地塞米松对ANIT诱导的胆汁淤积大鼠的治疗作用

[目的]探讨地塞米松对α-萘异硫氰酸（ANIT ）诱导的胆汁淤积大鼠的治疗作用。[方法]将健康雄性Wistar大鼠32只随机分为A、B、C、D四组。A组,仅灌花生油。B组,仅灌ANIT液。C组,灌ANIT液的同时予地塞米松（DEM ）处理。D组,灌ANIT液后24 h予DEM处理,每组8只。48 h后收集胆汁,计1 h胆汁量（BC）。取门静脉血检测总胆红素（TBIL）,直接胆红素（DBIL）碱性磷酸酶（ALP）,丙氨酸转氨酶（ALT ）的浓度。肝脏标本活检。[结果]B组各项指标明显高于A组（ P ＜0．01）。C、D两组 TBIL、DBIL指标低于B组（P ＜0．01）,D组与C组两组无明显区别（P ＞0．05）,D组略高于C组。B组ALP高于C组（P＜0．05）,低于D组（ P＜0．01）。D组高于C组（ P ＜0．01）。B组ALT低于C组（ P ＜0．01）。C、D两组没有明显差别（P＞0．05）。B、D两组没有明显差别（P ＞0．05）。B、C、D三组中,BC值C组多于B、D组（P＜0．01）。D组多于B组（ P ＜0．01）。[结论]地塞米松有减黄作用,提示临床对药物性肝损引起的急性黄疸病例可早期予激素制剂干预。鉴于激素干预可能增加肝细胞损伤,大剂量应用应该谨慎。     

水蛭对肝内胆汁淤积大鼠模型法尼醇X受体通路的调节作用

目的 研究水蛭对肝内胆汁淤积大鼠模型法尼醇X受体(FXR)通路的调节作用.方法 选取40只8周龄SPF级雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为正常组、模型组、熊去氧胆酸(UDCA)组、水蛭高剂量组、水蛭低剂量组,每组8只.UDCA组按60 mg/kg的剂量灌胃UDCA溶液,水蛭高、低剂量组分别按50 mg/kg和20 mg...     

α-萘异硫氰酸酯诱导幼鼠亚急性肝内胆汁淤积的动态变化

目的制作亚急性肝内胆汁淤积动物模型,探索亚急性胆汁淤积发生的生化和病理变化。方法幼年SD大鼠,分为对照组与ANIT模型组,分别给与芝麻油以及α-萘异硫氰酸酯(ANIT)灌胃,每周一次共4次,48小时后分批处死动物,取血标本送检肝功能指标,留取肝脏标本观察肝脏以及胆道病理改变。结果 ANIT灌胃后48小时,血转氨酶、胆红素明显上升,肝脏出现结构坏死,炎症细胞浸润、增生,胆管增生,9天、16天逐渐加重,23天肝功能指标逐渐恢复,肝脏结构好转,胆管增生和纤维化仍明显。结论成功制作幼鼠亚急性胆汁淤积的动物模型,ANIT每周一次灌胃后2~3周内胆汁淤积明显,第4周生化和病理结构逐渐恢复,但胆管增生和肝纤维化仍然明显。     

对赤芍醇提浸膏和水提液治疗胆汁淤积型肝损伤的药效筛选

目的:筛选有治疗胆汁淤积型肝损伤作用的赤芍提取物。方法:将小鼠随机分成正常对照组、模型组、赤芍醇提浸膏高、中、低剂量组,水提液高、中、低剂量组和阳性药赤丹退黄颗粒组;用α-萘异硫氰酸酯建立胆汁淤积型小鼠模型,连续给药6天后,检测血清ALT、BIL、ALP、TBA等指标,并进行病理组织观察和半定量分析。结果:赤芍醇提浸膏能显著降低血清DBIL、ALP、ALT和AST值(P<0.05或P<0.01),并能明显改善α-萘异硫氰酸酯引起的组织损伤(P<0.01),中剂量作用与阳性对照药相似;而水提液没有治疗作用(P>0.05)。结论:赤芍治疗胆汁淤积型肝炎的有效药物成分主要在赤芍醇提浸膏中。     

杠板归总黄酮提取物对α-萘异硫氰酸脂诱导小鼠胆汁淤积性肝损伤保护作用研究

目的：通过构建α-萘异硫氰酸脂（α-naphthylisothiocyanate,ANIT）诱导小鼠肝损伤模型,研究杠板归总黄酮提取物对小鼠肝脏的保护作用及其作用机制。方法：随机将60只昆明种小鼠分为6组,分别为空白对照组,病理模型组,阳性对照组（联苯双酯0.15 g/kg）,杠板归总黄酮提取物高、中、低剂量组（1.2、0.6、0.3 g/kg）。除空白对照组外,采用腹腔注射ANIT的方法制造小鼠急性肝损伤模型,用杠板归总黄酮提取物连续灌胃9 d,禁食20 h后,眼球取血、取肝组织,测定肝组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）的含量及血清谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartate amino transferase,AST）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、总胆汁酸（total bile acid,TBA）、总胆红素（total bilirubin,TBIL）水平。结果：与模型组相比,杠板归总黄酮高剂量组小鼠血清ALT水平[（243.14±27.35） U/L]、AST水平[（345.02±24.01） U/L]、LDH水平[（505.97±68.56） U/L]、TBA水平[（112.02±17.16） nmol/mL]、TBIL水平[（15.08±4.09） nmol/mL]以及肝组织中GSH含量 [（63.08±4.88） ?滋mol/mg]和MDA含量[（3.55±0.32） nmol/mg]明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;中剂量组小鼠肝组织中血清ALT水平[（330.56±24.74） U/L]、AST水平[（438.60±32.51） U/L]、LDH水平[（597.90±66.90） U/L]、TBA水平[（144.62±16.37） nmol/mL]、TBIL水平[（27.36±6.51） nmol/mL]以及肝组织中GSH含量[（54.52±3.80） ?滋mol/mg]和MDA含量[（5.65±0.35） nmol/mg]与模型组相比也明显降低,差异也具有统计学意义（P<0.05）。结论：杠板归总黄酮对ANIT诱导小鼠胆汁淤积性肝损伤有一定的疗效。     

甘草酸、甘草次酸及苦参碱等对实验性胆汁淤积大鼠作用的比较

目的:观察甘草酸(GL)、甘草次酸(GA)、苦参碱(MT)、氧化苦参碱(OMT)、丹参酚酸B(SAB)、水飞蓟素(SI)和地塞米松(DEX)对异硫氰酸-1-萘酯(ANIT)致急性肝内胆汁淤积的作用。方法:应用灌胃ANIT(50 mg/kg)建立大鼠急性肝内胆汁淤积病理模型,观察上述药物对大鼠肝功能各项生化指标、肝组织病理改变、2 h胆汁流量和酮洛酚葡萄糖醛酸结合物(KPG)的累计胆排泄率的影响。结果:GL、GA和MT均能明显减轻ANIT导致的胆管损伤、胆汁淤积和肝细胞损伤。DEX减轻胆管损伤,对肝细胞损伤无保护作用。OMT、SAB和SI不能减轻ANIT的肝脏毒性。结论:GL、GA、MT和DEX对ANIT诱导的急性肝内胆汁淤积型肝炎有明显的保护作用,而且GL、GA和MT的保护作用优于DEX。     

基于FXR通路探讨鸡血藤对ANIT诱导的肝内胆汁淤积模型大鼠的作用及机制

目的 观察鸡血藤对α-萘异硫氰酸盐(ANIT)诱导的肝内胆汁淤积SD大鼠的治疗作用,并从调控法尼醇X受体(FXR)相关通路方面进行机制研究.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(对照组)、ANIT造模组(模型组)、熊去氧胆酸60mg/kg组、鸡血藤150mg/kg组(鸡血藤低剂量组)、鸡血藤300mg/kg组(...     

大黄素对胆汁淤积大鼠肝细胞转运体基因表达的影响

目的：探讨大黄素对α-萘异硫氰酸酯（ANIT）致急性肝内胆汁淤积的保护作用及其机制.方法：采用ANIT灌胃制备大鼠急性肝内胆汁淤积病理模型.将32只大鼠随机分为正常对照组、正常＋大黄素组、模型组、模型＋大黄素组,观察各组大鼠肝功能各项生化指标和肝组织病理学改变,并采用实时荧光定量RT-PCR检测肝细胞膜上转运体基因胆盐输出泵（BSEP）、多药耐药相关蛋白2（MRP2）、钠-牛磺胆酸共转运蛋白（NTCP）、多药耐药蛋白2（MDR2）、多药耐药相关蛋白3（MRP3）和核受体法尼酯衍生物X受体（FXR）mRNA水平的变化.结果：模型组与正常对照组相比较,TB,DB,ALT,AST,ALP和TBA浓度明显增高（P〈0.01）,光镜下可见肝细胞变性和坏死、中性粒细胞浸润,在mRNA水平NTCP,FXR表达降低（P〈0.01）,MDR2,MRP3表达增高（P〈0.01或P〈0.05）,而BSEP,MRP2表达差异无显著性.经大黄素治疗后TB,DB,ALT,AST,ALP和TBA均降低（P〈0.01或P〈0.05）,组织病理学改变轻微,NTCP,MDR2,MRP3表达高于模型组（P〈0.05）,但BSEP,MRP2,FXR的表达与模型组相比较差异无显著性.正常＋大黄素组与正常对照组相比较上述各项指标差异均无显著性.结论：大黄素对胆汁淤积型肝炎有保护作用,调节肝脏中与胆汁酸代谢相关的NTCP,MDR2,MRP3的表达以减少胆汁酸在肝脏中的蓄积可能是其退黄、恢复肝脏功能的作用机制之一.     

软坚护肝片对大鼠肝纤维化的治疗作用

目的 探讨软坚护肝片对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用及其可能的作用机制.方法 将90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、扶正化瘀胶囊阳性对照组和软坚护肝片1.24、0.62和0.31g/kg剂量组,除正常对照组外,其余各组采用CCl4灌胃建立大鼠肝纤维化模型共12周,于第9周治疗组每天灌喂软坚护肝片(1.24、0.62和0.31g/kg)和扶正化瘀胶囊(0.20 g/kg)干预8周.实验结束后检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(Alb)、透明质酸(HA)和Ⅲ型前胶原酶(PCⅢ)的水平,以及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量和肝指数.HE染色观察各组大鼠肝纤维化程度.结果 与模型组比较,各剂量的软坚护肝片及扶正化瘀胶囊能显著降低大鼠血清中ALT、AST、HA和PCⅢ的水平,降低肝组织中异常升高的Hyp含量(P＜0.05);同时,各剂量的软坚护肝片能显著提高大鼠血清中的Alb含量(P＜0.05).软坚护肝片各剂量组大鼠肝脏纤维化程度明显减轻.结论 软坚护肝片有一定的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与降低胶原的合成及抗自由基有关.     

季德胜蛇药对大鼠急性肝损伤的保护作用及机制的初步研究

目的:探讨季德胜蛇药对大鼠急性肝损伤的保护作用及其机制.方法:SD大鼠48只,随机分为正常对照组、模型组、高剂量蛇药治疗组和低剂量蛇药治疗组.采用a-萘异硫氰酸酯(Alpha-naphthylisothiocyanate,ANIT)制备大鼠急性肝损伤模型,观察季德胜蛇药对肝损伤大鼠的血清丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷光甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)水平的影响,并对肝脏组织进行病理学观察.结果:与模型组比较,低剂量蛇药治疗组大鼠的血清ALT水平明显下降而血清GSH显著升高(P<0.05);蛇药治疗组大鼠的肝组织病理改变较模型组减轻,尤以低剂量组明显.结论:季德胜蛇药对ANIT所致大鼠急性肝损伤有一定的保护作用,其机制之一可能与提高机体抗氧化能力有关.     

复方熊去氧胆酸口服液对大鼠淤胆型肝炎的影响

观察复方熊去氧胆酸口服液(C-UDCA)对大鼠肝内胆汁淤积型肝炎的影响。采用灌胃α-萘异硫氰酸酯(ANIT)诱发大鼠淤胆型肝炎模型,检测经口给予C-UDCA后对大鼠胆汁流量、肝功能各项生化指标、肝组织生化指标及肝组织病理形态学的影响。结果显示,C-UDCA能明显减轻ANIT导致的胆管损伤、胆汁淤积和肝细胞损伤。与单方熊去氧胆酸(UDCA)比较,C-UDCA 高、中剂量组能显著降低血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平、升高肝组织Na⁺-K⁺-ATPase、SOD酶活性。提示C-UDCA对ANIT诱导的急性肝内胆汁淤积型肝炎有明显的改善作用,且C-UDCA的作用优于UDCA。     

白藜芦醇退黄保肝作用及其与胆汁酸排泄的相关性研究

目的:研究白藜芦醇的退黄保肝作用及其与胆汁酸代谢转运的相关性?方法:采用α-萘异硫氰酸酯(ANIT)致大鼠胆汁淤积性肝损伤模型,观察白藜芦醇退黄保肝的作用;原代大鼠三明治肝细胞模型上,观察白藜芦醇对ANIT损伤的肝细胞胆汁排泄,肝细胞内总胆固醇?总胆汁酸和总胆红素,以及对胆汁酸排泄相关代谢酶?转运体基因表达的影响?结果:白藜芦醇能显著降低ANIT所致胆汁淤积性肝损伤大鼠模型中血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)?天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及总胆红素(TBIL)?直接胆红素(DBIL)和间接胆红素(IBIL)的含量?在原代大鼠三明治肝细胞模型上白藜芦醇可恢复ANIT所致原代肝细胞胆管外排指数(BEI)的降低;显著降低ANIT所致的肝细胞内总胆汁酸和总胆红素的升高,恢复ANIT所致的总胆固醇水平的降低?白藜芦醇可显著改善ANIT所致的胆汁外排转运体Bsep?Mrp2?胆汁酸摄取转运体Ntcp及胆汁酸代谢相关酶Cyp7a1?Cyp8b1 mRNA表达的降低?结论:白藜芦醇具有退黄保肝?改善胆汁淤积的作用,其机制与调节肝细胞上胆汁酸排泄相关代谢酶和转运体相关?     

重肝注射液对大鼠急性黄疸的疗效研究

重肝注射液是用传统治疗黄疸性肝炎的中草药提取物配伍所制成的复方注射剂,本研究用异硫氰酸-α-萘酯(ANIT)造成的大鼠急性黄疸性肝损害模型,证实静脉滴注该制剂对急性黄疸性肝损害有良好的治疗作用,能降低血清胆红素及谷丙转氨酶,减轻肝细胞的损伤程度,为该制剂的临床使用提供了科学理论依据。     

秋水仙碱对大鼠急性胰腺炎的作用及其机制研究

目的 观察秋水仙碱对急性胰腺炎（AP）的作用,并探讨相关机制。方法 将30只AP大鼠随机分为模型组、低剂量组和高剂量组,每组10只。另取10只大鼠仅开腹,翻动胰腺,关腹,不做其他处理,设为对照组。低、高剂量组分别舌下静脉注射秋水仙碱2、4 mg/kg,对照组、模型组均舌下静脉注射等体积0.1%二甲基亚砜溶液,1次/d,连续5 d。采用酶联免疫吸附试验检测血清炎症因子水平;苏木精-伊红染色观察胰腺组织病理变化;Western blotting检测胰腺组织肿瘤坏死因子受体-1(TNF-R1)、TNFR1相关的死亡区域蛋白（TRADD）、受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组、低剂量组、高剂量组血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛（MDA）、降钙素基因相关肽（CGRP）水平、病理评分及TNF-R1、TRADD、RIP1蛋白相对表达量升高（P <0.05）;与模型组比较,低剂量组、高剂量组血清IL-6、TNF-α、MDA、CGRP水平、病理评分及TNF-R1、TRADD、RIP1蛋白相对表达量降低（P <0.05）...     

素馨护肝方对ANIT诱导大鼠胆汁淤积性肝损伤的保护作用

目的:观察中药复方素馨护肝方对胆汁淤积型大鼠T-BIL、D-BIL、I-BIL、TBA含量的影响,探讨该复方防治肝内胆汁瘀积的作用机制。方法:SD雄性大鼠40只,体重(200±10)g,根据体重随机分为4组,即正常对照组、模型组、阳性药熊去氧胆酸组、素馨护肝方组,每组10只,分笼饲养于屏障级动物环境,自由饮水。给药组给予相应的药物,模型组和正常对照组给予生理盐水,连续灌胃4 d。实验第5天,除正常对照组外,其他各组一次性灌胃ANIT橄榄油,灌胃前12 h禁食不禁水,正常对照组灌胃等体积的橄榄油。造模4 h后各组给予相应的药物或生理盐水。造模后给予相应药或水连续3 d,最后一次药后1 h麻醉取样后处死动物,各动物处死前禁食不禁水12 h。空腹取血,收集肝脏标本。全自动生化分析仪检测血清中T-BIL、D-BIL、I-BIL、TBA的含量。结果:与模型组比较,素馨护肝方组血清T-BIL、D-BIL、I-BIL、TBA均显著降低(P0.01)。HE染色显示,素馨护肝方组减少炎性细胞浸润范围和纤维细胞增生程度。结论:素馨护肝方能明显抑制肝内胆汁瘀积大鼠血清T-BIL、D-BIL、I-BIL、TBA水平,从而减轻肝细胞的损伤,这可能是其防治肝内胆汁瘀积的重要机制之一。     

α-硫辛酸防治非酒精性脂肪肝大鼠的作用机制

目的探讨α-硫辛酸对非酒精性脂肪肝大鼠的作用及机制。方法雄性Wistar大鼠90只,随机分为正常组(n=15)和实验组(n=75)。正常组普通饮食,实验组高脂饮食,8周末实验组再分为α-硫辛酸组(n=45)、维生素E组(n=15)和模型对照组(n=15)。12周末处死大鼠,检测肝指数并用生物化学法测定氨基转移酶、游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、血糖(GLU)、超氧化物歧化酶(SOD)。结果与模型对照组相比,α-硫辛酸组大鼠肝指数、氨基转移酶、GLU明显降低;同时FFA、MDA明显降低,SOD明显升高。结论α-硫辛酸可通过抗氧应激和脂质过氧化防治治疗大鼠非酒精性脂肪肝。     

垂盆草苷对幼龄肝内胆汁淤积大鼠的作用机制

研究垂盆草苷(sarmentosin,SA)对幼龄肝内胆汁淤积大鼠的干预和调节作用。将48只SD幼龄大鼠随机分为正常组(Control)、α-萘异硫氰酸酯(ANIT)组(Model)、熊去氧胆酸(UDCA)阳性对照组、垂盆草苷低、中、高剂量组,每组8只,除正常组外,各组大鼠连续1周分别灌胃给予相应药物,每日1次。在第5 d灌胃给予80 mg/kg ANIT造模。在造模后48 h测定大鼠的胆汁流量;测定大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)的活性和总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)的含量;检测肝脏组织病理变化和组织匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;测定血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(INF-γ)、白细胞介素1β(IL-1β)的表达;Western blot法分析胆汁酸转运蛋白与合成蛋白。与正常组相比,模型组胆汁流量受到明显的抑制;大鼠肝组织出现明显的病理损伤;血清中ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、TBA水平显著升高;组织匀浆中MDA含量显著升高,SOD和GSH-Px含量显著降低;炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β的表达升高(P<0.05,P<0.01);FXR、SHP-1、SHP-2、MREP2、BSEP、NTCP蛋白表达下降,CYP7A1、CYP27A1蛋白表达升高。与模型组相比,垂盆草苷各剂量组大鼠的胆汁流量呈现不同程度的增加;大鼠肝脏组织的病理损伤有所改善;血清中ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、TBA水平降低;肝脏组织匀浆中MDA的含量降低,SOD、GSH-Px的含量升高(P<0.05,P<0.01);TNF-α、IFN-γ、IL-1β的表达降低(P<0.05,P<0.01);结果表明垂盆草苷对于胆汁淤积有一定的治疗效果,其中垂盆草苷高剂量的作用效果与UDCA组相当,同时垂盆草苷可上调FXR、SHP-1、SHP-2、MREP2、BSEP、NTCP蛋白表达,下调CYP7A1、CYP27A1蛋白表达,说明垂盆草苷通过调控相关蛋白发挥作用。垂盆草苷对ANIT所致的SD幼龄大鼠肝内胆汁淤积有明显的干预和调节作用。可能是通过参与胆汁酸的转运与合成发挥其治疗作用。     

利胆退黄法对肝内胆汁淤积湿热证大鼠BSEP表达的影响

目的：通过研究利胆退黄法对肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝组织中BSEP基因表达的影响,以期进一步从分子水平探讨利胆退黄法的作用靶点及机制。方法：45只雄性SD大鼠随机分为3组：正常组、模型对照组和治疗组。检测治疗后大鼠血清生化指标、肝脏组织病理的变化和肝脏BSEP的表达。结果：治疗后治疗组大鼠体重增加（31.39士3.72 g）明显高于模型对照组大鼠（22.36±3.32 g）,P〈0.05。治疗组大鼠血清TB、DB、ALT、AST、ALP、TBA分别为13.90±2.88μmol/L,7.47±2.70μmol/L,75.33±9.42 U/L,216.64±31.20 U/L,226.40±32.86 U/L,19.73±2.10μmol/L）,低于模型对照组（34.72±3.65μmol/L,19.33±3.27μmol/L,123.73±18.51 U/L,353.78±63.08 U/L,355.49±63.08 U/L,36.15±6.77μmol/L）,P〈0.05;HE染色显示治疗组大鼠肝脏的病理损害轻于模型对照组。免疫组织化学染色显示治疗组大鼠比模型对照组表达更多BSEP阳性细胞。荧光定量RT-PCR法显示模型对照组大鼠肝组织中BSEP mRNA表达（2-△△CT值1.49±0.49）明显低于治疗组（2-△△CT值1.96±0.66）,P〈0.05。结论：利胆退黄法能有效改善肝内胆汁淤积湿热证大鼠的肝功能、减轻病理损害,并能上调肝脏BSEP的表达。