The Effect of Fluoride on the Cellular Uptake and Pool of Amino Acids

Abstract Fluoride decreased the initial uptake of 2-aminoisobutyric acid (AIB) in LS cells only in high (supralethal) concentrations and after several hours of exposure. The steady state level of AIB seemed somewhat more sensitive as it was halved after 23 hours exposure to 6 mM-NaF. The cellular levels of some natural amino acids were also reduced by fluoride. However, cells resistant to fluoride showed equally lowered levels of amino acids, indicating that the observed effect of fluoride on cellular amino acid levels may be of little importance.     

三叶青总氨基酸对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用

目的观察三叶青总氨基酸（TAART）对四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法选用CCl4致小鼠急性肝损伤模型,以测定小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）活性,肝脏系数,肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量及对肝组织进行病理学检查等指标观察TAART对肝损伤的保护作用。结果TAART能明显降低CCl4致小鼠肝损伤血清ALT,AST值,降低肝脏系数及肝组织中MDA的含量,增加肝组织中SOD活性,减轻CCl4对肝脏细胞的病理损伤。结论三叶青总氨基酸对CCl4致小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与其抗氧化作用相关。     

阿那白滞素对缺氧-复氧和兴奋性氨基酸所致神经细胞损伤的保护作用

用缺氧-复氧环境和兴奋性氨基酸谷氨酸诱导培养神经元细胞损伤和坏死,观察阿那白滞素(1)对体外培养大鼠脑神经元细胞坏死的保护作用,以研究其抗缺血性脑损伤的作用机制.结果表明,1的3个剂量组(25、50、100μg/ml)均能明显减轻缺氧-复氧所致的神经元细胞损伤,浓度效应呈正相关.定性观察表明,1的3个剂量组对谷氨酸致神经元细胞损伤亦有改善作用,且与浓度相关.提示在缺氧-复氧和兴奋性氨基酸导致的大鼠神经元细胞损伤中可能有IL-1炎症通路参与.     

异丙酚对颅脑手术创伤所致脑脊液兴奋性氨基酸和甘氨酸水平的影响

目的：观察异丙酚对颅脑手术创伤所致脊液兴奋性氨基酸（excitatory amino acids,EAA)(主要包括谷氨酸，天门冬氨酸）和甘氨酸（glycine,Gly)水平的影响。方法：选择会侵袭脑实质的颅内手术25例，分为异丙酚麻醉（n=13)和常规麻醉（n=12)两组，分别于术前，术中和术后检测脑脊液中EAA和Gly的浓度。结果：常规全身麻醉组术后脑脊液EAA和Gly含量显著升高，表明常规全身麻醉下颅脑手术后脑细胞外液EAA和Gly 的水平明显增加，提示手术刺激类似创伤，可引起脑细胞外液脑EAA和Gly聚集；异丙酚麻醉组手术后脑脊液EAA和Gly液水平明显低于非异丙酚麻醉组。结论：异丙酚可明显抑制颅脑手术所致脑细胞外液EAA和Gly的积聚。涉及颅脑实质的手术病例用异丙酚麻醉。对减轻颅脑术后继发性神经功能损伤的发生可能有一定的临床价值。     

间-尼索地平对大鼠急性肺损伤的保护作用

目的观察新型钙拮抗剂间-尼索地平对脂多糖（LPS）诱导大鼠急性肺损伤（ALl）是否有保护作用,探讨Au治疗的新思路。方法以LPS（5．0mg／kg）尾静脉注射建立肺损伤模型。观察各组大鼠肺组织病理改变,计算肺W／D值,检测肺泡上皮细胞内Ca2＋浓度,测定支气管-肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子α（TNF—α）和蛋白质含量,肺组织中丙二醛（MDA）含量,肺毛细血管通透指数（CPI）的变化。结果间-尼索地平能明显减轻LPS所致ALl模型肺组织病变情况。间-尼索地平组肺泡上皮细胞Ca2＋浓度比LPS组含量明显减少（P〈0．05）,肺W／D值比LPS组明显降低（P〈O．05）,肺CPI比LPS组明显降低（P〈0．01）,肺组织MDA含量比LPS组含量减少（P〈0．01）。结论间-尼索地平对脂多糖肺损伤有一定的保护作用。     

Excitatory amino acid receptors in rat locus coeruleus

Summary The goal of this study was to investigate whether locus coeruleus neurons of the rat are sensitive to agonists of the different excitatory amino acid receptors. All experiments were performed on a midpontine rat slice preparation. Bath-applied l-glutamate, kainate, N-methyl-d-aspartate (NMDA) and quisqualate induced concentration-dependent activations of all neurons which were reflected in an increase of the neurons' mean discharge rate. The rank order of cell activation was kainate quisqualate > NMDA > l-glutamate. None of the agonists induced a bursting-type of discharge. The NMDA-receptor blocker dl-2-amino-5-phosphonovaleric acid (APV, 30 M) selectively antagonized the NMDA-induced increase in cell firing. Kynurenic acid (100 M) non-selectively attenuated the response to NMDA, kainate and quisqualate. Neither APV nor kynurenic acid per se had any effect on the spontaneous firing rate. If the Mg²⁺ concentration in the superfusion medium was lowered from 2 mM to nominally zero the response to NMDA was selectively increased. In conclusion, locus coeruleus neurons share with other neurons their sensitivity to agonists of all three types of excitatory amino acid receptors. However, in contrast to other neurons, they do not respond with a bursting type of discharge. Send offprint requests to H.-R. Olpe at the above address     

(-)-S·R-蝙蝠葛苏林碱对谷氨酸引起的大鼠大脑皮质神经元损伤的保护作用

用细胞培养方法,在原代培养的大鼠皮质神经细胞上,观察了(-)-S·R-蝙蝠葛苏林碱对谷氨酸引起的神经元损伤的保护作用。以Fura-2/AM为Ca²⁺的荧光指示剂,用AR-CM-MIC阳离子测定系统观察(-)-S·R-蝙蝠葛苏林碱对谷氨酸诱发大鼠脑皮质神经细胞内Ca²⁺升高的影响。结果表明(-)-S·R-蝙蝠葛苏林碱能剂量依赖性地抑制谷氨酸的神经毒作用,对谷氨酸诱发的神经细胞内游离Ca²⁺升高有明显的抑制作用。提示蝙蝠葛苏林碱对缺血性脑损伤有保护作用。     

可乐定对原代培养大鼠皮质神经元氧糖剥夺损伤的保护作用

目的：研究可乐定对原代培养大鼠皮质神经元氧糖剥夺( OGD)损伤的保护作用。方法取培养8 d的皮质神经元,分为正常对照组、模型对照组、可乐定(1.0,3.0,10.0μmol·L-1)预处理组。神经元氧糖剥脱损伤模型通过化学性缺氧、孵育液缺糖的方法建立。神经元损伤程度采用噻唑蓝( MTT)染色法和检测乳酸脱氢酶( LDH)的释放量来进行评价,观察预给予可乐定(1.0,3.0,10.0μmol·L-1)对神经元损伤的保护作用。结果显微镜下,正常对照组细胞密集,胞体饱满,边缘光滑,有较强折光性;神经元存活率(100.00±32.12)％,LDH释放比率(100.00±37.51)％。模型对照组细胞核固缩,细胞膜不完整,折光性差,MTT染色吸光度值明显降低,神经元存活率(53.61±7.62)％,LDH释放量显著增加,释放率为(166.07±9.65)％。可乐定(1.0,3.0,10μmol·L-1)预处理可明显逆转ODG损伤所致细胞形态的改变,剂量依耐性升高MTT染色吸光度值,神经元存活率分别为(67.53±10.54)％,(71.50±9.79)％和(87.48±5.29)％,同时可明显降低LDH的释放量,释放率分别为(136.45±25.72)％,(130.92±24.94)％和(121.63±32.68)％。结论可乐定对原代培养大鼠皮质神经元ODG损伤具有良好的保护作用。     

脾氨肽口服冻干粉中游离氨基酸及肽的含量测定

目的：建立定量分析脾氨肽口服冻干粉中游离氨基酸与肽含量的方法.方法：采用氨基酸分析仪,以外标法定量测定游离氨基酸与酸水解后总氨基酸的含量,总氨基酸与游离氨基酸的差值即为肽的含量.结果：各氨基酸在各自测定浓度20％～180％的范围内线性关系均良好（r均在0.999以上）;游离氨基酸回收率在97.2％ ～ 103.9％之间,总氨基酸的回收率在93.1％～ 101.7％之间,RSD均小于2.0％（n=9）.结论：本方法能够准确地测定样品中游离氨基酸及肽的含量.     

不同炮制方法对玳瑁浸出物及氨基酸含量的影响

目的 测定玳瑁药材浸出物、氨基酸的含量及炮制对结果的影响。方法 采用药典规定方法测定浸出物的量。全自动氨基酸分析仪测定经厌氧管充氮密封酸水解后玳瑁中氨基酸的含量。结果 炮制后浸出物的量明显提高。玳瑁中氨基酸含量较高,17种单体氨基酸总量达75%,其中酪氨酸、甘氨酸、脯氨酸、亮氨酸等含量较高。结论 炮制能明显提高玳瑁浸出物的量,其中砂烫醋淬后显著高于生品。全自动氨基酸分析仪能够很好地测定酸水解后的玳瑁氨基酸的含量。     

支链氨基酸对肝硬化病人血糖代谢的影响

６２例肝硬化病人分为伴发脑病（ＥＣ）Ｎ和不脑病（ＮＣ）组。两组分别交替商注支链氨基酸（ＢＣＡＡ）和含％葡萄糖ＢＣＡＡ，并定时取血测定血Ｎ（ＢＧ）、胰岛素（ＩＲＩ）及胰高糖素（ＩＲＧ）。结果表明，ＥＣ组给含葡萄糖ＢＣＡＡ后３０ｍｉｎ血糖明显下降（Ｐ＜０．０１），并出现低血糖症，ＩＲＩ／ＩＧＲ比值显著上升，而ＮＣ组上述现象却不明显。提示，对临床伴有脑病的肝硬化病人使用ＢＣＡＡ特别是和葡萄糖联用时可引起或加重低血糖症，应适当监测血糖水平或并用高渗葡萄糖。     

正交设计优选乳宁丸中总氨基酸的测定工艺

优选出乳宁丸中总氨基酸的最佳测定工艺。方法：采用L9（3^4）正交试验设计,以水解温度、水解时间和盐酸浓度为考察因素,乳宁丸中总氨基酸的含量和得率为考察指标,确定乳宁丸中总氨基酸的最佳提取条件。结果：最佳测定工艺为水解温度llO℃,水解时间为22h,盐酸浓度为6mol·L^-1。结论：该优化测定工艺可用于乳宁丸中总氨基酸的测定,为乳宁丸的进一步研究提供了参考。     

Protective Effect of Nebivolol against Oxidative Stress Induced by Aristolochic Acids in Endothelial Cells

Aristolochic acids (AAs) are powerful nephrotoxins that cause severe tubulointerstitial fibrosis. The biopsy-proven peritubular capillary rarefaction may worsen the progression of renal lesions via tissue hypoxia. As we previously observed the overproduction of reactive oxygen species (ROS) by cultured endothelial cells exposed to AA, we here investigated in vitro AA-induced metabolic changes by ¹H-NMR spectroscopy on intracellular medium and cell extracts. We also tested the effects of nebivolol (NEB), a β-blocker agent exhibiting antioxidant properties. After 24 h of AA exposure, significantly reduced cell viability and intracellular ROS overproduction were observed in EAhy926 cells; both effects were counteracted by NEB pretreatment. After 48 h of exposure to AA, the most prominent metabolite changes were significant decreases in arginine, glutamate, glutamine and glutathione levels, along with a significant increase in the aspartate, glycerophosphocholine and UDP-N-acetylglucosamine contents. NEB pretreatment slightly inhibited the changes in glutathione and glycerophosphocholine. In the supernatants from exposed cells, a decrease in lactate and glutamate levels, together with an increase in glucose concentration, was found. The AA-induced reduction in glutamate was significantly inhibited by NEB. These findings confirm the involvement of oxidative stress in AA toxicity for endothelial cells and the potential benefit of NEB in preventing endothelial injury.     

柱前衍生反相高效液相法定量检测烧伤患者血清氨基酸的含量

目的：应用柱前衍生的高效液相色谱法,定量测定重症烧伤病人血清中氨基酸的含量。方法：以2、4－二硝基氟苯（DNFB）为衍生剂,用反相高效液相色谱法在360nm处测定血清中17种游离氨基酸的含量。并以外标法进行计算。结果：在27分内分出17种氨基酸,分离完全。DNFB省生的氨基酸其回收率在97.32％－104.26%之间,变异系数为1.5%-4.8%。在重症务病人组,血清中多种氨基酸含量发生显著改变。结论：本法操作简便,快速准确,重复性好,适用于临床检测的需要。     

汉防己甲素对低温灌洗保存大鼠供肝的肝功能影响的实验研究

目的:观察汉防己甲素(TET)在低温灌洗保存供肝时对肝细胞的钙超载及肝功能的影响。方法:低温灌洗保存大鼠肝脏4 h,按保存液的不同分为4组:A组(对照组):乳酸林格液灌洗保存;B组(TET注射组):腹腔内注射TET,乳酸林格液灌洗保存;C组(TET灌洗组):腹腔内注射TET,乳酸林格液中加入TET灌洗保存;D组(Collins组):Collins液灌洗保存,测定供肝低温灌洗保存后肝细胞内钙浓度和肝功能,并在光镜和电镜下观察肝脏的结构。结果:细胞内钙浓度和肝功能测定,各实验组与对照组、C组与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05);组织学观察支持以上结果。结论:TET能显著减轻低温灌洗保存下肝细胞的钙超载并起到保护肝功能作用;TET溶液直接灌洗保存供肝比TET腹腔注射效果好;用TET溶液灌洗并保存供肝4 h与Collins液灌洗保存组效果相近;TET对供肝的灌洗保存有积极的作用,因此推断该药有望用于临床供肝的保存。     

甘草酸二铵对大鼠脑缺血再灌致神经细胞凋亡的保护作用

研究表明,细胞凋亡是造成脑缺血-再灌注后迟发性持续神经细胞损伤不可忽视的重要因素.所以,减少神经细胞的凋亡对于减轻局灶性脑缺血再灌注损伤显得尤为必要.已有研究表明,甘草酸二铵为18α-甘草酸的铵盐制剂,具有很强的抗炎、抗过敏、保护膜结构和免疫调节作用[1].本实验则进一步研究了甘草酸二铵(DG)对缺血再灌注致脑神经细胞凋亡的保护作用.     

汉防己碱和1，6—二磷酸果糖对大鼠局部脑缺血模型的作用

以大鼠大脑中动脉阻塞24小时后的梗塞面积和体积为指标，试验了汉防己碱和1，6－二酸果糖对大鼠局部脑缺血的保护作用，在大脑中动脉阻塞后，汉防己碱7．5，12．0和15．0mg.kg^-1以及1，6－二磷酸果糖20和350mg.kg^-1分别立即腹腔给药，以剂量依赖方式明显减少大鼠脑的梗塞面积和体积，MK8012．0mg.kg^-1亦能减少梗塞面积和体积，汉防己碱和1，6－二磷酸果糖联合用药所产生的保护作用比任何一药物单用时的保护作用都好，提示汉防巳碱和1，6－二酸磷酸果糖有协同作用，在大脑中动脉阻塞后1小时和2小时给药，汉防己碱和1，6－二磷酸果糖仍有脑缺血保护作用，但在梗塞后3小时给药则未见任何保护作用。提示中风或脑缺血后，既非5分钟即不可救药，但亦应尽早用药，实验结果表明汉防己碱和1，6－二磷酸果糖可能有希望的脑缺血保护剂。     

海螵蛸中游离核苷与氨基酸类成分的同时检测与分析

目的 建立同时测定海螵蛸中12种核苷、18种氨基酸含量的检测方法。方法 使用超快速液相色谱-串联质谱（UFLC-MS/MS）,采用Acquity BEH Amide色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,采用乙腈-0.1%甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min^–1,柱温30℃;采用电喷雾离子源正离子多反应监测模式测定。采用主成分分析和二维主成分分析对样品进行综合评价。结果 12种核苷、18种氨基酸在一定范围内线性关系良好（r²>0.999 0）,稳定性、精密度、重复性均良好,RSDs<3.24%,加样回收率在95.14%~103.84%,RSDs在0.93%~3.82%。18个批次海螵蛸中核苷总量为82.38~565.65 μg·g^–1,氨基酸总量为1 233.12~9 913.49 μg·g^–1。通过主成分分析不同产地海螵蛸主成分包含9种氨基酸和7种核苷,并且具有地域性特征。结论 该方法准确、快速、高效,可同时完成对海螵蛸中12种核苷、18种氨基酸的含量测定,可为海螵蛸的质量评价与鉴定提供相关依据,为后续研究提供参考。     

复方氨基酸胶囊纠正慢性肾功能衰竭血液透析伴低蛋白血症的疗效观察

目的:观察复方氨基酸胶囊纠正慢性肾功能衰竭血液透析伴低蛋白血症的疗效。方法:30例慢性肾功能衰竭血液透析伴低蛋白血症患者口服复方氨基酸胶囊(0. 35g/粒)2粒,2次/d ,连用12wk ,比较治疗前和治疗后肝、肾功能及血浆白蛋白、血浆前白蛋白的变化。结果:治疗前、后血浆白蛋白分别为(30. 5±4. 6)、(35 .9±7. 1)g/L(P<0. 05) ;治疗前、后血浆前白蛋白分别为(213. 0±46. 9)、(275. 8±52 .3)mg/L(P<0. 05)。治疗前、后患者肝、肾功能无显著变化,且服药过程中无1例发生任何不良反应。结论:复方氨基酸胶囊用于纠正慢性肾功能衰竭血液透析患者的低蛋白血症安全、有效。