针刺调控脑缺血再灌注损伤后内质网应激机制的研究进展

脑缺血再灌注损伤(CIRI)是指缺血脑组织血供恢复再通后对脑组织及神经功能造成的二次损伤。内质网应激(ERS)是内质网受到外来压力刺激后大量错误及未折叠蛋白蓄积于内的现象。研究表明,CIRI可诱发ERS,而ERS又在CIRI的病理进程中发挥关键作用。一方面脑缺血再灌注后ERS可适度激活未折叠蛋白反应(UPR),促进内质网对错误折叠或未折叠蛋白进行处理,保护受损的神经细胞;另一方面持久剧烈的UPR则会进一步激活细胞的程序性死亡途径,诱发细胞自噬和细胞凋亡。越来越多的研究表明,针刺对大鼠脑缺血再灌注后诱导的内质网应激反应以及过度的内质网应激后引发的神经细胞自噬和凋亡均有一定的影响。因此,本研究对针刺调控CIRI后ERS的相关机制的研究进展进行概述,以期为临床应用针刺防治缺血性卒中提供一定的科学依据。     

中医药干预自噬保护脑缺血再灌注损伤的研究进展

脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)主要是指脑组织功能因缺血缺氧导致受损,而恢复血液灌注会再次对脑组织造成伤害,使脑组织细胞的损伤程度进一步加重,最终导致受损部位神经细胞凋亡或坏死,及缺血区域脑组织功能失调或丧失.CIRI是危害人们身体健康的主要疾病之一,其高病死率、高致残率给患者家庭和社会带来了严重的经济负担[1].有研究者发现在脑缺血早期,激活自噬主要起神经细胞保护作用,而在脑缺血再灌注后期,很可能因自噬的过度激活而导致神经细胞被破坏[2],目前越来越多的研究证明自噬具有双重作用.中医药治疗本病无论是中药单方、复方,或者是针刺穴位等均可多靶点、多途径地调控相关蛋白及信号通路,发挥修复神经元等脑组织的保护作用.本文通过整理相关文献,现就自噬在脑缺血再灌注损伤中的作用以及中医药在该领域的干预研究综述如下.     

细胞自噬在脑缺血再灌注损伤中作用机制的研究进展

心脏骤停心肺复苏后期患者死亡的主要原因是大脑缺血再灌注损伤,近年来自噬在脑缺血再灌注损伤中的作用逐渐被发现,自噬激活对脑缺血再灌注损伤的作用是双面的,受多种因素的调控,与多种蛋白通路相关联,发挥复杂的作用。虽然目前关于自噬在脑缺血再灌注损伤中的机制尚不完全明了,但自噬参与脑缺血再灌注后一系列病理生理变化毋庸置疑。故而对目前神经元自噬在心肺复苏后脑缺血再灌注损伤方面的研究进展进行综述。     

针刺调控自噬保护脑缺血再灌注损伤的研究进展

自噬是机体的一种自我保护机制,在缺血、缺氧等应激状态下对维持细胞存活和内环境的稳定起到重要作用。但是,过度的自噬可启动细胞的自噬性细胞凋亡。研究发现,针刺不仅能直接调控自噬体的数量,调控自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3、B淋巴细胞瘤基因2同源结构域蛋白和自噬底物蛋白p62的表达,还可以通过调控Ⅲ型磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及腺苷酸活化蛋白激酶-mTOR-UNC51样激酶1相关信号通路来抑制或激活自噬,从而改善脑缺血再灌注损伤(CIRI)。通过总结近年来针刺调控自噬防治CIRI的研究,为临床推广运用针刺治疗缺血性脑卒中提供实验依据。     

针刺治疗脑缺血再灌注损伤相关信号通路的机制研究进展

脑缺血再灌注损伤(CIRI)是指缺血脑组织在梗死相关血管开通后,可能导致比血管闭塞时更严重的急性损伤.针刺干预CIRI具有良好疗效.该文就基础研究中针刺可减轻CIRI中炎症反应、钙离子超载及相关信号通路的CIRI治疗机制进行综述,以期为CIRI中神经保护的进一步研究指明可能的方向.     

二甲双胍调节细胞自噬和焦亡发挥脑缺血再灌注损伤保护作用的机制研究

目的 研究二甲双胍(metformin,Met)调节细胞自噬和焦亡保护脑缺血再灌注损伤(CIRI)的机制.方法 采用线栓法阻塞SD大鼠大脑中动脉2h后再灌注制备CIRI模型.分两组实验,第1组:采用3个剂量的Met(50、100、200 mg· kg-1·d-1,ig)进行Met药效学和血糖评价.第2组:Met对损伤脑...     

醒神通督针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬的作用研究

目的 从自噬探讨醒神通督针刺抗脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组(简称模型组)和脑缺血再灌注+醒神通督针刺组(简称针刺组)。采用大脑中动脉线栓法构建脑缺血再灌注损伤模型,针刺组大鼠造模前5 d开始干预,取穴“百会”“四神聪”“足三里”,每日针刺1次,直至再灌注24 h。另外2组大鼠只抓取不针刺。再灌注24 h后采用氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色观察脑梗死面积,透射电镜观察神经元及自噬的亚显微结构,Western blot、免疫荧光检测缺血皮层微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein light chain 3B, LC3)、肌球蛋白样BCL2结合蛋白(coiled coil moesin like BCL2 interacting protein, Beclin-1)、自噬相关蛋白(autophagy related protein, Atg)12、蛋白激酶B (protein kinase B, PKB,又称Akt)与磷酸化Akt (...     

芪蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬相关因子LC3、p62表达水平的影响

目的 通过研究益气活血通络中药芪蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠自噬相关因子LC3、p62表达的影响，阐明该方拮抗脑缺血再灌注损伤的可能分子机制。方法 将大鼠随机分为sham组、I/R组、3-MA组、中药组。中药及3-MA抑制剂干预后，复制MCAO/R模型，再灌注24 h后进行神经功能评分；TTC染色评定脑梗死体积；免疫荧光、Western-Blot及电镜检测自噬发生水平、自噬相关蛋白表达水平、细胞损伤程度。结果 与I/R组相比，中药组大鼠神经功能损伤显著减轻，脑梗死体积显著缩小，LC3BⅡ/Ⅰ比值明显升高，p62蛋白表达量显著降低，中药组细胞形态及细胞器保留较完整，有较多自噬小体及自噬溶酶体出现。结论 芪蛭胶囊可有效缓解脑梗死及神经功能损伤，提高LC3,降低p62的表达，进一步激活细胞自噬，从而有效拮抗CIRI,保护神经元。     

柚皮素对脑缺血损伤小鼠神经细胞线粒体自噬的影响实验研究

目的:探讨柚皮素对脑缺血小鼠神经细胞的保护作用,并从线粒体自噬途径探讨其保护作用的机制。方法:采用大脑中动脉栓塞造模(MCAO)的脑缺血再灌注损伤小鼠模型,原代皮层神经元的糖氧剥夺再灌注模型。动物实验分为空白组、假手术组、模型组、溶剂组、柚皮素组、抑制剂组、抑制剂+柚皮素组。细胞实验分为正常组、模型组、模型+柚皮素组、正常+柚皮素组、模型+抑制剂组、柚皮素+抑制剂组。检测神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞活力,观察小鼠脑组织神经细胞内粒体结构和线粒体自噬体分布情况,检测线粒体相关蛋白TOMM20、COX4I1、P62、LC3、Cyt C表达水平。结果:柚皮素可以降低MCAO小鼠的神经功能缺损评分,缩小脑梗死体积,增强神经细胞活力。电镜及Western blot结果发现柚皮素可以激活并促进MCAO小鼠神经细胞线粒体自噬。结论:柚皮素可以激活脑缺血后神经细胞线粒体自噬,减轻脑缺血后神经细胞损伤。     

地黄饮子减少老龄大鼠脑组织缺血再灌注损伤的机制研究

目的：探讨地黄饮子（Dihuang Yinzi,DY）对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法：构建大脑中动脉栓塞大鼠模型诱导脑缺血再灌注损伤（Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI）。HE染色观察脑缺血再灌注大鼠大脑皮层组织病理学改变，TTC染色观察大鼠脑梗死面积，Western blot检测脑组织中与自噬相关的Beclin-1、Atg5、LC3蛋白表达的情况，免疫组化检测脑组织中CD62P的表达量，ELISA法测定大鼠血清中β血小板球蛋白/β血栓环蛋白（β-TG）和血小板因子4(PF4)的含量，并检测各组大鼠的脑水肿情况。结果：HE染色结果显示地黄饮子可明显改善缺血再灌注对脑组织的病理学损伤，TTC染色和脑水肿检测结果显示地黄饮子可有效减轻CIRI造成的脑梗死和脑水肿。与CIRI组比较，CIRI+DY12g/kg组脑组织中Beclin-1、LC3 II/LC3 I和Atg5蛋白的表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01）。脑组织中CD62P的蛋白表达量显著降低（P<0.05或P<0.01），血清中β-TG和P...     

中医药干预PERK信号通路在脑缺血再灌注损伤中的研究进展

脑缺血再灌注损伤（CIRI）是指大脑血流供应中断后再次恢复血流供应致使大脑组织正常生理结构遭到破坏,神经功能代谢损伤加重的现象。CIRI的病理生理机制复杂,主要涉及细胞凋亡、炎症反应、氧化应激、细胞自噬、内质网应激等生物学过程。现阶段,西医治疗CIRI手段有限,但中医药在防治CIRI方面却有着独特优势,可通过多途径、多靶点进行干预,从而降低病死率及改善功能障碍。PERK及其下游蛋白是内质网应激中一条诱发细胞凋亡、调控细胞自噬的信号通路,与CIRI有着密切联系。近年来在中医药防治CIRI中PERK是重要靶点之一,且取得一定成果。因此,本文对PERK信号通路在CIRI中的防治作用及中医药干预作用进行综述,为中医药在CIRI中的作用机制的研究提供又一参考方向。     

针刺调控脑缺血再灌注损伤后钙超载机制研究进展

缺血性中风关键病理环节是脑缺血再灌注损伤,而导致缺血性神经细胞凋亡、坏死的关键因素是钙超载。目前研究已证实针刺对钙稳态有良好的调控作用,可以通过抑制钙超载来减轻其对神经细胞的损害。本研究回顾近15年相关文献,分析总结针刺在调控脑缺血再灌注损伤后钙超载的病理机制,包括通过抑制连接蛋白Cx43半通道开放、调控细胞内游离钙浓度、抑制钙调蛋白表达、阻断L-型电压门控钙通道的功能等,进而抑制钙超载,调控钙稳态,拮抗脑缺血再灌注后继发的神经细胞损伤,以期为今后的研究提供思路。     

电针水沟穴对脑缺血再灌注大鼠自噬相关蛋白p62表达的影响

目的:探讨电针水沟穴对大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)损伤的保护作用及与自噬相关蛋白p62的关系。方法:线栓法复制大鼠局造性脑缺血再灌注模型。采用Bederson神经功能缺损体征评分法对MCAO/R大鼠进行神经功能评分;Western blot检测MCAO/R大鼠自噬相关蛋白p62的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠有明显神经功能缺损体征,自噬相关蛋白p62的表达明显下调;与模型组相比针刺治疗组大鼠神经功能缺损体征明显减轻,自噬相关蛋白p62的表达明显上调。结论:电针水沟穴可能是通过拮抗自噬相关蛋白p62表达的下调减轻脑缺血再灌注损伤。     

针刺激活Ⅲ型PI3K/Beclin-1通路调控脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧海马区细胞自噬

目的:观察针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧海马组织Ⅲ型磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)及Beclin-1等自噬相关指标的影响，探讨针刺调控Ⅲ型PI3K/Beclin-1通路适度激活脑缺血再灌注损伤大鼠缺血侧海马神经细胞自噬的作用机制。方法:SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、针刺组、模型+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、针刺+3-MA组，每组11只。使用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型。模型+3-MA组、针刺+3-MA组于再灌注前30 min予侧脑室注射3-MA 5䥺SymbolmApL(400 nmol/5䥺SymbolmApL)。针刺组、针刺+3-MA组针刺“大椎”“水沟”“百会”,每15 min捻转1次，留针30 min,每12 h治疗1次，共7次。于再灌注后2 h、干预后进行Garcia神经功能评分，干预后通过TTC染色法观察大鼠脑组织缺血面积百分比，Western blot法检测缺血侧海马组织Ⅲ型PI3K、Beclin-1、自噬标志物微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、溶酶体相关膜蛋白2(Lamp2)、P62的蛋白表达水平，透射电镜法观察缺血侧海马组织神经...     

针刺联合川芎嗪处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察针刺联合川芎嗪处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响。方法取健康SD大鼠18只,以线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型。随机分为假手术即正常对照组（A组,n=6）、缺血再灌注损伤对照组（B组,n=6）和针刺联合川芎嗪干预组（C组,n=6）。再灌注24 h后取脑,固定切片,染色。用大鼠行为学改变、病理形态学变化、凋亡细胞数三个指标对干预效果作出评价。结果成功复制大鼠鼠脑缺血再灌注损伤模型;针刺联合川芎嗪干预组效果显著,可明显改善缺血再灌注所致的神经元损伤。结论针刺联合川芎嗪处理能够有效抑制大鼠脑缺血再灌注损伤中神经细胞的凋亡,对大鼠有较好的脑保护作用。     

针刺“头四关穴”对脑缺血再灌注家兔Bcl-2、c-fos和Caspase-3蛋白表达的影响

目的:观察针刺"头四关穴"对家兔局灶脑缺血再灌注损伤后凋亡相关蛋白表达的影响,探讨其对神经细胞的保护机制。方法:将家兔随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组又随机分为1天、3天和7天3个时间点。采用大脑中动脉线栓法(MCAO)建立家兔局灶性脑缺血再灌注模型,在脑缺血2 h后进行再灌注。针刺组家兔在脑缺血6 h后采用电针"头四关穴"进行治疗,每日1次。在再灌注后1天、3天和7天分别处死取材。免疫组化法检测脑组织缺血区周围Bcl-2、c-fos和Caspase-3蛋白表达。结果:Bcl-2、c-fos和Caspase-3蛋白在假手术组表达较低,在模型组呈现出高表达,1天时表达最高;与模型组相比,针刺组各相应时间点c-fos和Caspase-3蛋白表达均明显降低,而Bcl-2蛋白表达则明显增高(P0.01)。结论:针刺"头四关穴"能上调Bcl-2蛋白表达,下调c-fos和Caspase-3蛋白表达,针刺"头四关穴"可能通过抑制脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡途径,从而对脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

川芎嗪抗脑缺血再灌注损伤作用机制的研究进展水

缺血性脑损伤包括缺血期原发性损伤和再灌注期继发性损伤。脑缺血再灌注损伤（CIRI）是指因脑缺血致使脑组织坏死前,闭塞的脑血管再通后缺血性损伤进一步加重的现象[1]。快速恢复脑组织的血液灌注是救治脑缺血的前提．而继后的再灌注损伤是不可避免的。CIRI是一个复杂的病理生理过程,与能量代谢障碍,兴奋性氨基酸毒性,脑细胞水肿,炎性细胞浸润,微血管新生,细胞凋亡等因素有关[2]。脑缺血后的药物干预就是要抑制神经元损伤,恢复局部脑血流,阻断缺血半暗带区向脑梗死发展。川芎嗪（TMP）是从中药川芎中提取的生物碱类有效成分。具有改善微循环。保护神经,减缓缺血再灌注损伤的作用[3]。现将近年来国内外对TMP保护脑缺血再灌注损伤作用的研究,综述如下。     

针刺对大鼠脑组织神经生物学基因表达的研究

目的:采用基因芯片技术,分析探讨针刺预处理抗脑缺血再灌注损伤作用的分子机制.方法:取雄性Wistar大鼠6只,3只为正常对照组,另3只为针刺预处理组.针刺组先行"肾俞""百会"针刺预处理,出针后0.5 h断头取脑.基因芯片技术进行基因表达差异分析.结果:针刺预处理后0.5 h,大鼠脑组织表达变化大于2倍的基因共265个,20个基因表达差异具有显著性意义(P＜0.05).其中8个基因表达上调,12个基因表达下调;涉及神经元信号传递类(离子通道、递质、受体、第二信使)基因11个,涉及转录调控类基因5个,涉及代谢酶类基因2个,涉及热休克反应类基因1个,涉及细胞骨架类基因1个.结论:一些针刺诱导的基因表达产物在针刺预处理抗脑缺血再灌注损伤过程中发挥了重要作用;针刺预处理后神经细胞功能状态的改变可能是其随后发挥抗脑缺血再灌注损伤作用的重要基础.     

中药调控PI3K/Akt信号通路治疗脑缺血再灌注损伤的研究进展

脑缺血再灌注损伤（CIRI）是指脑缺血后梗死区脑组织血流和氧供恢复，引起缺血脑组织继发性损伤的一种复杂的瀑布级联反应过程。目前尽快溶栓，恢复脑组织供血仍是治疗脑卒中的唯一策略，但相当一部分患者再灌注后其症状较前会更加严重，使患者面临神经功能损伤甚至死亡等不良结局，严重影响患者的生活质量和生命安全，因此深入探索脑缺血再灌注损伤的作用机制与治疗策略具有重要的临床意义。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路响着细胞的增殖、生长和分化，作为经典的抗凋亡/促生殖的信号传导通路之一，是预防CIRI的关键级联信号通路，在线粒体障碍、细胞凋亡、细胞自噬、氧化应激和炎症反应等多种机制中处于核心位点，与CIRI的发生发展密切相关。传统中医药对于临床治疗脑卒中及其并发症已有上千年历史，近年来中医药防治CIRI的临床成效也得到大量研究结果的肯定，进一步阐明了中药单体、活性成分及其复方可凭借多靶点、多组分和多途径的生物学优势直接或间接调控PI3K/Akt信号通路，并对CIRI起到整体性保护作用。笔者通过分析近年来国内外中医药相关研究进展，对调控PI3K/Akt信号通路在CIRI中的防治作用及机制进行综述，以期为中医药临床防治CIRI的作用机制研究提供进一步的理论依据。     

中医药防治脑缺血再灌注损伤实验研究进展

脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia_reperfusion injury,CIRI)是指脑组织在缺血恢复血液灌注后损伤进一步加重,其发生机制尚未彻底阐明.本病属中医学"中风"范畴,病机为气虚不能统血或气滞血瘀,脉络不通[1].近年来研究表明,传统中药在防治脑缺血再灌注损伤方面取得了一定成效,现综述如下.