双自杀基因重组腺病毒对胰腺癌细胞SW1990的体外杀伤作用

目的 研究腺病毒介导的血管内皮生长因子(VEGF)启动子驱动胞嘧啶脱氨酶(CD)/胸苷激酶(TK)融合基因系统(Ad-VEGFP-CDTK)对胰腺癌细胞SW1990增殖的影响.方法 重组腺病毒体外感染表达VEGF的SW1990细胞株,用空腺病毒做对照,观察其感染效率并以RT-PCR、Western blot方法检测转基因细胞CDTK的表达,MTF法观察该体系对SW1990细胞生长增殖的影响及其旁观者效应;电镜观察细胞的病变;流式细胞仪检测细胞周期的变化和DNA含量的变化;分光光度法检测细胞内caspase-3活性. 结果两种腺病毒对细胞株的感染率相似.RT-PCR和Western blot检测发现转染Ad-VEGFP-CDTK的细胞有目的基因和蛋白的表达.MTT法检测显示前药呈剂量依赖性抑制SW1990生长,且观察到该体系明显的旁观者效应.电镜下可见SW1990有凋亡改变.用流式细胞仪测定用药组出现典型的凋亡峰;细胞周期分析显示治疗后细胞G0-G1期比率增多,G2-M及S期细胞减少.随着前药浓度的升高转基因细胞内caspase-3活性逐渐升高.结论 VEGF启动子可调控双自杀基因体系抑制胰腺癌细胞SW1990增殖,并且诱导胰腺癌细胞凋亡.     

microRNA-451对人脑胶质瘤细胞株A172增殖和凋亡的影响

目的 观察microRNA-451(miR-451)对胶质瘤细胞株A172增殖和凋亡的影响.方法 合成寡核苷酸miR-451拟似物(miR-451 mimics)转染A172细胞,实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染后miR-451的表达,Western blot法检测蛋白表达,应用流式细胞术、噻唑蓝(MTT)比色法和Annexin Ⅴ法评价miR-451对A172细胞生长、增殖和凋亡的影响.结果 与对照组比较,miR-451 mimics转染组细胞miR-451表达升高＞6倍;Western blot法显示癌基因AKT1表达下降到(43.81±5.20)%、Cyclin D1(56.09±3.40)%和bcl-2(63.49±3.70)%,抑癌基因p27表达升高到(145.51±6.70)%;细胞周期G0/G1期细胞增多达17.4%,出现G0/G1期阻滞;MTT法分析显示细胞生长受抑＞35%;Annexin Ⅴ法检测显示细胞凋亡明显升高＞15%.结论 miR-451可抑制人脑胶质瘤细胞生长和增殖,诱导细胞凋亡,具有抑瘤作用.     

线粒体融合素基因-2对乳腺癌细胞增殖的影响及其机制

目的 观察外源性线粒体融合素基因-2(Mfn2)对乳腺癌细胞(MCF-7)增殖的影响,探讨其抑制乳腺癌细胞产生增殖的机制.方法 将含有Mfn2cDNA的质粒在阳离子聚合物的介导下在体外转染MCF-7,蛋白印记法(Western blot)检测绿色荧光蛋白(GFP)、p21waf1、CDK2蛋白的表达,细胞计数测定Mfn2对MCF-7细胞增殖的影响,DNA直方图分析法测定Mfn2对MCF-7周期分布的影响,用Cyclins/DNA双参数流式细胞术对Cyclin A进行标记,Cellquest软件分析.结果 转染Mfn2基因的MCF-7细胞可以稳定高表达GFP蛋白;细胞计数测定表明转染Mfn2cDNA后,MCF-7细胞增殖明显受抑,DNA直方图分析法测定显示细胞停滞于S期;转染质粒组S期细胞占42.70%,转染空质粒组和空白对照组分别为17.15%、19.58%(P《0.05);用Cyclins/DNA双参数流式细胞术检测转染质粒组Cyclin A较对照两组明显升高;Western blot显示转染质粒组p21高表达,磷酸化CDK2低表达.结论 转染Mfn2基因可以明显抑制MCF-7细胞的增殖,并使细胞停滞于S期.     

腺病毒介导的Wt-p53基因对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨野生型p53（wtp53）基因对体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFB）增殖的影响。方法 通过腺病毒载体将wt-p53基因转染至KFB中，用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测转染组与非转染组KFB中wt-p53的mRNA表达；通过间接免疫荧光法检测转染组与非转染组KFB中wt-P53蛋白表达；转染后1～6d用台盼蓝染色法计数活细胞数，并绘制生长曲线；采用流式细胞仪检测两组细胞生长周期各时相分布。结果 两组细胞中wt-p53的mRNA表达相差明显，转染组细胞中wt-P53蛋白表达明显强于非转染组；转染组细胞G0～G1期比例明显高于非转染组（P〈0．05），而G2～M期比例明显低于非转染组（P〈0．05）。结论 wt-p53基因能明显抑制体外培养的KFB增殖。     

TRIM55对大鼠系膜细胞增殖的调控作用

目的系膜增殖性肾炎是世界范围内高发的肾小球疾病,其发病与系膜细胞异常增殖有关,但调控系膜细胞增殖的内在分子机制尚不明确。本研究旨在探索TRIM55对大鼠系膜细胞(RMCs)增殖的调控作用及机制。 方法向8周龄雄性SD大鼠尾静脉注射2.5 mg/kg抗Thy-1抗体建立抗Thy-1肾炎模型。PAS染色观察肾脏病理表现,qPCR检测大鼠肾小球TRIM55 mRNA表达量;利用质粒及siRNA转染分别得到TRIM55过表达及低表达的RMCs,利用流式细胞仪检测其细胞周期;Western印迹检测p27及Cyclin D1的蛋白表达量。 结果TRIM55在抗Thy-1肾炎模型系膜增殖期高表达(P<0.01,T＝3.625)。体外RMCs中,TRIM55过表达可促进RMCs细胞周期由G1期向G2/S期转化,诱导系膜细胞增殖(P<0.01,T＝13.1);TRIM55低表达可引起RMCs的G1期阻滞,抑制RMCs增殖(P<0.01,T＝5.31)。此外,TRIM55过表达可下调p27表达、上调Cyclin D1;反之,TRIM55低表达可上调p27表达、下调Cyclin D1。 结论TRIM55可通过调节p27及Cyclin D1表达水平影响细胞由G1期到G2/S期的转化,进而调控RMCs的增殖。     

脆性组氨酸三联体基因对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨脆性组氨酸三联体基因（FHIT）转染对结肠癌细胞株SW480增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 将重组真核表达质粒pRc/CMV2-FHIT通过脂质体转染技术导入人结肠癌细胞株SW480（实验组）,筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染了空质粒pRc/CMV2的SW480细胞作为阴性对照,以正常SW480细胞作为空白对照.应用MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western blot分析caspase-8酶原的变化,半定量RT-PCR检测caspase-8 mRNA水平的改变,肽核酸标记底物的比色法检测caspase-8的相对活性.结果 转染96 h后,实验组和阴性对照组细胞生长抑制率分别为71.7%和16.9%,G0/G1细胞比例分别为（63.3±3.5）%和（50.6±2.1）%,细胞凋亡率分别为（40.5±3.1）%和（18.6±2.6）%,caspase-8 mRNA条带光密度积分值分别为107和41,caspase-8蛋白相对活性分别为0.43和0.25;上述差异均有统计学意义（P＜0.05）.当加入FHIT抑制剂后,caspase-8蛋白相对活性恢复至对照组水平（0.22）.结论 FHIT基因转染能够明显抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,诱导SW480细胞发生G0/G1期阻滞,其作用机制可能与caspase-8表达及活性上调有关.     

RNA干扰沉默雷帕霉素靶蛋白基因表达对血管平滑肌细胞增殖活性的影响

目的 构建靶向雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的RNA干扰表达载体，观察其对血管平滑肌细胞（VSMC）增殖活性的影响。方法 根据大鼠mTOR基因序列设计2个短发夹环RNA（shRNA）序列，化学法合成单链寡核苷酸序列，将cDNA序列插入逆转录病毒载体pLXIN，脂质体介导转染包装细胞PT67后获得mTOR的重组逆转录病毒shRNA表达载体，感染VSMC，Northern blot和Western blot法检测mTOR及其下游底物真核细胞启动子4E结合蛋白（4E-BP1）、p70s6k等表达的变化，流式细胞仪检测VSMC细胞周期的变化，噻唑蓝（MTT）法检测VSMC增殖活性的改变。结果 shRNA序列插入pLXIN载体并感染VSMC，证实其能够显著抑制mTOR的mRNA和蛋白产物表达，mTOR通路下游的核糖体蛋白S6激酶（p70s6k）表达相应减少，而4E-BP1的表达却显著增强；感染前VSMC细胞G1／Go期比例为71％，S期为15％，凋亡细胞为2％；转染后72h，G1／岛期比例为87％，S期为6％，凋亡细胞为6％（P＜0．01）；表明G0／G1→S过程受阻，VSMC的分裂、增殖受到抑制，凋亡机制启动，更多细胞停滞在G0／G1期。结论 成功构建靶向mTOR基因的shRNA表达载体，能够明显抑制VSMC分裂、分化和增殖。     

线粒体融合素基因2联合氟尿嘧啶对肝癌细胞的作用

目的研究线粒体融合素基因2(mfn2)转染联合氟尿嘧啶对肝癌细胞的作用。方法用脂质体2000将质粒pEGFPmfn2、空质粒pEGFP N2分别转染HepG2细胞,实验分三组:重组质粒pEGFPmfn2转染HepG2细胞为实验组,空质粒pEGFP-N2转染HepG2细胞为阴性对照组,HepG2细胞为空白对照组。RT-PCR和Western Blot分别检测转染后各组细胞mRNA和蛋白水平的表达。采用MTT法检测mfn2基因转染联合5-氟尿嘧啶对肝癌细胞增殖的影响;流式细胞术检测转染后细胞周期的分布情况。结果经脂质体2000转染后,RT-PCR结果显示转染mfn2基因的HepG2细胞基因组中存在有目的基因特异性片段,表明转染成功;Western Blot检测结果表明转染后细胞中有Mfn2蛋白表达;流式细胞术对细胞周期分布检测的结果表明,细胞被阻滞在G0/G1期,转染pEGFPmfn2组G0/G1期所占比例为(83.2±1.5)%,明显高于转染空质粒pEGFP组与对照组G0/G1期所占比例(P<0.05)。MTT法检测结果提示转染mfn2基因的HepG2细胞可增强化疗药物氟尿嘧啶对细胞的增殖抑制作用。结论线粒体融合素基因2联合氟尿嘧啶作用肝癌细胞能够加强氟尿嘧啶的增殖抑制作用,明显增强肝癌细胞对氟尿嘧啶的敏感性。     

细胞周期蛋白D1在三氧化二砷抑制人胆囊癌细胞生长中的作用

目的 探讨细胞周期蛋白(Cyclin)D1在三氧化二砷(As2O3)抑制人胆囊癌细胞体外生长中的作用.方法 不同浓度的As2O3作用于胆囊癌细胞GBC-SD,MTT法检测细胞生长情况,流式细胞仪检测细胞周期分布.Western印迹和RT-PCR检测Cyclin D1、D2、D3和CDK4、K6的蛋白和mRNA表达.构建Cyclin D1的表达质粒并转染GBC细胞,观察Cyclin D1过表达时细胞周期的变化.结果 As2O3能抑制胆囊癌细胞生长,作用呈时间、剂量一效应关系;流式细胞仪检测发现As2O3可将增殖过程中的胆囊癌细胞阻滞于G1期;Western印迹及RT-PCR检测显示Cyclin D1表达下降;过表达Cyelin D1逆转了As2O3对细胞周期的改变.结论 Cyclin D1在As2O3抑制人胆囊癌细胞的生长中起重要作用.     

细胞周期蛋白E小干扰RNA靶向调控乳腺癌移植瘤生长的研究

细胞周期蛋白(Cyclin)E是调控细胞从G1期进入S期的一个重要蛋白,它与乳腺恶性肿瘤的生长、增殖、内分泌治疗的敏感性以及病情预后都有密切联系.已有相关文章报道在体外Cyclin E能够高效地抑制乳腺癌细胞中Cyclin E的表达,从而抑制乳腺癌细胞的生长与增殖.我们通过建立不同模式的乳腺癌移植瘤模型来观察Cyclin E在体内对于成瘤能力的不同影响,展示针对Cyclin E的RNA干扰(RNAi)技术用于基因靶向治疗的潜在价值.     

转染人高迁移率族蛋白1反义基因对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨反义高迁移率族蛋白1(HMGB1)基因对人胰腺癌细胞的抑制作用。方法　应用分子克隆技术构建反义HMGB1基因真核表达载体pcDNA3 1/anti HMGB1,用脂质体法将其导入人胰腺癌细胞PANC 1中,经G4 18筛选获得可稳定表达反义HMGB1的人胰腺癌细胞克隆,通过逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法和噻唑蓝比色法检测转染4 8h后胰腺癌细胞HMGB1基因表达和体外增殖活性的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期情况。结果　获得了pcDNA3 1/anti HMGB1真核表达质粒,pcDNA3 1/anti HMGB1转染可使PANC 1细胞HMGB1mRNA和蛋白表达水平显著降低(P <0 .0 1)、肿瘤细胞增殖能力明显受到抑制(P <0. 0 1) ,并出现细胞周期G1期阻滞、凋亡细胞百分数增加。结论　反义HMGB1基因的表达能有效抑制胰腺癌细胞的体外增殖并促进细胞凋亡。     

结肠癌肝转移细胞增殖能力减弱

目的 通过阶梯转移法在裸鼠中筛选出人结肠癌肝转移细胞,然后对结肠癌肝转移细胞的生长增殖能力进行鉴定.方法 通过SW1116细胞株裸鼠皮下连续5次传代后取皮下种植瘤裸鼠结肠原位种植,分别取肝脏转移灶和皮下5代细胞进行原代培养,获得大肠癌肝转移细胞和皮下5代的原代细胞,分别命名为结直肠癌肝转移细胞1代(CHM-1)和皮下第5代(P5),通过CCK-8测生长曲线、流式检测细胞周期以及细胞周期相关的蛋白的免疫细胞化学来对SW1116、CHM-1和P5增殖能力进行检测.结果 细胞增殖实验显示CHM-1生长速度明显慢于SW1116和P5细胞(P＜0.05);流式细胞周期分析中CHM-1细胞G41期(68.390±2.865)%比例高于SW1116(50.440±1.472)%和P5(53.930±2.651)%(P＜0.05),G2期CHM-19(13.530±4.411)%比例要低于SW1116(32.030±5.645)%和P5(29.720±3.559)%(P＜0.05),S期3种细胞差异无统计学意义(18.250±6.901)%、(19.050±4.162)%、(18.930±0.169)%(P＞0.05);免疫细胞化学分析发现细胞周期蛋白Cyclin DI在CHM-1(23.7±4.7)%中的表达比SW1116(30.2±5.1)%和P5(32.1±4.2)%减少(P＜0.05).结论 发现侵袭能力和生长增殖能力具有反向关联,即结肠癌肝转移细胞具有更强的侵袭能力,但生长增殖速度比其他细胞更慢.

Abstract：

Objective To study the proliferation ability of liver metastatic colorectal cancer cells by establishing stepwise metastatic colorectal carcinoma cell model via in vivo selection.Methods SW1116 cells were transplanted into the subcutis of nude mice and serially passaged for 5 times,and then the subcutaneous tumor was implanted into the cecal wall of new nude mice.The liver metastatic lesions and the subcutaneous carcinoma cells of the fifth generation were picked for primary culture.Two cell lines named CHM-1 and P5 were obtained.Proliferation levels were analyzed by testing of cell growth curve,cell cycle analyses by flow cytometry and Cyclin D1 analysis by immunocytochemistry.Results CHM-1 grew much slower than P5 and SW 1116 although there was no difference between P5 and SW 1116 in cell proliferation assay ( P＜0.05 ).Cell cycle analysis revealed that the percentage of cells in G0/G1 phase was higher (P＜0.05) in CHM-1 (68.390 ±2.865)% than in SW1116 (50.440 ± 1.472)% and P5 (53.930 ± 2.651)%,but that in G2/M phase was lower ( P＜0.05 ) in CHM-1 ( 13.530 ± 4.411 )% than in SW1116 (32.030 ±5.645)% and P5 (29.720 ±3.559)% rough there was no difference in S phase ( 18.250 ± 6.901 )%,( 19.050 ± 4.162 )%,( 18.930 ± 0.169 )% ( P ＞ 0.05 ).The expression of cell cycle proteins Cyclin D1 was decreased ( P＜0.05 ) in CHM-1 ( 23.7 ± 4.7 )% as compared with thoseinP5(32.1±4.2)% and SW1116 (30.2 ±5.1)%.Conclusion In the same cell line,there was a reverse relationship between the ability of invasion and proliferation.     

丁酸钠对人胰腺癌细胞ASPC-1生长的影响及其机制的研究

目的 探讨丁酸钠对人胰腺癌ASPC-1细胞生长的影响并探讨其作用机制.方法 使用不同浓度丁酸钠处理ASPC-1细胞.MTT法观察肿瘤细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化;Western印迹法检测细胞内p21、p53、bcl-2、bax蛋白表达的变化,实时定量PCR检测p21和bcl-2的表达.结果 丁酸钠能明显抑制ASPC-1细胞的增殖,其作用具有明显的时间和剂量依赖性.丁酸钠处理24 h后ASPC-1细胞凋亡率明显提高(P＜0.05),S期细胞比例显著降低(P＜0.05),G0/G1期细胞比例显著升高(P＜0.05).p21、bax蛋白表达明显上调(P＜0.05);bcl-2蛋白的表达显著降低(P＜0.05);p53蛋白表达无明显变化(P＞0.05).结论 丁酸钠可以通过诱导胰腺癌细胞的凋亡和周期阻滞而抑制癌细胞生长;其发生机制可能与下调抗凋亡基因bcl-2、上调促凋亡基因bax和肿瘤抑制基因p21的表达有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of sodium butyrate(NaBT) on proliferation of human pancreatic cancer cell line ASPC-1 and explore the possible mechanism. Methods The methylthiazolyl tetrazolium assay (MTT) method was used to detect cell proliferation and draw a curve. The cell apoptosis and cell cycle were determined with flow cytometry. Western blot was used to study the effect NaBT on the pancreatic cancer cells and explore its mechansim. Real-time PCR was employed to assess the expression levels of p53, p21, bcl-2 and cell cycle regulation gene p21. Results After incubation with different concentrations of NaBT for 24 to 72 h, ASPC-1 cell proliferation was inhibited dramatically. NaBT induced an increase of G0/G1 phase cells and a significant decrease in the ratio of S phase cells. The expression of p21 and bax was up-regulated at protein and mRNA level. The expression of bcl-2 was down-regulated at protein and mRNA level. There was no significant difference in the expression of p53 at protein and mRNA level. Conclusion TSA-induced growth inhibition is associated with a block in the G0/G1 phase and apoptosis, which may occur through down-regulating the expression of apoptosis gene bcl-2 and up-regulating the expression of cell cycle regulation gene p21and pro-apoptotic gene bax.     

脆性组氨酸三联体基因FHIT对乳腺癌细胞株MCF-7的作用

目的 克隆人类脆性组氨酸三联体基因(FHIT)并构建其真核表达载体pcDNA3.1(+)/FHIT,将人FHIT基因转染人乳腺细胞MCF-7中稳定表达,检测转染后细胞生物学特性的变化.方法 构建FHIT基因表达载体pcDNA3.1(+)/FHIT,用脂质体法将FHIT基因的真核质粒表达载体pcDNA3.1(+)/FHIT导入人乳腺癌细胞MCF-7中,细胞计数、流式细胞术分析转染后细胞的生物学特性变化.结果 将逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增后的产物克隆到表达载体peDNA 3.1(+)上,经PCR扩增筛选鉴定和测序鉴定证实为所需序列,转染乳腺癌MCF-7细胞后,FHIT基因的表达明显增强,细胞周期分析发现MCF-7/FHIT与MCF-7比较S期及G2/M期的细胞减少,G0/G1期的细胞增加,MCF-7/FHIT细胞的凋亡率为(29.75±5.90)%,MCF-7细胞的凋亡率为(11.21±6.10)%,和MCF-7比较,转染后的MCF-7/FHIT细胞的凋亡明显增加,MCF-7细胞的增殖明显抑制.结论 FHIT基因表达载体可有效抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖.     

胃泌素受体拮抗剂丙谷胺对人大肠癌SW480细胞株作用及机理

目的，探讨胃泌素受体拮抗剂丙谷胺(PGL)对人大肠癌SW480细胞株活细胞散、DNA和蛋白质合成及细胞增殖周期的影响，为大肠癌病人应用丙谷胺治疗提供实验依据．方法：用MTT比色分析法测活细胞散，流式细胞术测DNA、蛋白质和细胞增殖周期。结果，PGL组括细胞散、DNA和蛋白质合成、细胞周期分布和增殖指数(PI)与对照组比无显著性(P均>0.05)。PG(5肽胃泌素)组活性细胞数明显高于对照组(P<0.01)，POL PG组活细胞散、DNA和蛋白质台成、S、G1M期细胞数及PI均明显低于PG组(P均<0．01)，G0/G1期细胞散明显高于PG组(P<0.01)，而与对照组比均无显著性(P均>0．05)。结论。PG对大肠癌SW480细胞株生长无明显影响，但可抑制胃泌素对大肠癌细胞的促增殖作用，其作用机理为抑制胃泌素对癌细胞的DNA和蛋白质的合成，从而抑制癌细胞从G0/G1期过渡S、G1M期。     

转染TSLC1基因肝癌细胞株BEL-7402生物学特性的研究

目的 将人TSLCl基因转染人肝癌细胞BEL-7402中稳定表达,检测转染后细胞生物学特性的变化.方法 用脂质体法将TSLCl基因的真核质粒表达载体pcDNA3.1(+)/TSLCl导人人肝癌细胞株BEL-7402中,G418筛选克隆,再以逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)、Western blot的方法检测TSLCI的表达,细胞计数、流式细胞术及裸鼠负荷瘤实验分析转染后细胞的生物学特性变化.结果 TSLCl在BEL-7402细胞中的表达可抑制BEL-7402细胞的生长,BEL-7402-TSLCI与BEL-7402比较s期及G2/M期的细胞减少,G0/G1期的细胞增加.转染后的BEL-7402-TSLCl细胞的凋亡明显增加,转染后荷瘤裸小鼠肿瘤的生长受到抑制.结论 TSLCl基因的转染可以抑制BEL-7402细胞的增殖、诱导肝癌细胞的凋亡,为肝癌的基因治疗提供理论依据.     

抑制信号传导与转录激活因子3对人胰腺癌体外血管生成的影响

目的　探讨RNA干扰(RNAi)抑制信号传导与转录激活因子3(STAT3)对人胰腺癌体外血管生成的影响及其机制.方法 RNAi抑制胰腺癌细胞株SW1990细胞中STAT3、噻唑蓝(MTT)和流式细胞技术分别检测胰腺癌细胞上清液对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞增殖和细胞周期的影响.体外迁移实验检测胰腺癌细胞上清液诱导的HUVEC迁移能力;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胰腺癌细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达.结果　MTT和流式细胞仪结果显示RNAi抑制STAT3后,HUVEC增殖能力下降,24、48、72 h的细胞增殖率分别为(1.19±0.11)％、(1.62±0.15)％、(1.95±0.18)％;细胞周期阻滞于G0/G1期,为(80.95±7.49)％.体外迁移实验显示RNAi抑制STAT3后,HUVEC迁移能力明显减弱.ELISA显示RNAi抑制STAT3后,VEGF蛋白表达下降60％.结论　RNAi抑制STAT3可以通过下调VEGF,抑制胰腺癌细胞体外血管生成能力.     

金属硫蛋白与人胰腺癌细胞耐放射性的关系初步探讨

目的探索金属硫蛋白（MT）表达水平与胰腺癌细胞放射敏感性的关系。方法分别采用外源性锌离子及反义寡聚核酸（AS）转染P3、Pan-1、MIA、SW1990、Cap、ASPC等6株胰腺癌细胞，调节MT表达，随后应用ELISA及集落实验检测MT表达水平及放射敏感性指标存活分数（SF2）的变化。结果与亲本株相比，经锌离子刺激后，P3、Pan-1、MIA、SW1990及Cap等5株胰腺癌细胞MT表达增高1．98-31．17倍（P〈0．05），SF2增高5．1％-26．5％（P〈0．05）；ASPC经锌离子诱导后MT表达及耐放射性增高均不明显（P〉0．1）。应用AS转染后，P3、Pan-1、MIA、SW1990、Cap、ASP（；等6株胰腺癌细胞MT表达降低1．05～26．6倍（P％0．05），SF2降低3．6％～16．7％（P〈0．05）。结论MT表达水平与胰腺癌细胞耐放射性有明显相关性。     

维甲类化合物Ro40-8757对人胰腺癌JF-305细胞株的抗增殖作用及其机制的研究

目的 研究维甲类化合物Ro40-8757对人胰腺癌JF－305细胞株的抗增殖作用及其作用机制。方法 采用四甲基氮唑蓝实验、流式细胞技术、Western blot蛋白检测技术分别检测Ro40-8757对人胰腺癌JF－305细胞株的增殖、细胞周期和p37蛋白表达的影响。结果 Ro40-8757可明显抑制JF－305细胞株的生长，并呈剂量、时间依赖性作用。用10^-5mol/L Ro40-8757处理细胞72h，G1期细胞由56％增加至76％，S期细胞由25％减少至7％，细胞周期阻滞于G1期；用10^-5mol/L Ro40-8757处理12h，JF－305细胞p27蛋白表达增加至对照组的2.2倍、24h为1.9倍，48h为1.2倍、72h为0.7倍。结论 Ro40-8757对人胰腺癌JF－305细胞株具有明显的生长抑制作用，并可以导致其G1期细胞周期阻滞和上调p27蛋白表达，上调p27蛋白引起细胞事可能是其抗肿瘤的机制之一。     

内皮抑素质粒联合阿霉素对人脑胶质肉瘤GL15细胞株增殖和凋亡的影响

目的 探讨内皮抑素(ES)以及ES和阿霉素联合应用对人脑胶质肉瘤细胞株GL15增殖和凋亡的影响.方法 通过质粒转染的方法,运用MTT法和流式细胞仪检测了ES以及ES和阿霉素联合应用对GL15细胞株增殖和凋亡的影响.结果 MTT法检测表明阿霉素对转染pcDNA3.1 ES的GL15细胞的生长抑制作用明显增强,细胞增殖明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测表明,转染pcDNA3.1 ES后,G0/G1期细胞明显增加(P<0.05),S期细胞明显减少(P<0.01),凋亡率明显上升(P<0.01);联合阿霉素治疗后,上述差异更加显著(P<0.01).结论 ES联合ADM可明显抑制人脑胶质肉瘤GL15细胞株的生长,二者联用可以产生协同抗瘤作用.