益糖康治疗糖尿病气阴两虚证血清代谢组学研究

目的:运用代谢组学方法研究中药益糖康对于糖尿病气阴两虚证大鼠的干预作用,探讨其在体内发挥药效的作用机制。方法:通过超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪(ultra-performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC/Q-TOF-MS)联用技术分析药物作用后大鼠血清的代谢轨迹,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘方判别分析(PLS-DA)寻找各组代谢物差异,筛选潜在内源性标志物。结果:初步鉴定出可能的8种潜在代谢生物标志物,分别为乳酸、1,5脱水山梨醇、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、牛磺酸、棕榈酸、花生四烯酸、L-苹果酸。这些内源性标志物在益糖康治疗组恢复明显。结论:中药益糖康可通过调节糖代谢、脂肪代谢、氨基酸代谢、三羧酸循环等途径来发挥对机体糖稳态的调控。本研究从体内代谢角度揭示了益糖康对糖尿病气阴两虚证治疗的作用机制。     

益糖康治疗糖尿病气阴两虚证血清代谢组学研究

目的:运用代谢组学方法研究中药益糖康对于糖尿病气阴两虚证大鼠的干预作用,探讨其在体内发挥药效的作用机制。方法:通过超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪(ultra-performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC/Q-TOF-MS)联用技术分析药物作用后大鼠血清的代谢轨迹,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘方判别分析(PLS-DA)寻找各组代谢物差异,筛选潜在内源性标志物。结果:初步鉴定出可能的8种潜在代谢生物标志物,分别为乳酸、1,5脱水山梨醇、L-苯丙氨酸、L-精氨酸、牛磺酸、棕榈酸、花生四烯酸、L-苹果酸。这些内源性标志物在益糖康治疗组恢复明显。结论:中药益糖康可通过调节糖代谢、脂肪代谢、氨基酸代谢、三羧酸循环等途径来发挥对机体糖稳态的调控。本研究从体内代谢角度揭示了益糖康对糖尿病气阴两虚证治疗的作用机制。     

基于气相色谱质谱联用仪的糖尿病胃轻瘫大鼠血清代谢组学研究

目的:分析2型糖尿病胃轻瘫组大鼠与正常组大鼠血清分子代谢物代谢轮廓的变化?方法:应用气相色谱和质谱联用仪方法,通过偏最小二乘法-判别分析方法(partial least squares linear discriminant analysis,PLS-DA)和正交偏最小二乘法-判别分析方法(orthogonal partial least squares linear discriminant analysis,OPLS-DA),鉴别糖尿病胃羟瘫组和正常组间血清小分子代谢物的区别?结果:两组血清的多种氨基酸成分有显著差异,与正常组比较,糖尿病胃轻瘫组苏氨酸?丙氨酸?甘氨酸?肌酸及苯丙氨酸含量明显下降,尿酸含量明显上升?结论:甘氨酸?肌酸?苯丙氨酸等多种氨基酸含量的变化可能与糖尿病胃轻瘫的发病机制有关?     

中西医结合治疗2型糖尿病气阴两虚证临床观察

目的:观察津力达颗粒对2型糖尿病气阴两虚证患者的临床症状、血糖、胰岛功能及胰岛素抵抗的影响。方法:58例2型糖尿病患者,在原有治疗方案基础上,强化饮食运动教育,同时加用津力达颗粒,每次9 g,3次·d-1,疗程2个月,进行治疗前后对照。结果:治疗后患者临床症状积分较治疗前明显减少(P0.001),说明患者临床症状明显改善;空腹血糖较治疗前下降2.74 mmol·L~(-1)(P0.001)、餐后2小时血糖下降10.13 mmol·L~(-1)(P0.001)、糖化血红蛋白下降1.67%(P0.001);餐后2小时胰岛素水平升高7.15 m U·L~(-1)(P0.001);胰岛素分泌指数升高较治疗前0.13(P0.001),胰岛素抵抗指数则下降0.81(P0.05);而空腹胰岛素水平及患者体质量指数未见明显变化。结论:津力达颗粒可改善2型糖尿病气阴两虚证患者临床症状,能够一定程度恢复患者胰岛β细胞功能、促进餐后胰岛素分泌,可改善胰岛素抵抗,具有较好的降糖作用。     

气相色谱-质谱法分析乳腺癌患者血清代谢组

目的:探讨基于气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析乳腺癌血清代谢组学的方法.方法:收集乳腺癌患者30例和正常人25例血清,衍生化后采用GC-MS分析其氨基酸、脂肪酸、糖类、有机酸等内源性代谢物变化.结果:该方法的进样精密度、日内精密度RSD均<14.4%,线性良好(r2>0.9905),回收率在80.7%～118.0%之间(RSD<12.0%),样品在室温24 h内稳定,冻融稳定性良好(冻融3次后样品之间RSD<14.6%).乳腺癌患者血清中丙氨酸、草酸和谷氨酰胺的发生频率分别为96.7%、100%和93.3%,这可能是潜在的代谢肿瘤标记物.结论:该方法稳定可靠,可作为辅助手段应用于乳腺癌的诊断.     

基于高效液相色谱-质谱技术的早期胃癌血清代谢组学分析

目的对比早期胃癌患者与健康人血清代谢产物的差异,寻找潜在的与早期胃癌相关的小分子代谢标志物。方法应用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)技术对16例早期胃癌患者与20例健康对照者的血清样本进行代谢组学检测。采用主成分分析法(PCA)、偏最小二乘判别法(PLS-DA)和t检验统计分析早期胃癌实验组与健康对照组的差异代谢物,最后将找到的差异代谢物通过人类代谢组数据库(HMDB)检索鉴定。结果与正常人相比,早期胃癌患者糖类、脂类等代谢可能存在异常,同时共筛选鉴定出9个对分类有显著贡献的代谢标志物。结论基于HPLC-MS技术的血清代谢组学分析方法能够有效区分早期胃癌与健康个体,对早期胃癌的诊断具有潜在的临床价值。     

2型糖尿病气阴两虚证大鼠模型的建立及评价

目的:建立2型糖尿病气阴两虚证模型,并从血糖(BG)、血脂及胰岛素(Insulin)水平等几个方面对其进行评价。方法:采用高脂饲料喂养结合小剂量链脲佐菌素(STZ)尾静脉注射的方法制备2型糖尿病大鼠模型,在此基础上予过量的青皮、附子灌胃来建立2型糖尿病气阴两虚证模型,然后用中汇糖脉康进行反证。结果:中药造模后,模型组及糖尿病对照组大鼠的血糖显著高于正常组,但其两者之间无明显差异;3组大鼠的血清甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)及胰岛素水平呈依次显著升高,表现为,正常组<糖尿病对照组<模型组。反证前后,除血糖外,其它各项指标均有显著改变。结论:在高脂饲料喂养结合STZ注射法诱导2型糖尿病模型的基础上,采用过量的青皮、附子灌胃的方法来建立2型糖尿病气阴两虚证模型是可行的,并可用TG、TC、LDL及Insulin等几项指标来作为评价该模型是否成功的检测指标。     

基于气相色谱-质谱的肥胖抵抗大鼠尿液代谢组学研究

目的对肥胖抵抗大鼠尿液进行代谢组学分析,研究高糖高脂饮食对非肥胖型代谢紊乱的影响,探讨非肥胖型2型糖尿病的发病机制。方法建立肥胖抵抗大鼠模型,取静脉血,测其生化指标,同时对尿液进行气相色谱-质谱分析,得到的数据进行代谢组学分析。结果除羰基戊二酸(RSD=11.77%)外,其他14种代谢物的相对标准偏差(RSD)均在10%以内,R2Y和Q2值分别为0.929和0.905;与对照组相比,肥胖抵抗组大鼠尿液中能量代谢过程的相关代谢物羟基乙酸、苏氨酸、丝氨酸、丁二酸、延胡索酸、2,3-二羟基-丁酸、苹果酸、羰基戊二酸减少,同时与肠道菌群代谢相关的代谢物对羟基苯甲酸、葡萄糖醇、反式乌头酸、果糖、葡萄糖、肌醇含量也明显减少。结论饮食干预16周之后,肥胖抵抗组大鼠能量代谢过程中的主要代谢物发生异常,基于GC-MS的代谢组学分析方法能较为全面的反应能量代谢状况,发现差异代谢物,可用于非肥胖型2型糖尿病发病机制的研究。     

洛沙坦治疗糖尿病的气相色谱代谢组学

目的建立基于气相色谱的"全"组分代谢物代谢组学分析方法,评价洛沙坦对糖尿病的治疗效果。方法取服药后患者尿样,样品被预处理和色谱分析后,经峰匹配进行多变量代谢组学分析。同时测定患者服药前后不同时间的血压、尿蛋白、尿中8-羟-2-脱氧鸟苷含量和血肌酐浓度。结果患者服药8～12周后洛沙坦对糖尿病的治疗效果不明显,常规生化指标未发生显著性变化,代谢组学研究显示葡萄糖醇和肌醇等代谢物发生变化。结论代谢组学能利用机体不同时间点代谢组的变化轨迹描绘药物疗效的发展过程。     

益气养阴方治疗2型糖尿病气阴两虚证患者的临床观察

目的:探讨中药复方益气养阴方(YQYYF)治疗2型糖尿病气阴两虚证患者的疗效及其可能的作用机制。方法:将60例2型糖尿病气阴两虚证患者随机分为治疗组(n=30)和对照组(n=30),对照组给予糖尿病常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加用益气养阴方,疗程为8周。评价两组患者的中医证候疗效,比较两组患者治疗前后的空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2h BG)、空腹胰岛素(FINS)、餐后2 h胰岛素(2h FINS)、空腹C肽(C-P)、餐后2 h C肽(2h C-P)、胰岛细胞功能相关指标(HOMA-IR、HOMA-B)及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等的变化。结果:治疗组患者的中医证候明显改善,而对照组患者无显著改善。治疗后,治疗组患者的FBG2、h BG较治疗前明显下降(P<0.01),C-P2、h C-P较治疗前明显升高(P<0.05,P<0.01),HOMA-IR较治疗前明显降低(P<0.05),且治疗组患者的FBG、2h BG水平及HOMA-IR较对照组亦明显降低(P<0.05),C-P2、h C-P水平较对照组明显升高(P<0.05)。结论:益气养阴方可以改善气阴两虚型2型糖尿病患者的症状,降低其血糖水平,同时改善患者的胰岛素抵抗,其作用机制可能与改善患者体内的氧化应激状态有关。     

胃癌气阴两虚证患者舌苔菌群与血清炎症代谢的相关性分析

目的探讨胃癌气阴两虚证患者舌苔菌群变化的炎症代谢机制。方法基于医院开展病例-对照研究,纳入13例胃癌气阴两虚证患者,以23例健康人为对照组,高通量测序分析舌苔菌群,电化学发光技术检测血清20种炎症因子,气相色谱质谱联用检测血清代谢组学。结果与对照组相比,胃癌气阴两虚证患者舌苔细菌Shannon指数降低(P0.05),而舌苔真菌Alpha多样性差异无统计学意义(P0.05)。判别分析显示,舌苔的3个细菌属(柄细菌属、巨单胞菌属、木洞菌属)和1个真菌属(裂壳属)是胃癌气阴两虚证的标志菌群。胃癌气阴两虚证患者血清谷氨酸、L-组氨酸、肌酸等15种代谢分子水平升高(P0.05),IL-17α、TNF-α、IL-6等8种血清炎症因子水平升高(P0.05)。相关性分析发现,IL-17α、IL-6、TNF-α与梭杆菌属、卟啉单胞菌属显著负相关(r-0.4,P0.05),梭杆菌属、消化链球菌属与血清谷氨酸代谢水平显著负相关(r-0.4,P0.05)。结论胃癌气阴两虚证患者舌苔菌群与血清炎症因子、代谢分子相关,为阐明气阴两虚证的形成机制提供了新的切入点。     

基于气相色谱-质谱的大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织代谢组学特征

目的 寻找溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜组织中UC相关的特异性标志物.方法 将16只健康大鼠分为UC模型组(12只)和正常对照组(4只),用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)建立UC大鼠模型,正常对照组大鼠正常喂养.UC模型组分别在造模后5、10、15 d各取4只大鼠与正常对照组病变部位的黏膜组织进行GC-MS检测,并采用主成分分析法、偏最小二乘-线性判别分析法、化学计量学方法进行分析,最后采用t检验并结合OPLS-DA模型第一主成分的VIP值(VIP＞1)来寻找差异性表达代谢物.结果 与正常对照组相比,UC模型组结肠组织的代谢谱有明显改变,共找到9种差异代谢产物(P＜0.05),分别是尿苷、腺嘌呤、胞嘧啶、甘氨酸、乳酸、牛磺酸、苏氨酸、甘露糖、β-丙氨酸.结论 UC大鼠和正常大鼠结肠组织间存在差异代谢组分,9种差异代谢物在临床上可作为UC早期诊疗的生物学标志物.     

基于气相色谱质谱技术的肾细胞癌患者尿液代谢组学分析

目的对肾细胞癌（renal cell cancer, RCC）患者的尿液进行代谢组学分析,建立数据模型并筛选特征代谢标志物。方法采
用气相色谱质谱联用技术（gas chromatography mass spectrometry, GC-MS）分析27例RCC患者,26例泌尿系其它肿瘤患者及
26例健康人的尿液,利用SIMCA-P+12.0.1.0软件进行主成分分析（principal component analysis, PCA）及正交偏最小二乘法-判
别分析（orthogonal partial least-squares discriminant analysis,0PLS-DA）,并筛选特征代谢产物。结果构建了PCA（R2X=0.846,
Q2=0.575）和OPLS-DA（R2X=0.736,R2Y=0.974,Q2Y=0.897）模型,筛选出14种差异代谢产物,主要是有机酸、马尿酸、色氨酸
及其降解产物,其中戊酸、丙二酸、戊二酸、己二酸、吲哚乙酸、氨基喹啉、喹啉及色氨酸在RCC患者尿液中的含量显著高于正常
人（P<0.01）,同时RCC组的尿液中戊酸、苯丙氨酸、6-甲氧基-硝基喹啉的含量显著高于泌尿系其它肿瘤患者（P<0.01）。结论
基于GC-MS的代谢组学方法可以区分RCC患者,筛选出的代谢产物可能是RCC的诊断标志物,可进行深入研究。
     

2型糖尿病的代谢组学研究进展

2型糖尿病是以糖、脂代谢紊乱为主要特征的慢性代谢性疾病,其发病率逐年升高.目前2型糖尿病的发病机制仍未完全阐明.代谢组学是一种能够检测出生物体代谢产物变化的新技术,其主要的检测手段包括核磁共振、气相色谱-质谱联用和液相色谱-质谱联用技术.文章就2型糖尿病发病前后与糖、脂、氨基酸代谢有关的生物标志物变化进行综述.     

2型糖尿病患者血清与粪便的代谢组学研究

目的 研究2型糖尿患者与健康者血清和粪便的代谢组学差异,分析差异代谢物与2型糖尿病之间的相关性.方法 选择2018年1月至2019年3月在昆明医科大学第二附属医院内分泌科住院的2型糖尿病患者53例,以及同期常规体检健康对照人群30例,采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱技术对两组研究对象的血清代谢物及30例糖尿病患者...     

2型糖尿病患者血清与粪便的代谢组学研究

  目的  研究2型糖尿患者与健康者血清和粪便的代谢组学差异，分析差异代谢物与2型糖尿病之间的相关性。  方法  选择2018年1月至2019年3月在昆明医科大学第二附属医院内分泌科住院的2型糖尿病患者53例，以及同期常规体检健康对照人群30例，采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱技术对两组研究对象的血清代谢物及30例糖尿病患者与对照组的粪便代谢物进行非靶向和靶向的代谢组学研究。应用Spearman相关性分析方法对血清和粪便中的差异代谢物与2型糖尿病相关指标的相关性进行分析。  结果  在2型糖尿病组与健康对照组血清样本中鉴定出15个差异代谢物，在粪便样本中鉴定出的差异代谢物则有6个。其中，糖尿患者血清中的谷氨酰胺、壬二酸、癸二酸及3-羟基癸二酸等二羧酸类羟基化衍生物明显低于健康对照组，差异有统计学意义（P < 0.01），而琥珀酰乙酰乙酸、缬氨酸、亮氨酸、葡萄糖、乳酸的含量则高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.01），并且琥珀酰乙酰乙酸、乳酸与糖化血红蛋白、餐后2 h血糖及空腹血糖浓度具有较强的正相关性，而壬二酸、癸二酸及二羧酸类羟基化衍生物与血糖浓度则具有较强的负相关；在粪便代谢物中，去氧胆酸和鹅去氧胆酸等胆汁酸与受检者的血糖浓度也有着一定的正相关性，并且单变量分析结果显示，与健康对照组相比糖尿病患者血清中的去氧胆酸和鹅去氧胆酸均显著性升高，差异有统计学意义（P < 0.05）。  结论  2型糖尿患者的血清代谢组学与健康者具有明显的差异，这些差异代谢物与糖尿病的发生和发展具有较强的关联性。在粪便代谢组学中，糖尿患者的胆汁酸水平与血糖的浓度变化也密切相关。     

基于彩色多普勒对2型糖尿病肾病气阴两虚证客观化的初步研究

目的探讨2型糖尿病肾病气阴两虚证与彩色多普勒部分客观化指标的相关性,为其客观化研究提供新的理论。方法选择2型糖尿病肾病中气阴两虚证患者209例,正常对照组50例。首先采用二维图像观察DN肾脏的大小及实质回声;再用CDFI观察肾血流灌注程度;再用脉冲波多普勒观察主肾动脉、段间动脉及叶间动脉血流频谱,测量收缩期峰值血流速度(VS)、舒张期末血流速度(VD)、平均血流速度(VM)、搏动指数(PI)、阻力指数(RI)值。结果 (1)气阴两虚患者肾脏体积基本正常,与正常组比较,差异不显著(P0.05)。(2)彩色多普勒观察到的肾实质回声与气阴两虚证存在一定的相关性,R_(气阴两虚)=0.4046±0.0404,且气阴两虚证与正常对照组对比,一致性中度。(3)肾动脉血流的灌注程度与气阴两虚证存在的相关性,R气阴两虚=0.4146±0.0399。(4)MRA、SRA、IRA的血流频谱指标VS、VD、VM、PI、RI与气阴两虚证存在相关性;气阴两虚证与正常对照组比较,差异显著或非常显著(P0.05,P0.01)。结论 2型糖尿病肾病气阴两虚证与肾脏的大小、实质回声、血流灌注的程度及肾动脉各分支的血流动力学存在一定的相关性。     

串联质谱联合气相色谱-质谱检测遗传性代谢病

目的 应用串联质谱检测干血滤纸片中的氨基酸和酰基肉碱谱,联合气相色谱-质谱技术检测尿液中有机酸谱,对遗传性代谢病进行筛查和诊断.方法 留取4981例临床疑似遗传性代谢病儿童的干血滤纸片、尿或尿滤纸片,利用串联质谱仪检测血中氨基酸和酰基肉碱,利用气相色谱-质谱仪检测尿中有机酸,部分患儿结合相关酶活性测定及基因突变分析进行诊断.结果 在4981例患儿中共诊断319例(6.4%)24种遗传代谢病,其中氨基酸代谢病155例(48.6%),8种疾病;有机酸血症150例(47.0%),10种疾病;脂肪酸13氧化代谢病14例(4.4%),6种疾病.结论 串联质谱对氨基酸和脂肪酸代谢病的诊断具有特异性,气相色谱-质谱对有机酸血症的诊断具有特异性,部分氨北基酸代谢病需要这2种技术联合应用才能诊断.     

2型糖尿病气阴两虚患者血清胆汁酸代谢物的多元分析研究

目的 研究2型糖尿病合并气阴两虚患者与正常气阴两虚患者血清胆汁酸的代谢差异.方法 选取新疆医科大学第四附属医院2015年1月-2018年12月就诊的2型糖尿病气阴两虚患者30例及正常气阴两虚体检者25例,采集志愿者空腹血在3000 r/min离心10 min得到血清,采用超高效液相色谱-串联质谱分析仪(UPLC/MS-...