κB的研究进展

核转录因子ＮＦ κＢ(ｎｕｃｌｅａｒｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ κＢ ,ＮＦ κＢ)是一类关键性的核转录因子 ,通常以同源或异源二聚体非活性形式存在于几乎所有类型细胞的胞质 ,具有十分重要的功能。它与免疫细胞的活化 ,Ｔ和Ｂ淋巴细胞的发育 ,应激性反应 ,细胞凋亡等多种细胞活动有关。许多因素可激活核转录因子ＮＦ κＢ ,使其从细胞质转位于细胞核 ,与ＮＦ κＢ反应性基因的κＢ位点结合并调控ＮＦ κＢ反应性基因的转录。我们对近年来有关核转录因子ＮＦ κＢ活化的信号转导机制 ,ＮＦ κＢ对炎性分子转录的调控 ,ＮＦ …     

NF-κB/IκB:重要的转录调节因子

核转录因子ｋａｐｐａ Ｂ（ＮＦκＢ）是一组重要的转录调节因子,可在免疫刺激剂等多种因素作用下激活而调节基因的转录,参与调节许多与免疫功能和炎症有关的基因。ＩκＢ（Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ＮＦκＢ）是其抑制分子,对其激活的调控起着关键作用。本文综述了ＮＦκＢ激活及调控的有关机理,为对其进一步研究提供理论依据。     

PRDM1调控NF-κB信号通路对巨噬细胞极化和功能的影响

目的:本文旨在探讨正性调节区锌指蛋白1(PRDM1)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)极化和功能的影响及其分子机制.方法:体外提取BMDMs作为研究对象,并进行极化诱导,采用荧光定量PCR和Western blot法检测不同极化状态的巨噬细胞PRDM1的表达水平;设计构建PRDM1过表达腺病毒载体,瞬时感染BMDMs...     

构架蛋白TRAF对CD154诱导转录因子NF-κB活化的影响

目的　研究构架蛋白TRAF1-6在CD154诱导NF-κB活化信号通路中的作用机制。方法通过流式细胞仪分析TRAF蛋白在Ramos B细胞中的基础表达,转染野生型或显性失活TRAF判断TRAF对NF-κB活化的影响,并研究CD154刺激可诱导哪些TRAF蛋白与CD40免疫共沉淀。结果TRAF1、2、3、5和TRAF6在Ramos B细胞中均有基础表达,转染野生型TRAF6较其他TRAF可更显著诱导NF-κB活化,而转染显性失活质粒对CD154诱导NF-κB活化的抑制作用TRAF6>TRAF5>TRAF2> TRAF3。CD154刺激诱导TRAF2、6与CD40共沉淀。结论TRAF6在CD154诱导NF-κB活化中作用最重要;CD154刺激诱导TRAF2、6与CD40形成免疫复合物。     

核转录因子-κB与前列腺肿瘤

核转录因子NF-кB具有多向性调节作用,可在多种因素作用下被激活,参与调控多种基因的表达;参与免疫反应、胚胎发育、凋亡、肿瘤形成和转移等多种生理及病理过程;并与肿瘤转移过程中起重要作用的粘附分子和细胞外基质蛋白水解酶等分泌调节有关.前列腺肿瘤的发生、发展及浸润转移,与NF-кB及其抑制因子间正常平衡的破坏及随之而来的系列NF-кB依赖基因表达的改变密切相关.本文综述了NF-кB与恶性肿瘤发生、发展、浸润转移的关系及与NF—κB相关的抗肿瘤策略.     

核转录因子-κB与前列腺肿瘤

核转录因子NF-κB具有多向性调节作用,可在多种因素作用下被激活,参与调控多种基因的表达;参与免疫反应、胚胎发育、凋亡、肿瘤形成和转移等多种生理及病理过程;并与肿瘤转移过程中起重要作用的粘附分子和细胞外基质蛋白水解酶等分泌调节有关.前列腺肿瘤的发生、发展及浸润转移,与NF-κB及其抑制因子间正常平衡的破坏及随之而来的系列NF-κB依赖基因表达的改变密切相关.本文综述了NF-κB与恶性肿瘤发生、发展、浸润转移的关系及与NF-κB相关的抗肿瘤策略.     

NF—κB／IκB：重要的转录调节因子

核转录因子ｋａｐｐａＢ（ＮＦ－κＢ）是一组重要的转录调节因子,可在免疫刺激剂等多种因素作用激活而调节基因的转录,参与调节许多与免疫功能和炎症有关的基因。ＩκＢ（ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙＮＦ－κＢ）是其抑制分子,对其激活的调控起着关键作用,本文综述了ＮＦ－κＢ激活及调控有关机理,为对其进一步研究提供理论依据。     

TRIM38蛋白对核转录因子NF-κB的影响

目的 TRIM家族是一类结构保守的蛋白家族,目前发现其包含70多种成员,参与了增值、分化、细胞凋亡及病毒与宿主的免疫应答等.TRIM38的功能尚不清楚.本研究拟通过实验确证TRIM38对核转录因子NF-κB活性的调节.方法 在293T细胞中过表达TRIM38,采用荧光素酶报告系统检测TRIM38及其结构与缺失突变体对NF-κB启动子活性的影响.用Western Blot方法 检测TRIM38蛋白的表达.结果 TRIM38可以激活NF-κB,并且在构建的TRIM38保守结构域的缺失突变体中,只有SPRY结构域缺失后不影响TRIM38的功能.结论 TRIM38是一个不依赖于SPRY结构域的NF-κB的激活蛋白.

Abstract：

Objective The tripartite motif (TRIM) proteins are a family of more than 70 human members, however only a few of them have been well studied. It has been shown that TRIM proteins are involved in various cellular processes such as cell proliferation, differentiation, apoptosis and antiviral defense. The functions of TRIM38 are largely unknown. In this study we explore the effect of TRIM38 on NF-κB signaling pathway. Methods 293T cells were transfected with NF-κB-Luc and plasmids expressing TRIM38 and its mutants fused to Flag. 24 h after transfection, cells were harvested and luciferase activities were measured. Data are representative of three independent experiments with triplicate samples. The expression of proteins was analyzed by Western Blot. Results TRIM38 could activate NF-κB signaling pathway. The mutants of TRIM38 affected the function of TRIM38. Only the mutant of SPRY domain deletion had no obviously influence of the function of TRIM38. Conclusion Our study reveals that NF-κB is activated in response to TRIM38.     

JNK3抑制NF-κB转录活性的研究

目的研究人c-Jun氨基末端激酶3(c-Jun N-terminal kinases3,JNK3)对核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)转录活性的影响。方法构建人JNK3真核表达载体pcDNA3.1-JNK3,与3×κB-luc报告基因质粒共转染人胚胎肾细胞293(HEK293),分别进行如下处理:共转染50ngpCMV-Myc-p65质粒;转染24h后,加入浓度为10ng/ml的TNF-α或IL-1β刺激6h,收集细胞,检测荧光素酶活性。结果成功构建了pcDNA3.1-JNK3真核表达载体;提高细胞内p65水平,加入TNF-α或IL-1β刺激均可明显激活NF-κB的转录,JNK3对NF-κB的转录活性有明显抑制作用,且随着JNK3转染剂量的增加,抑制作用增强。结论JNK3能明显抑制NF-κB的转录活性。     

国产红葡萄酒对食饵性AS血管壁NF-κB活化及MCP-1表达的影响

目的 探讨国产红葡萄酒(RW)在细胞、分子、基因调控水平的抗动脉粥样硬化(AS)作用，从而为RW防治AS提供实验佐证。方法 采用病理技术、电泳迁移率改变分析法(EMSA)和原位杂交术检测食饵性AS血管壁的病理变化、NF-κB活化及MCP-1 mRNA表达情况及RW对其干预的影响。结果 与食饵性AS组各相应的时相点相比国产红葡萄酒可显著抑制不同阶段AS血管组织的增生、组织细胞NF-κB活化、显著下调其MCP-1 mRNA的表达，并具有时间依赖性，RW干预12周时作用最强。结论 提示国产RW可能是通过抑制NF-κB活性，减少MCP-1 mRNA表达，从而阻抑了AS组织的损伤，延缓病变的发展。     

核因子-κB与神经损伤

核因子κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）是在1986年由Sen和Baltimore 应用凝胶电泳迁移率实验（EMSA）分析B细胞核提取物中发现的。最近研究表明，NF-κB是一种重要的转录因子，广泛存在于真核细胞中，参与多种基因的表达调控，具有广泛的生物活性，能够促进多种细胞因子、粘附因子和趋化因子的基因转录，在炎症反应中起重要作用，具有多种生物学功能。NF--κB存在于神经系统几乎所有类型的细胞中，主要包括神经元、星胶质细胞、小胶质细胞和少突细胞，在神经塑型、神经发育及神经变性等过程中具有独特作用并参与神经系统的病理、生理过程，尤其是在中枢神经损伤和变性疾病中发挥着重要作用。     

人参皂苷Rg1对H_2O_2诱导的293T细胞NF-κB转录活性影响

目的:观察人参皂苷Rg1对H_2O_2诱导HEK293T细胞损伤过程中NF-κB转录活性的影响,探讨人参皂苷Rg1的抗氧化机制.方法:H_2O_2模拟氧化应激条件,MTT法和台盼蓝染色法检测人参皂苷Rg1对细胞生长的影响;以DCFH-DA为探针流式细胞仪检测细胞内ROS水平;利用双荧光素酶顺式报告系统,检测人参皂苷Rg1对荧光素酶报告基因NF-κB-Luc相对荧光素酶值的影响,以检测人参皂苷Rg1是否具有下调H_2O_2诱导的NF-κB转录激活的作用.结果:H_2O_2诱导损伤的293T细胞存活率随H_2O_2浓度的增高而下降,相同H_2O_2浓度下,人参皂苷Rg1预保护组细胞存活率较损伤组显著提高(P＜0.05);H_2O_2处理后细胞内自由基明显增加,其荧光强度增加了40%～50%,而给予有效浓度的人参皂苷Rg1后,荧光强度降低35%～40%;与正常对照组比较,H_2O_2模拟氧化应激条件下,HEK293T细胞中NF-κB荧光素酶报告活性明显升高(P＜0.05),而在人参皂苷Rg1预保护组则明显受到抑制(P＜0.05).结论:人参皂苷Rg1对H_2O_2所致的细胞氧化应激损伤具有明显的保护作用,其可能机制是有效地清除了细胞内过多的自由基,下调了转录因子NF-κB的转录活性,继而抑制了NF-κB通路的激活.     

NF-κB在急性胰腺炎中的研究进展

NF-κB(转录因子核因子-κB)是一类主要参与机体炎性分子表达调控的转录分子，在急性胰腺炎中，其表达也受到很大的影响，苓主要对近几年NF-κB在急性胰腺炎中的研究作一综述。     

小鼠异位气管移植模型中核转录因子NF-κB 激活MCP-1诱导闭塞性细支气管炎的研究

目的 利用同种异体小鼠异位气管移植模型,研究NF-κB是否激活MCP-1基因参与闭塞性细支气管炎(OB),探讨OB的发病机制. 方法 将小鼠异位气管移植模型分成同基因组(BALB/C→BALB/C)和异基因组(BALB/C→C57BL/6),在术后7、14、21 d观察气管移植物是否发生OB;免疫组化染色检测气管移植物MCP-1蛋白表达;EMSA测定各组气管移植物NF-κB的转录活性改变;RT-PCR检测MCP-1的mRNA水平;ELASA检测外周血MCP-1蛋白水平.结果 异基因移植实验组气管移植物管腔闭塞率在术后7 d仅(6±3)%,14 d为(28±)8 %,21 d达到(74±12)%,而同基因移植对照组管腔闭塞率在术后7～21 d均小于3 %;与对照组比较,实验组气管移植物NF-κB的转录活性在术后7、14、21 d均明显升高;气管移植物MCP-1 mRNA及血清中MCP-1蛋白水平术后7、14 d升高,术后21 d与对照组比较无显著差异.结论 同种异体小鼠异位气管移植中,NF-κB转录活性增强,在移植后早期激活其下游靶基因MCP-1募集单核细胞和淋巴细胞攻击移植物,促进闭塞性细支气管炎的发生发展.