葡萄糖-6-磷酸异构酶免疫复合物检测方法的建立及其在类风湿关节炎诊断中的应用

目的建立葡萄糖-6-磷酸异构酶(G6PI)免疫复合物测定方法,初步探讨其与类风湿关节炎(RA)发病机制的关系及其对RA辅助诊断、病情监测的作用。方法建立C1q抗体捕获ELISA方法,并对311例血清标本(RA患者176例、其他免疫疾病患者35例和健康体检者100例)和44例关节液标本(RA患者33例、非RA关节疾病患者11例)中的G6PI/G6PI抗体/C1q免疫复合物水平进行检测。结果以波长450 nm吸光度值(A_(450nm))表示复合物含量,176例RA患者血清中G6PI免疫复合物为0.918±0.507,显著高于其他免疫疾病对照组(0.746±0.399)和健康对照组(0.696±0.362),P0.01;而两对照组间差异无统计学意义。RA活动组为1.045±0.529,显著高于非活动组(0.764±0.436),P0.01。以健康对照组A_(450nm)值建立正常参考区间,结果G6PI免疫复合物对RA诊断的敏感性和特异性分别为60.2%和67.4%,活动期RA的阳性率为74%,显著高于非活动期(43.7%)。33例RA患者、11例其他关节疾病患者关节液中G6PI免疫复合物A_(450nm)分别为0.835±0.497和0.596±0.132,RA患者组显著高于其他关节病组,P0.05。结论 RA患者血清和关节液G6PI免疫复合物含量增高,且增高程度与RA病情活动相关;G6PI免疫复合物可能在RA发病中起重要作用,且与疾病的活动性密切相关。     

葡萄糖6-磷酸异构酶与类风湿关节炎患者临床表现的关系

目的探讨葡萄糖6磷酸异构酶(G6PI)抗原在类风湿关节炎(RA)的发生发展中的作用。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测140例RA患者、75例其他风湿性疾病患者和50名健康对照者血清中G6PI抗原的浓度,同时检测RA患者C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、血沉(ESR),关节疼痛和肿胀数以及X线分级等。结果 RA组血清G6PI抗原浓度为(3.13±2.62)μg/mL,明显高于其他风湿性疾病组(0.148±0.045)μg/mL和健康对照组(0.107±0.065)μg/mL。RA组G6PI抗原阳性率明显高于其他风湿性疾病组和健康对照组(P<0.01)。RA活动组G6PI抗原浓度及阳性率高于RA非活动组(P<0.05)。G6PI抗原浓度和RA患者疼痛和肿胀关节数及CRP呈正相关。结论 G6PI抗原在RA的发病及关节损伤中有一定的作用,有可能成为诊断RA、判断其疾病活动性及疗效监测的一个辅助指标。     

血清葡萄糖-6-磷酸异构酶测定在类风湿性关节中的变化及临床价值

目的探讨葡萄糖-6-磷酸异构酶（G6PI）在类风湿关节炎（RA）诊断中的价值。方法用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法检测82例RA患者、68例非RA患者、60例体检健康者血清G6PI、抗环瓜氨酸肽抗体（CCP抗体）、类风湿因子（RF）浓度,。用四格表分析评价G6PI、CCP抗体对RA的诊断效能。结果 G6PI浓度：RA患者为（3.49±2.11mg/L）,非RA患者为（0.136±0.067mg/L）,健康对照组为（0.113±0.043mg/L）。RA患者血清中G6PI浓度显著高于非RA组和健康对照组（P〈0.01）,在RA患者中G6PI的敏感性高于抗CCP抗体和RF（P〈0.05）,而特异性低于抗CCP抗体高于RF（P〈0.05）。相关分析显示RA患者G6PI浓度与类风湿因子（RF）浓度呈显著正相关（r=0.622,P〈0.01）,与CCP抗体无相关性（r=0.203 P〉0.05）。结论 G6PI抗原是独立于抗CCP抗体之外的又一RA早期诊断及判断预后较理想的指标。     

血清葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原和抗环瓜氨酸肽抗体在类风湿关节炎诊断及治疗中的意义

目的探讨血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)抗原和抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体在类风湿关节炎(RA)诊治中的意义。方法用酶联免疫吸附试验分别检测41例活动期RA患者口服来氟米特治疗前、治疗12周、24周及健康对照组血清中的GPI抗原和抗CCP抗体水平,并与RA患者临床活动指标进行比较分析。结果 (1)血清GPI抗原和抗CCP抗体对RA诊断的敏感性分别为87.8%和90.2%,两者差异无统计学意义(P=1.000)。(2)治疗前患者血清GPI抗原和抗CCP抗体水平分别为(3.33±1.88)μg/ml和(84.10±36.26)U/ml,明显高于正常对照组(P<0.001);治疗12周及24周血清GPI抗原较治疗前明显降低(P<0.001),而抗CCP抗体无明显改变(P>0.05)。(3)血清GPI抗原水平在治疗前及治疗过程中与年龄、压痛关节数、肿胀关节数、类风湿因子、血沉、C反应蛋白及DAS28等指标呈正相关(P<0.05),抗CCP抗体治疗前与双手X线分期相关。结论 RA患者血清GPI抗原和抗CCP抗体均具有较高的敏感性,GPI抗原与RA的活动性密切相关,可作为评估病情活动的新指标,抗CCP抗体与RA骨侵蚀相关,而与疾病活动无相关。     

荧光定量RT-PCR检测类风湿关节炎患者葡萄糖-6-磷酸异构酶mRNA表达水平的研究

目的通过比较分析葡萄糖-6-磷酸异构酶(G6PI)mRNA在类风湿关节炎(RA)、其他自身免疫性疾病及健康人群之间的表达差异,探讨其在RA中的致病机制。方法建立实时定量RT-PCR方法,并利用该法检测128例RA患者(RA组)、32例其他自身免疫性疾病患者(疾病对照组)、100例健康体检者(健康对照组)G6PI基因的表达水平。结果经GAPDH校正后G6PI基因表达水平在RA组为2.72±2.09,其中活动组和缓解组分别为3.12±2.40和2.13±1.34,疾病对照组为2.14±1.43,健康对照组为1.25±0.73。RA组显著高于健康对照组(P0.01),RA活动组基因表达水平显著高于缓解组(P0.01),也显著高于疾病对照组(P0.01)。结论 G6PI在RA患者中表达的显著增加表明G6PI可能参与了RA的发病过程,并与疾病的活动性相关,可作为RA的辅助性诊断指标及早期筛查指标。     

颗粒蛋白前体与类风湿性关节炎的关系

目的探讨血清及关节液颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)水平在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)诊断与鉴别诊断中的价值。方法 RA患者76例(RA组)、骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者55例(OA组)以及体检健康者40例(对照组),检测各组血清PGRN水平以及RA组和OA组患者关节液中PGRN水平,并进行比较;采用ROC曲线计算PGRN诊断RA的灵敏度和特异度。结果 RA组血清PGRN[(55.2±11.1)μg/L]高于OA组[(45.4±6.6)μg/L]和对照组[(42.5±7.2)μg/L](P0.01),OA组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);RA组关节液PGRN水平[(69.1±4.8)μg/L]高于OA组[(36.3±10.1)μg/L](P0.01);活动期RA患者血清及关节液中PGRN水平[(58.3±9.2)、(79.0±3.6)μg/L]高于非活动期患者[(50.2±10.9)、(63.3±4.0)μg/L](P0.01);以OA和对照组为对照,血清PGRN诊断RA的灵敏度为84.2%,特异度为80.1%;以OA为对照,血清PGRN诊断RA的灵敏度为68.4%、特异度为70.9%,关节液PGRN诊断RA的灵敏度为73.7%、特异度为78.2%。结论血清及关节液PGRN水平对RA诊断与鉴别诊断有较好应用价值,可作为RA辅助诊断指标。     

血清GPI在类风湿关节炎诊断中的意义探讨

目的:探讨血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)抗原检测在类风湿关节炎(rheumatiod arthritis,RA)患者诊断中的意义.方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测117例风湿病患者血清中GPI抗原的含量,其中68例RA患者,49例其他风湿病患者.同时还检测其血清中类风湿因子(rheumatiod factor,RF)、血沉(ESR)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、抗环瓜氮酸肽(CCP)抗体、补体3(C3)、补体4(C4)、酸性糖蛋白(AGP)和C反应蛋白(CRP)的含量.分析RA患者GPI抗原水平与RF、ESR、IgG、IrA、IgM、抗CCP抗体、c3、C4、AGP和CRP的相关性.结果:所有患者中GPI抗原含量为:(1.61±1.87)μg/ml,在RA患者中GPI的含量为(2.48±1.93)μg/ml,其他风湿病为(0.40±0.81)μg/ml.GPI抗原的阳性率在RA患者中为98.5%,其他风湿病中为26.5%.RA组57.3%的病人浓度高于2μg/ml.GPI的含量在RA组和其他风湿病组差异有统计学意义(P<0.01).GPI与RF、抗CCP-Ab、ESR、Igc、IgA等存在相关(P<0.05或P<0.01).结论:在各种自身免疫性疾病中,RA组血清中GPI升高最明显.血清GPI可作为RA的诊断指标.如果GPI和RF、抗CCP-Ab联合检测,将对RA的诊断具有较高价值.     

类风湿性关节炎患者血清25-羟-维生素D水平与疾病活动度的相关性

目的 探讨类风湿性关节炎（RA）患者的血清25-羟-维生素D[25-(OH)-D]水平及其与疾病活动度的相关性。方法 选取2016年6月至2017年10月本院风湿免疫科收治的RA患者80例作为RA组,另选取同期进行体检的健康者80例作为对照组,检测比较两组的血清25-(OH)-D水平。计算RA患者的疾病活动性评分28(DAS 28),分析疾病的严重程度与维生素D水平的相关性。结果 RA组的血清25-(OH)-D水平为（21.05±10.02）μg/L,84%存在维生素D缺乏。对照组的血清25-(OH)-D水平为（32.87±14.16）μg/L,34%存在维生素D缺乏。RA组的血清25-(OH)-D水平明显低于对照组,差异有统计学意义（P<0.01）。RA疾病完全缓解组、低活动性组、中度疾病组和高疾病活动组的血清25-(OH)-D水平分别为（34.32±8.70）μg/L、（31.80±2.30）μg/L、（24.47±7.28）μg/L和（15.36±5.84）μg/L。血清25-(OH)-D水平与RA疾病活动性呈显著负相关（P<0.01）。结论 维生素D缺乏在RA患者中...     

葡萄糖6-磷酸异构酶（GPI）检测在类风湿性关节炎诊治中的应用价值

目的 探讨葡萄糖6-磷酸异构酶在类风湿性关节炎(rheumatoid arthriti,RA)诊断中的应用价值,以及与类风湿因子(RF)和抗CCP抗体联合检测的意义.方法 检测85例RA患者,44例非RA自身免疫病痛人,40例健康对照者血清GPI浓度,并同时检测RF,抗CCP抗体含量,对各组间结果 进行统计学分析.结果 RA组、非RA自身免疲病组和健康对照组GPI浓度(μg/ml)及阳性率(%)分别为20.37±56.54和44.7,0.82±2.83和15.9,0.073±0.053和0.RA组GPI浓度和阳性率显著高于疾病组和健康对照组(P<0.001).结论 血清GPI检测对RA诊断具有一定价值,可作为RA诊断的一个新的血清学指标,和RF,抗CCP抗体联合检测提高了对RA诊断的灵敏度和特异性.     

β_2-微球蛋白与前列腺癌的相关性探讨

目的探讨血清β2-微球蛋白(β2-MG)与前列腺癌(PCa)的相关性,分析β2-MG对于PCa的诊断和预后的意义。方法采用化学发光法测定了30例PCa患者血清β2-MG和前列腺特异性抗原(PSA)的水平,并与30例前列腺增生组(BPH)和35例健康对照组进行对比分析。结果 PCa组血清β2-MG水平[(3.24±0.51)μg/mL],高于健康对照组[(1.67±0.33)μg/mL]和BPH组[(1.96±0.32)μg/mL],差异有统计学意义(P0.01),而BPH组与健康对照组之间比较差异无统计学意义(P0.05);PCa组血清PSA水平[(35.03±5.67)ng/mL]高于健康对照组[(2.80±0.45)ng/mL]和BPH组[(9.21±1.56)ng/mL],差异有统计学意义(P0.01),且BPH组血清PSA水平高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.01),Gleason分数大于或等于7(中高危)的PCa患者血清β2-MG水平[(3.47±0.56)μg/mL]高于Gleason分数小于或等于6(低危)的患者[(2.64±0.43)μg/mL],差异有统计学意义(P0.01)。结论β2-MG可用于区分PCa和BHP的标志物,对PCa的辅助诊断、治疗和预后有一定的指导意义。     

Diagnostic value of glucose-6-phosphate isomerase in rheumatoid arthritis

BackgroundAlthough glucose-6-phosphate isomerase (G6PI), anti-G6PI antibodies and G6PI-containing immune complexes (G6PI-CIC) have proved high expression in patients with rheumatoid arthritis (RA), comprehensive evaluation of the G6PI-derived markers, G6PI antigen, anti-G6PI Abs, G6PI-CIC and G6PI mRNA, in the diagnosis of RA remains necessary.MethodsWe measured G6PI antigen, anti-G6PI Abs, C1q/G6PI-CIC as well as anti-cyclic citrullinated peptide antibodies (anti-CCP Abs) in serum and concomitantly synovial fluid (SF) by ELISA in RA, other rheumatic diseases and healthy controls. The G6PI mRNA expression in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) was assessed with real-time PCR.ResultsAs compared with non-RA patients, RA patients had increased levels of G6PI antigen, anti-G6PI Abs, C1q/G6PI-CIC and G6PI mRNA expression in sera or PBMCs, and increased levels of G6PI and C1q/G6PI-CIC in SF. The serum G6PI levels in RA patients positively correlated with anti-G6PI Abs, C1q/G6PI-CIC, G6PI mRNA, anti-CCP Abs, RF, CRP and ESR, respectively. The area under curve analyses demonstrated that serum G6PI had the best discriminating power for RA and active RA followed by C1q/G6PI-CIC, anti-G6PI Abs and G6PI mRNA. The simultaneous use of serum G6PI and anti-CCP Abs assays in the form of either of them tested positive gave improved sensitivities of 88.1% for RA and 95.8% for active RA.ConclusionsDespite the elevated expression of all G6PI-derived markers in RA, the serum G6PI has the best discriminating power among the four G6PI-derived markers. The serum G6PI determination either alone or in combination with anti-CCP Abs improves the diagnosis of RA.     

血清6-磷酸葡萄糖异构酶及抗CCP抗体等联合检测对类风湿关节炎临床诊断应用的研究

目的探讨葡萄糖6-磷酸-异构酶（GPI）在类风湿关节炎（RA）患者诊断中的意义。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测69例类风湿关节炎（RA）患者,29例其他风湿患者、40例健康对照血清中GPI浓度,同时检测RA患者类风湿因子（RF）、环瓜氨酸肽（CCP）抗体、血沉等血液指标。结果RA患者中GPI浓度为2．41&#177;2．27,其他风湿患者为0．18&#177;0．13,健康对照组为0．11&#177;0．05。GPI浓度在类风湿关节炎患者血清中显著高于其他风湿病组和健康对照组（P〈0．05）。结论部分RA患者血清GPI浓度显著增高,GPI可以作为临床诊断RA的指标之一,同时可作为病情活动状况的判断依据。     

类风湿关节炎患者血清GPI检测及其诊断价值的研究

目的探讨血清葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）水平与类风湿关节炎（RA）发病的相关性及其对RA诊断的价值。方法采用ELISA法检测68例RA患者、69例非RA自身免疫性疾病患者和77例健康体检者血清GPI水平,常规检测RA患者类风湿因子（RF）、红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）和抗CCP抗体水平。结果RA患者血清GPI水平为（7．01±8．03）mg／L,非RA自身免疫性疾病患者为（O．30士0．57）mg／L,健康体检者为（O．22±0．65）mg／L,RA患者血清GPI浓度显著高于非RA自身免疫性疾病患者和健康体检者（P〈0．001）。活动性RA患者和非活动性RA患者血清GPI水平比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。以0．332mg／L为临界值,GPI检测用于RA诊断的灵敏度和特异度分别为70．6％和92．2％,ROC曲线下面积为0．901;GPI水平与RF、ESR、CRP及抗CCP抗体水平呈正关,相关系数分别为0．645、0．480、0．389和0．623（均P〈0．05）。结论RA患者血清GPI水平显著升高,GPI有可能成为诊断RA及判断RA活动性的一个新指标。     

中毒家兔体内呋喃丹水平检测及其体内分布规律研究

目的建立亲水性固相材料提取呋喃丹的方法,研究呋喃丹在中毒家兔死后体内的分布规律。方法选取雄性家兔12只,随机分为2LD_(50)和4LD_(50)组,经灌胃匀速注入2倍半数致死量(2LD_(50))(220mg/kg)和4倍半数致死量(4LD50)(440mg/kg)呋喃丹。观察给药到死亡时的生命体征的变化以及中毒症状,待呼吸和心跳全部消失时,迅速解剖动物,取心血、心、肝、脾、肺、肾、脑冷冻保存。采用亲水性固相材料萃取柱进行提取,二氯甲烷洗脱提取,气相色谱定量检测其中呋喃丹的水平。结果亲水性固相材料萃取柱提取回收率高,呋喃丹平均回收率99.3%,检出限为5ng/mL。各脏器组织呋喃丹水平由高到低分别为:(1)2LD_(50)组:肺(10.98±2.30)μg/mL、肝(7.92±2.39)μg/mL,心血(2.13±1.36)μg/mL,脑(2.01±1.57)μg/mL,心(1.23±0.38)μg/mL,肾(1.31±0.42)μg/mL,脾(0.59±0.21)μg/mL。(2)4LD_(50)组:肺(6.86±3.02)μg/mL,肝(6.12±2.38)μg/mL,肾(2.52±1.54)μg/mL,脑(1.91±0.72)μg/mL,心(1.48±1.75)μg/mL,心血(1.17±1.57)μg/mL,脾(1.15±0.66)μg/mL。结论亲水性固相材料提取呋喃丹的方法成本低、方便快捷、提取率高、杂质少,可应用于呋喃丹中毒案件法医学鉴定的实验研究。呋喃丹在死后家兔体内分布不均匀,在含血丰富的组织器官中水平高。     

儿童葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原检测参考范围的建立

目的建立儿童葡萄糖-6-磷酸异构酶（G6PI）抗原浓度检测的临界值。方法采用固相酶联免疫吸附试验（ELISA）检测775名正常对照者[分别按年龄（≤3岁、4-6岁、7-9岁和〉9岁）和性别（男、女）分组]及53例类风湿关节炎（RA）患儿G6PI抗原浓度。采用受试者工作特征（ROC）曲线确定G6PI的临界值。结果≤3岁、4-6岁、7-9岁和（9岁正常对照者G6PI抗原浓度分别为0.126±0.069、0.127±0.079、0.129±0.072和（0.126±0.072）mg/L,各组间差异均无统计学意义（P〉0.05）。以性别分组,男、女G6PI抗原浓度分别为0.124±0.089和（0.123±0.065）mg/L,2组间差异无统计学意义（P〉0.05）。RA组G6PI抗原浓度[（0.517±0.298）mg/L]显著高于正常对照组[（0.127±0.073）mg/L,P=0.00]。当临界值在0.27 mg/L时,G6PI抗原用于RA诊断的特异性为95.1%,敏感性为79.2%;当临界值在0.32 mg/L时,其特异性为96.2%,敏感性为65.4%。结论深圳地区儿童G6PI抗原检测当临界值在0.27和0.32 mg/L时,具有较好的诊断符合率,且无年龄、性别差异。     

粪便钙卫蛋白检测在结直肠癌诊断中的作用探究

目的探讨粪便钙卫蛋白检测在结直肠癌诊断中的作用。方法选取本院2012年10月至2014年10月诊治的炎症性肠病患者246例为Ⅲ组,结直肠癌患者246例为Ⅱ组,非癌息肉患者246例为Ⅰ组,健康体检人员246例为对照组,均行粪便钙卫蛋白检测。结果Ⅰ组粪便钙卫蛋白[(145.52±4.14)μg/g]高于对照组[(18.05±3.76)μg/g],差异有统计学意义(P0.05)。Ⅱ组粪便钙卫蛋白[(557.63±24.81)μg/g]高于对照组和Ⅰ组,差异有统计学意义(P0.05)。Ⅲ组粪便钙卫蛋白[(896.50±113.57)μg/g]高于对照组、Ⅰ组和Ⅱ组,差异有统计学意义(P0.05)。结肠癌患者粪便钙卫蛋白[(205.36±31.24)μg/g]高于直肠癌患者[(126.84±19.07)μg/g],差异有统计学意义(P0.05)。B期粪便钙卫蛋白[(197.58±23.16)μg/g]高于A期[(107.36±11.25)μg/g],差异有统计学意义(P0.05)。C期粪便钙卫蛋白[(143.09±18.27)μg/g]高于A期,却低于B期,差异有统计学意义(P0.05)。D期粪便钙卫蛋白[(168.25±16.38)μg/g]高于A期和C期,却低于B期。差异有统计学意义(P0.05)。结论粪便钙卫蛋白检测可为结直肠癌临床诊断提供准确的科学依据,并且操作方便、价格低廉、患者依从性高,适用于门诊筛查,值得临床推广使用。