β-地中海贫血合并δ β-地中海贫血一个家系的产前诊断

目的对1例β-地中海贫血合并δβ-地中海贫血的家系进行产前诊断。方法用PCR-反向点杂交和长链PCR技术对胎儿进行产前基因诊断。结果母亲为β-珠蛋白基因密码子41/42（？TTCT）突变杂合子,父亲为缺失型Gγ＋（Aγδβ）0突变杂合子,胎儿基因型正常。结论对一个家系中出现重型β-地中海贫血患者,但用常规方法只能找到一个基因突变时,应考虑缺失突变的可能,并用合适的方法验证,然后才能产前诊断。     

应用反向点杂交法产前诊断β-地中海贫血375例

目的探讨应用反向点杂交（RDB）产前诊断β-地中海贫血的实用性。方法对375例有出生重型β-地中海贫血患儿的孕妇用RDB方法进行产前诊断，若夫妇一方携带的为少见β-地中海贫血突变，则加用DNA测序方法。结果375例孕妇中有373（99．5％）例可以应用RDB作出产前诊断，有2例需要DNA测序完成。共377例胎儿中诊断出正常103（27．3％）例，轻型β-地中海贫血170（45．1％）例，重型104（27．6％）例。结论RDB是产前诊断β-地中海贫血较为适用的方法，能应用于在绝大多数产前诊断病例中。     

羊水细胞培养法在地中海贫血产前诊断中的应用探讨

目的探讨羊水细胞培养法在血性羊水标本地中海贫血基因检测中的应用价值。方法选取贵州省户籍,需进行地中海贫血产前诊断孕妇的血性或非血性羊水标本,用PCR结合反向点杂交(RDB)法检测经羊水细胞培养及未经培养的同一孕妇羊水细胞的3种α基因缺失,3种α点突变和17种β点突变位点地贫基因。结果培养及未经培养的羊水细胞基因组DNA地中海贫血基因检测阳性例数均为105例。其中,非血性羊水地贫基因型两种方法检测结果一致;血性羊水地贫基因型两种方法检测结果有3例不一致。结论羊水细胞培养法在地贫基因产前诊断中能有效避免因母体血污染导致的误诊,提高产前诊断的准确性。通过该方案的实施能最大限度地减少甚至预防重型地贫患儿的出生,提高人口的出生质量,对预防出生缺陷、优生优育工作有重要意义。     

缺失型β-地中海贫血一个家系的产前诊断

目的对1例β-地中海贫血合并缺失型遗传性持续性胎儿血红蛋白（HPFH）的家系进行产前诊断。方法用PCR-反向点杂交和长链PCR技术对胎儿进行产前基因诊断。结果父亲为β-基因CDs 41/42（-TTCT）杂合子,母亲为东南亚（SEA）缺失型HPFH,胎儿基因型为β-基因CDs 41/42（-TTCT）杂合子。结论在β-地中海贫血筛查中应考虑到缺失型HPFH,当它有可能与β-地中海贫血复合存在时,应进行产前诊断。     

产前诊断罕见重型β-地中海贫血一例分析

目的对产前β-地中海贫血(β-地贫)筛查阳性的患者及其胎儿进行β-地贫基因分析,对可疑罕见β-地贫患者采用基因测序法进一步确诊,防止重型地贫患儿的出生。方法通过血常规及血红蛋白电泳分析为可疑β-地贫的病例,采用反向斑点杂交法检测17种常见β-地贫基因点突变,对于未发现常见突变者采用β珠蛋白基因DNA测序。结果先证者有MCV和MCH降低,Hb A2升高的血液学表型,临床常规试剂未检出17种β-地贫基因点突变,基因测序为罕见β-地贫CD8/9(+G)突变杂合子,产前诊断胎儿为重型β-地贫:βCD17/βCDS8/9(+G)。结论对夫妻一方确诊为β-地贫,另一方有明显血液学表型但排除常见β-地贫基因突变类型的患者,应采用其它方法进一步确诊,并对其胎儿进行产前诊断,防止重型地贫患儿的出生。     

引物延伸变性高效液相色谱产前诊断β-地中海贫血

目的建立针对中国人常见β-地中海贫血(β-地贫)基因型的产前诊断新方法。方法PCR扩增的靶序列,经引物延伸,得到中国人β-地贫5个常见突变的特异性延伸片段,用全变性高效液相色谱分析延伸片段混合物,分离图谱可鉴定被检样本的基因型。结果盲法分析显示,36个家系108例样品的引物延伸变性高效液相色谱与反向点杂交(reversedotblot,RDB)检测结果符合率为100%。其中6例RDB诊断为上述5个常见突变以外的突变。该法的突变检出率为94.4%(102/108),对产前诊断家庭的诊断率为97.2%(35/36)。结论该法是一种准确、高效的β-地贫突变分析方法,可用于β-地贫的产前诊断。     

应用多重等位基因特异PCR技术进行β地中海贫血的…

在等位基因特异ＰＣＲ及多重ＰＣＲ的基础上建立了多重等位基因特异ＰＣＲ技术（ＭＡＳ－ＰＣＲ），对中国人常见的２８Ａ→Ｇ，ＣＤ１７→０，ＣＤ４１－４２（－４ｂｐ）和ＣＤ７１－７２（＋Ａ）等β地中海贫血基因突变进行检测。应用该技术对２１例β地中海贫血患者或携带者进行诊断和２例高风险胎儿进行产前诊断，诊断结果与ＰＣＲ／ＡＳＯ探针点杂交或ＤＮＡ测序的结果完全一致，证实多重等位基因特异ＰＣＲ技术具有简便、快速     

应用多重等位基因特异PCR技术进行β地中海贫血的基因诊断

在等位基因特异ＰＣＲ及多重ＰＣＲ的基础上建立了多重等位基因特异ＰＣＲ技术（ＭＡＳＰＣＲ），对中国人常见的－２８Ａ→Ｇ，ＣＤ１７→０，ＣＤ４１－４２（－４ｂｐ）和ＣＤ７１－７２（＋Ａ）等β地中海贫血基因突变进行检测，应用该技术对２１例β地中海贫血患者或携带者进行基因诊断和２例高风险胎儿进行产前诊断诊断，诊断结果与ＰＣＲ／ＡＳＯ探针点杂交或ＤＮＡ测序的结果完全一致，证实多重等位基因特异ＰＣＲ技术具有简便、快速、可靠和经济等优点。     

应用单管多重PCR诊断缺失型α-地中海贫血

目的探讨应用单管多重PER对缺失型α地中海贫血进行诊断,并了解-SEA、-α3.7、-α4.2三种缺失型在广西南宁农村地区人群中的分布情况。方法对466例用血液学参数分析初筛为仪地中海贫血患者进行基因诊断。结果初筛为OL地中海贫血466例临床标本,基因检测证实326例为0【地中海贫血。在326例o【地中海贫血患者中,-SEA／αα197例、-α3.7／αα64例、-α4.2／αα50例,占60．43％、19．63％和15．34％。与PCR检测相比,MCV、MCH和HbA2检测的灵敏度分别为86．20％、79．45％、77．61％;检测特异度分别89．29％、66．43％、71．14％。结论与血液学检测方法相比,单管多重PCR检测具有快速、准确的优点,可用于大面积人群和,临床样品的缺失型仪一地中海贫血的分子流行病学调查及产前诊断。     

β-地中海贫血产前诊断的新方法——双标记免疫荧光技术

β-地中海贫血(以下简称β-地贫)是一种遗传性疾病,表现为血红蛋白β链合成减少或完全缺乏.正常胎儿从4～6个月(second trimester)就有一定程度的β链合成,而β-地贫胎儿此时期的β链合成则明显减少或根本不合成.因此,检测胎儿血中β链的有无或多少,就可以诊断β链合成的失调程度.目前,β-地贫的产前诊断方法有两种,第一是用同位素掺入法测定胎儿红细胞中β、γ和α的相对合成速度.该法虽有一定准确性,但有以下缺点:     

β类珠蛋白基因的多态性及其在β地中海贫血产前诊断中的应用

人类β类珠蛋白基因的排列为5’-ψβ_2-(?)-Gγ-Aγ-ψβ_1-δ-β-3’(ψβ_1和ψβ_2为假基因),全长约65kb。β类珠蛋白基因具有遗传异质性.在正常情况下,某些核苷酸位点可以发生中性改变,构成β类珠蛋白基因多态性。此种多态性对β珠蛋白的合成并不产生影响,只是作为一种遗传标志而已。β地中海贫血(以下简写为β地贫或β~(thal))除了β珠蛋白基因(简写为β基因)的外显子、内含子或旁侧序列发生特异性突变或部分缺失(它     

广西桂林地区β-地中海贫血基因突变类型的探讨

目的了解桂林地区β-地中海贫血（以下简称13地贫）的基因型构成情况及分布,为制定本地区β-地贫防治计划提供参考,有效控制重型地中海贫血患儿出生。方法应用双重PCR结合反应斑点杂交技术对桂林地区426例经筛查至少符合HbA2增高、HbF增高、出现HbE带三项之-的样本进行17种中国人常见的β-地贫基因突变检测。结果在受检的426例样本中共检出杂合子419例,纯合子2例,双重杂合子5例。检出13种基因类型,其中CD41—42、CD17、IVS-11—654、CD-28、CD71—72、BE是桂林地区最主要的β-地贫基因突变类型,分别占50．47％、22．30％、12．68％、5。16％、2．81％、2．35％。结论桂林地区β-地贫以中国人发病率高的突变类型为主。     

PCR方法检测罕见中间型α地中海贫血二例报道

地中海贫血是由于珠蛋白基因的缺失或点突变所致的遗传性溶血性贫血,本文对用PCR方法检测罕见中间型α地中海贫血2例报道如下：     

利用孕妇外周血浆中小片段游离胎儿DNA进行β-地中海贫血无创性产前诊断

目的利用cffDNA对胎儿进行广西、广东地区常见的17种β-地中海贫血基因型的检测,与传统创伤性产前诊断相比较,探讨该方法的准确性和可行性。方法针对广西、广东地区常见的β-地中海贫血突变的基因型设计三对不同引物,并用生物素标记。对cffDNA进行二次PCR反应后,使用反向斑点杂交(revert dot-blot hybridization,RDB)检测胎儿的β-珠蛋白基因型,与创伤性产前诊断结果比较,观察准确率。结果37例cffDNA标本检测中,检出重型β-地中海贫血19例,轻型β-地中海贫血11例,正常7例,与创伤性产前诊断结果相比较出现3例误诊,准确率为91.9%(34/37)。结论利用cffDNA进行β-地中海贫血的检测,可能出现母源性DNA背景的污染,当胎儿基因型与母亲基因型相同时,必须提高警惕,进一步分析或者复查。因为该技术取样容易,对孕妇胎儿无风险,不受孕期时间影响,易为与孕妇接受,因此进一步改进该技术后有望可用于β-地中海贫血的诊断。     

聚合酶链反应技术在β-地中海贫血基因诊断中的应用

从云南省德宏州、西双版纳州、玉溪地区和昆明地区采集临床诊断为β-地中海贫血的病例24例，经提取DNA，聚合酶链反应和非同位素(加强化学发光，ECL)标记寡核苷酸探针点杂交进行基因诊断。文献报道β-地中海贫血的基因突变主要有十种类型。本组在已完成杂交的病例中最常见的突变为Codons 41-42，即编码子41-42发生框架位移，减少TTCT四个碱基，这与国内广东、四川的研究相似。     

单管多重PCR快速检测中国人三种常见缺失型α-地中海贫血基因

目的建立一种简单快速、准确可靠、经济实用的检测常见缺失型α-地中海贫血(α-地贫)突变(--^SEA、-α^3.7和-α^4.2)的单管多重PCR技术以用于α-地贫的分子筛查和产前诊断。方法采用gap—PCR方案设计4组PCR引物并对PCR反应条件进行系统优化以扩增代表这3种地贫和α2基因存在的特异性DNA片段。此外，还设计1对引物扩增LIS1基因3′-端非翻译区片段作为整个PCR体系扩增成功与否的内在对照。采用盲法分析对该技术的特异性、准确性和可靠性进行评价并应用于产前分子诊断中。结果所建的单管多重PCR技术成功地检出这3种常见缺失型α-地贫突变的纯合子、杂合子和双重杂合子。正常人出现LIS1和α2基因特异扩增片段，而--^SEA、-α^3.7和-α^4.2杂合子除了出现正常人的2条扩增带外，还分别出现1条指示这些突变存在的特异性扩增片段。盲法分析结果显示，该技术对α-珠蛋白基因型经过Southern印迹法或DNA直接测序确证的DNA标本的诊断准确性达到100％，并被成功地应用于9个重症α-地贫高风险家庭的产前诊断中。结论该技术可准确、快速地检测--^SEA、-α^3.7和-α^4.2 3种常见缺失型α-地贫突变，且具有经济和实用的优点，非常适合于α-地贫的大人群分子筛查和临床样品的基因诊断。     

用连锁DNA多态的分子分析β-地中海贫血和其它单基因病的产前诊断模型

在现代医学实践中,遗传因素决定的人类疾病显得日益重要。单基因病的发病率随地理分布而异,在欧洲新生儿中的发病率大约为1％。目前,临床上对这类疾病有两种处理方法,即对症治疗和通过产前诊断施行人工流产预防此病。     

β-地中海贫血的出生前诊断-胎儿红细胞与抗-AB血清反应法

近年来,由于胎儿血标本的制备和胎儿红细胞珠蛋白链合成分析的开展,使遗传性Hb病的出生前诊断成为可能。本文报道了2对夫妇有β-地中海贫血(β-地贫)危险而作出生前诊断的结果。这两例均是在遗传咨询后要求作出生前诊断的。两对夫妇中例|为β°-地贫,例2为β~+地贫,母方血型为O型,父方为AB型。胎儿血标本分别在妊娠22和21周经超声波定泣后采取。然后从母亲-胎儿的混合血中清除母亲血。例1的20μl血标本中,胎儿血占10％,例2的16,18和和19μl血标本中,胎儿血分别占40、7、10％。经试验表明:新生儿标本中红细胞低于5％时就能与抗-AB血清反应,获得令人满意的凝集作用,而且不改变β/γ比值。在本试验的2例中,例1的β/γ比值为0.038,     

闽东地区畲族小儿β-地中海贫血15例临床分析及干预措施探讨

目的通过对闽东地区13年来15例畲族小儿β-地中海贫血病例的回顾性分析,小结β-地中海贫血的各种治疗方法,并提出干预措施。方法用回顾性分析方法对闽东地区13年来15例畲族小儿β-地中海贫血病例进行临床分析。结果闽东汉族人口300万,畲族人口20万,畲汉人口比例为1:15,闽东汉族小儿β-地中海贫血住院率为0.0046‰,畲族为0.05‰,畲汉之比为12.1:1,按人口比例畲族小儿住院率远高于汉族,u=3.98,P<0.01,有高度显著性差异。畲族小儿β-地中海贫血患者占同期总住院病人数的0.05%,占同期溶血性贫血病人的6.1%,占同期β-地中海贫血住院总数的51.72%,其中男11例,女4例;山区10例,沿海5例;发病年龄1个月~7岁,平均年龄1.33岁;随访4年,12例出院后7天~4年内死亡,1例第2次住院时死亡,2例失访。结论β-地中海贫血目前尚缺少有效的治疗方法,现有的治疗包括一般治疗(含输血治疗、铁鳌合剂治疗、脾切除和脾栓塞治疗)、药物治疗(含r-基因活化治疗、抗脂质过氧化治疗、α-肽链合成抑制剂治疗)、造血干细胞移植(HSCT,含骨髓移植、BMT、脐血移植UCBT、外周血造血干细胞移植PBCCT)及基因治疗等,后二者被认为是目前根治重型β-地中海贫血的最佳方法。对夫妇双方均为地中海贫血基因携带者的孕妇,在妊娠早期或中期进行产前诊断,防止重型β-地中海贫血患儿的出生,是最积极、有效的预防措施。     

在普查β-地中海贫血性状中一种有效的渗透脆性管测法

本文评价在希腊、南斯拉夫、泰国等国人群中,用三种缓冲液(0.32%缓冲盐液、0.36%缓冲盐液和台罗德氏溶液“Tyrodesolution”)的渗透脆性管测法作为普查β-地中海贫血性状试验的有效性。作者的方法为:取三个试管分别加入5毫升的0.32%缓冲盐液、0.36%缓冲盐液和台罗德氏溶液,每一试管内加入0.02毫升全