荧光定量PCR技术在检测HCV—RNA中的应用

目的 评价荧光定量ＰＣＲ技术测定ＨＣＶ－ＲＮＡ水平的价值,探讨ＰＢＭＣ中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的意义。方法 采用荧光定量ＫＲ及ＲＴ－ＰＣＲ技术同时检测８７例血液透析患者的血清和淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果血清、淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ的荧光定量ＰＣＲ检出率（４９．４％、６９．０％）,分别高于相应标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ阳性率（３３．３％、３５．６％）（Ｐ ＜０．０５）。血清、淋巴细胞中同时检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的一致率,荧光定量ＰＣＲ法（３１．０％）显著高于ＲＴ－ＰＣＲ定性法（６．９％）（Ｐ＜０．００１）． 荧光定量ＰＣＲ法,淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ检出率高于血清（Ｐ＜０．０１）。结论 与 ＲＴ－ＰＣＲ相比,荧光定量ＰＣＲ技术检测 ＨＣＶ－ＲＮＡ敏感性较高,对ＰＢＭＣ内ＨＣＶ－ＲＮＡ检测有利于提高ＨＣＶ检测的阳性率。     

PCR法检测尿毒症病人血清HCV—RNA结果分析

应用ＰＣＲ技术检测尿毒症病人血清ＨＣＶ—ＲＮＡ１６５例，结果显示：ＥＩＡ检测病人血清抗ＨＣＶ阳性率为６３．０％；抗ＨＣＶ阳性病人ＨＣＶ—ＲＮＡＰＣＲ检出阳性率为６５．３％；抗ＨＣＶ阴性病人检出率为９．８％；ＰＣＲ总阳性检出率为７５．１％。提示：ＣＲＦ病人抗ＨＣＶ和ＨＣＶ—ＲＮＡ检出率与输血呈正相关。ＣＲＦ病人接受透析与输血次数愈多，感染ＨＣＶ的机会就愈大。在血清中单独出现抗ＨＣＶ或同时检出抗ＨＣＶ和ＨＣＶ—ＲＮＡ者，表明与早期输血感染ＨＣＶ者已产生抗ＨＣＶ，ＨＣＶ—ＲＮＡ阳性与近期输血再次感染者关系极为密切。用ＰＣＲ法直接检测病毒毒粒要早于ＥＩＡ检出抗ＨＣＶ的阳性结果，有利于早期诊断。     

套式聚合酶链反应检测丙肝病毒核酸

对７０例血清谷丙转氨酶（ＡＬＴ）异常、疑是丙型肝炎（ＨＣＶ）患者血清标本，用ＨＣＶ基因５＇非编码区引物作套式聚合酶链反应（套式ＰＣＲ），扩增产物为２６０ｂｐ，结果显示５２例丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）阳性，１８例阴性，阳性率为７４．２％。１０例助血员血样ＨＣＶ－ＲＮＡ均为阴性。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析，阳性ＰＣＲ产物为ＨＣＶ－ＲＮＡ所特异。作者认为，采用高保守区核苷酸序列引物作套式ＰＣＲ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ，可提高实验的敏感性和特异性。     

树Qu对丙型肝炎病毒的易感性研究

目的：探讨树Ｑｕ对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的易感性。方法：对来自云南的树Ｑｕ接种含ＨＣＶ的病人血清,然后用ＰＣＲ方法检测树Ｑｕ血清的ＨＶＣ ＲＮＡ,用反向被动血凝法测定抗－ＨＣＶ抗体,用原位ＰＣＲ方法检测树Ｑｕ肝细胞内的ＨＶＣ ＲＮＡ。结果：３４．８％的树Ｑｕ（８／２３）在接种ＨＣＶ后,血清中检出ＨＣＶ ＲＮＡ,对４例抗ＨＣＶ阳性和谷丙转氨酶升高的树Ｑｕ的肝组织进行原位ＰＣＲ检测,结果在１例肝细胞中     

HBV,HCV,HGV重叠感染的回顾性研究

目的 了解１０年前我国ＨＢｓＡｇ阳性献血员ＨＢＶ,ＨＣＶ,ＨＧＶ重叠感染状况。方法 采用逆转录套式ＰＣＲ技术检测血清中ＨＢＶＲＮＡ、ＨＧＶＲＮＡ、免疫ＰＣＲ技术检测ＨＢＶＤＮＡ。结果 发现在ＨＢｓＡｇ阳性献血员中,ＨＢＶＤＮＡ阳性率９０％,ＨＣＶＲＮＡ阳性率２０％,ＨＧＶＲＮＡ阳性率６％,三重感是性率３％。结论ＨＢｓＡｇ阳性献血员吸较高比例的双重感染,且以ＨＣＶ感染为主。     

109例肝细胞癌患者HCV感染及酶切基因型

为了解广州地区肝细胞癌患者中丙型肝炎病毒感染情况及其基因型，我们对１０９例ＨＣＣ患者血清做了抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ检测，并以ＰＣＲ阳性产物做了酶切片段长度多态性分析。在２２例ＨＣＣ抗－ＨＣＶ阳性血清中ＨＣＶＲＮＡ阳性１８例，其中１５例与ＨＢＶ重叠感染，３例为单独感染。     

RT－PCR检测HCV RNA假阳性结果分析

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ是诊断ＨＣＶ感染的最敏...     

HBV与HCV重叠感染的研究

应用ＰＣＲ法和套式ＰＣＲ法对深圳地区４４例ＨＢＶ血清学标志物阳性者进行ＨＣＶ－ＲＮＡ检测，并同时作ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，以了解ＨＢＶ与ＨＣＶ重叠的感染情况，同时观察其血清ＡＬＴ的情况。结果发现，４４例患者中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１２例（２７．２７％）；ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性２２例（５０．００％），抗ＨＣＶ阳性２１例（４７．７３％）．表明ＨＢＶ与ＨＣＶ的重叠感染率较高，应引起人们的重视。     

山东地区输血后丙肝患者HGV感染状况及HGV部分核酸序列测定

目的 了解山东地区输血后丙型肝炎患者庚肝病毒感染的状况及ＨＧＶ部分基因核苷酸序列。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＧＶＲＮＡ，并对阳性扩增的产物采用ＰＣＲ技术片段直接克隆法测定。结果 从８６例ＰＴＨ－Ｃ患者血清中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性者３１例（３６％），其中一例患者ＨＧＶＮＳ５区部分核苷酸序列与美国原始株和另一例日本株核苷酸同源性比较分别为８６％和８４％。结论 证实山东地区ＰＩＨ－Ｃ患者存在着ＨＧＶ感     

抗-HCV阴性献血员丙肝病毒感染及意义

目的：探讨抗－ＨＣＶ阴性献血员隐匿性ＨＣＶ感染情况。方法：采用逆转录套式ＰＣＲ检测１００例抗ＨＣＶ阴性献血员血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果：血清中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性２例,ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性６例;有１例血清及ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性。结论：抗－ＨＣＶ阴性的献血员中仍有少数存在ＨＣＶ输血传播的可能,对献血员仅筛查抗－ＨＣＶ是不够的,应对血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－     

HBVDNA与HCVRNA同步扩增技术的建立与应用

同一份血清中的ＨＢＶＤＮＡ与ＨＣＶＲＮＡ经热变性直接法一步裂解，先用针对ＨＣＶ特异的外引物将ＨＣＶＲＮＡ逆转录为ｃＤＮＡ，然后采用ＨＢＶ，ＨＣＶ各自特异的２套引物进行ＰＣＲ同步扩增。结果按预定大小，ＰＣＲ产物出现２条带。分别为４２８ｂｐ，１４４ｂｐ。将产物转移至尼龙膜上，经α－３２ＰｄＣＴＰ标记ＨＣＶ探针及地高辛素标记ＨＢＶ探针进行重复杂交，证明１４４ｂｐ为ＨＣＶ所特有，４２８ｂｐ为ＨＢＶ特有。用该方法对３０份单独检测证实ＨＢＶ，ＨＣＶ核酸均阳性血清测验，其结果完全吻合、该二联技术可明显缩短检测时间，具有简便、快速、敏感的特点。     

丙型肝炎病毒5’非编码区PCR产物单链构象多态性分析及序列测定

目的：研究慢性肝炎病人血清、肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５＇非编码区变异情况．方法：收集１０例慢性肝炎病人及４例肝细胞肝癌病人血清和肝细胞肝癌组织，检测抗ＨＣＶ抗体阳性，进行ＨＣＶ５＇非编码区ＲＮＡ的逆转录ＰＣＲ扩增，ＰＣＲ产物进行单链构象多态性分析，并对部分病例序列进行测定．结果：６例慢性肝炎病人血清及３例肝细胞肝癌组织中检测到ＨＣＶＲＮＡ，单链构象多态性分析显示各例条带之间无明显差异，对１例肝细胞肝癌组织中ＨＣＶ５＇非编码区ｃＤＮＡＰＣＲ产物的序列测定表明它与ＨＣＶ－１的同源性为９７．３％，与ＨＣＶ－ＢＫ的同源性为９７．７％．结论：我们的结果提示在西安地区ＨＣＶ５＇非编码区几乎是一样的，并进一步证实不同地区ＨＣＶ５＇非编码区的高度保守性．     

烧伤病人输血后丙肝发生情况报告

采用酶联免疫反应（ＥＬＩＳＡ）及聚合酶反应（ＰＣＲ）方法，对２０例烧伤病人血清丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）及丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ进行了检测。结果：入院时，输血组及非输血组抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ检测均为阴性。一个月后。输血组１０例病人中发现抗－ＨＣＶ阳性５例、ＨＣＶＲＮＡ阳性４例；而非输血组抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ检测均为阴性。说明输血是烧伤病人感染ＨＣＶ的重要途径。本还对烧伤病人输血     

丙型肝炎泪液中HCV RNA的检测和基因分型

目的 研究泪液是否与ＨＣＶ转播有关。方法 采用套式－ＰＣＲ法检测了１５３例慢性丙型肝炎患者血液和泪液中的ＨＣＶ，并进行了基因分型。结果 从１１７例阳性血清患者的泪液标本中检测到ＨＣＶ ＲＮＡ阳性８例。结论 ＨＣＶ ＲＮＡ可在泪液中存在，应重点加强眼科医疗设备的消毒及预防医源性感染。     

定量PCR技术检测输血后丙型肝炎病毒RNA及在干扰素治疗中的应用

应用定量ＰＣＲ技术检测输血后ＨＣＶＲＮＡ，定量分析结果表明，ＨＣＶｃＤＮＡ浓度与３Ｈ参入ｃｐｍ值有良好的线性关系，１０ｐｇＨＣＶｃＤＮＡ扩增１０～３０个周期时，ｒ＝０．９４６３，１００ｐｇ时，ｒ＝０．９７２３，１０００ｐｇ时，ｒ＝０．７９８５，临床检测结果表明，３例典型的急性输血后丙型肝炎中，２例经干扰素治疗患者血清中ＨＣＶＲＮＡ含量变化很大，１例ＨＣＶＲＮＡ阴转，另１例明显下降，提示定量ＰＣＲ技术对判断丙型肝炎治疗效果很有价值。     

丙型肝炎患者血请抗－HCV和HCVRNA的联合检测

丙型肝炎患者血请抗－ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ的联合检测章巧月本文应用ＥＬＩＳＡ法及聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１９６例肝炎患者血清同时检测抗－ＨＣＶ与ＨＣＶＲＮＡ，现将结果报道如下。材料和方法一、１９６例各型肝炎为１９９４年３月至１１月我院住院和门诊患者，其...     

聚合酶链反应在乙,丙型病毒性肝炎中的应用

聚合酶链反应在乙、丙型病毒性肝炎中的应用宋有良，孔祥寰聚合酶链反应（ＰＣＲ）用于传染病的诊断，省内报道甚少。本文采用ＰＣＲ法检测肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ或ＨＣＶＲＮＡ，并与其ＨＢＶＭ或抗ＨＣＶ作比较，以探讨ＰＣＲ在乙、丙型病毒性肝炎中的应用及意义。１...     

武汉地区献血员血清TTV等几种肝炎相关病毒的基因检测

了解武汉地区不同献血员血清ＴＴＶ感染特点及其与其它几种肝炎相关病毒感染之间的关系。方法采用ＰＣＲ及巢式ＰＣＲ对５４例武汉市城区义务献血员及７４例既往乡村献血者分别进行血清ＴＴＶ ＤＮＡ,ＨＣＶ ＲＮＡ及ＨＧＶ ＲＮＡ等检测。结果：ＴＴＶ ＤＮＡ、ＨＣＶ ＲＮＡ及ＨＧＶ ＲＮＡ指标阳性率在既 往乡村个体献血员为４３．２％、２３．０％与２．７％,城区义务献血员为５．６％、１．９％与１．９％,前者ＴＴＶ     

聚合酶链反应研究血液透析患者丙型肝炎

目的：探讨维持性血液透析患者ＨＣＶ感染的临床与流行病学问题。方法：采用聚合酶链反应方法（ＰＣＲ），检测２０例丙肝病毒抗体（抗－ＨＣＶ）阳性的维持性血液透析患者血清和透后的透析液中丙型肝炎病毒ＲＮＡ。结果：血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者为６例（３０％），而透后透析液ＨＣＶ－ＲＮＡ均为阴性。结论：血透患者ＨＣＶ感染与透析液污染之间未发现直接相关性依据。     

RT／PCR检测血清中HCV RNA及其在丙型肝炎诊断中的价值

ＲＴ／ＰＣＲ检测血清中ＨＣＶＲＮＡ及其在丙型肝炎诊断中的价值向青陈志华王晋清范慕贞（临床医学研究所生化室）丙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）是引起输血后丙型肝炎的主要致病源，属于单股正链ＲＮＡ病毒。由于其在血清中含量很低，用常规方...