鬼臼毒素人工抗原的合成与鉴定

目的合成和鉴定鬼臼毒素人工抗原，以获取具有特异性和高度亲和性的鬼臼毒素多克隆抗体。方法 通过酯化反应合成半抗原鬼臼毒素半琥珀酰酯；利用活泼酯法和混合酸酐法偶联成免疫和包被所需的人工抗原；按常规免疫法，从免疫的兔血清中获取高效的抗鬼臼毒素抗体。结果质谱、核磁共振和红外分析表明两种不同方法均成功地合成了半抗原鬼臼毒素半琥珀酰酯。人工抗原的偶联比因载体蛋白和合成方法的不同而有所不同，Hapten-BSA₁为88.6，Hapten-BSA₂为40.3，Hapten-OVA₁为17.8和Hapten-OVA₂为54.2。利用兔M4440产生的抗血清建立的ELISA方法对鬼臼毒素的最低检测浓度为0.12 μg·mL^-1，半数抑制浓度为221 μg·mL^-1。结论成功地合成了鬼臼毒素人工抗原，并获得了抗鬼臼毒素抗体，为鬼臼毒素免疫分析方法的进一步研究提供了条件。     

岩沙海葵毒素人工抗原的合成及鉴定

目的制备岩沙海葵毒素(PTX)的人工抗原和抗血清,为建立PTX的酶联免疫检测方法提供技术基础。方法用小分子succinimidyl3-(2-pyridyldithio)propionate(SPDP)将PTX巯基化成半抗原PTX-PDP,用2-iminothiolane将大分子载体蛋白质匙眼血蓝蛋白(KLH)巯基化成KLH-SH,再将PTX-PDP和KLH-SH反应合成人工抗原PTX-PDP-KLH免疫雌性6~8周龄Balb/c小鼠,进行多抗的制备。用同样的方法制备酶联免疫反应之包被抗原PTX-PDP-BSA,用于检测血清抗体效价。结果根据紫外检测图谱,PTX的最大吸收波长在264nm处,KLH及BSA的最大吸收波长在278及279nm处,而合成的人工抗原PTX-PDP-KLH和PTX-PDP-BSA的最大吸收波长分别在267和273nm处。抗血清经间接酶联免疫吸附法检测,效价达到1∶3200,且与正常Balb/c小鼠、昆明种小鼠及兔血清间无交叉反应。结论合成的人工抗原纯度高,具有较好的免疫原性。     

基质辅助激光解吸飞行时间质谱在生物大分子中的应用

此文概述了基质辅助激光解吸飞行时间质谱在对多肽与蛋白质、多糖、核苷酸等生物大分子的相对分子质量准确测定及其纯度评价中的应用 ,以及采用母离子源衰减技术对生物大分子分子结构的研究应用 ,基质辅助激光解吸飞行时间质谱的广泛应用必将促进有机高分子和生物大分子两个领域的发展     

复发性卵巢癌血清差异表达蛋白分析

目的 探讨血清差异表达蛋白对提高复发性卵巢癌的诊断意义.方法 采用弱阳离子(WCX)磁珠纯化试剂盒和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,对21例复发性卵巢癌和18例完全临床缓解期卵巢癌患者(对照组)的血清标本进行检测,筛选出复发性卵巢癌患者与对照组血清中的差异表达质谱峰,并建立诊断模型.结果 在Mr 1000～12000区段,发现复发性卵巢癌与对照组间差异表达蛋白峰10个(P<0.05).其中Mr 1944、1980、2080、2661、2993、4450、4659、5359的蛋白峰显著上调,Mr 1897、7868则显著下调.结论 MALDI-TOF-MS结合磁珠技术能直接检测出复发性卵巢癌患者血清差异表达蛋白,对提高复发性卵巢癌诊断的敏感性和特异性具有一定的临床意义.     

生物质谱技术在中药研究中的应用

生物质谱技术为中药研究尤其是大分子药物的研究提供大量的结构信息,因而近几年发展比较快速。本资料从生物质谱技术在中药药学研究、中药作用相关蛋白研究、中药与生物大分子的相互作用研究、中药治疗的蛋白质组学研究以及代谢组学研究等几个方面综述了近几年生物质谱技术在中药研究中的进展,以供同行参考。     

基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱用于中草药黄芪鉴别的研究

目的：考察基体辅助激光解吸电离时间飞行质谱用于中草药鉴别的可行性。方法：以2,5－二羟基苯甲酸为基体对不同产地的黄芪进行质谱分析,比较质谱图,找出黄芪的指纹峰,通过指纹峰和专属性较强的质谱峰判断黄芪的真为。结果：判断出兰州产红芪不是黄芪。结论：建立中草药的基体辅助激光解吸电离质谱的指纹谱库,可以对中草药进行快速鉴别。     

利用MALDI-TOF MS对血流感染病原菌快速鉴定的准确性评价

目的探讨利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对血流感染病原菌快速鉴定的准确性。方法选取356例(356份)患者的血液样本作为研究对象,分别使用MALDITOF MS与Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统(Vitek 2 Compact)对血流感染病原菌进行检测,并以Vitek 2 Compact鉴定结果为金标准,观察MALDI-TOF MS的鉴定符合率。结果在阳性血培养瓶中,革兰阴性菌主要包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌复合菌、阴沟肠杆菌复合群、沙门菌群,种水平鉴定符合率为94.64%(212/224);革兰阳性菌主要包括表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌、肺炎链球菌,种水平鉴定符合率为94.62%(88/93)。真菌主要包括白色假丝酵母、热带假丝酵母、近平滑假丝酵母、清酒假丝酵母、光滑假丝酵母、新型隐球菌、克柔假丝酵母、葡萄牙假丝酵母,种水平鉴定符合率为80.00%(24/30),另检出马尔尼菲青霉菌9株,因不做生化鉴定未列入对比。结论利用MALDI-TOF MS对血流感染病原菌快速鉴定具有较高准确率,且检测简便、检测时间短。     

基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪检测生蚝中副溶血性弧菌的分析

摘要：目的:建立快速检测生蚝中副溶血性弧菌基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪（MALDI-TOF）分析方法。方法:抽取市售生蚝,根据GB/T 4789.7-2013国标对副溶血性弧菌进行前增菌、分离培养并进行革兰染色,用于初步鉴定。选取可疑菌株,利用MALDI-TOF进行采集,采用Flex Analysis和Bio Typer软件对图谱进行鉴定和离子分析。结果:经初步鉴定,样品中存在8株可疑菌,MALDI-TOF证实8株可疑菌均为副溶血性弧菌,且与VITEK生化鉴定结果完全一致。结论:MALDI-TOF方法简单、准确、高效,可用于检测生蚝中副溶菌的快速鉴定。     

磷酸糖脂类抗生素moenomycin A的分离和鉴定

在畜用抗生素—黄霉素产生菌的选育和开发研究过程中，应用Waters Oasis^R HLB固相萃取技术，建立了新的高效液相分析和制备条件，从黄霉素预混合剂中获得了主要活性组分的纯品，利用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术，鉴别其结构为moenomycin A。     

生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒抗原检测及分析

目的探讨生殖器疱疹（GH）患者单纯疱疹病毒（HSV）抗原的检测方法。方法选取皮肤性病门诊就诊的疑似GH患者260例，采取ELISA法进行HSV抗原检测。结果该组患者HSV阳性例数为122例（46．9％）；其中65例皮损不明显者HSV阳性例数为6例（9．2％）；不同皮损类型中水疱HSV阳性检出率最高为80．0％，其次溃疡检出率为61．3％，痂皮检出率为30．0％，丘疹、红斑检出率为14．3％，裂隙检出率为13．0％，宫颈糜烂检出率为37．5％等；其中水疱、溃疡HSV阳性检出率明显高于痂皮、丘疹红斑、裂隙尿道拭子及宫颈分泌物，两者分别比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论HSV传染性强，发病率高，临床应积极采用ELISA法并合理选取皮损标本进行HSV抗原检测，以提高诊断率。     

高效液相色谱法测定银翘解毒片中甘草酸的含量

目的　建立银翘解毒片中甘草酸的含量测定方法。方法　采用HPLC法 ,用KromasilC18色谱柱 (4 6mm×15 0mm) ;以乙腈 - 0 2 %磷酸二氢钠溶液 (14 0∶70 )为流动相 ;流速为 1 0ml·min-1;检测波长为 2 5 4nm。结果　本法线性关系良好 (r =0 9992 ) ,平均回收率为 99 78% ,RSD =0 6 %。结论　本法操作简便、结果准确 ,重现性好 ,可用于银翘解毒片的质量控制     

高效液相色谱法测定胃灵颗粒中甘草酸含量

目的：建立测定胃灵颗粒中甘草酸含量的方法。方法：采用高效液相色谱法(HPLC)，Hyersil C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：甲醇 0.2 mol·L 1醋酸铵溶液 冰醋酸(66∶33∶1)；检测波长：254 nm。结果：甘草酸在7.444～37.220 μg·mL 1范围内线性关系良好，r＝0.999 5，回收率为98.58%，RSD＝0.65 %。结论：该方法简便、准确、可控，可作为该产品的质量控制方法。     

住院患者应用甘草酸类药的疗效观察

目的:探究甘草酸类药临床疗效及作用特点,为临床选用药品提供参考意见。方法:将2009年12月—2010年11月间的全部住院患者(17 682例)进行回顾性研究,以只使用1个品种甘草酸类药,并排除联合用其他保肝降酶药的患者入组(9 902例)。着重研究各品种甘草酸类药临床疗效,详细探究对于不同类型肝病患者中各品种临床疗效及应用情况。结果:(1)作为保肝降酶药,3种甘草酸类药用于绝大多数肝病患者的治疗是有效的;(2)3种主要甘草酸类药治疗乙型肝炎或酒精性性肝炎患者,有效率>90%者均可选用;(3)对于丙型和乙丙合并感染性肝炎,异甘草酸镁或复方甘草酸苷有效率较高,可优先选择;(4)对于戊型病毒性肝炎和自身免疫性肝炎患者,甘草酸二胺有效率分别为92.75%和92.72%,可优先选择;(5)对于诊断不明的肝功能异常患者,临床也可以选用甘草酸类药改善肝功能异常,然后再酌情修订治疗方案;(6)年龄<18岁的患者总体疗效不太理想,>58岁的患者疗效有下降的趋势,值得注意。结论:本文统计的3种甘草酸类药在临床治疗慢性肝炎时,疗效是肯定的,但对于不同类型肝炎,3种主要甘草酸类药显示出疗效的差异,值得临床参考和深入研究。     

HPLC法测定温六散中甘草酸单铵的含量

目的:建立温六散中甘草酸单铵的含量测定方法。方法:超声提取,使用C1 8柱,甲醇-含3%冰醋酸的0 .2 m ol/ L醋酸铵溶液(6 2∶38)为流动相,检测波长为2 5 0 nm。结果:此方法线性关系良好,平均加样回收率为99.5 % ,RSD为1.8%。结论:本方法分离良好,可用于温六散的质量控制     

高效液相色谱法测定尿毒清冲剂中甘草酸含量

用反相ＨＰＬＣ法对尿毒清冲剂中甘草酸成分进行了定量研究。选择ＯＤＳ柱７ｕｍ（４．６ｘ１５０ｍｍ），流动相为；四丁基氢氧化铵溶液（３．２１０００）－甲醇－乙腈（６０：３０：１２），磷酸调ｐＨ６．０，检测波长：２５４ｎｍ，柱温：４０℃。甘草酸铵在０．６ｕｇ—１．８ｕｇ范围内呈线性关系，ｒ＝０．９９９６。样品经聚酰胺小柱进行精制，测定得方法的加样回收率为９６．１９％，ＲＳＤ为２．２４％。该法可作为该制剂的质量标准之一．     

HPLC法同时测定养血化瘀合剂中阿魏酸和甘草酸的含量

目的：建立HPLC法同时测定养血化瘀合剂中阿魏酸、甘草酸含量的方法。方法：采用Diamonsil C18（200mm×4．6mm,5μm）色谱柱,以乙腈为流动相A,0．085％磷酸水溶液为流动相B,进行线性梯度洗脱,流速为1．0ml·min^-1,检测波长为245nm,柱温为25℃。结果：阿魏酸在5．02～50．24μg·ml^-1（r=0．9．999）和甘草酸在2．46～24．62μg·ml^-1（r=0．9999）的范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系,阿魏酸和甘草酸的加样回收率分别为100．1％（n=9,RSD=1．57％）和99．8％（n=9,RSD=0．98％）。结论：本法操作简单、快速、重复性好,结果准确可靠,可用于养血化瘀合剂的质量控制。     

复方止咳冲剂中甘草酸和绿原酸的高效液相色谱法测定

复方止咳冲剂由甘草、金银花等十几味中药与大量赋形剂制成，甘草酸与绿原酸是其中重要的化学组成，本文建立了同时测定甘草酸与绿原酸的RP－HPLC－UV方法，用C18不锈钢柱为色谱柱，以甲醇（0．5％醋酸）－水（0．5％醋酸）为流动相，梯度法洗脱，用外标法定量，测定了三批样品，回收率均大于90％，相对标准偏差均小于3％。     

HPLC法测定复方甘草片中甘草酸的含量

目的：建立HPLC法测定复方甘草片中甘草酸含量的方法。方法：色谱柱为Inertsil ODS-3（250mm×4．6mm,5um）;流动相为乙腈-2％冰乙酸（50：50）;流速：1．0ml·min^-1;检测波长为254nm。结果：甘草酸含量测定的线性范围为13．94～83．64ug·ml^-1（r=0．9998,n=6）,平均加样回收率为98．2％,RSD为1．85％（n=6）。结论：此方法简便,重复性好,可作为本品质量控制方法。     

HPLC法测定全鹿丸中甘草酸和五味子醇甲的含量

目的:建立同时测定全鹿丸中甘草酸和五味子醇甲含量的高效液相色谱方法.方法:采用Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.5%磷酸溶液(40:60)为流动相,流速:1.0 ml·min-1,检测波长:250 nm,进样量:10 μl,柱温:30℃.结果:甘草酸、五味子醇甲进样量分别在0.050～1.005 μg、0.021～1.068 μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率分别为101.12%(RSD=0.98%)和98.51%(RSD=1.05%).结论:该方法操作简便,快速易行,结果准确可靠,可以作为全鹿丸中甘草酸和五味子醇甲的含量测定方法.     

高效液相色谱法测定川贝清肺膏中甘草酸的含量

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定川贝清肺膏中甘草酸的含量。方法：采用Kromasil-C18（4.6 mm×150 mm,5μm）为色谱柱;流动相：乙腈-水-冰醋酸（37∶63∶2）;检测波长：250 nm;流速：1 ml/min;柱温为室温（25℃）。结果：样品中甘草酸得到很好的分离,当甘草酸在10.0～104.0μg范围内呈线性关系（r=0.999 9,n=5）,平均加样回收率为100.99%,RSD为0.96%（n=6）。结论：本法简便、准确、可靠、专属性强、重现性好,可用于川贝清肺膏中甘草酸的含量测定。